2025年粵教新版選擇性必修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年粵教新版選擇性必修3生物上冊月考試卷331考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、杜泊羊以其生長速度快；肉質(zhì)好等優(yōu)點；被稱為“鉆石級”肉用綿羊。科研工作者通過胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示，相關(guān)敘述正確的是（）

A.選用的雌性杜泊羊只要有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力就行B.從卵巢中采集的卵母細胞都已完成減數(shù)分裂ⅡC.為避免代孕錦羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng)，應(yīng)注射免疫抑制劑D.采集的精子需要進行獲能處理2、中國科學院團隊對雌性獼猴進行克??；成功獲得“中中”和“華華”兩姐妹，突破了現(xiàn)有技術(shù)無法體細胞克隆非人靈長類動物的世界難題，為建立人類疾病的動物模型，研究疾病機理，研發(fā)診治藥物帶來光明前景。如圖為“中中”和“華華”培育的流程，相關(guān)敘述不正確的是（）

A.該過程屬于無性繁殖B.圖中的卵子實際上是次級卵母細胞C.③過程是動物胚胎的體外培養(yǎng)過程，需無菌、無毒環(huán)境D.中中、華華的性別由纖維細胞的遺傳物質(zhì)決定3、某實驗室做了如圖所示的實驗研究；下列與實驗相關(guān)的敘述正確的是（）

A.過程①導(dǎo)入的誘導(dǎo)基因使成纖維母細胞發(fā)生基因突變B.丙細胞既能持續(xù)分裂，又能分泌單一的抗體C.過程②的培養(yǎng)過程中實現(xiàn)了動物細胞的全能性D.過程③④所用的培養(yǎng)基中都含有聚乙二醇4、下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，錯誤的是（）A.實驗用到的研磨液中往往需要加入DNA酶抑制劑B.洋蔥研磨液需用濾紙過濾，以保證提取的DNA量C.將二苯胺試劑加入溶有絲狀物的NaCl溶液中，沸水浴呈藍色D.若提取的絲狀物為黃色，說明其可能含有蛋白質(zhì)等雜質(zhì)成分5、關(guān)于微生物的實驗室培養(yǎng)和菌種保存的敘述，正確的是（）A.平板劃線法和稀釋涂布平板法分別用的接種工具是涂布器和接種環(huán)B.若液體培養(yǎng)基需震蕩培養(yǎng)，其目的是使微生物分布均勻以便涂布C.長期保存的菌種，需放在-20℃的冷凍箱中保存D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可以長期保存菌種評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、人參是一種名貴藥材；具有良好的滋補作用?？诜?干擾素在慢性乙肝；丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細胞的流程，①~④表示相關(guān)的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶，它們的識別序列及切割位點如表所示。下列選項正確的是（）

。限制酶。

識別序列和切割位點。

EcoRI

BamHI

A.步驟①中，利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時，設(shè)計引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列B.科研人員在兩種引物的一端分別加上了GAATTC和GGATCC序列，目的是方便后續(xù)的剪切和連接C.在過程③中T—DNA整合到受體細胞的染色體DNA上D.過程④中，科研人員最終未能檢測出干擾素基因，其原因可能是干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細胞7、下圖是胚胎干細胞潛能示意圖,相關(guān)敘述正確的是()

A.由細胞形態(tài)判斷,4種細胞中細胞②最可能連續(xù)分裂B.胚胎干細胞能分化為各種細胞的實質(zhì)是基因的選擇性表達C.分化得到的各種細胞,功能不同的主要差異是特定蛋白不同D.定向誘導(dǎo)胚胎干細胞分化形成的組織或器官,進行自體移植可避免免疫排斥反應(yīng)8、轉(zhuǎn)MT-like基因的衣藻對Pb、Cd等重金屬離子的抗性明顯增強，對Cb2+富集效應(yīng)顯著。某研究小組計劃通過多聚酶鏈式反應(yīng)（PCR）技術(shù)擴增MT-like基因，并進一步通過基因工程手段構(gòu)建凈化重金屬廢水的工程菌。下列有關(guān)PCR操作的敘述，正確的是（）A.PCR擴增需要加入Taq酶和DNA連接酶B.需設(shè)計一對與MT-like基因兩端序列互補的引物C.設(shè)計引物時要避免引物之間形成互補堿基對D.長度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火溫度9、下列有關(guān)哺乳動物精子和卵子的發(fā)生以及受精作用的敘述，不正確的是（）A.采集到的精子和卵子相遇即可發(fā)生受精作用B.排卵就是排出成熟卵子的過程C.卵子形成時的分裂過程均在卵巢內(nèi)完成D.卵子受精的標志是在卵細胞膜和透明帶之間觀察到兩個極體10、豬瘟病毒（CSFV）蛋白質(zhì)外殼上的E2蛋白；對于病毒入侵細胞至關(guān)重要。研究人員利用E2蛋白來制備抗CSFV單克隆抗體的過程如圖。下列敘述錯誤的是（）

