達(dá)亞美的用卡說明書

2/50達(dá)亞美ABO正反定型/RHD定型卡（卡式凝膠法）說明書[藥品名稱]通用名：ABO正反定型/RHD定型卡英文名：DiaclonABO/D+reverseGrouping漢語拼音：ABOZhengFanDingXing/RHDdingxingKa[使用目的]僅用于體外診斷，主要用于中心血站、醫(yī)院輸血科、血庫中供血者或受血者的紅細(xì)胞ABO血型系統(tǒng)的正反定型和RH系統(tǒng)中D抗原的檢測，以及檢驗科常規(guī)血型的檢查。[試驗原理]達(dá)亞美血型配血系統(tǒng)采用卡式凝膠技術(shù)，是生物化學(xué)凝膠過濾技術(shù)和免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物，通過調(diào)節(jié)凝膠的濃度來控制凝膠間隙的大小。使其間隙只能允許游離的紅細(xì)胞通過，從而使游離紅細(xì)胞與聚集紅細(xì)胞分離。如果通過離心紅細(xì)胞沉積在凝膠管底部，則表明紅細(xì)胞未發(fā)生凝聚凝集，是陰性反應(yīng)，若紅細(xì)胞聚集在凝膠帶上部，則表明紅細(xì)胞發(fā)生凝集，呈陽性反應(yīng)。此外凝膠中已經(jīng)加好了抗人球蛋白及各類血型抗體，從而簡化了操作過程，只需加入樣本即可。達(dá)亞美血型正反定型卡（DiaclonABO/D+ReverseGrouping）,共有六個微柱，前三個微柱的凝膠介質(zhì)中分別含有單克隆抗體抗-A，抗-B和抗-D，用以檢測紅細(xì)胞上ABO抗原和D抗原，ctl管為陰性對照管，含有2/50“中性”凝膠的另兩個微管，用商業(yè)化A1和B細(xì)胞檢測血清中的抗原來進(jìn)行血型的反定型。[主要組成成分]ABO正反定型/RHD定型卡（DiaClonABO/D+ReverseGrouping）前三個微柱的凝膠介質(zhì)中含有單克隆抗-A[M297/628（LA-2）細(xì)胞系]，抗-B[LM306/686（LB-2）細(xì)胞系]和抗-D[LHM59/20（LDM3）+175-21細(xì)胞系]。Ctl管為陰性對照管。另二個微管含有“中性”凝膠。保存于濃度小于0.1%的NaN3溶液中。注：儲存于18-25℃的室溫下。貯存時勿靠近任何熱源、空調(diào)或通風(fēng)口。穩(wěn)定性見標(biāo)簽上的失效期其他必備試劑：達(dá)亞美2號稀釋掖（ID-Diluent2）;調(diào)節(jié)紅細(xì)胞懸液的濃度。測試細(xì)胞試劑：0.8%的商業(yè)化反定測試A1和B紅細(xì)胞懸液，可直接使用[儀器]達(dá)亞美加樣槍達(dá)亞美槍頭(加樣槍配套槍頭)試管（裝懸液用）達(dá)亞美離心機（可同時離心6、12或24張卡）[樣本要求]1、血型定型：用常規(guī)靜脈穿刺法抽取血樣。血樣最好用枸櫞酸鹽、EDTA、肝素或CPD-A抗凝。為了得到可靠的結(jié)果，必須強調(diào)一定要使用新鮮采集的血液。3/50血型反定型：當(dāng)需要用血清（而非血漿）來進(jìn)行血型反定型時，必須仔細(xì)清洗血清?？膳c使用前，以1500g的轉(zhuǎn)速將血清離心10分鐘，以避免纖維蛋白殘留物干擾反應(yīng)類型。如果樣品在分離后沒有立即用于檢測，應(yīng)將其貯存于2-8℃，最長保存時間為48小時。如想保存更長時間，應(yīng)置于-20℃。[試驗方法]在室溫下平衡達(dá)亞美2號稀釋液和商業(yè)化的反定測試紅細(xì)胞配置紅細(xì)胞懸液，將0.5ml達(dá)亞美2號稀釋液移入一個干凈玻璃試管中；加入50μl全血或25μl壓積紅細(xì)胞，輕輕混勻。