2025年滬科版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年滬科版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、胚胎干細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的全能性，下列有關(guān)胚胎干細(xì)胞的敘述錯(cuò)誤的是（）A.胚胎干細(xì)胞可以由早期胚胎或原始性腺中分離獲得B.在形態(tài)上具有體積大、細(xì)胞核小、核仁明顯的特點(diǎn)C.ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，能夠維持不分化的狀態(tài)D.分化誘導(dǎo)因子可誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型細(xì)胞分化2、用質(zhì)粒（甲）和含目的基因的DNA片段（乙）構(gòu)建基因表達(dá)載體獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌；下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.若通過(guò)PCR技術(shù)獲取該目的基因，應(yīng)該選用引物甲和引物丙B.利用質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建表達(dá)載體，應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ剪切C.若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞中，需選用感受態(tài)的大腸桿菌D.用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基即可篩選出含目的基因的大腸桿菌3、下面是3種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)DNA分子的識(shí)別序列和剪切位點(diǎn)圖（箭頭表示切點(diǎn)；切出的斷面為粘性末端），下列敘述錯(cuò)誤的是（）

限制酶1：--↓GATC--；限制酶2：--CCGC↓GG--；限制酶3：--G↓GATCC--A.不同的限制酶有不同的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，體現(xiàn)了酶的專一性B.限制酶2和3識(shí)別的序列都包含6個(gè)堿基對(duì)C.限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同D.限制酶2能夠識(shí)別和切割RNA分子內(nèi)的核苷酸序列4、下列關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)B.體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體C.植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于作物脫毒D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育5、研究人員制備哺乳動(dòng)物膀胱生物反應(yīng)器，用其獲得人體特殊功能蛋白W的基本過(guò)程如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.步驟①和②所代表的操作分別是顯微注射、受精卵獲能B.步驟③的代孕性體無(wú)需進(jìn)行同期發(fā)情處理C.可收集膀胱生物反應(yīng)器的尿液來(lái)提取WD.轉(zhuǎn)基因的動(dòng)物乳腺上皮細(xì)胞與膀胱上皮細(xì)胞中都能表達(dá)W基因6、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用的敘述，不正確的是（）A.可以將抗病蟲(chóng)害、抗除草劑等基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物使其具有相應(yīng)的抗性B.可以使用DNA重組技術(shù)，使微生物生產(chǎn)稀缺的藥物，如免疫球蛋白等C.可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)使奶牛變成生物反應(yīng)器，使它們的奶中富含某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、珍貴藥材或人類所需要的蛋白質(zhì)D.將不同生物的DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)移和重組，會(huì)創(chuàng)造出新物種評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、模型是人們?yōu)榱四撤N特定目的而對(duì)認(rèn)識(shí)的對(duì)象所做的一種簡(jiǎn)化的概括性描述。對(duì)圖示生物概念模型的分析正確的是（）

A.若該模型表示體外受精技術(shù)，則C不能直接移植到代孕母體B.若該模型表示核移植技術(shù)，則C→D過(guò)程與胚胎移植技術(shù)有關(guān)C.若B表示培養(yǎng)液和胚胎干細(xì)胞，則C→D的培養(yǎng)過(guò)程中有可能出現(xiàn)分化現(xiàn)象D.若該模型表示農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法操作流程，則C可表示Ti質(zhì)粒，D是植物細(xì)胞8、熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測(cè)樣本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸檢測(cè)。其原理是：先由病毒的RNA逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，然后對(duì)得到的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。在PCR反應(yīng)體系中加入引物的同時(shí)，加入與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)接受到熒光信號(hào)，即每個(gè)DNA分子擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成（如圖）。Ct值（循環(huán)閾值）的含義為：每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.擴(kuò)增過(guò)程中引物先于探針結(jié)合到模板DNA上B.若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來(lái)的一個(gè)DNA分子，經(jīng)n次循環(huán)后，需要消耗熒光探針2n-1個(gè)C.C值越大表示被檢測(cè)樣本中病毒數(shù)目越多D.若樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解，檢測(cè)結(jié)果可能為陰性9、生物興趣小組的三位同學(xué)吃冰激凌后有兩人嚴(yán)重腹瀉，他們懷疑冰激凌中大腸桿菌超標(biāo)。衛(wèi)生部門(mén)規(guī)定1000mL自來(lái)水37℃培養(yǎng)48h后大桿菌菌落數(shù)不能超過(guò)3個(gè)，于是他們?cè)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)此冰激凌進(jìn)行檢測(cè)。下列實(shí)驗(yàn)操作，不合理的是（）A.再去小店買一個(gè)同樣品牌的同種冰激凌，然后配制伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（該培養(yǎng)基可用來(lái)鑒別大腸桿菌），滅菌、倒平板B.取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×105C.取各個(gè)稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個(gè)濃度涂3個(gè)平板，共培養(yǎng)18個(gè)平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48hD.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏小10、下列關(guān)于基因工程中幾種工具的敘述，正確的是（）A.限制酶可水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可將末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)C.DNA聚合酶能夠從核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因11、草莓是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高的水果，深受人們喜愛(ài)，但由于草莓是無(wú)性繁殖，感染的病毒很容易傳給后代，導(dǎo)致產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差?？蒲腥藛T通過(guò)熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)法，取得了較好的脫毒效果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示(S代表成活率，D代表脫毒率)。下列敘述正確的是（）。莖尖長(zhǎng)度(mm)

