《松樹苗期線蟲病抗性評價技術(shù)規(guī)程》編制說明

廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《松樹苗期線蟲病抗性評價技術(shù)規(guī)程》（征求意見稿）編制說明一、項目來源廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《松樹苗期線蟲病抗性評價技術(shù)規(guī)程》編制項目由廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督管理局《關(guān)于下達(dá)2022年廣西地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項目計劃的通知》（桂質(zhì)監(jiān)函〔2022〕1903號）批準(zhǔn)立項。由廣西壯族自治區(qū)林業(yè)局提出，廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院、貴港市覃塘林場、百色市林科所負(fù)責(zé)起草。項目編號：2022-1096，起止年限：2022.07-2023.10。主要起草人及分工如下表。姓名單位職務(wù)/職稱分工譚健暉廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院教授級高工標(biāo)準(zhǔn)撰寫、方案制定李鵬廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院工程師試驗設(shè)置和測定楊章旗廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院教授級高工抗性評價蒙青松貴港市覃塘林場工程師抗性檢測羅群鳳廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院高級工程師苗木培育吳東山廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院高級工程師抗性檢測吳善廣百色市林科所高級工程師抗性檢測唐生森廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院工程師抗性檢測賈婕廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院高級工程師苗木培育二、制定標(biāo)準(zhǔn)的必要性和意義松材線蟲病是近40年來我國發(fā)生的最嚴(yán)重、最危險的重大森林病害，被我國列入對內(nèi)、對外的重大檢疫對象，亞洲是松材線蟲病流行危害最嚴(yán)重的地區(qū)，中國是目前遭受松材線蟲病威脅最嚴(yán)重的國家，病害已經(jīng)在我國十多個省區(qū)造成了大面積松樹死亡，現(xiàn)有6000萬公頃松林正面臨著松材線蟲病大流行的威脅，累計致死松樹達(dá)數(shù)十億株，疫區(qū)數(shù)量、發(fā)生面積和病死樹數(shù)量還在迅速擴大。目前，我國采取的主要防控技術(shù)包括病害檢疫和疫情監(jiān)測、疫木除治、媒介昆蟲防治3種。但由于松材線蟲病發(fā)病因素和傳播擴散途徑復(fù)雜、為害嚴(yán)重、防治困難，對該病害的控制還未取得突破性的進(jìn)展。馬尾松(PinusmassonianaLamb．)分布于我國南方17省(區(qū))，是我國主要的鄉(xiāng)土樹種，廣西是我國馬尾松中心產(chǎn)區(qū)，馬尾松是廣西林業(yè)的優(yōu)勢樹種，同時支撐著廣西“造紙與木材加工”千億元產(chǎn)業(yè)和特色“松脂產(chǎn)業(yè)”。經(jīng)過國家“七五”至“十三五”科技攻關(guān)/支撐項目的實施，廣西馬尾松的遺傳資源、生產(chǎn)力和產(chǎn)業(yè)化水平穩(wěn)居全國前列?！笆濉逼陂g，松材線蟲病列入廣西重大動植物疫病。抗病育種是治理森林病害的有效途徑之一，盡快培育出抗松材線蟲病的鄉(xiāng)土松種品種，是松材線蟲病防控的重要長期戰(zhàn)略。廣西松樹研究團隊于2000年啟動抗蟲（松毛蟲松毒蛾、松梢螟）育種研究，篩選和評價抗性種質(zhì)116份，選育抗蟲植物新品種“松?”