（配制好的細(xì)胞懸液立即使用）分離血清或血漿達(dá)亞美卡上標(biāo)上病人的姓名/編號，撕開鋁箔將50μlA1反定測試細(xì)胞移入中性凝膠A1管中將50μlB反定測試細(xì)胞移入中性凝膠B管中在A1和B管中分別加入50μl病人的血清或血漿。在室溫（18-25℃）下孵育10分鐘；A-B-D-Ctl中加入10-12.5μl病人的紅細(xì)胞懸液10、將卡在達(dá)亞美離心機（ID-Centrifuge）上離心10分鐘；11、判讀與記錄反應(yīng)結(jié)果。注意：勿使用有干膠、氣泡等現(xiàn)象或密封性已破壞的達(dá)亞美卡。質(zhì)控：為了保證實驗結(jié)果的有效性，應(yīng)用已知陽性和陰性的樣品來進(jìn)行檢測。[對實驗結(jié)果的解釋]1、原則：4/50陽性：凝集的紅細(xì)胞在凝膠表面形成一條紅線，或凝集物分散在凝膠中。陰性：紅細(xì)胞在微管底部形成密集的扣形物。2、ABO正定型的反應(yīng)：抗-A抗-BA++++—B—++++AB++++++++O——比“++++”弱的反應(yīng)可能提示為A亞型或B亞型。為了得到正確結(jié)果，應(yīng)該進(jìn)一步作完全定型測試（抗-A、抗-B、抗-AB）。重要：CtL管的反應(yīng)必須為陰性。如Ctl為陽性，那么抗原的檢測無效。應(yīng)按照注意事項重新進(jìn)行檢測。反定型的反應(yīng)：5/50A1B血型+→++++—B—+→++++A+→+++++→++++O+→++++—AB如果反應(yīng)結(jié)果可疑，可用四細(xì)胞試劑（A1、A2、B和O）重復(fù)血型的反定型。4、RhD的反應(yīng)6/50+++++→+++—RhD陽性RhD弱陽性RhD陰性弱D的反應(yīng)可能為陰性，如果要求檢測所有的弱D，那么所有的陰性結(jié)果都必須重新檢測。[局限性]1、所有使用的材料如被細(xì)菌或其他物質(zhì)污染。可能引起假陽性或假陰性結(jié)果；2、血清中的纖維蛋白殘留物，或紅細(xì)胞懸液中的凝集紅細(xì)胞，都可能阻滯非凝集的細(xì)胞，離心或在凝膠頂端形成一條粉紅色帶，而此時大多數(shù)紅細(xì)胞都沉積在微管的底部。3、必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，并使用我們推薦的儀器設(shè)備。應(yīng)該按照GLP操作程序定期檢查這些儀器設(shè)備；4、不用達(dá)亞美2號稀釋液，而改用其他懸浮溶液，可能改變反應(yīng)類型；5、紅細(xì)胞懸液太濃或太稀都可能引起異常結(jié)果；[產(chǎn)品性能指標(biāo)]對測試細(xì)胞數(shù)量的最低要求：陽性細(xì)胞陰性細(xì)胞１抗ＡA1A2BAxBON/a２２２２２N/a２抗ＢBA1BN/aA1ON/a２２Ｎ/a22N/a7/50３抗ＤR1rR2rDweakrrr’rr”r222111４質(zhì)控CTS沒有要求５中性CTS沒有要求６中性CTS沒有要求對反應(yīng)強度的最低要求：１Ａ１：≥２．０；Ａ２Ｂ：≥２．０；Ａｘ：≥０．５２Ｂ：≥２．０；Ａ１Ｂ≥２．０３Ｒ１ｒ：≥２．０；Ｒ２ｒ：≥２．０；Ｄｗｅａｋ≥０．５４所有未致敏的紅細(xì)胞均為陰性５未應(yīng)用６未應(yīng)用[注意事項]1、陰性對照管（Ctl管）反應(yīng)必須為陰性。如為陽性，則需按下列步驟操作：在配制5%細(xì)胞懸液前，用0.9%NaCl溶液（或達(dá)亞美2號稀釋液）洗滌紅細(xì)胞；然后按試驗方法進(jìn)行操作。如果ABO血型正定型與反定型有出入，可參考“達(dá)亞美ABO血型差異表”中的有關(guān)資料。所用的抗-D已經(jīng)過挑選，以使其不與DVI變型反應(yīng)。8/50完全正反定型要求分別使用抗-A、抗-B、抗-AB和A1、A2、B、O細(xì)胞。