38℃熱處理時(shí)間(d)

10203040400.3~0.5S：36.7%

D：81.8%S：40.0%；

D：83.3%S：30.0%

D：100%S：16.7%

D：100%0.5~0.8S：60.0%：

D：66.7%S：60.0%；D：72.2%S：50.0%

D：93.3%S：40.0%

D：100%0.8~1.0S：93.3%：

D：57.1%S：85.7%：

D：69.2%S：60.0%：

94.4%S：46.7%：

D：92.5%

A.莖尖培養(yǎng)法運(yùn)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)B.熱處理的目的可能是阻止病毒進(jìn)入莖尖C.熱處理時(shí)間越長(zhǎng)，成活率越高D.脫毒率與莖尖大小呈負(fù)相關(guān)12、利用膠體金檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)抗原最常用的是雙抗夾心法。雙抗夾心法需要準(zhǔn)備待測(cè)抗原的配對(duì)抗體；一個(gè)抗體用膠體金標(biāo)記（即膠體金標(biāo)記抗體）并固定在結(jié)合墊上，另一個(gè)抗體固定在NC膜的檢測(cè)線（T線）上。另外，還需要準(zhǔn)備能與金標(biāo)抗體特異性結(jié)合的二抗并固定于NC膜的控制線（C線）上，如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.樣品中含有待測(cè)抗原時(shí)，T線和C線均會(huì)顯色B.圖中的抗體都需要與抗原結(jié)合C.結(jié)合墊是為了固定金標(biāo)抗體D.若T線不顯色說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果無(wú)效13、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥?；步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源14、某種物質(zhì)S（一種含有C；H、N的有機(jī)物）難以降解；會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要甲，乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無(wú)機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無(wú)機(jī)鹽、水、S和Y下列分析正確的是（）

A.Y物質(zhì)是瓊脂，甲和乙均需采用高壓蒸汽滅菌B.若搖瓶甲細(xì)菌細(xì)胞估算數(shù)為2×107個(gè)/mL，每個(gè)平板接種量為0．1mL，菌落平均數(shù)為200個(gè)，則搖瓶?jī)?nèi)菌液至少稀釋104倍C.③過(guò)程所使用的接種環(huán)，需采用灼燒滅菌法進(jìn)行滅菌D.⑤過(guò)程中若S的濃度超過(guò)某一濃度時(shí)，菌株對(duì)S的降解量可能會(huì)下降15、下列關(guān)于微生物發(fā)酵的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.制備培養(yǎng)基過(guò)程中，需要在滅菌后進(jìn)行pH的調(diào)節(jié)B.制作果酒時(shí)適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率，抑制雜菌生長(zhǎng)C.現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后即可進(jìn)行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵D.醋酸菌能將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜?，故夏天開(kāi)瓶后的紅酒容易變酸評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)16、人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為_(kāi)_______________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）17、常用的轉(zhuǎn)化方法：

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是_______，其次還有______和______等。

將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是_______。此方法的受體細(xì)胞多是_______。

將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是_______，最常用的原核細(xì)胞是_____，其轉(zhuǎn)化方法是：先用______處理細(xì)胞，使其成為_(kāi)_____，再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。18、結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：______和______。19、通常將DNAD的羥基（—OH）成為_(kāi)______________端，而磷酸基團(tuán)的末端成為_(kāi)__________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向總是從_________________延伸。20、通過(guò)____________的方式，來(lái)控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。21、應(yīng)用分析與比較的方法，對(duì)生殖性克隆與治療性克隆進(jìn)行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項(xiàng)目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________22、在日常生活中，我們還遇到哪些有關(guān)生物技術(shù)安全與倫理問(wèn)題？我們能基于所學(xué)生物學(xué)知識(shí)參與這些問(wèn)題的討論嗎？嘗試舉一個(gè)實(shí)例加以說(shuō)明______。評(píng)卷人得分四、判斷題(共3題，共24分)23、目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯(cuò)誤24、利用基因工程技術(shù)建立移植器官工廠是目前基因工程取得實(shí)際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域。（選擇性必修3P90）()A.正確B.錯(cuò)誤25、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共6分)26、黃粉蟲(chóng)可以吞食；降解塑料；利用黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染進(jìn)行生物降解，是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲(chóng)腸道中分離、純化微生物的過(guò)程，回答下列問(wèn)題：

(1)富集培養(yǎng)基按物理性質(zhì)屬于___________培養(yǎng)基，不含有_____________，但含有酵母膏、蛋白豚。酵母膏能提供所需的__________________。

(2)選擇培養(yǎng)基中需加入_______________作為唯一碳源，稀釋涂布后最后一組可能形成菌落。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法有_______________和利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

(3)如果對(duì)白色污染進(jìn)行傳統(tǒng)填埋、焚燒容易造成二次污染，黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染的降解______（填“會(huì)”或“不會(huì)”）造成二次污染。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共36分)27、科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛；如果要加快轉(zhuǎn)基因奶生的繁殖速度，可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克?。ㄈ鐖D所示）。

（1）在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)之前，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織進(jìn)行分離，形成單個(gè)細(xì)胞，這一過(guò)程中需要利用________酶處理。

（2）在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞的增殖方式是_________。此外，細(xì)胞增殖還表現(xiàn)出貼壁生長(zhǎng)和_________等特點(diǎn)。

