2025年陜教新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年陜教新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、有關微生物營養(yǎng)物質的敘述中，正確的是（）A.是碳源的物質不可能同時是氮源B.微生物的培養(yǎng)都需要提供碳源、氮源、水、無機鹽，缺一不可C.牛肉蛋白胨培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基，營養(yǎng)全面D.液體培養(yǎng)基有利于營養(yǎng)物質的吸收，可用于微生物的擴增培養(yǎng)2、小鼠胚胎干細胞經定向誘導可獲得多種功能細胞、制備流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進雄鼠產生更多的精子B.細胞a和細胞b內含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細胞D.胚胎干細胞和誘導出的各種細胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)3、“格瓦斯”是由酵母菌和乳酸菌雙菌發(fā)酵的傳統(tǒng)谷物發(fā)酵飲料。傳統(tǒng)做法是采用俄式大面包為基質，加入菌種發(fā)酵生成微量乙醇、一定量的CO2以及豐富的有機酸物質。下列相關敘述中，正確的是（）A.兩種菌的代謝類型相同B.CO2由兩種菌共同產生C.發(fā)酵過程需要密閉條件D.兩種菌間為互利共生關系4、據(jù)圖所示，有關工具酶功能的敘述不正確的是（）

A.限制性內切酶可以切斷a處B.DNA聚合酶可以連接a處C.解旋酶可以使b處解開D.DNA連接酶可以連接c處5、下列哪項不是蛋白質工程的基本思路（）A.通過改造或合成基因獲得所需要的蛋白質B.從預期的蛋白質功能出發(fā)，設計預期的蛋白質結構C.根據(jù)所預期的蛋白質結構，推測相應的氨基酸序列D.根據(jù)推測的氨基酸序列，便能確定唯一對應的脫氧核苷酸序列6、如表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，下列有關說法錯誤的是（）。成分含量成分含量NaNO33gFeSO40.01gK2HPO41g葡萄糖30g瓊脂15g定容至1000mLMgSO4·7H2O0.5g抗生素0.1萬單位

A.依物理性質劃分，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基B.由培養(yǎng)基的原料可知，所培養(yǎng)的微生物是異養(yǎng)型，培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌C.本培養(yǎng)基中抗生素的添加滿足了微生物生長對特殊營養(yǎng)物質的要求D.若該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細菌，應除去抗生素和NaNO3，并加入尿素評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)7、科學家運用基因工程技術，將人凝血因子基因導入山羊的受精卵中，培育出山羊乳腺生物反應器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有關敘述錯誤的是（）A.可用顯微注射技術將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導入山羊的受精卵B.在該轉基因羊中，人凝血因子存在于乳腺細胞，而不存在于其他細胞C.人凝血因子基因開始轉錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNAD.科學家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因重組在一起，從而使人凝血因子基因只在乳腺細胞中特異表達8、下列關于果酒和果醋的制作原理、發(fā)酵過程的敘述中不正確的是（）A.果酒和果醋的發(fā)酵菌種不同，但代謝類型相同B.制作果酒和果醋時都應用70％的酒精對發(fā)酵瓶消毒C.變酸果酒的表面觀察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的制作可用同一裝置，但需控制不同發(fā)酵條件9、營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細胞代謝調節(jié)機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應不能進行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產物，為工業(yè)生產提供大量的原料產物。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。下列說法不合理的是（）

A.過程①的接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養(yǎng)基的成分相同B.進行過程②培養(yǎng)時必須先將絲絨布轉印至基本培養(yǎng)基上順序不能顛倒C.統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時間不足導致菌落數(shù)目偏大D.營養(yǎng)缺陷型菌株細胞代謝調節(jié)機制中的某些酶被破壞，可能與核孔復合體的蛋白質空間結構發(fā)生改變有關10、利用基因編輯技術將病毒外殼蛋白基因導入豬細胞中，然后通過核移植技術培育基因編輯豬，可用于生產基因工程疫苗。如圖為基因編輯豬培育流程，下列敘述不正確的是（）