達(dá)亞美卡（“DiaClonABO/D+ReverseGrouping”）不含抗-AB，并只允許用A1和B細(xì)胞。[包裝規(guī)格]112*12卡/箱[儲藏]儲存于18--25℃的室溫下。貯存時勿靠近任何熱源，空調(diào)或通風(fēng)口。[有效期]有效期見標(biāo)簽，一般保證9個月左右。[批準(zhǔn)文號][生產(chǎn)企業(yè)]名稱：DiamedAG地址1785Cressier/Morat,Switizerland電話傳真郵政編碼網(wǎng)址www.diamed.ch10/50達(dá)亞美低離子/抗人球卡（卡式凝膠法）說明書[藥品名稱]通用名：低離子/抗人球卡英文名：Liss/coombs漢語拼音:Dilizi/kangrenqiuKa[使用目的]僅用于體外診斷，達(dá)亞美抗人球卡用于中心血站、輸血科和血型學(xué)相關(guān)實驗室的抗人球?qū)嶒?，包括抗體篩查，抗體鑒定，交叉配血實驗和直接抗人球?qū)嶒灥?。[試驗原理]達(dá)亞美血型配血系統(tǒng)采用卡式凝膠技術(shù)，是生物化學(xué)凝膠過濾技術(shù)和免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物，通過調(diào)節(jié)凝膠的濃度來控制凝膠間隙的大小。使其間隙只能允許游離的紅細(xì)胞通過，從而使游離紅細(xì)胞與聚集紅細(xì)胞分離。如果通過離心紅細(xì)胞沉積在凝膠管底部，則表明紅細(xì)胞未發(fā)生凝聚凝集，是陰性反應(yīng)，若紅細(xì)胞聚集在凝膠帶上部，則表明紅細(xì)胞發(fā)生凝集，呈陽性反應(yīng)。此外凝膠中已經(jīng)加好了抗人球蛋白及各類血型抗體，從而簡化了操作過程，只需加入樣本即可。達(dá)亞美卡(“LISS/Coombs”)的6個微管中都含有多克隆AHG，常用作抗體篩查、抗體鑒定、交叉配血和直接Coombs測試。在作間接Coombs測試時，不需要費時費力的洗滌步驟，因為紅細(xì)胞懸液先被加入微管中，在凝膠懸液的上端形成一個屏障，因此避免了AHG被病人血漿/血清中的免疫球蛋白中和。10/50[主要組成成分]達(dá)亞美卡(“LISS/Coombs”)6個微管的凝膠中都懸浮有多克隆AHG（兔抗-IgG，單克隆抗-C3d）。儲存在室溫下（18-25℃）。注：儲存于18-25℃的室溫下。貯存時勿靠近任何熱源、空調(diào)或通風(fēng)口。穩(wěn)定性見標(biāo)簽上的失效期其他必備試劑：達(dá)亞美2號稀釋液（ID-Diluent2）;調(diào)節(jié)紅細(xì)胞懸液的濃度。測試細(xì)胞試劑：ID-DiaCell，ID-DiaScreen4,ID-DiaPanel:測試細(xì)胞試劑。[適用儀器]達(dá)亞美加樣槍達(dá)亞美槍頭(加樣槍配套槍頭)試管（裝懸液用）達(dá)亞美離心機（可同時離心6、12或24張卡）[樣本要求]用常規(guī)靜脈穿刺法抽取血樣。血液最好用枸櫞酸鹽、EDTA、肝素或CPD-A抗凝。也可以使用不抗凝的血樣，為了得到可靠的結(jié)果，必須強調(diào)一定要使用新鮮收集的血液。當(dāng)需要用血清（而非血漿）來進(jìn)行仔細(xì)清洗血清?？捎谑褂们?，以1500g將血清離心3分鐘，以避免纖維蛋白殘留物干擾反應(yīng)類型。[試驗方法]11/50血樣的準(zhǔn)備：紅細(xì)胞：如作直接Coombs測試、交叉配血和自身對照，用達(dá)亞美2號稀釋液配制0.8%的紅細(xì)胞懸液，操作步驟如下：使用前將達(dá)亞美2號稀釋液在室溫下平衡。在一個干凈試管中加入1.0ml達(dá)亞美2號稀釋液；加入10ul血液，輕輕混勻；配制好的細(xì)胞懸液可立即使用。