A.注射E2蛋白后，從小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞均能產(chǎn)生E2蛋白抗體B.過程②可使用PEG融合法或滅活病毒誘導(dǎo)法，得到的③不一定是雜交瘤細胞C.細胞③經(jīng)一次篩選即可得到足量多的能產(chǎn)生E2蛋白抗體的雜交瘤細胞D.此過程生產(chǎn)的單克隆抗體既可用于CSFV的檢測，也可用于該種豬瘟的治療11、下面為制備單克隆抗體過程示意圖，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.①表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞均是從小鼠的脾臟中提取的B.④中的篩選是通過抗原—抗體反應(yīng)進行的C.④中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生多種抗體的雜交瘤細胞D.⑤可以無限增殖12、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計品種乙組織培養(yǎng)實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預(yù)實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素13、某牧場引進一只產(chǎn)肉性能優(yōu)異的良種公羊；為了在短時間內(nèi)獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的大量后代，該牧場通過以下流程進行了相關(guān)操作。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.在體外受精前對采集到的精子要進行獲能處理B.用孕激素對供體母羊進行處理，可獲得更多的卵母細胞C.為避免受體母羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng)，應(yīng)注射免疫抑制劑D.為了提高已有胚胎的利用率，可采用胚胎分割技術(shù)14、甲、乙是嚴重危害某二倍體觀賞植物的病菌。研究者發(fā)現(xiàn)抗甲基因、抗乙基因可分別表達合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)抑制甲、乙的細胞增殖，并獲得了抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株，再將二者雜交后得到F1，結(jié)合單倍體育種技術(shù)，培育出同時抗甲、乙的植物新品種。以下相關(guān)敘述錯誤是（）A.分別導(dǎo)入不同受體細胞的抗甲、抗乙基因都能有效能編碼相應(yīng)的蛋白質(zhì)B.培育該植物新品種的過程利用了基因工程、雜交育種和單倍體育種技術(shù)C.該新品種的培育利用了基因重組、基因突變、染色體變異等生物學原理D.培育出的該植物新品種植株是四倍體，和原植物存在著明顯的生殖隔離評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)15、纖維素酶是一種__________，一般認為它至少包括三種組分，即__________、___________和_______________，前兩種酶使纖維素分解成___________，第三種酶將纖維二糖分解成_____________。正是在這三種酶的協(xié)同作用下，纖維素最終被__________成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)，同樣，也可以為人類所利用。16、基因的“剪刀”是_____，它的化學本質(zhì)是_____，它只能識別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構(gòu)成；基因的運載體是將_____送入_____的運輸工具。目前常用的運載體有_____、________和_____。質(zhì)粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環(huán)狀_____。17、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。18、通常將DNAD的羥基（—OH）成為_______________端，而磷酸基團的末端成為___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向總是從_________________延伸。19、隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的飛速發(fā)展；轉(zhuǎn)基因動物；克隆動物和試管動物相繼問世，請回答下列問題：

（1）轉(zhuǎn)基因動物、克隆動物和試管動物培育過程中都要用到的生物技術(shù)包括______。

（2）核移植是動物克隆的第一步，包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用處于______（填時期）的______為受體細胞。

（3）在“試管動物”的培育過程中，常采用______（填激素名稱）處理可使雌性個體一次排出多枚卵母細胞。從雄性個體采集的精子需______后才能進行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為______；卵細胞膜反應(yīng)。

（4）若考慮環(huán)境承載力，轉(zhuǎn)基因動物、克隆動物和試管動物不宜放置到自然環(huán)境中，這遵循了生態(tài)工程的______原理。20、科學家采用定點誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術(shù)的要點是什么？_________21、最后檢測目的基因是否翻譯成______，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取______，用相應(yīng)的______進行______。評卷人得分四、判斷題(共2題，共6分)22、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。()A.正確B.錯誤23、蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共9分)24、新冠肺炎目前已成為影響全球的嚴重肺部傳染性疾病；為遏制新冠肺炎傳播，必須快速檢測出新冠病毒感染者并排除非攜帶者，同時盡快研制出新冠疫苗，以便采取針對性的預(yù)防措施。

（1）目前檢測的方法主要是病毒核酸檢測，該方法利用核酸強大的體外擴增能力。主要原理：取得咽拭子樣本提取出RNA，并將RNA轉(zhuǎn)變?yōu)镈NA，接著用PCR擴增，最后再用熒光標記的_________檢測病毒DNA的存在。其中RNA轉(zhuǎn)變?yōu)镈NA的過程需在樣本中加入_________酶，PCR需在樣本中再加入_________，一般要經(jīng)歷30多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為_________三步。

（2）目前研制的新冠疫苗主要是基因工程疫苗。我國陳薇院士團隊成功開發(fā)了一種以人復(fù)制缺陷腺病毒為載體的重組新型冠狀病毒疫苗，用來制備該疫苗的目的基因由________的一段無毒序列構(gòu)成，在構(gòu)建基因表達載體時，需將目的基因插在腺病毒載體的_________之間，構(gòu)建基因表達載體的目的是_____________________________。25、霍山石斛多糖具有顯著的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。為探究引起該免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的物質(zhì)是大分子霍山石斛多糖還是多糖小分子片段；某科研小組進行了如下實驗：將霍山石斛的某種多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)制作成抗原；并生產(chǎn)出單克隆抗體，利用該抗體探究霍山石斛多糖引起的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。制備單克隆抗體的流程如圖所示。請回答：