（3）操作中需要將人生長(zhǎng)激素基因的奶牛體細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的___________中。

（4）利用____________技術(shù)可獲得同卵多胎，對(duì)_____________時(shí)期的胚胎進(jìn)行胚胎移植可獲得多個(gè)的轉(zhuǎn)基因個(gè)體。28、目前，常態(tài)化疫情防控已經(jīng)成為我們生活的一部分，正確佩戴口罩是預(yù)防新冠肺炎的有效手段。為了解某種醫(yī)用防護(hù)口罩（經(jīng)滅菌）佩戴時(shí)間對(duì)防護(hù)功能的影響，進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，參與實(shí)驗(yàn)的志愿者隨機(jī)分為甲、乙，丙三組，在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室佩戴不同時(shí)間后取樣。取樣過(guò)程：分別剪取口罩內(nèi)層（與口和皮膚接觸面）和外層6cm×6cm無(wú)紡布，剪碎后加入5mL培養(yǎng)液中，震蕩2分鐘，待無(wú)紡布碎片自然沉降后，取上清液1mL接種于固體培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)后，在放大鏡下統(tǒng)計(jì)每cm2培養(yǎng)基上的菌落數(shù)；每組取平均值。濾菌率=（內(nèi)層菌落數(shù)-外層菌落數(shù)）/內(nèi)層菌落數(shù)。結(jié)果見(jiàn)表。

。組別佩戴時(shí)間培養(yǎng)基上每cm2菌落數(shù)（個(gè)）濾菌率%內(nèi)層外層內(nèi)層外層甲20分鐘23.670.9596.13乙2小時(shí)73.932.9196.06丙4小時(shí)129.7510.1692.17（1）上述實(shí)驗(yàn)中，需要進(jìn)行滅菌處理的是____________

A．剪刀B．培養(yǎng)基C．放大鏡D．取樣的口罩紗布。

（2）口罩上細(xì)菌可能的來(lái)源有____________

A．人體皮膚B．人體呼出氣體C．口罩D．外界空氣。

（3）培養(yǎng)基上統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比口罩上活菌的實(shí)際數(shù)目_____________，原因是_____________。

（4）從表中數(shù)據(jù)可知，口罩內(nèi)層細(xì)菌數(shù)量較多，且隨著佩戴時(shí)間的延長(zhǎng)細(xì)菌數(shù)量增長(zhǎng)顯著。根據(jù)你的生活經(jīng)驗(yàn)和所學(xué)知識(shí)，分析口罩內(nèi)層細(xì)菌數(shù)量增長(zhǎng)的可能原因是____________________。（要求答出兩點(diǎn)）

（5）我國(guó)規(guī)定醫(yī)用防護(hù)口罩對(duì)細(xì)菌的濾菌率達(dá)到95%為合格。根據(jù)表中數(shù)據(jù)，醫(yī)務(wù)人員佩戴此類一次性口罩較為合理的時(shí)間是__________________。29、在擬南芥種子發(fā)育過(guò)程中；由受精極核（相當(dāng)于含有一套精子染色體和兩套卵細(xì)胞染色體）發(fā)育的胚乳到一定時(shí)期會(huì)被子葉完全吸收。在擬南芥種子萌發(fā)過(guò)程中，子葉的功能是為胚發(fā)育成幼苗提供營(yíng)養(yǎng)。

（1）M基因具有抑制胚到發(fā)育的作用。研究者利用______法將T-DNA插入到擬南芥的M基因中；使M基因功能喪失（記為m），導(dǎo)致胚乳發(fā)育過(guò)度，而使種子敗育。

（2）M基因具有MD、MR兩種等位基因；為研究基因的遺傳規(guī)律，研究者用不同基因型的擬南芥進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)（如下表）。

。實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)四母本MDMDMRMRMDMDMDm父本MRMRMDMDMDmMDMDF1種子育性可育可育可育1/2可育1/2敗育表中的實(shí)驗(yàn)三與實(shí)驗(yàn)四互為_(kāi)___實(shí)驗(yàn)。分析實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二，可得出的結(jié)論是MD和MR不影響_____。依據(jù)實(shí)驗(yàn)三和四的結(jié)果推測(cè)，來(lái)自______（選填“母本”或“父本”）的M基因不表達(dá)。

（3）為進(jìn)一步用雜交實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證上述推測(cè)，將實(shí)驗(yàn)三的F1植株全部進(jìn)行自交，若推測(cè)成立，F(xiàn)1植株所結(jié)種子中能發(fā)育成植株的占____。

（4）為從分子水平再次驗(yàn)證上述推測(cè)；研究者對(duì)實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二中所結(jié)種子的M基因的轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行鑒定；結(jié)果如圖1。

鑒定雜交結(jié)果時(shí)，分別提取種子中胚和胚乳的總RNA，通過(guò)____獲得cDNA，進(jìn)行PCR擴(kuò)增后電泳。結(jié)果表明M基因在____細(xì)胞中均可轉(zhuǎn)錄，來(lái)自____的M基因在__細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。30、閱讀以下材料，回答（1）?（5）。

基因魔剪：CRISPR/Cas系統(tǒng)。

要揭示生命的運(yùn)作原理；常需要對(duì)基因進(jìn)行編輯。在過(guò)去，這一步異常艱難。但隨著CRISPR/Cas技術(shù)的出現(xiàn)，科學(xué)家已能在極短時(shí)間內(nèi)就更改生命密碼。