b)間接Coombs使用的血漿/血清：注：如果樣品在分離后沒有立即用于檢測，應(yīng)將它仍貯存于2-8℃，最長保存時間為48小時。如想保存更長時間，應(yīng)置于-20℃。2、測試步驟直接Coombs測試：在達(dá)亞美卡（“LISS/Coombs”）各管上，標(biāo)上病人或獻(xiàn)血者的姓名/編號以示區(qū)別，撕開鋁箔（要用多少微管就撕開多少鋁箔）；加入50ul紅細(xì)胞懸液；達(dá)亞美卡在達(dá)亞美離心機上離心10分鐘；判讀試驗結(jié)果?？贵w篩查：在達(dá)亞美卡（“LISS/Coombs”）各管上，標(biāo)上病人或獻(xiàn)血者的姓名/編號以示區(qū)別，撕開鋁箔（要用多少微管就撕開多少鋁箔）；將每一測試細(xì)胞試劑各50ul加入相應(yīng)微管中；如要做自控，則將50ul病人自身的紅細(xì)胞懸液加入相應(yīng)微管中；將25ul病人血漿/血清分別加入各管中；12/50將達(dá)亞美卡在達(dá)亞美孵育器中孵育15分鐘（37℃）在達(dá)亞美離心機上離心10分鐘；判讀與記錄試驗結(jié)果?？贵w鑒定：取2張達(dá)亞美卡（“LISS/Coombs”），標(biāo)上病人或獻(xiàn)血者的姓名/編號以示區(qū)別，撕開鋁箔；將每一ID-Diapanel測試細(xì)胞試劑各50ul加入相應(yīng)微管（第1-11管）中；將50ul病人自身紅細(xì)胞懸液加入第12個微管（自控管）中；將25ul病人的血漿/血清分別加入所有的12個微管中；在達(dá)亞美孵育器中孵育15分鐘（37℃）；在達(dá)亞美離心機上離心10分鐘；判讀反應(yīng)結(jié)果。交叉配血：達(dá)亞美卡（“LISS/Coombs”）各管上，標(biāo)上病人或獻(xiàn)血者的姓名/編號以示區(qū)別，撕開鋁箔（要用多少微管就撕開多少鋁箔）；將50ul的供者紅細(xì)胞加入微管中如要做自控，則將50ul病人自身的紅細(xì)胞懸液加入相應(yīng)微管中；將25ul病人血漿/血清分別加入各管中；將達(dá)亞美卡在達(dá)亞美孵育器中孵育15分鐘（37℃）在達(dá)亞美離心機上離心10分鐘；判讀與記錄試驗結(jié)果。注意：勿使用有干膠、氣泡等現(xiàn)象或密封性已破壞的達(dá)亞美卡。14/50質(zhì)控：為了保證實驗結(jié)果的有效性，應(yīng)用已知陽性和陰性的樣品來進(jìn)行檢測。[對實驗結(jié)果的解釋]原則陽性：凝集的紅細(xì)胞在凝膠表面形成一條紅線，或凝集物分散在凝膠中。陰性：紅細(xì)胞在微管底部形成密集的扣形物。B)反應(yīng)：直接Coombs測試：陰性反應(yīng)：表明紅細(xì)胞上沒有可檢測到的抗體。陽性反應(yīng)（±→++++）：表明病人的紅細(xì)胞已被致敏（即紅細(xì)胞被抗體和/或C3d覆蓋）?？贵w篩查：陰性反應(yīng)：表明病人血漿/血清中沒有可檢測到的不規(guī)則抗體。陽性反應(yīng)：表明存在不規(guī)則抗體。將觀察到的反應(yīng)與抗原表中的反應(yīng)比較。不同的測試細(xì)胞試劑“ID-DiaCellI-II”、“ID-DiaCellI-II-III”、或“ID-DiaScreenI-II-III-Ⅳ”對應(yīng)于不同的抗原表。根據(jù)反應(yīng)類型和抗原譜，可提示存在抗體的類型。可作進(jìn)一步的常規(guī)測試以鑒定抗體。與某些篩查細(xì)胞有陽性反應(yīng)，自控管陰性：表明存在特異性抗體。與所有篩查細(xì)胞有陽性反應(yīng)，自控管陽性：可能是由于存在自身抗體或非特異性反應(yīng)。與所有篩查細(xì)胞有陽性反應(yīng)，自控管陽性：但與一種/幾種篩查細(xì)胞的陽性反應(yīng)比自控管更強，可以認(rèn)為除了非特異性反應(yīng)外，可能還存在特異性抗體，病人的血樣需作進(jìn)一步檢測。