A.對1號豬使用促性腺激素處理，可使其超數(shù)排卵B.采集到的卵母細胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期才能用于核移植C.產出的基因編輯豬的性染色體來自2號與3號豬D.為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導入4號豬并正常表達，可采用DNA測序的方法11、體外受精和胚胎移植都是在醫(yī)學和農業(yè)生產上應用較多的胚胎工程技術。判斷下列相關表述錯誤的是（）A.精子需要獲能才能與卵子結合，而卵子一經排出就具備受精能力B.精子入卵后，卵細胞膜會發(fā)生反應阻止其他精子入卵C.經胚胎移植產生的后代，其遺傳特性與受體保持一致D.進行胚胎移植前，要對供體和受體進行免疫檢查，防止發(fā)生免疫排斥反應12、下列關于現(xiàn)代生物技術的敘述正確的是（）A.從酵母菌細胞中提取到人干擾素說明相應的目的基因完成了在受體細胞中的表達B.在植物細胞與組織培養(yǎng)中，花藥不能作為組織培養(yǎng)的材料C.在動物細胞培養(yǎng)中，用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞D.多種顯微操作和處理技術使體外受精、胚胎移植和胚胎分割成為可能評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)13、通過統(tǒng)計平板上的________________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進行計數(shù)。14、植物基因工程：______。15、毛霉等微生物產生的蛋白酶可以將豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以將_____________水解成_________________和________________。16、胚胎工程。

胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術，由______、______、______、胚胎冷凍保存技術和______技術等組成的現(xiàn)代生物技術。17、我國政府同樣禁止進行治療性克隆實驗。（選擇性必修3P108）()18、隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，有些新的致病微生物被發(fā)現(xiàn)，它們的危害可能更大。通過互聯(lián)網(wǎng)或圖書館搜集近年發(fā)現(xiàn)的致病微生物的相關資料，分析和歸納這些資料__________。19、第四步：_____評卷人得分四、實驗題(共3題，共30分)20、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結構，使蛋白質變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結構，使蛋白質變性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法，比較了兩種提取DNA的方法，主要操作如下：

實驗測定結果如下（表中OD260反映溶液中核酸的濃度；OD280反映溶液中蛋白質的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200請回答下列問題。

（1）與常溫下研磨相比，液氮中研磨的優(yōu)點是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一異戊醇，蛋白質等雜質可溶于氯仿一異戊醇，實驗過程中加入氯仿一異戊醇離心后，應?、賍_____加異丙醇（異丙醇與水互溶）并離心進行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是________。

（3）兩種方法中，________法提取的DNA較多，其可能原因是_______。

II：某研究組對玉米開展了組織培養(yǎng)及相關研究；A；B、C、D表示以親本植物為材料進行的四種人工繁殖過程，請據(jù)圖回答下列問題：

（1）植物組織培養(yǎng)過程中，外植體需要進行消毒處理。利用圖中的部分葉片進行植物組織培養(yǎng)時，需將其先用________消毒30s后；用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈傷組織的誘導，對形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的濃度。當玉米愈傷組織在只含有細胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加____________；以促進苗形成。

（3）研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是_______（填下列序號）。

①綠色芽點細胞排列松散②剛融合的雜交細胞發(fā)生質壁分離。

③胚狀體細胞中有葉綠體④分化的愈傷組織的各細胞的形態(tài)大小一致21、氨基丁酸（GABA）是具有降血壓；抗焦慮等功能的水溶性氨基酸。科研人員通過實驗研究了白方腐乳在前發(fā)酵鹽腌和后發(fā)酵過程中GABA的含量變化；為尋找生產富含GABA腐乳的工藝奠定基礎。實驗步驟如下：

①豆腐白坯表面接種毛霉孢子后；在適宜的溫度和濕度下培養(yǎng)48h，獲得毛坯。

②將毛坯分層整齊地擺放在瓶中；鹽腌5天。

③腌制后加入鹵湯；置于28℃恒溫箱中后發(fā)酵90天。

④分別采集各時段的腐乳坯樣品；測定GABA含量，結果如圖。

請分析并回答問題：

（1）前發(fā)酵過程中，毛坯的GABA含量發(fā)生明顯變化的原因是毛霉產生的_______促進蛋白質水解產生GABA。

（2）步驟②中，加鹽腌制的正確操作是______________。此過程腐乳干重中的GABA含量下降，一方面與食鹽抑制毛霉生長，酶活性降低有關；另一方面，豆腐中的水分滲出，部分GABA會____________而導致測定值減小。

（3）后發(fā)酵所加的鹵湯中，具有抑菌防腐和調味的成分主要有_______。此過程中，發(fā)酵_______天后的白方腐乳出廠銷售比較適宜。22、研究者改造與腸道共生的大腸桿菌；口服該工程菌后激活機體特異性免疫，實現(xiàn)腫瘤的預防和治療。

(1)部分腸道細菌能夠分泌外膜囊泡（OMV）；如圖1．OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內豐富的免疫細胞。細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白。

研究者利用含圖2所示元件的表達載體轉化大腸桿菌制備工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表達產物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結合，提高樹突狀細胞_____OMV的能力。