，并開展了抗性機理和速生高抗種質(zhì)創(chuàng)制研究，奠定了松樹抗性育種的基礎(chǔ)。2016年，松材線蟲病抗性育種被列入國家“十三五”重點研發(fā)計劃中松樹產(chǎn)業(yè)4大重點攻關(guān)問題之一，2017至今4年間，松材線蟲抗性篩選和評價先后獲廣西重大創(chuàng)新驅(qū)動專項、廣西八桂學(xué)者專項和廣西院士后備人選工程專項資助，顯示了松材線蟲抗性檢測評價的重要性和緊迫性。制定抗松材線蟲病松樹苗期檢測技術(shù)規(guī)程，進(jìn)一步規(guī)范抗松材線蟲病松樹苗期鑒定和評價技術(shù)，解決規(guī)?；剐苑N質(zhì)的評價和篩選方法，對提高松樹的整體抗性水平具有重要的現(xiàn)實意義。三、主要起草過程項目組系統(tǒng)開展了抗松材線蟲病檢測方法研究，通過人工接種蟲的方式開展了7個樹種（馬尾松、濕地松、加勒比松、火炬松、濕加松、細(xì)葉云南松和南亞松）、360株苗木（3個定向培育種子園12個家系）、2種繁殖方式（嫁接、實生）、3種苗齡（180d、360d、540d）、6個線蟲種源（廣西5個、南京1個）、2種灰葡萄孢培養(yǎng)基（PSA、玉米粒）、3種接蟲方法（打孔、傷皮和嫩枝皮接）、3種抗性穩(wěn)定性（接蟲1次、2次和3次）、2種感病表現(xiàn)（表型、線蟲分離）、感病指數(shù)和感病率等的比較研究，完成相關(guān)試驗2280個，確定了最佳的抗性檢測和評價方法，并在全區(qū)統(tǒng)籌布局了南寧、貴港、百色3個抗松材線蟲病檢測點。經(jīng)過5年研究，建立了系統(tǒng)完善的抗性評價技術(shù)體系，收集了大量原始數(shù)據(jù)。并訪問了大量林農(nóng)，座談了國有林場、個企等松樹林經(jīng)營生產(chǎn)單位。2022年7月標(biāo)準(zhǔn)項目下達(dá)后，廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院主持成立了標(biāo)準(zhǔn)編制小組，開始實施標(biāo)準(zhǔn)項目的組織協(xié)調(diào)和標(biāo)準(zhǔn)編制工作。標(biāo)準(zhǔn)編制小組依據(jù)《中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)化法》、《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則匯編》、標(biāo)準(zhǔn)制定有關(guān)文件資料和《廣西壯族自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)定》要求，詳細(xì)學(xué)習(xí)了GB/T1.1－2020、GB/T1.2－2020等基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)，研究確定了標(biāo)準(zhǔn)編寫的原則和技術(shù)路線，根據(jù)項目計劃進(jìn)度要求，確定了標(biāo)準(zhǔn)編寫的原則和技術(shù)路線，并有序地組織開展標(biāo)準(zhǔn)的編制工作。（一）工作組討論稿（第一階段）標(biāo)準(zhǔn)各項技術(shù)指標(biāo)確定的依據(jù)，主要來自多年來起草單位執(zhí)行的“松樹線蟲病抗性評價研究與應(yīng)用”科研成果，并參照了國內(nèi)已經(jīng)發(fā)布的有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。2022年8月至2022年9月，編制組在馬尾松線蟲病多年來的實踐經(jīng)驗和研究資料進(jìn)行匯合、分析和總結(jié)基礎(chǔ)上，對抗性評價關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行了完善、補充和進(jìn)一步整理，確定了廣西地方標(biāo)準(zhǔn)的基本內(nèi)容和思路。并經(jīng)過編制小組成員反復(fù)研討，形成了標(biāo)準(zhǔn)的編制原則及綱要。