14/50抗體鑒定：陽性反應(yīng)：表明存在不規(guī)則抗體。將觀察到的反應(yīng)與抗原表中的反應(yīng)比較。不同的測試細(xì)胞試劑“ID-DiaPanel”對應(yīng)于不同的抗原表。在大多數(shù)情況下，根據(jù)反應(yīng)類型和抗原譜，可以鑒定抗體的類型（自控管必須為陰性）。與所有“ID-DiaPanel”測試細(xì)胞有陽性反應(yīng)，但自控管陰性：表明可能存在抗高頻率抗原的異常抗體，如自控管也為陽性：可能是由于存在游離的自身抗體，或存在非特異性反應(yīng)。交叉配血陰性反應(yīng)：表明獻(xiàn)血者與受血者的血液相容。陽性反應(yīng)：表明由于存在抗體，獻(xiàn)血者與受血者的血液不相容。[局限性]1、所有使用的材料如被細(xì)菌或其他物質(zhì)污染?？赡芤鸺訇栃曰蚣訇幮越Y(jié)果；2、血清中的纖維蛋白殘留物，或紅細(xì)胞懸液中的凝集紅細(xì)胞，都可能阻滯非凝集的細(xì)胞，離心或在凝膠頂端形成一條粉紅色帶，而此時大多數(shù)紅細(xì)胞都沉積在微管的底部。3、必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，并使用我們推薦的儀器設(shè)備。應(yīng)該按照GLP操作程序定期檢查這些儀器設(shè)備；4、不用達(dá)亞美2號稀釋液，而改用其他懸浮溶液，可能改變反應(yīng)類型；5、紅細(xì)胞懸液太濃或太稀都可能引起異常結(jié)果；[產(chǎn)品性能指標(biāo)]抗篩實驗：15/50使用抗篩細(xì)胞和陽性對照血清反應(yīng)為陽性使用抗篩細(xì)胞和隨機陰性血清反應(yīng)為陰性血清/紅細(xì)胞AHGIAHGIIAHGIIIAHGIAHGIIAHGIIIAHGIAHGIIAHGIIIAHGIAHGIIAHGIII+DialissCTl+++++++++++++ABplasma－－－－－－－－－－－－直接抗人球?qū)嶒灒菏褂肐gG和蔗糖致敏的紅細(xì)胞反應(yīng)稱陽性，隨機細(xì)胞為陰性卡片紅細(xì)胞AHGAHGAHGAHGAHGAHGAHGAHGAHGAHGAHGAHGIgG3.8-43.8-43.8-43.8-43.8-43.8-43.8-43.8-43.8-43.8-43.8-43.8-4Sucrose≥1≥1≥1≥1≥1≥1≥1≥1≥1≥1≥1≥1SRK————————————————————————[注意事項]在IAT測試中，如果離心后在微管上端發(fā)生溶血，應(yīng)該視作陽性。[包裝規(guī)格]112*12卡/箱[儲藏]儲存于18--25℃的室溫下。貯存時勿靠近任何熱源，空調(diào)或通風(fēng)口。[有效期]有效期見標(biāo)簽，一般保證18個月左右。16/50[批準(zhǔn)文號][生產(chǎn)企業(yè)]名稱：DiamedAG地址1785Cressier/Morat,Switizerland電話傳真郵政編碼網(wǎng)址www.diamed.ch17/5018/50達(dá)亞美ABO/D血型復(fù)查卡（卡式凝膠法）說明書[藥品名稱]通用名：達(dá)亞美ABO/D血型復(fù)查卡英文名：DiaClonABDconfirmation漢語拼音：DaYaMeiABO/DXueXingFuChaKa[使用目的]用于中心血站、醫(yī)院輸血科、血庫中受檢人員血型已知的情況下，對紅細(xì)胞ABO血型系統(tǒng)和RH系統(tǒng)中D抗原進(jìn)行復(fù)查，如兩個檢測結(jié)果一致，基本證實血型鑒定無誤，檢測的操作和解釋正確。