(2)為研究上述工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應的效果，研究者用健康小鼠進行如下實驗：。組別第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小時后，飲用含阿拉伯糖的水結果檢測第1組空載體+第12天，每組隨機取5只小鼠等量的脾臟細胞與黑色素瘤細胞共培養(yǎng)，檢測殺傷率，結果如圖3．第2組ClyA-Fc+第3組ClyA-OVA+第4組第5組

注：“+”；“-”代表是否飲用；

口服工程菌12小時后其在腸道內存在數(shù)量較多。

①第4、5組的操作是_____。圖3結果說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應，理由是_____。

②為進一步驗證上述結論，研究者進行如下實驗：先加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，再加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，檢測熒光細胞的數(shù)目，若第5組_____為最大值；則上述結論成立。

A．帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物。

B．帶有綠色熒光標記的細胞毒性T細胞特異性抗體。

C．第1-5組小鼠脾臟細胞。

③腫瘤患者術后極易復發(fā)，研究者重復上表實驗，并在第3次口服工程菌后第50天給小鼠注射黑色素瘤細胞。目的是_____。

(3)該工程菌的研發(fā)為不同腫瘤的精準治療和預防提供了可能。依據(jù)本研究，設計針對肺癌治療的工程菌表達載體元件：_____。評卷人得分五、綜合題(共4題，共28分)23、質粒通常用來構建基因表達載體；基因表達載體的構建是實施基因工程的核心。構建基因表達載體前首先要獲取目的基因，PCR是獲取大量目的基因的一種方法，如一個DNA片段上有10種基因，現(xiàn)只需要其中的某個基因，PCR技術就可以實現(xiàn)在生物體外復制特定DNA片段（目的基因）的目的。

（1）PCR反應體系的成分中有兩種引物；在復性時引物會結合到互補DNA鏈，對兩種引物的設計要求之一是：兩種引物之間不能堿基互補配對，試分析原因_______________；PCR反應體系的成分中能夠決定復制特定DNA片段的是_____________（填“模板”；“引物”或“taq酶”）；從引物設計的角度考慮，如果目的基因兩側沒有酶切位點，用PCR技術_____________（“可以”或“不可以”）為目的基因設置酶切位點。

（2）構建基因表達載體的目的是___________（答出兩點即可）。一個基因表達載體的組成；除了目的基因外，還必需有啟動子和終止子，啟動子的本質是_____________，其為_____________識別和結合的位點。

（3）圖1表示質粒載體，圖2表示插入了目的基因的重組質粒，被轉化的大腸桿菌有兩種，分別是含有質粒載體和含有插入目的基因的重組質粒，結合圖示，這兩種大腸桿菌可以用圖中___________抗性基因進行篩選。24、長期以來優(yōu)良種畜的繁殖速度始終是限制畜牧養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的瓶頸；近年來發(fā)展起來的細胞工程技術和胚胎工程技術為優(yōu)良種畜的快速繁殖帶來了無限生機。下面是科學家快速繁殖良種奶牛的兩種方法，請據(jù)圖回答：

(1)在試管牛E和克隆牛G的培育過程中都必須用到的兩項技術是動物細胞培養(yǎng)和___________________，把早期胚胎送入受體母牛的最佳時期是__________________期。

(2)克隆牛G形成重構胚的過程采用的是細胞工程中的__________________技術。去核時常采用__________________的方法。

(3)若獲得的克隆牛G與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質的角度分析其原因是_________________。

(4)培育試管牛E時需對母牛B和母牛D進行_________________處理，其目的是_________________，以便將胚胎移至母牛D的子宮內。受體母牛必須和供體牛屬于_________________。移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎是_________________。25、為提高棉花的耐鹽能力，研究者將徑柳匙葉草液泡膜Na＋/K＋逆向轉運蛋白基因（TaNHX2基因）轉移到棉花細胞內；獲得耐鹽棉花。下圖為TaNHX2基因以及可與其連接的四種引物?；卮鹣铝袉栴}：

(1)在目的基因的獲取以及連接中都會用到限制酶，該酶主要來源于原核細胞，而原核細胞中DNA是裸露的，推斷限制酶不切割自身DNA的原因是__________；可以看做是原核生物的“免疫系統(tǒng)”。

(2)通過反轉錄的方法獲得的TaNHX2基因若要正常表達，需要在基因上連接調控序列__________，采用PCR技術對目的基因進行擴增時，需選用的引物為__________（填圖中字母），該過程必須有引物的原因是__________。引物不能循環(huán)利用的原因是__________；因此在具體操作中應在PCR反應體系中源源不斷地加入兩種引物。