CRISPR/Cas9系統(tǒng)由Cas9蛋白和人工設(shè)計(jì)的gRNA構(gòu)成。在gRNA引導(dǎo)下；Cas9與靶序列結(jié)合并將DNA雙鏈切斷。隨后細(xì)胞通過(guò)自身的DNA損傷修復(fù)機(jī)制，將斷裂上下游兩端的序列連接起來(lái)，但通常會(huì)在斷裂處造成少量核苷酸的插入或缺失。當(dāng)DNA雙鏈斷裂后，如果細(xì)胞中有DNA修復(fù)模板（由需要插入的目的基因和靶序列上下游的同源序列組成），斷裂部分可依據(jù)修復(fù)模板進(jìn)行精確修復(fù)，從而將目的基因描入到指定位點(diǎn)。

通過(guò)在Cas9基因中引入突變，獲得了只有切割一條鏈活性的nCas9。將nCas9與胞嘧啶脫氨酶或腺嘌呤脫氨酶融合，科學(xué)家開(kāi)發(fā)出了單堿基編輯技術(shù)（圖2)，能夠?qū)Π形稽c(diǎn)進(jìn)行精準(zhǔn)的堿基編輯，最終可以分別實(shí)現(xiàn)C→T(G→A)或A→G(T→C)的減基替換。

對(duì)CRISPR/Cas系統(tǒng)的不斷改造；使其在基因編輯外，還可用于激活或抑制基因的轉(zhuǎn)錄等。雖然目前CRISPR/Cas技術(shù)還存在一些不足，如脫靶問(wèn)題等，但作為一種革命性的技術(shù)，其應(yīng)用前景廣闊。

（1）利用CRISPR/Cas9技術(shù)進(jìn)行基因編輯，需構(gòu)建含gRNA基因和Cas基因的___________，并導(dǎo)入受體細(xì)胞。gRNA依據(jù)___________原則與靶序列特異性結(jié)合；引導(dǎo)Cas9蛋白進(jìn)行切割。

（2）有些遺傳病是由于基因中一個(gè)堿基對(duì)的改變引起的，如果要修正此基因突變，圖示的三種途徑中，哪種更為合適？__________請(qǐng)判斷并說(shuō)明理由__________。

（3）如果要利用CRISPR/Cas9技術(shù)將一個(gè)基因從基因組序列中刪除，設(shè)計(jì)gRNA的思路是___________。

（4）將CRISPR/Cas9技術(shù)用于抑制基因轉(zhuǎn)錄時(shí)（不改變基因結(jié)構(gòu)），需對(duì)CRISPR/Cas9系統(tǒng)進(jìn)行改造和設(shè)計(jì)，請(qǐng)寫(xiě)出基本思路__________。

（5）將CRISPR/Cas技術(shù)應(yīng)用于人類基因的編輯時(shí)，特別要注意___________方面的問(wèn)題。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

胚胎干細(xì)胞：（1）來(lái)源：哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)。（2）特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

【詳解】

A；來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)；A正確；

B；胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積??；細(xì)胞核大，核仁明顯的特點(diǎn)，B錯(cuò)誤；

C；在飼養(yǎng)層細(xì)胞上；胚胎干細(xì)胞可維持不分化狀態(tài)，C正確；

D；在ES細(xì)胞培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子牛黃酸或丁酰環(huán)腺苷酸等物質(zhì)時(shí)；就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

1；目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2；基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

3；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4；目的基因的檢測(cè)與鑒定：

（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。

（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；根據(jù)圖乙中子鏈延伸方向；若通過(guò)PCR技術(shù)大量擴(kuò)增該目的基因，應(yīng)該選用引物甲和引物丙，A正確；

B；圖甲中BamHⅠ同時(shí)破壞兩種抗性基因；不能選用，故圖乙中目的基因左側(cè)只能選BclⅠ，而質(zhì)粒上沒(méi)有目的基因右側(cè)Sau3A的切點(diǎn)，兩者都有HindⅢ的切點(diǎn)，為了防止目的基因與質(zhì)粒隨意連接，故質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建表達(dá)載體，應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ剪切，B正確；

C；若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞大腸桿菌時(shí)；需用鈣離子等處理，使其處于感受態(tài)，C正確；

D；在受體細(xì)胞中；插入目的基因時(shí)氨芐青霉素抗性基因被破壞，不能和目的基因同時(shí)表達(dá)，含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上含目的基因的大腸桿菌不能存活，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

一種限制酶只能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．圖中識(shí)別序列和剪切位點(diǎn)可以看出，限制酶2和3識(shí)別的序列都包含6個(gè)堿基對(duì)，并且限制酶1和3剪出的粘性末端均為GATC。

【詳解】

A；酶具有專一性；不同的限制酶有不同的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，A正確；

B；圖中可得；限制酶2和3識(shí)別的序列分別是CCGCGG和GGATCC，均為6個(gè)堿基對(duì)，B正確；

C；限制酶1和3剪出的粘性末端相同；均為GATC，C正確；

D；限制酶只能識(shí)別特定的DNA序列；因此三種限制酶均不能識(shí)別和切割RNA中核糖核苷酸序列，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】4、B【分析】蛋白質(zhì)工程與基因工程不同；基因工程產(chǎn)生的是自然界中原有的蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)工程能創(chuàng)造出自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)。體細(xì)胞雜交技術(shù)目前主要用于制備單克隆抗體，克隆動(dòng)物涉及了細(xì)胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程可通過(guò)對(duì)現(xiàn)有基因進(jìn)行改造后而合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)；A正確；