（1）圖中細胞a是免疫后小鼠體內(nèi)的___________，通常情況下該細胞不能進行增殖，原因是___________。

（2）與植物原生質(zhì)體融合相比，①過程特有的誘導(dǎo)因素是___________。若只存在細胞的兩兩融合，融合體系中除未融合的細胞外，還可能有__________和__________。篩選時，需用特定的____________培養(yǎng)基才能把實驗所需細胞選擇出來。

（3）在篩選過程中需進行__________和__________，以便獲得足夠數(shù)量的能分泌特異性抗體的細胞，還需用___________作為檢測特異性抗體的物質(zhì)。

（4）將篩選出的細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)，可從小鼠____________中提取單克隆抗體。

（5）研究發(fā)現(xiàn)，霍山石斛多糖可降解產(chǎn)生小分子片段，這些片段不能與獲得的單克隆抗體結(jié)合?？蒲行〗M用霍山石斛多糖給小鼠灌胃后，取出小腸、肝、脾、腎和肺進行抗原-抗體雜交實驗，發(fā)現(xiàn)除腸腔外其他組織均未檢測到霍山石斛多糖。該實驗____________（填“能”或“不能”）說明引起免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的是大分子霍山石斛多糖，理由是___________。26、炭疽；是一種由炭疽芽孢桿菌引起的人獸共患性傳染病，也是我國規(guī)定的乙類傳染病?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：

(1)人通常是通過接觸患炭疽的動物或動物制品被感染，皮膚炭疽病在人類炭疽病中最為常見，這類患者的皮膚滲出物中含有炭疽芽孢桿菌。皮膚炭疽病疑似患者就醫(yī)時，醫(yī)生先要取患者的皮膚滲出物稀釋后涂布到固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)獲得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培養(yǎng)基上的菌落進行如圖所示實驗（注：實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽芽孢桿菌）。

①該實驗的目的是_____。

②對照組試管中應(yīng)加入_____，實驗過程中為避免雜菌污染進行的操作包括_____（至少寫出兩點）。

③實驗結(jié)果為_____時；表明該疑似患者被炭疽芽孢桿菌感染。

④實驗過程中需將錐形瓶固定在搖床上，在35℃下振蕩培養(yǎng)24h，直至液體培養(yǎng)基變渾濁。振蕩培養(yǎng)說明炭疽芽孢桿菌的代謝類型是_____，振蕩培養(yǎng)的目的是_____。液體培養(yǎng)基變渾濁的原因是_____。

(3)對炭疽芽孢桿菌進行計數(shù)時，選用10-4、10-5、10-6三個稀釋度的菌液，各取0．2mL涂布，每個稀釋度作三次重復(fù)，經(jīng)24h恒溫培養(yǎng)后結(jié)果如表。稀釋度10-410-510-6平板編號A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落數(shù)31529830245535112911

由表可知，最適合計數(shù)的稀釋度為_____，原因是_____。評卷人得分六、綜合題(共3題，共21分)27、金黃色葡萄球菌腸毒素（SEs）是一類可溶性小分子蛋白質(zhì)；是引起細菌性食物中毒及腸胃炎的主要因素之一?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為了用基因工程制備SEs純品，科研人員首先需要___________；若采用___________技術(shù)進行這一階段的操作，前提條件是要有一段_________________________________；以便合成引物。

(2)科研人員利用如圖所示的質(zhì)粒進行基因工程操作的核心步驟，即___________，已知在新霉素抗性基因內(nèi)部存在HindIII識別序列，質(zhì)粒的其他部位和目的基因內(nèi)部均無XbaI、SacI、HindIII三種限制酶的識別位點，假設(shè)SEs基因為680bp，在進行操作時，若選擇SacI對目的基因和質(zhì)粒進行酶切，缺點是___________；若選擇XbaI、SacI對目的基因和質(zhì)粒進行酶切，缺點是_________________，因此最好選用_______________對目的基因和質(zhì)粒進行酶切。操作成功后的結(jié)構(gòu)（M）長___________bp。

(3)若以大腸桿菌為受體細胞，導(dǎo)入M前需在大腸桿菌的培養(yǎng)液中加入適量的___________。28、環(huán)境雌激素（EEs）是指能夠擾亂動物內(nèi)分泌活動；生理活性與雌激素較為相似的動物體外化學物質(zhì)。斑馬魚幼魚的卵黃蛋白原（vtg）基因在正常情況下不表達，在EEs誘導(dǎo)下可表達且表達水平與EEs的濃度呈正相關(guān)。為了簡便直觀地檢測水體中EEs污染情況，研究人員培育了一種轉(zhuǎn)基因斑馬魚，部分過程如圖所示，相關(guān)限制酶識別序列及切割位點如表。

限制酶識別序列及切割位點SphICGTAC↓GHindIIIA↓AGCTTKpnIGGTAC↓C

請根據(jù)圖表回答下列問題：

(1)上圖的操作屬于基因工程基本操作步驟中的______；當EEs存在時，野生斑馬魚的vtg基因啟動子可以激活______基因的表達，從作用效果上來看該啟動子是一種______型啟動子。