[試驗原理]達(dá)亞美血型配血系統(tǒng)采用卡式凝膠技術(shù)，是生物化學(xué)凝膠過濾技術(shù)和免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物，通過調(diào)節(jié)凝膠的濃度來控制凝膠間隙的大小。使其間隙只能允許游離的紅細(xì)胞通過，從而使游離紅細(xì)胞與聚集紅細(xì)胞分離。如果通過離心紅細(xì)胞沉積在凝膠管底部，則表明紅細(xì)胞未發(fā)生凝聚凝集，是陰性反應(yīng)，若紅細(xì)胞聚集在凝膠帶上部，則表明紅細(xì)胞發(fā)生凝集，呈陽性反應(yīng)。此外凝膠中已經(jīng)加好了抗人球蛋白及各類血型抗體，從而簡化了操作過程，只需加入樣本即可。19/50達(dá)亞美血型復(fù)查卡（DiaclonABDconfirmation）,其凝膠介質(zhì)中含有單克隆抗體抗-A[LM297/628(LA-2)細(xì)胞系]，抗-B[LM306/686（LB-2）細(xì)胞系]和抗-D[LHM59/20（LDM3）,175-2細(xì)胞系]?？梢约t細(xì)胞的ABO血型系統(tǒng)進(jìn)行正定，對D抗原進(jìn)行檢測。在RhD血型定型中，目前認(rèn)為對輸血受血者和出生前的患者，抗-D試劑不應(yīng)該用來檢測DVI表型。D抗原由許多表位（epitope）組成，在所有9個表位中，DVI紅細(xì)胞缺乏6個表位。這意味著有DVI表型的人，在受到胎兒或輸入的RhD陽性紅細(xì)胞的免疫后，可能產(chǎn)生針對丟失的表位的抗-D。為了保證給予病人適當(dāng)?shù)闹委煷胧?，我們?yīng)將病人DVI紅細(xì)胞定為“Rh陰性”。相反，獻(xiàn)血者的血液應(yīng)該用抗-D來檢測，如檢測不到DVI，應(yīng)將其定為“Rh陽性”，以避免將該血液輸給RhD陰性或部份RhD的病人。[主要組成成分]達(dá)亞美卡(DiaClonABDConfirmation),每卡含有六個微柱，分成兩組，每組中不同微柱的凝膠介質(zhì)中分別含有單克隆抗-A[M297/628(LA－2)細(xì)胞系],抗-B[LM306/686（LB－2）細(xì)胞系]和抗-D[LHM59／20（LDM3），175－2細(xì)胞系]。保存于濃度小于0.l％的NaN3溶液中。注：儲存于18--25℃的室溫下。貯存時勿靠近任何熱源?？照{(diào)或通風(fēng)口。穩(wěn)定性見標(biāo)簽上的失效期。其它必備試劑：20/50達(dá)亞美2號稀釋液（ID—Diluent2）：調(diào)節(jié)紅細(xì)胞懸液的濃度。[儀器]達(dá)亞美加樣槍達(dá)亞美槍頭(加樣槍配套槍頭)試管（裝懸液用）達(dá)亞美離心機（可同時離心6、12或24張卡）[樣本要求]用常規(guī)靜脈穿刺法抽取血樣，血樣最好用枸櫞酸鹽、EDTA、肝素或CPD-A抗凝。為了得到可靠的結(jié)果，一定要使用新鮮收集的血液。[試驗方法]配制5％紅細(xì)胞是液，步驟如下：使用前讓達(dá)亞美2號稀釋液在室溫下平衡，將5ml達(dá)亞美2號稀釋液移入一個干凈玻璃試管中，然后加入50μl全血或25μl壓積紅細(xì)胞，輕輕混勻。（配制好的細(xì)胞懸液立即使用）。在達(dá)亞美卡上標(biāo)上病人的姓名/編號,撕開鋁箔；將10—12.5μl病人的紅細(xì)胞懸液，分別加入達(dá)亞美卡的前三個微管中；將達(dá)亞美卡在達(dá)亞美離心機上離心10分鐘；判讀與記錄反應(yīng)結(jié)果。注：如果僅檢測一個病人血樣，可將達(dá)亞美卡的前三個微管的鋁箔撕開，剩下的三個微管可以留待以后檢測另一血樣。21/50勿使用有干膠、氣泡等現(xiàn)象或密封性己破壞的達(dá)亞美卡。質(zhì)控:為了保證實驗結(jié)果的有效性，應(yīng)用已知陽性和陰性的樣品來進(jìn)行檢測。