B；克隆動(dòng)物利用了細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)；體細(xì)胞雜交技術(shù)目前主要用于制備單克隆抗體，B錯(cuò)誤；

C；莖尖和根尖等分生區(qū)幾乎不含病毒；所以將植物分生區(qū)（莖尖、根尖等）進(jìn)行組織培養(yǎng)可以獲得脫毒苗，C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞工程中基本的技術(shù)手段；可為動(dòng)物的轉(zhuǎn)基因技術(shù)提供受體細(xì)胞等，并且基因工程中的受精卵同樣需要用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成早期胚胎進(jìn)行移植，D正確。

故選B。5、C【分析】【分析】

分析題圖：①表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；②表示早期胚胎培養(yǎng)；③表示胚胎移植。

【詳解】

A；受精卵的全能性最大；利用受精卵作為重組表達(dá)載體的宿主細(xì)胞常采用顯微注射的方法將載體注入，繼而對(duì)受精卵進(jìn)行早期胚胎的培養(yǎng)（②），直到適合移植，A錯(cuò)誤；

B；步驟③的代孕性體需進(jìn)行同期發(fā)情處理；這樣移植胚胎容易成功著床，B錯(cuò)誤；

C；根據(jù)題意：轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的膀胱上皮細(xì)胞能表達(dá)出W蛋白質(zhì)；因此可收集膀胱生物反應(yīng)器的尿液來(lái)提取W，C正確；

D；W基因是選擇性表達(dá)；只在膀胱上皮細(xì)胞中表達(dá)，D錯(cuò)誤；

故選C。6、D【分析】【分析】

植物基因工程的應(yīng)用：（1）抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物；（2）抗病轉(zhuǎn)基因植物；（3）抗逆轉(zhuǎn)基因植物；（4）轉(zhuǎn)基因改良植物品質(zhì)．總之基因工程在農(nóng)業(yè)上用于生產(chǎn)高產(chǎn)；穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的品種；能產(chǎn)生抗逆性品種．動(dòng)物基因工程的成果：（1）提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速度：外源生長(zhǎng)激素基因；（2）改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)；（3）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物；（4）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體；（5）基因工程藥物，如人胰島素、細(xì)胞因子、抗體、疫苗、生長(zhǎng)激素、干擾素等．

【詳解】

A；可以將抗病蟲(chóng)害、抗除草劑等基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物使其具有相應(yīng)的抗性；A正確；

B；可以使用DNA重組的微生物；生產(chǎn)稀缺的基因藥物，B正確；

C；可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)使奶牛變成生物反應(yīng)器；使它們的奶中富含某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、珍貴藥材或人類所需要的蛋白質(zhì)，C正確；

D；將不同生物的DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)移和重組；可以創(chuàng)造出新品種，但不能產(chǎn)生新物種，D錯(cuò)誤。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)7、A:B:C【分析】【分析】

1；基因表達(dá)載體是目的基因和載體重組后形成的。

2；體外受精是指獲能的精子和成熟的卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵的過(guò)程。

3；胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性；能夠分裂和分化。

4；動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；若該模型表示體外受精技術(shù)；則C（受精卵）不能直接移植到代孕母體，需要將C移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí)，才可以將其取出向受體移植，A正確；

B；若該模型表示核移植技術(shù)；A和B表示供體細(xì)胞核和去核的卵細(xì)胞，則C→D過(guò)程表示胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)，B正確；

C；若A、B表示培養(yǎng)液和胚胎干細(xì)胞；則C→D的傳代培養(yǎng)過(guò)程中有可能出現(xiàn)分化現(xiàn)象，C正確；

D；若該模型表示農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法操作流程；則C可表示重組Ti質(zhì)粒，D是農(nóng)桿菌，D錯(cuò)誤。

故選ABC。8、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應(yīng)過(guò)程是：變性→復(fù)性→延伸。

【詳解】

A；基因擴(kuò)增過(guò)程中需要特定的引物；該引物的作用是定位基因的位置，與模板鏈結(jié)合并為子鏈的延伸提供起點(diǎn)，擴(kuò)增過(guò)程中引物和探針應(yīng)同時(shí)結(jié)合到模板DNA上，A錯(cuò)誤；

B、若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來(lái)的一個(gè)DNA分子，每個(gè)DNA分子需要1個(gè)探針，擴(kuò)增n次，可得到2n個(gè)DNA分子，則共需要消耗2n-1個(gè)探針；B錯(cuò)誤；

C；由題可知C值越大；該反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定閾值經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越大，即每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號(hào)越少。每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號(hào)越少，代表被檢測(cè)樣本中的病毒數(shù)目越少，C錯(cuò)誤；

D；如果樣本內(nèi)的病毒RNA被降解；會(huì)導(dǎo)致無(wú)法檢測(cè)出樣本內(nèi)的正確病毒數(shù)目，D正確。

故選ABC。9、A:B:C【分析】【分析】

1；微生物常見(jiàn)的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法；稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)。