(2)對vtg基因啟動子進行擴增前，應(yīng)設(shè)計合適的引物，并在引物的______（填“3′端””或“5′端”）添加特定的序列，使擴增后的啟動子DNA片段首末兩端分別含有______酶識別序列及切割位點；以便vtg基因啟動子能夠定向插入原始質(zhì)粒的正確位置。

(3)獲得的重組質(zhì)粒可通過______方法導(dǎo)入到斑馬魚的______細胞中；為鑒定是否成功導(dǎo)入，應(yīng)檢測細胞中是否含有______（填“vtg”或“EGFP”）基因。

(4)為檢測某水樣M中EEs的污染情況；研究小組進行了如下實驗操作：

①選取成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的斑馬魚幼魚若干尾隨機均分為A、B、C三組，B組培養(yǎng)環(huán)境為含較低濃度EEs的培養(yǎng)液，A組和C組的培養(yǎng)環(huán)境分別是______；

②一段時間后觀察并統(tǒng)計各組斑馬魚的綠色熒光強度，結(jié)果如下。組別ABC綠色熒光強度無+++++

注：“+”數(shù)量越多表示熒光強度越高。

實驗結(jié)論：________________________。29、DDX5基因在細胞周期調(diào)控、腫瘤發(fā)生等方面發(fā)揮重要作用。研究人員運用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)對口蹄疫病毒易感的PK-15細胞株中的DDX5基因進行敲除，為后續(xù)研究DDX5基因在病毒感染中的作用提供基礎(chǔ)。請據(jù)圖回答下列問題。

(1)圖1中，Ori是_______（酶）首先結(jié)合的核苷酸序列。構(gòu)建CRISPR-Cas9表達載體時使用的工具酶主要有______。結(jié)合對圖2中CRISPR-Cas9技術(shù)原理的理解，圖1表達載體中需要插入兩種sgRNA基因，原因是_____。

(2)研究中先將CRISPR-Cas9表達載體導(dǎo)入大腸桿菌DH5a，再將菌液利用________法接種到加有________的細菌培養(yǎng)基上，待菌落長成后，直接挑取菌落加入到PCR反應(yīng)系統(tǒng)中進行基因鑒定。PCR過程中不需要先提取細菌DNA的原因是______。

(3)研究中采用培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌對CRISPR-Cas9表達載體進行擴增。與PCR相比，利用大腸桿菌進行目的基因擴增的優(yōu)點有________、____________。

(4)取轉(zhuǎn)化的PK15細胞懸液進行有限稀釋，再接種到6孔培莽板上，一段時間后對各孔內(nèi)的細胞株進行DDX5蛋白檢測，結(jié)果如圖（其中B-actin是真核細胞骨架蛋白）。對細胞懸液有限稀釋法的目的是________，細胞培養(yǎng)時CO2培養(yǎng)箱中充入的氣體應(yīng)是_______。根據(jù)檢測結(jié)果，敲除DDX5基因的細

胞株編號有___________。

參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

1；體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細胞的采集和培養(yǎng)①主要方法是：用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞或直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。（2）精子的采集和獲能①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。②對精子進行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學誘導(dǎo)法。（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程。

2；胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；題圖中選用的雌性杜泊羊為供體；應(yīng)具有優(yōu)良遺傳特性，對受體的選擇需要有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力，A錯誤；

B；雌性動物的減數(shù)第一次分裂在排卵前后完成；從卵巢中采集的卵母細胞多數(shù)處于減數(shù)第一次分裂，未完成減數(shù)分裂Ⅱ，B錯誤；

C；動物的子宮為免疫特赦區(qū)；代孕綿羊?qū)χ踩肱咛ゲ粫a(chǎn)生排斥反應(yīng)，C錯誤；

D；采集的精子不能直接進行受精作用；需要進行獲能處理才行，D正確。

故選D。

【點睛】2、C【分析】【分析】

1；動物細胞核移植技術(shù)是將動物的細胞核移入一個去核卵母細胞中；并使重組細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)。

2；分析圖示可知；①為將纖維細胞注射到去核的卵母細胞中，②為對重組細胞進行體外培養(yǎng)，發(fā)育成新胚胎，再進行③胚胎移植過程，最終獲得克隆猴。

【詳解】

A；該過程沒有經(jīng)過精卵的結(jié)合；屬于無性繁殖過程，重組細胞能發(fā)育成完整個體說明動物細胞核具有全能性，A正確；

B；圖中的卵子實際上是處于減數(shù)第二次分裂時期的次級卵母細胞；B正確；

C；③過程是動物胚胎移植過程；②過程是動物胚胎的體外培養(yǎng)過程，C錯誤；

D；中中、華華是由重組細胞發(fā)育而來；其細胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)來自纖維細胞，因此性別由纖維細胞的遺傳物質(zhì)決定，D正確。

故選C。3、B【分析】【分析】

分析題圖可知：①是將目的基因?qū)胧荏w動物細胞；②是干細胞培養(yǎng)過程中的增殖分化，③是誘導(dǎo)動物細胞融合，④是培養(yǎng)雜交細胞生產(chǎn)單克隆抗體。