(3)我國在轉基因棉花的培育上獨創(chuàng)的方法是__________，為檢測棉花轉基因是否成功，可采用個體水平的檢測方法，即__________，完成轉基因的棉花表現(xiàn)出耐鹽特性的機理是__________，使棉花耐鹽性增強。26、干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫病；其血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體異性最強，影響最顯著。科研人員為建立抗SSB抗體全自動定量檢測的磁微?；瘜W發(fā)光試劑，利用基因工程技術獲得重組SSB蛋白，流程如下，請分析回答：

(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要____________酶。通過PCR技術擴增SSB基因的前提是要測定該基因兩端部分核苷酸序列，目的是____________。

(2)為確保與PET41a質粒定向連接，獲得的SSB基因兩端要含有____________酶切位點。在PCR過程中，第____________輪循環(huán)產物中出現(xiàn)含所需限制酶的片段A。

(3)獲得含SSB基因的重組質粒后，進行如下實驗切割原質粒和重組質粒，獲得片段大小如右表（1kb=1000堿基對）（注意：DNA片段大小與圖中所畫比例一致）。SSB基因的長度為____________。限制酶EcoRIBamHI和XhoI原質粒8.1kb2.7kb、5.4kb重組質粒3.4kb、5.0kb未做該處理

(4)③過程目的是將重組質粒轉染到大腸桿菌內，并接種于添加____________的培養(yǎng)基上；收集菌落進行鑒定，將陽性菌落進一步純化后將菌體破碎處理，篩選得到重組SSB蛋白。

(5)為檢測重組質粒表達情況及重組蛋白與抗體結合能力，科研人員通過注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑進行如下實驗，請完成下表：。實驗步驟實驗操作分組取健康、生理狀態(tài)相同的小鼠隨機均分成兩組。實驗處理實驗組注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑，對照組①____________，連續(xù)三次。飼養(yǎng)在相同且適宜環(huán)境中飼養(yǎng)。②___第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗體進行檢測。結果分析與對照組相比，若抗體檢測呈③____________，則表明重組SSB蛋白具有與相應抗體高度結合的能力。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、D【分析】【分析】

本題主要考查微生物的營養(yǎng)需求及培養(yǎng)基的組成及功能；培養(yǎng)基的組成成分包括碳源；氮源、水和無機鹽，此外還要滿足微生物生長對PH、特殊營養(yǎng)物質及氧氣的要求。

【詳解】

A；是碳源的物質同時也可以是氮源；如牛肉膏和蛋白胨均可作為碳源和氮源，同時還提供維生素，A錯誤；

B；并非所有微生物的培養(yǎng)基中都必須含有碳源、氮源：自養(yǎng)的微生物不需要碳源、固氮微生物不需要氮源；B錯誤；

C；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應用最廣泛和最普通的培養(yǎng)基；屬于天然培養(yǎng)基，C錯誤；

D；液體培養(yǎng)基中不加任何凝固劑；這種培養(yǎng)基的成分均勻，微生物能充分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料，利于微生物擴增培養(yǎng)，D正確。

故選D。

【點睛】

不同的微生物，所需營養(yǎng)物質由較大差別，要針對微生物具體情況進行分析，本題需要考生比較分析，是對考生綜合能力的考查。2、D【分析】【分析】

1；胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）。

2；ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如?；撬帷⒍□－h(huán)腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素促進成熟雌性個體超數(shù)排卵，然后將卵細胞從母體內取出，在試管內與人工采集的精子進行體外受精，培育成胚胎，A錯誤；

B、細胞a和細胞b是由同一個受精卵經過有絲分裂形成的；故核基因相同，B錯誤；

C；運用細胞培養(yǎng)技術可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞；首先必須用胰蛋白酶處理內細胞團，分解細胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個細胞，C錯誤；

D、動物細胞培養(yǎng)時需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；以維持培養(yǎng)液的pH，D正確；

故選D。3、C【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應式如下：

（2）在無氧條件下，反應式如下：

2.乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；能發(fā)酵產生乳酸。

【詳解】

A；酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型；乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，A錯誤；

B、乳酸菌呼吸不能產生二氧化碳，因此CO2由酵母菌產生；B錯誤；

C；酵母菌在無氧條件下能發(fā)酵產生酒精；乳酸菌是厭氧菌，因此兩種發(fā)酵過程都需要密閉條件，C正確；

D；兩種菌間為競爭關系；D錯誤。

故選C。

【點睛】4、D【分析】【分析】

分析題圖：圖示為某DNA分子一個片段，其中a為磷酸二酯鍵，b為氫鍵；c為脫氧核苷酸內部的磷酸鍵。

【詳解】

A；限制酶可以切斷脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵；即a處，A正確；

B；DNA聚合酶可以連接脫氧核苷酸形成磷酸二酯鍵；即a處，B正確；

C、解旋酶可以使氫鍵斷裂，即b處；C正確；

D；DNA連接酶可以連接DNA片段形成磷酸二酯鍵；即a處，D錯誤。

故選D。5、D【分析】【分析】

蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需求。

【詳解】

A；蛋白質工程通過基因修飾或基因合成；對現(xiàn)有蛋白質進行改造，A不符合題意；

BC；蛋白質工程的基本途徑是：從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列（基因）；BC不符合題意；