2；稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的原理：①當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌；②通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中大約含有的活菌數(shù)。

【詳解】

A；若只對(duì)一個(gè)冰激凌進(jìn)行檢測(cè)；樣品太少則不能確定是某個(gè)冰激凌的質(zhì)量問(wèn)題還是這個(gè)品牌冰激凌的質(zhì)量問(wèn)題，正確的做法是再去小店隨機(jī)買多個(gè)同樣品牌的同種冰激凌，A錯(cuò)誤；

B、測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍的稀釋液進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×106；B錯(cuò)誤；

C；實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置對(duì)照；取各個(gè)稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個(gè)濃度涂3個(gè)平板，再取一個(gè)平板接種等量無(wú)菌水（作為對(duì)照），共培養(yǎng)19個(gè)平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48h，當(dāng)對(duì)照組無(wú)菌落生長(zhǎng)時(shí)，選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；

D；因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)；平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏小，該說(shuō)法合理，D正確。

故選ABC。10、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

【詳解】

A；限制酶可識(shí)別并在特定位置水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵；A正確；

B；DNA連接酶可以連接黏性末端相同；即末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段之間的磷酸二酯鍵，B正確；

C；DNA聚合酶只能從核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C錯(cuò)誤；

D；標(biāo)記基因可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)；故作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因，D正確。

故選ABD。11、A:B【分析】【分析】

由表格數(shù)據(jù)可知；隨著莖尖長(zhǎng)度的增長(zhǎng)，在相同處理時(shí)間下，成活率一般增大，脫毒率一般減小。

【詳解】

A；莖尖培養(yǎng)法運(yùn)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)；原理是植物細(xì)胞的全能性，A正確；

B；熱處理可以殺滅病毒、病菌；故目的可能是阻止病毒進(jìn)入莖尖，B正確；

C；相同莖尖長(zhǎng)度下；20天熱處理時(shí)成活率最高，熱處理時(shí)間再增加，成活率降低，C錯(cuò)誤；

D；由表格數(shù)據(jù)可知；40天熱處理時(shí)，莖尖0.3~0.5mm和0.5~0.8mm時(shí)脫毒率相同，因此只能說(shuō)在一定的熱處理時(shí)間內(nèi)，脫毒率與莖尖大小呈負(fù)相關(guān)，D錯(cuò)誤。

故選AB。12、B:D【分析】【分析】

T線和C線處同時(shí)顯示橫杠；即陽(yáng)性，若樣品中不含病毒，樣品經(jīng)過(guò)結(jié)合墊時(shí)由于不存在病毒抗原，則不存在抗原抗體特異性結(jié)合，顯色組分仍會(huì)隨樣品繼續(xù)向前運(yùn)動(dòng)，由于不存在病毒抗原，抗體不能與待測(cè)抗原結(jié)合，故在T線不會(huì)顯色。

【詳解】

A；分析題圖可知；若有抗原存在，T線上的抗體能夠結(jié)合抗原（該抗體經(jīng)過(guò)結(jié)合墊時(shí)已經(jīng)與膠體金抗體結(jié)合），則T線顯色，過(guò)量的膠體金抗體會(huì)移動(dòng)到C線處與二抗結(jié)合，C線也會(huì)顯色，故樣品中含有待測(cè)抗原時(shí)，兩條線均會(huì)顯色，A正確；

B；題圖中過(guò)量的膠體金抗體沒(méi)有結(jié)合抗原；而是與二抗結(jié)合，B錯(cuò)誤；

C；據(jù)題意可知；樣本中含有某種抗原，就會(huì)首先被結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合，形成“抗原—金標(biāo)抗體”復(fù)合物，所以結(jié)合墊中固定了金標(biāo)抗體，C正確；

D；若T線不顯色；說(shuō)明樣品中沒(méi)有抗原，D錯(cuò)誤。

故選BD。13、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法。

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應(yīng)取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養(yǎng)型生物；可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或稀釋涂布平板法來(lái)計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯(cuò)誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源，利用的是空氣中的氮?dú)?，D正確。

故選ACD。14、A:B:D【分析】【分析】

由題圖信息分析可知；通過(guò)過(guò)程①獲得菌懸液，此過(guò)程中的淤泥不需要滅菌操作，過(guò)程②可以使分解S的細(xì)菌大量繁殖（選擇培養(yǎng)），過(guò)程③通過(guò)稀釋涂布獲得分解S物質(zhì)的單菌落，過(guò)程④再次對(duì)各種單菌落進(jìn)行篩選，經(jīng)過(guò)過(guò)程⑤多次篩選后獲得高效降解S的菌體。

【詳解】

A；甲和乙的培養(yǎng)基均需采用高壓蒸汽滅菌；乙與甲不同的是Y，乙的培養(yǎng)基上有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明是固體培養(yǎng)基，因此Y是凝固劑瓊脂，A正確；

B、利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，要保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)為200個(gè)，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，在每個(gè)平板上涂布100μL（0.1ml）稀釋后的菌液，則有200×a÷0.1=2×107，則稀釋倍數(shù)a=104；B正確；

C；③過(guò)程采用的是稀釋涂布平板法；其接種工具為涂布器，涂布器需采用灼燒滅菌法進(jìn)行滅菌，C錯(cuò)誤；

D；⑤過(guò)程中若S的濃度超過(guò)某一濃度時(shí)；會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞由于滲透作用失水過(guò)多，會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)，使得菌株對(duì)S的降解量可能會(huì)下降，D正確。