【詳解】

A；分析題圖可知；圖中過程①導(dǎo)入的誘導(dǎo)基因使成纖維母細胞發(fā)生基因重組，A錯誤；

B；丙細胞由能無限增殖的甲細胞和能分泌特定抗體的乙細胞融合而成；因此丙細胞既能持續(xù)分裂，又能分泌單一的抗體，B正確；

C；細胞全能性是指已高度分化的細胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能；過程②為干細胞的增殖分化過程，沒有實現(xiàn)動物細胞的全能性，C錯誤；

D；過程③所用的培養(yǎng)基中含有聚乙二醇；過程④所用的培養(yǎng)基中不需要聚乙二醇，D錯誤。

故選B。4、B【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶；高溫和洗滌劑的耐受性。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。

【詳解】

A；實驗用到的研磨液中往往需要加入DNA酶抑制劑；降低DNA酶的活性，減少DNA的水解，A正確；

B；洋蔥研磨液用兩層紗布過濾；以保證提取的DNA量，B錯誤；

C；將白色絲狀物溶解在NaCl溶液中；加入二苯胺試劑后振蕩搖勻并沸水浴呈藍色，C正確；

D；若提取的絲狀物為黃色；說明提取的DNA純度不高，可能含有蛋白質(zhì)等雜質(zhì)成分，D正確。

故選B。5、C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

菌種保藏的原理：是為了達到長期保持菌種的優(yōu)良特性；核心問題是必須降低菌種變異率，而菌種的變異主要發(fā)生于微生物旺盛生長；繁殖過程，因此必須創(chuàng)造一種環(huán)境，使微生物處于新陳代謝最低水平，生長繁殖不活躍狀態(tài)；常用的方法有臨時保存法和甘油管藏法。

【詳解】

A；平板劃線法的接種工具是接種環(huán)；稀釋涂布平板法的接種工具是涂布器，A錯誤；

B；若液體培養(yǎng)基需震蕩培養(yǎng)；其目的是增加培養(yǎng)液的溶氧，為微生物呼吸作用提供充足的氧氣，B錯誤；

C；長期保存的菌種；采用甘油管藏的方法，需放在-20℃的冷凍箱中保存，C正確；

D；斜面培養(yǎng)基保存菌種的方式是臨時保存的；菌種容易發(fā)生突變，所以不能長期保存菌種，D錯誤。

故選C。

【點睛】二、多選題(共9題，共18分)6、A:B:D【分析】【分析】

分析圖解：圖中過程①表示利用PCR技術(shù)擴增目的基因；過程②表示基因表達載體的構(gòu)建，過程③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌，過程④表示目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

A；步驟①中；利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時，設(shè)計引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列，A正確；

B；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒；因此科研人員還在兩種引物的一端分別加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后續(xù)的剪切和連接，B正確；

C；在過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌；而根瘤農(nóng)桿菌在侵染人參愈傷組織細胞時，T-DNA才整合到受體細胞的染色體DNA上，C錯誤；

D；干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細胞或?qū)肴藚⒂鷤M織細胞的干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄；這會導(dǎo)致通過該方法不能檢測出干擾素基因，D正確。

故選ABD。7、A:B:C:D【分析】【分析】

干細胞：在個體發(fā)育過程中；通常把那些具有自我復(fù)制能力，并能在一定條件下分化形成一種以上類型的細胞的多潛能細胞稱為干細胞。

（1）全能干細胞：如胚胎干細胞；

（2）多能干細胞：如造血干細胞；

（3）專能干細胞：如骨髓瘤細胞；皮膚生發(fā)層干細胞。

【詳解】

A；由細胞形態(tài)判斷；①為精細胞，③為肌肉細胞，④為神經(jīng)細胞，這3種細胞都是高度分化的細胞，所以推測圖示4種細胞中細胞②分化程度最低，最可能連續(xù)分裂，A正確；

B；胚胎干細胞分化為各種細胞的實質(zhì)是基因的選擇性表達；B正確；

C；分化得到的各種細胞；功能不同的主要差異是特定蛋白不同，C正確；

D；定向誘導(dǎo)胚胎干細胞分化形成的組織或器官；進行自體移植可避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選ABCD。

【點睛】8、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。

【詳解】

A；DNA連接酶催化DNA片段連接；Taq酶催化脫氧核苷酸連接，故PCR擴增不需要DNA連接酶，A錯誤；

B；PCR技術(shù)的原理是堿基互補配對和DNA半保留復(fù)制；其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物，因此需設(shè)計一對與MT-like基因兩端序列互補的引物，B正確；

C；為避免引物自連；設(shè)計引物時要避免引物之間形成互補堿基對，C正確；

D；因G-C堿基對之間的氫鍵多于A-T堿基對之間的氫鍵；GC堿基對含量高的雙鏈的穩(wěn)定性更高，故GC堿基對含量高的引物需要更高的退火溫度，D正確。

故選BCD。

【點睛】9、A:B:C【分析】【分析】

受精包括受精前的準備階段和受精階段：準備階段1-精子獲能；剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力；準備階段2-卵子的準備，動物排出的可能是初級卵母細胞也可能是次級卵母細胞，都要在輸卵管內(nèi)進一步成熟，達到減數(shù)第二次分裂中期時，才具備與精子受精的能力。卵細胞形成過程，其中減數(shù)第一次分裂是在雌性動物排卵前后完成的，場所在卵巢；減數(shù)第二次分裂是在受精過程中完成的，場所在輸卵管中。受精作用完成的標志：在卵黃膜和透明帶之間的間隙可以觀察到兩個極體（一個是第一極體，還有一個是第二極體）