D；由于有的氨基酸可能由多個密碼子編碼；因此根據(jù)氨基酸序列推測的脫氧核苷酸序列可能不唯一，D符合題意。

故選D。6、C【分析】【分析】

各種培養(yǎng)基一般都含有水；碳源、氮源、無機鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。培養(yǎng)基按其物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基按其特殊用途可分為選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基中加入瓊脂可以制作固體培養(yǎng)基。

【詳解】

A；從培養(yǎng)基成分看；配方中含有凝固劑瓊脂，故依物理性質劃分，應屬于固體培養(yǎng)基，A正確；

B；由培養(yǎng)基的原料可知；葡萄糖屬于有機碳源，因此所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型，加入的青霉素能抑制細菌的生長，酵母菌是異氧型微生物，都可利用葡萄糖作為碳源，都屬于真核生物，因此該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌，B正確；

C；本培養(yǎng)基中抗生素的添加是為了篩選能夠抗該抗生素的微生物；C錯誤；

D、若用該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細菌，應以尿素為唯一氮源，因抗生素有殺菌作用，故應除去抗生素和NaNO3；并應加入尿素，D正確。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)7、B:C:D【分析】【分析】

轉基因動物生產藥物：

(1)基因來源：藥用蛋白基因+乳腺組織特異性表達的啟動子(原理：基因的選擇性表達)。

(2)成果：乳腺生物反應器。

(3)過程：將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起；導入哺乳動物的受精卵中，最終培育的轉基因動物進入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁生產所需要的藥物。(只有在產下雌性動物個體中，轉入的基因才能表達)。

【詳解】

A；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；因此可用顯微注射技術將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導入羊的受精卵，A正確；

B；在該轉基因羊中；人凝血因子存在于所有細胞中，但只在乳腺細胞中表達，B錯誤；

C；人凝血因子基因開始轉錄后；RNA聚合酶以DNA分子一條鏈為模板合成mRNA，C錯誤；

D；科學家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起；從而使人凝血因子基因只在乳腺細胞中特異表達，D錯誤。

故選BCD。8、A:C【分析】【分析】

果酒；果醋制作的注意事項。

(1)材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄沖洗，并除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。沖洗以洗去灰塵為目的，且不要太干凈，以防洗去野生型酵母菌。

(2)防止發(fā)酵液被污染的方法①榨汁機要清洗干凈并晾干。②發(fā)酵瓶要洗凈并用體積分數(shù)為70%的酒精消毒；或用洗潔精洗滌。③裝入葡萄汁后要封閉充氣口。

【詳解】

A；果酒發(fā)酵的菌種是酵母菌；其代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，而果醋發(fā)酵的菌種是醋酸菌，其代謝類型是異養(yǎng)需氧型，A符合題意；

B；制作果酒和果醋時均需要對發(fā)酵瓶消毒；均可用體積分數(shù)為70%的酒精進行消毒，B不符合題意；

C；在變酸果酒的表面觀察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的；液體表面不能形成菌落，C符合題意；

D；果酒和果醋的制作可用同一裝置；但需控制不同發(fā)酵條件，果酒制作需要無氧環(huán)境，適宜溫度為18～25℃，而果醋制作需要有氧環(huán)境，適宜溫度為30～35℃，D不符合題意。

故選AC。9、A:C:D【分析】【分析】

完全培養(yǎng)基中含有微生物生長所需要的各種營養(yǎng)成分；基本培養(yǎng)基缺少某種營養(yǎng)成分，通過影印培養(yǎng)法，二者接種的菌種相同，基本培養(yǎng)基上不能生長的菌株即為營養(yǎng)缺陷型菌株。

【詳解】

A；過程①得到的菌落均勻分布；接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養(yǎng)基的成分不同，基本培養(yǎng)基中缺乏某種氨基酸，A錯誤；

B；進行過程②培養(yǎng)時先將絲絨布轉印至完全培養(yǎng)基上；可能會攜帶某種氨基酸進入基本培養(yǎng)基，因此順序不能顛倒，B正確；

C；統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次；直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時間不足導致菌落數(shù)目偏小，C錯誤；