故選ABD。15、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精；醋酸菌在糖源；氧氣充足時(shí)；直接將葡萄糖氧化為醋酸；在糖源不足、氧氣充足時(shí)，可利用酒精，即乙醇作為呼吸底物，先將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜幔ù姿幔?/p>

【詳解】

A；制備培養(yǎng)基過(guò)程中；pH的調(diào)節(jié)應(yīng)在滅菌前進(jìn)行，A錯(cuò)誤；

B；制作果酒時(shí)適當(dāng)加大接種量；酵母菌菌體的基數(shù)增大，可使其快速形成優(yōu)勢(shì)菌群，抑制雜菌生長(zhǎng)，提高發(fā)酵速率，B正確；

C；現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后；為滿足發(fā)酵過(guò)程的需要，還要對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，之后才可進(jìn)行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵，C錯(cuò)誤；

D；醋酸菌能夠氧化酒精產(chǎn)生醋酸；造成葡萄酒的敗壞。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天開(kāi)瓶后的紅酒容易變酸，D正確。

故選AC。三、填空題(共7題，共14分)16、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體DNA分子18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】黏性末端平末端。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成，而只能從3，端延伸DNA子鏈的5，端向3，端20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液21、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復(fù)制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實(shí)現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會(huì)用到的技術(shù)有體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細(xì)胞后，根據(jù)治療目的誘導(dǎo)干細(xì)胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會(huì)應(yīng)用到的技術(shù)為干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)?！窘馕觥可承钥寺≈咐每寺〖夹g(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細(xì)胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復(fù)制品用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療22、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到的有關(guān)生物技術(shù)安全與倫理問(wèn)題有：生殖性克隆人倫理問(wèn)題；試管嬰兒與設(shè)計(jì)試管嬰兒倫理問(wèn)題、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性與倫理問(wèn)題和生物武器的安全性等。

例如轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性：轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性的爭(zhēng)議；主要集中在兩個(gè)方面，一是對(duì)人是否安全，二是對(duì)環(huán)境的影響。

對(duì)人的安全方面；支持轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為投放市場(chǎng)的轉(zhuǎn)基因作物都是經(jīng)過(guò)充分實(shí)驗(yàn)的，被改變的基因僅限于增加作物的抗??；抗災(zāi)害能力，并且在北美地區(qū)轉(zhuǎn)基因食品已經(jīng)使用的很多年，可以說(shuō)現(xiàn)在美國(guó)加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉(zhuǎn)基因食品長(zhǎng)大的；反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因食品有害，他們的證據(jù)主要是一位科學(xué)家的實(shí)驗(yàn)證明，用轉(zhuǎn)基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問(wèn)題是這個(gè)實(shí)驗(yàn)只成功過(guò)一次，后來(lái)別的科學(xué)家在相同的條件下都沒(méi)能再現(xiàn)這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

在環(huán)境方面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的爭(zhēng)議是最大的；也是歐洲人反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的重要依據(jù)，反對(duì)人持有的觀點(diǎn)是，通過(guò)改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲(chóng)害和其他災(zāi)害的植物，這種技術(shù)如果失去控制可能會(huì)把農(nóng)作物改造成適應(yīng)性極強(qiáng)的超級(jí)植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)地位，但轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的超級(jí)植物可能會(huì)打破自然平衡而泛濫成災(zāi)。

倫理問(wèn)題：由于轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進(jìn)行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預(yù)見(jiàn),這就使轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新呈現(xiàn)前所未有的復(fù)雜性,并不可避免地會(huì)引發(fā)很多全新的社會(huì)倫理問(wèn)題,引出種種有關(guān)生物科學(xué)家的道德責(zé)任和學(xué)術(shù)自由的哲學(xué)爭(zhēng)論。在轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新中,功利主義的預(yù)設(shè)和學(xué)術(shù)自由的主張必須以人類的價(jià)值、尊嚴(yán)和社會(huì)公正為前提條件。相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)家必須擔(dān)當(dāng)起必要的道德責(zé)任,把握好倫理橫桿,以促使轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新沿著科學(xué)的軌道健康發(fā)展?！窘馕觥吭谌粘Ｉ钪?；我們遇到的有關(guān)生物技術(shù)安全與倫理問(wèn)題有：生殖性克隆人倫理問(wèn)題；試管嬰兒與設(shè)計(jì)試管嬰兒倫理問(wèn)題、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性與倫理問(wèn)題和生物武器的安全性等。

例如轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性：轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性的爭(zhēng)議；主要集中在兩個(gè)方面，一是對(duì)人是否安全，二是對(duì)環(huán)境的影響。

對(duì)人的安全方面；支持轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為投放市場(chǎng)的轉(zhuǎn)基因作物都是經(jīng)過(guò)充分實(shí)驗(yàn)的，被改變的基因僅限于增加作物的抗??；抗災(zāi)害能力，并且在北美地區(qū)轉(zhuǎn)基因食品已經(jīng)使用的很多年，可以說(shuō)現(xiàn)在美國(guó)加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉(zhuǎn)基因食品長(zhǎng)大的；反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因食品有害，他們的證據(jù)主要是一位科學(xué)家的實(shí)驗(yàn)證明，用轉(zhuǎn)基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問(wèn)題是這個(gè)實(shí)驗(yàn)只成功過(guò)一次，后來(lái)別的科學(xué)家在相同的條件下都沒(méi)能再現(xiàn)這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