以試驗數(shù)據(jù)、調(diào)查材料為依據(jù)，對收集的資料進(jìn)行分析研究和處理，經(jīng)反復(fù)討論和修改，不斷完善，形成了工作組討論稿。（二）征求意見稿（第二階段）1、征求意見稿第一稿2022年9月3日，召開編制小組第一次會議，通過標(biāo)準(zhǔn)編制工作方案，明確編制小組成員，確定任務(wù)分工以及進(jìn)度安排。會議對工作組討論稿的框架、條款、技術(shù)參數(shù)等進(jìn)行了討論，修改形成征求意見稿第一稿。2、征求意見稿第二稿2022年12月10日，以項目組松樹抗性評價研究為主要依據(jù)，參考文獻(xiàn)資料對馬尾松抗性檢測的研究成果及技術(shù)參數(shù)，向森林培育技術(shù)專家咨詢意見，并組內(nèi)討論提出完善修改意見，形成了征求意見稿第二稿。3、形成征求意見稿第三、四稿2023年1月~2月，通過報刊、網(wǎng)絡(luò)等面向社會征求意見，召開征求意見會，主要起草人員對收集的意見進(jìn)行匯總討論，并對征求意見稿第二稿進(jìn)行征求意見，形成征求意見稿第三稿。2023年3月25日，召開編制小組第二次會議，對征求意見稿第三稿進(jìn)行逐條討論完善，并修改形成征求意見稿第四稿。四、制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù)，與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系，與有關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況（一）標(biāo)準(zhǔn)制定的原則和依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)制訂以推進(jìn)松樹抗性評價的規(guī)范化、科學(xué)化、高效化為目標(biāo)，遵循科學(xué)性、先進(jìn)性、合理性和適用性的原則，力求做到科學(xué)規(guī)范、指標(biāo)準(zhǔn)確、可操作性強，既與國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)接軌，又符合廣西區(qū)情。標(biāo)準(zhǔn)按中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T1.1－2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則》等文件的要求進(jìn)行編寫?！端蓸涿缙诰€蟲病抗性評價技術(shù)規(guī)程》標(biāo)準(zhǔn)主要遵循以下原則：1.科學(xué)性原則以長期馬尾松抗性檢測和評價研究為依據(jù)，在反復(fù)試驗測試和廣泛征求意見的基礎(chǔ)上，參考松材線蟲病技術(shù)文獻(xiàn)資料的研究成果及技術(shù)參數(shù)，向森林保護(hù)、高效培育技術(shù)專家咨詢意見，再根據(jù)審查意見對標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行修訂，制定標(biāo)準(zhǔn)。2.可操作性原則從松樹苗期抗性檢測技術(shù)的實際出發(fā)，充分考慮抗性評價的設(shè)施條件和技術(shù)要求，確保標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)條件和經(jīng)濟條件可行性。（二）與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系，與有關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況標(biāo)準(zhǔn)在制定的過程中，充分考慮全區(qū)松樹抗性評價地域差異，制定的抗性評價技術(shù)措施與當(dāng)前馬尾松高價值林培育發(fā)展要求保持一致，與現(xiàn)行相關(guān)國家法律法規(guī)、國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)保持協(xié)調(diào)一致。