D；若該菌株為原核細胞；則不存在核孔復合體，營養(yǎng)缺陷型菌株細胞代謝調節(jié)機制中的某些酶被破壞，應是控制該酶合成的基因發(fā)生突變，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】10、C:D【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖示基因編輯豬培育過程涉及的技術手段有轉基因技術；核移植技術、早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術等，利用轉基因技術將病毒外殼蛋白基因（目的基因）導入2號豬的體細胞核中，然后將2號豬的體細胞核移植到1號豬的去核卵母細胞中，再將重組細胞培養(yǎng)到囊胚并移植到3號豬的子宮中去，最后分娩產生了4號轉基因克隆豬。

【詳解】

A；對供體母豬使用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，A正確；

B；獲得的卵母細胞去核后；需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進行核移植，B正確；

C；染色體位于細胞核；則產出的基因編輯豬的性染色體來自于2號豬，C錯誤；

D；為檢測病毒外殼蛋白基因是否正常表達；可采用的方法是抗原-抗體雜交，D錯誤。

故選CD。11、A:C:D【分析】【分析】

試管動物是通過體外受精；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術；最終在受體的子宮中發(fā)育而來的動物，屬于有性生殖過程。

【詳解】

A；采集來的精子必須獲能之后才具備與卵子完成受精的能力；卵子只有發(fā)育到MⅡ中期才具備與精子受精的能力，A錯誤；

B；精子入卵后；卵細胞膜會發(fā)生卵細胞膜反應，阻止其它精子的進入，這是防止多精入卵受精的其中一個重要屏障，B正確；

C；供體胚胎與受體子宮建立的僅是生理和組織上的聯(lián)系；其遺傳物質在孕育過程中不會發(fā)生任何變化，因此胚胎移植產生的后代，其遺傳特性不受到受體的影響，后代的遺傳特性與供體保持一致，C錯誤；

D；受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應；所以不必進行免疫檢查，D錯誤。

故選ACD。12、A:C:D【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個細胞--制成細胞懸液--轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液--轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2；胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術；如體外受精、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術。

【詳解】

A；干擾素是人體的蛋白質；故從酵母菌細胞中提取到人的干擾素，說明目的基因已經完成了在受體細胞中的表達，A正確；

B；在植物細胞和組織培養(yǎng)中；花藥可以進行離體培養(yǎng)成單倍體植株，B錯誤；

C；使用酶解法可以獲得單個細胞；故在動物細胞培養(yǎng)中，用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞，C正確；

D；對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術；使體外受精、胚胎移植和胚胎分割成為可能，D正確。

故選ACD。

【點睛】三、填空題(共7題，共14分)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30～30014、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】抗蟲、抗病、抗逆轉基因植物，利用轉基因改良植物的品質15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】體外受精技術、胚胎移植技術、胚胎分割技術性別控制17、略

【分析】【詳解】

中國政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對治療性克隆，該表述錯誤?！窘馕觥垮e誤18、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個宿主轉移到另一個宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時近年來由于溫室效應加劇，也會使致病微生物的繁殖周期變短，可能會使危害性更大，因此我們需要積極開展科學研究，掌握防范的措施和防范，實現(xiàn)最好的防護，目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的檢測和鑒定四、實驗題(共3題，共30分)20、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有機體中的重要成分；在生物體中核酸常與蛋白質結合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）兩大類，在真核細胞中，前者主要存在于細胞核中，后者主要存在于細胞質及核仁里。在制備核酸時，通過研磨破壞細胞壁和細胞膜，使核蛋白被釋放出來。提取DNA有有多種方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有區(qū)別又有聯(lián)系。

II：題圖分析：A表示利用生殖細胞得到單倍體植株；B表示通過胚狀體進行無性繁殖；其中①為脫分化；再分化；C為植物組織培養(yǎng)；D表示植物體細胞雜交，其中②是誘導原生質體融合。

【詳解】

I：（1）液氮溫度低，液氮中研磨會研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量。

（2）氯仿-異戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-異戊醇，離心后，氯仿-異戊醇位于試管的底部，DNA溶于上清液中，所以離心后應該取上清液；含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物，說明DNA不溶于異丙醇，而雜質能溶于異丙醇。

（3）從表中數(shù)據(jù)可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA較多，根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物組織培養(yǎng)過程中；整個過程應嚴格無菌無毒，利用圖中的部分葉片進行植物組織培養(yǎng)時，需將其先用體積分數(shù)為70%的酒精消毒30s后，用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）為促進愈傷組織再分化；在配制分化培養(yǎng)基時需降低2，4-D的濃度。當玉米愈傷組織在只含有細胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加適量的生長素，以促進苗形成。