【詳解】

A；采集到的精子必需經(jīng)過獲能處理；卵細胞必需發(fā)育到減數(shù)第二次分裂的中期才具有受精能力，A錯誤；

B；排卵就是卵細胞從卵泡中排出；可能是初級卵母細胞或次級卵母細胞，B錯誤；

C；卵細胞形成時的分裂過程在卵巢和輸卵管中完成；C錯誤；

D；在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個極體；說明卵細胞已經(jīng)完成了受精，這是判斷卵細胞是否受精的重要標志，D正確。

故選ABC。

【點睛】10、A:C【分析】【分析】

將漿細胞和骨髓瘤細胞融合；經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞進行體內(nèi)或體外培養(yǎng)，獲得大量的特異性抗體的技術(shù)，稱為單克隆抗體的制備。

【詳解】

A；注射E2蛋白后；從小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞有多種，不一定能產(chǎn)生E2蛋白抗體，A錯誤；

B；過程②可使用PEG融合法或滅活病毒誘導(dǎo)法；得到的③可能是雜交瘤細胞，或者是融合的B細胞或是融合的骨髓瘤細胞，B正確；

C；細胞③要進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；經(jīng)過多次篩選，才可獲得足量多的能產(chǎn)生E2蛋白抗體的雜交瘤細胞，C錯誤；

D；豬瘟病毒（CSFV）的檢測采用抗原-抗體雜交技術(shù)；抗CSFV的單克隆抗體能與豬瘟病毒（CSFV）蛋白質(zhì)外殼上的E2蛋白結(jié)合，故此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可用于CSFV的檢測，D正確。

故選AC。11、A:C【分析】據(jù)圖分析；①過程表示獲取B淋巴細胞和骨髓瘤細胞；②過程促進細胞融合，采用離心；電刺激、聚乙二醇、滅活病毒等試劑誘導(dǎo)，篩選出雜交瘤細胞；④過程通過專一抗體檢驗陽性，篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群；⑥過程表示動物細胞培養(yǎng)。

【詳解】

A；B淋巴細胞是從小鼠的脾臟中提取的；骨髓瘤細胞不是，A錯誤；

B；④中篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；可以通過檢測抗原、抗體反應(yīng)，如果有反應(yīng)說明表達了抗體，B正確；

C；④中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生一種抗體的雜交瘤細胞；C錯誤；

D；⑤可以無限增殖；也能產(chǎn)生特異性抗體，D正確。

故選AC。12、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。13、B:C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括:

①對供；受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體）。用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。

②配種或人工授精。

③對胚胎的收集；檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查；此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑甚胚或胚囊胚階段。④對胚胎進行移植。

⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；采集到的良種公羊的精子；在體外受精前要進行獲能處理，A正確；

B；對本地母羊注射促性腺激素可促使其超數(shù)排卵；進而獲得更多卵母細胞，B錯誤；

C；受體母羊?qū)σ迫胱訉m的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；不需要注射免疫抑制劑，C錯誤；

D；采用胚胎分割技術(shù)可提高已有胚胎的利用率；D正確。

故選BC。14、A:C:D【分析】【分析】

1；單倍體：體細胞中具有本物種配子染色體數(shù)的個體；個體發(fā)育的起點是配子。獲取方法是花藥離體培養(yǎng)。單倍體育種的方法：花藥離體培養(yǎng)和用秋水仙素處理幼苗。

2；基因工程的步驟：獲取目的基因、構(gòu)建基因表達載體、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；目的基因?qū)胧荏w細胞不一定能表達；A錯誤；

B；該品種的培育利用了基因工程、雜交育種、單倍體育種技術(shù)；B正確；

C；該品種的培育涉及基因工程、雜交育種、單倍體育種等操作；培育過程利用了基因重組、染色體變異等原理，沒有利用基因突變，C錯誤；

D；該新品種依然是二倍體；沒有證據(jù)表明其是一個新物種，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】三、填空題(共7題，共14分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】復(fù)合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖水解16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質(zhì)核苷酸序列特定的切點DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細胞質(zhì)粒噬菌體動植物病毒細菌酵母菌細胞核自主復(fù)制DNA分子17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學合成法18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能從頭開始合成，而只能從3，端延伸DNA子鏈的5，端向3，端19、略

【分析】【分析】

1；動物核移植的概念：將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體，核移植得到的動物稱克隆動物；

2；早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分；除無機鹽和有機鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，并需添加動物血清等天然成分。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因動物；試管動物和克隆動物分別在體外得到早期胚胎后；都要通過胚胎移植獲得新個體。

（2）核移植包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎細胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對容易，而體細胞分化程度高，全能性不易表達；核移植常用的減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細胞作為受體細胞，其中去核的目的是避免原細胞核中遺傳物質(zhì)對克隆動物的影響，保證克隆動物的核遺傳物質(zhì)來自供體細胞。