[對實驗結(jié)果的解釋]A）原則：l、陽性：凝集的紅細(xì)胞在凝膠表面形成一條紅線，或凝集物分散在凝膠中。2、陰性：紅細(xì)胞在微管底部形成密集的扣形物。B）ABO血型的反應(yīng)；抗-A抗-B血型++++-A-++++B++++++++AB--O比“++++””弱的反應(yīng)可能提示為A亞型和／或B亞型。為了得到正確結(jié)果，應(yīng)該進(jìn)一步作完全定型測試（抗-A、抗-B、抗-AB）C）RhD血型的反應(yīng)+++++→+++—RhD陽性RhD弱陽性RhD陰性如果要求檢測所有的弱D。那么所有的陰性結(jié)果都必須重新檢測。22/50[局限性]1．ABO血型鑒定不能代替完全的ABO/Rh血型鑒定。它僅用于以前已確定血型的再鑒定。根據(jù)一般規(guī)律，ABO血型要靠反定型來確證，而只有對照管測試為陰性，ABO/Rh血型鑒定才有效；2．所使用的材料如被細(xì)菌或其它物質(zhì)污染，可能引起假陽性或假陰性結(jié)果；3．血清中的纖維蛋自殘留物，或紅細(xì)胞是液中的聚集紅細(xì)胞，都可能阻滯非凝集的細(xì)胞，在凝膠頂端形成一條粉紅色條帶，而此時大多數(shù)紅細(xì)胞都沉積在微管的底部；4．必需嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。并使用我們推薦的儀器設(shè)備。應(yīng)該按照GLP操作程序定期檢查這些儀器設(shè)備；5，不使用達(dá)亞美2號稀釋液，而使用其它懸浮溶液，可能改變反應(yīng)；6．紅細(xì)胞是液太濃或太稀都可能引起異常結(jié)果。[產(chǎn)品性能指標(biāo)]ＣＴＳ對測試細(xì)胞數(shù)量的最低要求：陽性細(xì)胞陰性細(xì)胞１+4抗ＡA1A2BAxBON/a２２２２２N/a２+5抗ＢBA1BN/aA1ON/a２２Ｎ/a22N/a３+6抗ＤR1rR2rDweakrrr’rr”r222111對反應(yīng)強度的最低要求：23/50１+4Ａ１：≥２．０；Ａ２Ｂ：≥２．０；Ａｘ：≥０．５２+5Ｂ：≥２．０；Ａ１Ｂ≥２．０３+6Ｒ１ｒ：≥２．０；Ｒ２ｒ：≥２．０；Ｄｗｅａｋ≥０．５４所有未致敏的紅細(xì)胞均為陰性５未應(yīng)用６未應(yīng)用[注意事項]在達(dá)亞美卡(DiaClonABDConfirmation”)中使用的單克隆抗-D，不與部份DVI表型的紅細(xì)胞反應(yīng)。[包裝規(guī)格]112*12卡/箱[儲藏]儲存于18--25℃的室溫下。貯存時勿靠近任何熱源。空調(diào)或通風(fēng)口。[有效期]有效期見標(biāo)簽，一般保證9個月。[批準(zhǔn)文號][生產(chǎn)企業(yè)]名稱：DiamedAG地址1785Cressier/Morat,Switizerland24/50電話傳真郵政編碼網(wǎng)址www.Diamed.ch25/50用達(dá)亞美卡[“DiaClonRhSubgroups+K”(C-c-E-e-K-ctl)]進(jìn)行Rh表型和Kell血型鑒定除了RhD抗原外，Rh系統(tǒng)的其它重要抗原是：C（rh′），E（rh″），c（hr′），e（hr″）。根據(jù)Issitt的調(diào)查，這些抗原在高加索人群中的發(fā)生頻率如下：C70%c80%E30%e98%適量抗原陽性紅細(xì)胞，可能刺激C、c、E和e陰性的個體產(chǎn)生抗體，而這些抗體一旦形成，就可能引起相應(yīng)紅細(xì)胞的破壞。所以，Rh表型的鑒定，對懷孕期間、以前有過輸血史的病人、以及含已知不規(guī)則抗體的病人，都是非常重要的。大約9%的高加索人群為Kell陽性。Kell抗原有很強的免疫原性。