本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容和各項指標(biāo)不低于國家強制性標(biāo)準(zhǔn)及國家推薦性標(biāo)準(zhǔn)。國內(nèi)與松材線蟲相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)有7項（國家標(biāo)準(zhǔn)4項、地方標(biāo)準(zhǔn)3項），其中松材線蟲防治標(biāo)準(zhǔn)3項、檢測檢驗標(biāo)準(zhǔn)2項、疫木處置標(biāo)準(zhǔn)1項、分子檢測鑒定標(biāo)準(zhǔn)1項（見表1）。7項標(biāo)準(zhǔn)均屬森林保護(hù)學(xué)科，分別規(guī)范了松材線蟲病的檢疫、防治和鑒定。表1松材線蟲病相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計序號標(biāo)準(zhǔn)名稱規(guī)范內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)編號1松材線蟲病檢疫技術(shù)規(guī)程松材線蟲病檢疫技術(shù)GB/T23476-20092松材線蟲普查監(jiān)測技術(shù)規(guī)程規(guī)定松材線蟲普查和監(jiān)測GB/T23478-20093松材線蟲病疫木處理技術(shù)疫木除害處理方法和技術(shù)GB/T23477-2009從分子角度對松材線蟲進(jìn)行鑒定和分類GB/T35342-20175松材線蟲病防控技術(shù)規(guī)程天牛防治、疫木清理、質(zhì)量監(jiān)理、效果評估DB35/T1451-2014松材線蟲病綜合治理DB33/T267-2006松材線蟲病治理工程監(jiān)理DB44/T1060-2012本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了線蟲收集與分離、蟲源鑒定、線蟲培養(yǎng)與擴繁、苗木培育、人工接蟲、接蟲次數(shù)、感病指數(shù)、抗性評價和技術(shù)檔案管理等9個方面的技術(shù)內(nèi)容，線蟲蟲源鑒定中的分子鑒定部分參照GB/T35342執(zhí)行，本標(biāo)準(zhǔn)還引用和參考了《主要造林樹種苗木分級》（GB6000）和《容器育苗技術(shù)》（LY/T1000）國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)各1項，上述2個標(biāo)準(zhǔn)均為苗木培育和分級的標(biāo)準(zhǔn)，未提及松材線蟲以及人工接蟲等內(nèi)容，其中容器苗的出圃規(guī)格、包裝與苗木運輸按LY/T1000的規(guī)定執(zhí)行，苗木質(zhì)量檢驗按GB6000規(guī)定執(zhí)行。以上標(biāo)準(zhǔn)對編制《松樹苗期線蟲病抗性評價技術(shù)規(guī)程》中的蟲源分子鑒定和苗木培育具有一定的指導(dǎo)和借鑒作用，但沒有專門針對抗性檢測的技術(shù)規(guī)程。本標(biāo)準(zhǔn)制定了內(nèi)容全面、系統(tǒng)、可操作性強的松樹苗期線蟲病抗性評價技術(shù)規(guī)程，利于規(guī)范和指導(dǎo)我區(qū)的松材線蟲病抗性檢測。五、主要條款說明、主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗驗證的論述《松樹苗期線蟲病抗性評價技術(shù)規(guī)程》主要章節(jié)內(nèi)容包括：范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語和定義、線蟲收集與分離、蟲源鑒定、線蟲培養(yǎng)與擴繁、苗木培育、人工接蟲、接蟲次數(shù)、感病指數(shù)、抗性評價、技術(shù)檔案管理。