（3）促性腺激素處理可促使雌性個體超數(shù)排卵；即使良種母牛一次排出多枚卵母細胞。精子需要經(jīng)過獲能處理才能受精；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應(yīng)；卵細胞膜反應(yīng)。

（4）要考慮環(huán)境承載力；處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的協(xié)調(diào)與平衡原理。

【點睛】

本題考查細胞工程、胚胎工程和生態(tài)工程的有關(guān)知識，意在考查考生理解能力、獲取信息的能力和綜合運用能力?！窘馕觥颗咛ヒ浦玻ɑ蚺咛サ脑缙谂囵B(yǎng)和胚胎移植）胚胎細胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對容易MⅡ中期去核卵母細胞促性腺激素獲能透明帶反應(yīng)協(xié)調(diào)與平衡20、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】會提高T4溶菌酶的耐熱性。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)抗體抗原－抗體雜交四、判斷題(共2題，共6分)22、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。23、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。

故正確。五、實驗題(共3題，共9分)24、略

【分析】【分析】

1；中心法則：（1）遺傳信息可以從DNA流向DNA；即DNA的復(fù)制；（2）遺傳信息可以從DNA流向RNA，進而流向蛋白質(zhì)，即遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯；（3）中心法則補充法則：遺傳信息從RNA流向RNA以及從RNA流向DNA?；虮磉_是指將來自基因的遺傳信息合成功能性基因產(chǎn)物的過程。

2、PCR：（1）聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈，即變性→退火→延伸。（2）參與PCR的主要物質(zhì)：引物、酶、原料（dNTP）、模板和緩沖液（其中需要Mg2+）等。

【詳解】

（1）新冠病毒為RNA病毒；需要從樣本中提取出RNA，然后逆轉(zhuǎn)錄為DNA，PCR擴增后，用含有目的基因的單鏈DNA（或基因探針）來檢測。根據(jù)中心法則，RNA可以逆轉(zhuǎn)錄為DNA。RNA逆轉(zhuǎn)錄為DNA需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶。PCR技術(shù)需要DNA作為模板；脫氧核苷酸為原料，還需要兩種不同的引物以及耐熱的DNA聚合酶，因此PCR需在樣本中再加入引物，原料（dNTP），酶（Taq酶），一般要經(jīng)歷30多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為：變性、退火、延伸。

（2）基因工程疫苗需要使用到病毒基因的一段無毒序列構(gòu)建疫苗的目的基因；構(gòu)建基因表達載體。構(gòu)建表達載體時，需要將目的基因插入到載體的啟動子和終止子之間，便于表達。構(gòu)建基因表達載體的目的就是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給后代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。

【點睛】

本題旨在考查學生理解PCR的實質(zhì)和主要參與的物質(zhì)，學會應(yīng)用基因工程的方法去解決實際問題。同時考察把握知識的內(nèi)在聯(lián)系并應(yīng)用相關(guān)知識綜合解決問題的能力?！窘馕觥竣?含目的基因的單鏈DNA（或基因探針）②.逆轉(zhuǎn)錄③.引物，原料（dNTP），酶（Taq酶）④.變性、退火、延伸⑤.病毒基因⑥.啟動子和終止子⑦.使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給后代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用25、略

【分析】【分析】

1.體液免疫的具體過程：

(1)感應(yīng)階段：除少數(shù)抗原可以直接刺激B細胞外；大多數(shù)抗原被吞噬細胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細胞將抗原呈遞給T細胞，再由T細胞呈遞給B細胞；

(2)反應(yīng)階段：B細胞接受抗原刺激后；開始進行一系列的增殖；分化，形成記憶細胞和漿細胞；

(3)效應(yīng)階段：漿細胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合；發(fā)揮免疫效應(yīng)。

2.單克隆抗體的制備：

(1)細胞來源：B淋巴細胞：能產(chǎn)生特異性抗體；在體外不能無限繁殖；骨髓瘤細胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖。

(2)雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖；又能產(chǎn)生特異性抗體。

(3)兩次次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。

(4)兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性。

(5)提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。

(6)單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強；靈敏度高；并可能大量制備。

【詳解】

（1）圖為單克隆抗體的制備的流程；圖中細胞a是免疫后小鼠體內(nèi)的B細胞（或漿細胞），該細胞是高度分化的細胞，不能進行分裂。

（2）與植物原生質(zhì)體融合相比；動物細胞融合特有的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒。若只存在細胞的兩兩融合，融合體系中除未融合的細胞外，還有兩兩融合的細胞，由于細胞的融合是隨機的，兩兩融合的細胞包括雜交瘤細胞和同種細胞融合成的細胞。篩選時，需用特定的選擇性培養(yǎng)基才能從中篩選出雜交瘤細胞。

（3）要想獲得足夠數(shù)量的能分泌特異性抗體的細胞；在篩選過程中需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，該過程是將霍山石斛的某種多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)制作成抗原；并生產(chǎn)出單克隆抗體，因此還需用（霍山石斛）多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)物作為檢測特異性抗體的物質(zhì)。

（4）若將篩選出的細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)；則可從小鼠腹水中提取單克隆抗體。