（3）①芽是植物體中具有分生能力的組織；細胞排列緊密，①錯誤；

②剛融合的植物體細胞沒有成熟的大液泡；無法構成滲透系統(tǒng)，不能發(fā)生質壁分離現(xiàn)象，②錯誤；

③胚狀體細胞出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽；因此其細胞內有葉綠體，③正確；

④分化的愈傷組織的結果形成了具有根和芽的胚狀體；細胞的形態(tài)發(fā)生了變化，④錯誤。

故選③。

【點睛】

本題主要考查DNA提取原理、操作過程及實驗結果的分析以及植物組織培養(yǎng)技術，意在考查學生讀圖能力和分析應用能力。【解析】研磨充分，低溫抑制酶活性抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量上清液DNA不溶于異丙醇，而雜質能溶于異丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNA（體積分數(shù)為70-75%）酒精降低（適量的）生長素③21、略

【分析】【分析】

腐乳的制作過程主要是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。

1；讓豆腐上長出毛霉：將豆腐塊平放在籠屜內；將籠屜中的溫度控制在15～18℃，并保持在一定的濕度。約48h后，毛霉開始生長，3d之后菌絲生長旺盛，5d后豆腐塊表面布滿菌絲。豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子。

2；加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中；同時逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增高鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽研制的時間約為8d左右．加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期的制作過程中不會過早酥爛。同時，鹽能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質。

3；加鹵湯裝瓶：鹵湯直接關系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等；含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味。香辛料種類很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以調制腐乳的風味，也具有防腐殺菌的作用?？蓳?jù)個人口味配置鹵湯。

4；密封腌制。

【詳解】

（1）前發(fā)酵過程中，毛霉等微生物產生的蛋白酶促進豆腐中的蛋白質水解產生GABA，使得毛坯的GABA含量明顯升高。

（2）步驟②中；加鹽腌制的正確操作是將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中，同時逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增高鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。鹽能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質。此過程腐乳干重中的GABA含量下降的原因可能是：①食鹽會抑制毛霉生長，酶的活性降低；②豆腐中的水分滲出，部分GABA會溶解于水而導致測定值減小。

（3）鹵湯是由料酒及各種香辛料配制而成的；可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味。后發(fā)酵過程中GABA的含量變化曲線圖顯示，在60天以后，GABA的含量達到最大值且保持相對穩(wěn)定，所以此時出廠銷售白方腐乳比較適宜。

【點睛】

解答本題的關鍵是掌握腐乳的制作的相關流程和知識要點，主要依靠學生對課本知識的理解和掌握，并結合題目中所給的GABA為水溶性氨基酸這一關鍵信息回答問題，同時需要學生在做題時思考符合經濟效益的選擇。【解析】蛋白酶逐層加鹽隨著層數(shù)的加高增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些隨水流失（溶解于水中）香辛料和料酒6022、略

【分析】【分析】

樹突狀細胞為抗原呈遞細胞；可識別；攝取和傳遞抗原信息。

【詳解】

（1）細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白；而OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內豐富的免疫細胞。所以，ClyA基因的作用為表達出細菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，進而融合基因可以被免疫細胞識別。Fc表達產物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結合，進而提高樹突狀細胞識別；攝取和傳遞抗原信息的能力。

（2）①根據(jù)表格和柱狀圖可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐漸增加部件，且第4組和第5組工程菌都是完整的，即第4組:ClyA-OVA-Fc第5組:ClyA-OVA-Fc，但是第4組飲用含阿拉伯糖的水，進而激活融合基因的表達；第5組不飲用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表達。所以，第3；5組含有OVA，在人為控制口服阿拉伯糖后產生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高；1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導，殺傷率均低。

②小鼠脾臟細胞具有免疫細胞；可在抗原刺激下引起特異性免疫。帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物可引起小鼠脾臟細胞發(fā)生特異性免疫，故先加入第1-5組小鼠脾臟細胞和帶有紅色熒光標記的OVA抗原肽復合物進行保溫，判斷特異性免疫的強度；

故選AC。

再加入帶有綠色熒光標記的細胞毒性T細胞特異性抗體；目的是檢測OVA抗原肽復合物是否能夠產生特異性細胞毒性T細胞。

故選B。

若第5組同時被紅色和綠色熒光標記的細胞數(shù)目占比越多；說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應，結論成立。

③腫瘤患者術后極易復發(fā)；說明特異性免疫功能減弱。所以，可多次注射黑色素瘤細胞，進而研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復發(fā)。

（3）本實驗中融合基因里面有OVA（黑色素瘤細胞特異性抗原），所以只需將OVA替換為肺癌細胞特異性抗原即可。即將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因?！窘馕觥?1)表達ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面識別；攝取。