本標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)內(nèi)容主要來源于廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究的研究成果，該團隊通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，初步了解松材線蟲病在國內(nèi)的分布范圍，同時對國內(nèi)松材線蟲病檢測和評價技術(shù)進(jìn)行調(diào)查和研究，掌握了松材線蟲分離鑒定、培養(yǎng)擴繁、人工接蟲、抗性評價等情況，收集國內(nèi)典型分布區(qū)松材線蟲蟲源，并在廣西林科院、貴港市覃塘林場、百色市林科所等地布置了測試苗木培育和人工接蟲試驗，相關(guān)試驗累積2280個，在抗松材線蟲病松樹苗期檢測技術(shù)方面總結(jié)了詳實可靠的經(jīng)驗。第1章范圍說明了標(biāo)準(zhǔn)的主要技術(shù)內(nèi)容和適用范圍。第2章規(guī)范性引用文件引用國家標(biāo)準(zhǔn)3項，行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)1項。第3章術(shù)語和定義確定了松材線蟲、松材線蟲病、人工接蟲和感病指數(shù)的定義。第4章線蟲收集與分離規(guī)范了松材線蟲收集與分離的貝爾曼漏斗法。主要依據(jù)廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院多年的松材線蟲收集和分離實際情況確定；近年來，團隊先后開展了松材線蟲疫木取樣、疫木試樣置備、預(yù)處理方法和分離時間等系列研究數(shù)據(jù)而確定。（1）松材線蟲疫木取樣于每年9月至次年3月，在松材線蟲疫區(qū)選取受松材線蟲為害疫木，截取3個3cm~5cm圓盤，用記號筆標(biāo)記取樣地點和試樣號，分別放入塑料密封袋保存帶回。（2）松材線蟲收集分離將疫木劈成小木條，準(zhǔn)備寬10cm～20cm的玻璃漏斗，末端接15cm左右長的乳膠管，將套有乳膠管的玻璃漏斗放置在漏斗架上；乳膠管上安裝彈簧止水夾，往玻璃漏斗中緩慢注入適量無菌水，將乳膠管底部氣泡排出，觀察乳膠管是否漏水，若漏水需夾緊或更換止水夾；用兩層紗布或紙巾包裹碎木條放入漏斗中，漏斗處貼上標(biāo)簽，沿漏斗內(nèi)壁緩慢注入適量無菌水至浸沒樣品，疫木浸泡一定時間后松開止水夾，用干凈小培養(yǎng)皿或離心管收集線蟲懸浮液5ml～15ml。設(shè)置疫木大小和浸提時間試驗，其中疫木劈成碎木條，長×寬分別設(shè)置5cm×1.5cm、5cm×1.0cm、5cm×0.5cm共3個處理，疫木浸泡時間設(shè)置1h、6h、12h和24h共4個處理，試驗結(jié)果表明，12h和24h間差異不顯著，且可獲得較多蟲源，綜合試驗結(jié)果，疫木大小5cm×0.5cm且浸提12h為線蟲分離收集的最佳時間（表2）。表2不同浸提時間收集線蟲統(tǒng)計疫木長寬/cm浸提時間/h0.1ml懸浮液線蟲數(shù)量/個5×1.5105×1.0695×0.512575×0.52461第5章蟲源鑒定線蟲分離鑒定分為形態(tài)學(xué)法和分子鑒定法兩種，形態(tài)學(xué)觀察法具體方法如下：將分離獲得的線蟲殺死，制作臨時玻片，在顯微鏡下觀察，雌雄蟲呈蠕長形，蟲體細(xì)長，唇區(qū)高，縊縮顯著，口針細(xì)長，基部稍增厚，中食道球卵圓形。其中雌成蟲單卵巢，前伸、直，有較寬陰門蓋，尾部末端寬圓呈指狀；雄成蟲交合刺大，弓狀，成對，喙突顯著，遠(yuǎn)端膨大如盤狀，尾部圓錐形，向腹彎曲似鳥抓，末端被一卵形交合傘包裹。線蟲分子鑒定參照GB/T35342執(zhí)行。第6章線蟲培養(yǎng)與擴繁包括線蟲培養(yǎng)和線蟲擴繁2個內(nèi)容。（1）線蟲培養(yǎng)采用PDA-灰葡萄孢平板培養(yǎng)基進(jìn)行線蟲培養(yǎng)，馬鈴薯設(shè)置50g、100g、150g和200g各4個濃度，蔗糖設(shè)置5g、10g、15g和20g各4個濃度，瓊脂設(shè)置7.5g、10g、15.0g和18g各4個濃度，共同組成培養(yǎng)基4個配方試驗，4個處理對灰葡萄孢和線蟲的影響見表2，試驗結(jié)果表明，處理4葡萄孢滿板時間為5天，比處理1的15天縮短了10天，差異達(dá)到極顯著水平，同時，0.1ml懸浮液線蟲數(shù)量達(dá)到203條，是處理1的2.36倍，馬鈴薯200g，蔗糖20g，瓊脂18g，水1000ml是PDA培養(yǎng)基的最佳配方。