（5）科研小組用霍山石斛多糖給小鼠灌胃后；取出小腸；肝、脾、腎和肺進行抗原-抗體雜交實驗，發(fā)現(xiàn)除腸腔外其他組織均未檢測到霍山石斛多糖?；羯绞嗵强山到猱a(chǎn)生小分子片段，該實驗不能證明具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的物質(zhì)是多糖還是降解后的小分子片段，因此該實驗不能說明引起免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的是大分子霍山石斛多糖。

【點睛】

本題考查免疫調(diào)節(jié)、單克隆抗體的制備等知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力以及獲取信息、分析問題的能力?！窘馕觥緽細胞（或漿細胞）該細胞是高度分化的細胞，不能進行分裂滅活的病毒雜交瘤細胞同種細胞融合成的細胞選擇性克隆化培養(yǎng)抗體檢測（霍山石斛）多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)物腹水不能霍山石斛多糖在腸腔中被降解，產(chǎn)生的多糖小分子片段可能具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)（或該實驗不能證明具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的物質(zhì)是多糖還是降解后的小分子片段）26、略

【分析】【分析】

1；稀釋涂布平板法：將待測樣品制成均勻的系列稀釋液；盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。2、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點到線的劃線稀釋而獲得較多獨立分布的單個細胞，并讓其成長為單菌落的方法。

【詳解】

（1）A；B、C中的菌落分布較均勻；是通過稀釋涂布平板法獲得的，而D是通過平板劃線法獲得的，劃線平板法是從上一次劃線的末端開始劃線。故選ABC。

（2）①從整個實驗過程可以看出；實驗通過對皮膚滲出物稀釋培養(yǎng)形成的菌落進行擴大培養(yǎng)后，利用噬菌體的作用檢測其中是否含有炭疽芽孢桿菌。②對照組中加入的液體不應(yīng)含有噬菌體，因此應(yīng)加入等量的生理鹽水；在進行微生物培養(yǎng)時為防止雜菌的混入，消毒和滅菌工作是關(guān)鍵，主要包括對操作的空間；操作者的衣著和手進行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌；實驗操作在酒精燈火焰附近進行；操作過程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周圍物品相接觸等。③若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度低于對照組，說明實驗組中的炭疽芽孢桿菌被噬菌體侵染與破壞，即該疑似患者感染了炭疽芽孢桿菌。④炭疽芽孢桿菌屬于細菌，能寄生在人和動物體內(nèi)，說明它是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)時需要借助搖床振蕩培養(yǎng)，說明它是需氧型生物；振蕩培養(yǎng)的目的是增加培養(yǎng)液中的氧氣含量，使細菌與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，有利于炭疽芽孢桿菌的大量繁殖；培養(yǎng)液變渾濁表明炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

（3）分析表中數(shù)據(jù)可知，只有稀釋度為10-5時菌落數(shù)在30~300之間，適合用于計數(shù)?！窘馕觥?1)ABC

(2)檢驗皮膚炭疽病疑似患者的皮膚滲出物中是否含有炭疽芽孢桿菌與實驗組等量的生理鹽水對操作的空間；操作者的衣著和手進行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌；實驗操作在酒精燈火焰附近進行；操作過程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周圍物品相接觸實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低（異養(yǎng)）需氧型增加培養(yǎng)液中的氧氣含量；使細菌與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

(3)10-5稀釋度為10-5時菌落數(shù)在30~300之間六、綜合題(共3題，共21分)27、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人類的愿望；將不同生物的遺傳物質(zhì)在體外人工剪切并和載體重組后轉(zhuǎn)入細胞內(nèi)進行擴增，并表達產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的技術(shù)。操作的對象是基因。

【詳解】

（1）金黃色葡萄球菌腸毒素（SEs）是一類可溶性小分子蛋白質(zhì)；是由SEs基因控制形成的蛋白質(zhì)，基因工程操作的是基因，因此為了用基因工程制備SEs純品，科研人員首先需要獲取SEs基因；若采用PCR技術(shù)進行這一階段的操作，前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。

（2）基因工程操作的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建。若選擇SacI對目的基因和質(zhì)粒進行酶切，由于切割后的兩端黏性末端相同，因此會出現(xiàn)目的基因的自身環(huán)化和反向連接，因此缺點是不能避免目的基因的自身環(huán)化和反向連接；據(jù)圖可知，若選擇XbaI、SacI對質(zhì)粒進行酶切，會產(chǎn)生一個段片段（1900bp）和一個含有兩種抗生素抗性基因的長片段，因此若選擇XbaI、SacI對目的基因和質(zhì)粒進行酶切，形成的重組DNA中以及空質(zhì)粒中都會含有兩種抗性基因，無法通過抗生素的抗性篩選重組DNA，故缺點是無法篩選空質(zhì)粒和重組質(zhì)粒。用SacI和HindIII切割會產(chǎn)生相同的黏性末端，因此最好選用XbaI、HindIII對目的基因和質(zhì)粒進行酶切。操作成功后的結(jié)構(gòu)（M）長13603-2246+680=12037bp。

（3）若以大腸桿菌為受體細胞，導(dǎo)入M前需在大腸桿菌的培養(yǎng)液中加入適量的Ca2+