(2)第4組:ClyA-OVA-Fc和-第5組:ClyA-OVA-Fc和+第3；5組含有OVA；在人為控制口服阿拉伯糖后產生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高;1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導，殺傷率均低ACB同時被紅色和綠色熒光標記的細胞數(shù)目占比研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復發(fā)。

(3)將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因五、綜合題(共4題，共28分)23、略

【分析】【分析】

PCR技術：

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。（2）原理：DNA復制。

（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

（4）條件：模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）

（5）過程：高溫變性：DNA解旋過程；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

（1）設計的與目的基因兩端序列互補配對的兩種引物；它們之間不能存在互補配對序列，其原因是：兩種引物之間需要滿足不能堿基互補配對是防止引物之間結合形成雙鏈，降低引物與DNA模板鏈結合的效率。PCR反應體系的成分中能夠決定復制特定DNA片段的是引物。從引物設計的角度考慮，如果目的基因兩側沒有酶切位點，用PCR技術可以為目的基因設置酶切位點。

（2）構建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在；可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。啟動子的本質是DNA片段，其為RNA聚合酶識別和結合的位點。

（3）從圖中看；目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，因此可以用四環(huán)素抗性基因篩選這兩種大腸桿菌，不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上存活的即是重組質粒。

【點睛】

熟記并理解基因工程的基本操作程序等相關的基礎知識、形成清晰的知識網(wǎng)絡。在此基礎上，從題意中提取有效信息并圍繞獲取目的基因的方法，特別是利用PCR技術擴增目的基因的過程等知識，進行相關問題的解答?！窘馕觥績煞N引物之間需要滿足不能堿基互補配對是防止引物之間結合形成雙鏈，降低引物與DNA模板鏈結合的效率引物可以使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用DNA片段RNA聚合酶四環(huán)素24、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖示為快速繁殖良種奶牛的兩種方法；其中試管牛E的培育采用了體外受體；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術，屬于有性生殖；克隆牛G的培育采用了核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術，屬于無性生殖。

【詳解】

（1）圖示為快速繁殖良種奶牛的兩種方法；試管牛E和克隆牛G的培育過程中都必須用到動物細胞培養(yǎng)和胚胎移植技術。早期胚胎一般發(fā)育到桑葚胚或囊胚時期時進行胚胎移植，故把早期胚胎送入受體母牛的最佳時期是桑葚胚或囊胚期。

（2）克隆牛G形成重構胚是將良種母牛C的細胞核轉移至良種母牛B的細胞質中；采用的是動物體細胞核移植，目前動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微操作法。

（3）通過核移植技術得到的克隆牛G；其卵母細胞細胞質中的遺傳物質(線粒體DNA)會對克隆動物的性狀產生影響，因此獲得的克隆牛G與供體動物性狀不完全相同。

（4）培育試管牛E時需對母牛B和母牛D注射激素，目的是使母牛B和母牛D同期發(fā)情，以便二者的生殖器官的生理變化同步，為供體的胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境，以便將胚胎移至母牛D的子宮內。受體母牛必須和供體牛屬于同一物種，受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應。這為胚胎在受體的存活提供了可能?！窘馕觥?1)胚胎移植桑葚胚或囊胚。

(2)動物體細胞核移植顯微操作。

(3)卵母細胞細胞質中的遺傳物質(線粒體DNA)會對克隆動物的性狀產生影響或克隆動物的細胞質中的遺傳物質(線粒體DNA)同時來自供體細胞和受體卵母細胞。

(4)同期發(fā)情使母牛B和母牛D生殖器官的生理變化同步，為供體的胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境同一物種受體子宮對外來胚胎不發(fā)生排斥反應25、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術常用到的工具有限制酶（剪刀）；DNA連接酶（針線），運載體（常用質粒）；

2；PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術；PCR的原理是DNA復制，需要的條件包括：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR擴增DNA的過程包括：高溫變性、低溫復性、中溫延伸3個過程。

【詳解】

（1）在目的基因的獲取以及連接中都會用到限制酶；限制酶能識別特定的核苷酸序列并在特定位點將其切割開來。該酶主要來源于原核細胞，而原核細胞中DNA是裸露的，但限制酶并不切割自身的DNA，可能是由于原核細胞DNA上沒有限制酶識別的序列，或者存在序列但是發(fā)生了分子修飾，導致限制酶不能識別該序列。

（2）以TaNHX2基因轉錄形成的mRNA為模板；在反轉錄酶的作用下獲得的TaNHX2基因沒有啟動子和終止子，故要想使該基因正常表達，需要在基因上連接調控序列啟動子（RNA聚合酶識別并結合的位點）和終止子（轉錄終止的位點）；DNA聚合酶只能從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，由圖示可知，采用PCR技術對目的基因進行擴增時，需選用引物A和D；每完成一次擴增后，合