處理3和最佳配方的差異不顯著，從經(jīng)濟角度出發(fā)，PDA配方可根據(jù)個自需要調(diào)整為馬鈴薯150-200g，蔗糖15-20g，瓊脂15.5-18g，均可達(dá)到較佳培養(yǎng)效果。在直徑9cm培養(yǎng)皿中取PDA培養(yǎng)基30ml，接入灰葡萄孢，經(jīng)25℃恒溫培養(yǎng)7d，待葡萄孢長滿平板時接入經(jīng)形態(tài)鑒定的雌、雄成蟲各10條，25℃恒溫暗培養(yǎng)使線蟲繁殖，視線蟲繁殖情況繼代擴繁培養(yǎng)。的視線蟲繁殖情況7d~15d進(jìn)行繼代擴繁培養(yǎng)。表3PDA培養(yǎng)基對線蟲培養(yǎng)的影響處理馬鈴薯/g蔗糖/g瓊脂/g葡萄孢滿板時間/d0.1ml懸浮液線蟲數(shù)量/個15057.5158621001010.01011731501515.0718142002018.05203第7章苗木培育苗木培育包括I級苗木培育、出圃規(guī)格、苗木質(zhì)量檢測、苗木定植和定植后管護(hù)5個內(nèi)容。（1）I級苗木培育采用輕基質(zhì)容器培育苗木，輕基質(zhì)由55%椰糠，30%碳化谷殼，15%泥炭土，0.5%過磷酸鈣組成。容器規(guī)格分為3.5cm×8cm和4.5cm×8cm兩種規(guī)格，用托盤間隔擺放方式放置容器苗。每個處理50株，重復(fù)3次。不同苗齡下4.5cm×8cm容器杯的苗木生長明顯高于3.5cm×8cm杯，苗木培育容器選擇4.5cm×8cm容器杯為優(yōu)，苗齡6個月以上為佳（表4）。表4容器大小和間隔擺放對馬尾松容器苗生長影響容器規(guī)格/cm100d苗高/cm地徑/mm苗高/cm6個月地徑/mm8個月苗高/cm地徑/mm3.59.9±1.8b1.22±0.15b12.6±2.1b1.73±0.31c19.0±3.6b2.08±0.34b4.512.5±2.3a1.41±0.25a15.9±2.5a2.35±0.41a26.4±5.6a3.00±0.62a（2）容器苗出圃育苗時間不同，馬尾松苗木苗高、地徑的生長量和木質(zhì)化時間不同。不同時間育苗1000株，共8個處理，定時觀察苗木木質(zhì)化時間，苗木達(dá)到半木質(zhì)化時，隨機抽取100株健康苗木測定苗高、地徑。試驗表明，不同育苗時間苗木達(dá)到半木質(zhì)化時間分別為5~6個月，育苗時間含冬季（12月至次年2月）需延長育苗時間1~2個月，均可達(dá)到Ⅰ級苗木標(biāo)準(zhǔn)。表4比較了不同育苗時間達(dá)半木質(zhì)化的苗齡、苗高和地徑。表5育苗時間苗齡和生長量比較育苗月份半木質(zhì)化月份半木質(zhì)化時苗齡/月平均苗高/cm平均地徑/mm90%苗高/cm90%地徑/mm17626.93.1202.338526.23.1222.649527.23.1212.4510522.53.2182.57次年1月722.64.2173.39次年3月724.93.6202.910次年4月621.73.1182.611次年5月635.53.8283.4（3）苗木質(zhì)量檢測在培育好的=1\*ROMANI級容器苗木中挑選苗高相對一致，無病蟲害的健壯苗木30株，容器苗的出圃規(guī)格、包裝與苗木運輸按LY/T1000的規(guī)定執(zhí)行，苗木質(zhì)量檢驗按GB6000規(guī)定執(zhí)行。（4）苗木定植和定植后管護(hù)采用隨機區(qū)組設(shè)計，小區(qū)株數(shù)10株，分3次重復(fù)定植在檢測大棚內(nèi)，各畦四邊分別設(shè)置保護(hù)行，扶下壓實（可降解容器帶營養(yǎng)袋種植，不可降解需剝袋種植），澆足定根水，視不同區(qū)域不同季節(jié)常規(guī)管護(hù)15d~20d，至苗木生長穩(wěn)定。第8章人工接蟲人工接蟲具體步驟為，選擇氣溫30℃左右的晴朗天氣，苗木接蟲前統(tǒng)一澆透水；在接種枝條的一側(cè)用鋒利刀剝開長約1cm割口，割口剝至形成層和木質(zhì)部，用移液槍將0.2ml線