在環(huán)境方面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的爭(zhēng)議是最大的；也是歐洲人反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的重要依據(jù)，反對(duì)人持有的觀點(diǎn)是，通過(guò)改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲(chóng)害和其他災(zāi)害的植物，這種技術(shù)如果失去控制可能會(huì)把農(nóng)作物改造成適應(yīng)性極強(qiáng)的超級(jí)植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)地位，但轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的超級(jí)植物可能會(huì)打破自然平衡而泛濫成災(zāi)。

倫理問(wèn)題：由于轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進(jìn)行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預(yù)見(jiàn),這就使轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新呈現(xiàn)前所未有的復(fù)雜性,并不可避免地會(huì)引發(fā)很多全新的社會(huì)倫理問(wèn)題,引出種種有關(guān)生物科學(xué)家的道德責(zé)任和學(xué)術(shù)自由的哲學(xué)爭(zhēng)論。在轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新中,功利主義的預(yù)設(shè)和學(xué)術(shù)自由的主張必須以人類的價(jià)值、尊嚴(yán)和社會(huì)公正為前提條件。相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)家必須擔(dān)當(dāng)起必要的道德責(zé)任,把握好倫理橫桿,以促使轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新沿著科學(xué)的軌道健康發(fā)展。四、判斷題(共3題，共24分)23、A【分析】【詳解】

目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒(méi)有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性，故正確。24、B【分析】【詳解】

基因工程技術(shù)可以使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實(shí)；說(shuō)明并未開(kāi)始實(shí)際應(yīng)用。

故題中描述錯(cuò)誤。25、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二代基因工程。故該說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共6分)26、略

【分析】【分析】

分離菌株的思路：

（1）自然界中目的菌株的篩選：①依據(jù)：根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。②實(shí)例：PCR技術(shù)過(guò)程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶，就是從熱泉中篩選出來(lái)的Taq細(xì)菌中提取出來(lái)的。

（2）實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)溫度.pH等）；同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。

(1)

富集培養(yǎng)基不含有瓊脂；按物理性質(zhì)屬于液體培養(yǎng)基，其中酵母膏能提供所需的碳源和氮源，可獲得數(shù)目較多的塑料降解菌。

(2)

篩選能降解塑料的微生物；需要使用以塑料為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，稀釋涂布后最后一組可能形成菌落。微生物的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可以用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)。

(3)

如果對(duì)白色污染進(jìn)行傳統(tǒng)填埋焚燒容易造成二次污染；黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染的降解不會(huì)造成二次污染。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的種類及功能，掌握接種微生物的方法及菌種保藏方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。【解析】(1)液體瓊脂碳源和氮源。

(2)塑料稀釋涂布平板法。

(3)不會(huì)六、綜合題(共4題，共36分)27、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因奶?？寺〉倪^(guò)程。首先采用基因工程技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)肽膛５捏w細(xì)胞；然后采用體細(xì)胞核移植技術(shù)將細(xì)胞核移入去核卵細(xì)胞形成重組細(xì)胞；再進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植得到轉(zhuǎn)基因克隆牛。

（1）

在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)；需要采用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織，使組織細(xì)胞分離，形成單個(gè)細(xì)胞。

（2）

動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)；細(xì)胞增殖的方式是有絲分裂，動(dòng)物細(xì)胞在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞的特點(diǎn)是貼壁生長(zhǎng)；接觸抑制。

（3）

為了使?fàn)倥５男誀钪饕晒w細(xì)胞核決定；需去掉卵母細(xì)胞核，然后將進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的供體細(xì)胞核注入去核的卵母細(xì)胞中，獲得重組細(xì)胞。

（4）

胚胎分割是借助顯微操作技術(shù)或徒手操作方法切割早期胚胎成二；四等多等份再移植給受體母畜；從而獲得同卵雙胎或多胎的生物學(xué)新技術(shù)，因此利用此技術(shù)可獲得同卵多胎。桑葚胚或囊胚是由于胚胎發(fā)育時(shí)間較短，還沒(méi)有和母體建立實(shí)質(zhì)性的聯(lián)系，胚胎所需要的養(yǎng)分可以有自身的儲(chǔ)存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)進(jìn)行提供，并且胚胎離開(kāi)母體后可以在短時(shí)間內(nèi)存活。放回在與之前相同的環(huán)境中不會(huì)影響到胚胎的繼續(xù)發(fā)育，因此胚胎移植時(shí)用桑椹胚或囊胚。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因克隆牛的培育過(guò)程圖，考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物體細(xì)胞核移植、胚胎移植的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程；識(shí)記動(dòng)物體細(xì)胞核移植的概念、過(guò)程及應(yīng)用；能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)答題?！窘馕觥浚?）胰蛋白酶或膠原蛋白酶。

（2）有絲分裂接觸抑制。

（3）卵母細(xì)胞。

（4）胚胎分割桑椹胚或囊胚28、略

【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基的成分包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長(zhǎng)因子。

2；微生物常見(jiàn)的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

（1）剪刀作為取材工具；要防止取材時(shí)雜菌污染，還有培養(yǎng)基是用來(lái)培養(yǎng)菌種的，不能有雜菌污染，這二者需要