據(jù)報道抗-Kell是溶血性輸血反應(yīng)的病因，可引起新生兒速發(fā)型和延遲型溶血性疾病。達(dá)亞美卡（“DiaClonRhSubgroups+K”）提供了全部Rh表型的鑒定，并且包括了Kell血型的定型。試劑：僅限于體外診斷用26/50達(dá)亞美卡（“DiaClonRhSubgroups+K”）含有懸浮在凝膠中的單克隆抗體，如抗-C（MS-24細(xì)胞系），抗-c（MS-33細(xì)胞系），抗-E（MS-260細(xì)胞系），抗-e（MS-16，MS-21，MS-63細(xì)胞系）和抗-K（MS-56細(xì)胞系）。Ctl管為陰性對照管。注：儲存于18-25℃的室溫下，貯存時勿靠近任何熱源、空調(diào)或通風(fēng)口。穩(wěn)定性見標(biāo)簽上的失效期。二、其它必備試劑：達(dá)亞美2號稀釋液（ID-Diluent2）：調(diào)節(jié)紅細(xì)胞懸液的濃度。（請見有關(guān)包裝盒內(nèi)插頁）三、其它必備材料：達(dá)亞美分液器達(dá)亞美加樣槍（FP-1、FP-2或EP-3型）達(dá)亞美槍頭（加樣槍配套槍頭）試管（裝懸液用）達(dá)亞美工作臺達(dá)亞美37℃孵育器達(dá)亞美離心機（固定轉(zhuǎn)速與時間，一次可同時離心6、12或24張卡）四、樣品材料：在收集血樣前，病人無需特殊準(zhǔn)備。用常規(guī)靜脈穿刺法抽取血樣。血樣最好用枸櫞酸鹽、EDTA、肝素或CPD-A抗凝。為了得到可靠的結(jié)果，必須強調(diào)一定要使用新鮮收集的血液。27/50五、血樣的準(zhǔn)備：用達(dá)亞美2號稀釋液（ID-Diluent2）配制5%紅細(xì)胞懸液，步驟如下：使用前讓達(dá)亞美2號稀釋液在室溫下平衡。1．將0.5ml達(dá)亞美2號稀釋液移入一個干凈玻璃試管中。2．加入50μl全血或25μl壓積紅細(xì)胞。輕輕混勻。（配制好的細(xì)胞懸液可以立即使用）六、質(zhì)控：為了保證實驗結(jié)果的有效性，應(yīng)平行檢測抗原陽性和陰性細(xì)胞。七、操作步驟：勿使用有干膠、氣泡等現(xiàn)象或密封性已破壞的達(dá)亞美卡。在達(dá)亞美卡上標(biāo)上病人的姓名/編號，撕開鋁箔；將10μl紅細(xì)胞懸液分別加入達(dá)亞美卡的所有微管中；在達(dá)亞美離心機上離心10分鐘；判讀與記錄反應(yīng)結(jié)果。八、結(jié)果解釋：A）原則：1、陽性：凝集的紅細(xì)胞在凝膠表面形成一條紅線，或凝集物分散在凝膠中。2、陰性：紅細(xì)胞在微管底部形成密集的扣形物。B）Rh亞型和Kell的反應(yīng)29/501、陽性反應(yīng)（+++→++++）：表明存在相應(yīng)抗原。2、陰性反應(yīng)：表明無相應(yīng)抗原。重要：Ctl管的反應(yīng)必須為陰性。如Ctl為陽性，那么抗原的檢測無效。應(yīng)按照九、注意事項的C-1重新進(jìn)行檢測。九、注意事項：陰性對照管（Ctl管）的反應(yīng)必須為陰性。如為陽性，則需按下列步驟操作：在準(zhǔn)備配制5%細(xì)胞懸液之前，先用NaCl溶液（或達(dá)亞美2號稀釋液）洗滌紅細(xì)胞。然后按“血樣的準(zhǔn)備“和”測試步驟“進(jìn)行操作。若反應(yīng)較弱（+→++），而對照管（Ctl）為清晰的陰性，則需按以下步驟重復(fù)檢測：=1\*GB3①用達(dá)亞美1號稀釋液（ID-Diluent1）配制5%紅細(xì)胞懸液（0.5ml達(dá)亞美1號稀釋液+50μl全血或25μl壓積細(xì)胞）=2\*GB3②輕輕混勻，在室溫下孵育10分鐘。=3\*GB3③取一張達(dá)亞美卡（“Rhsubgroups+K，人抗體，貨號n0002114），將10μl細(xì)胞懸液分別加入各微管中。=4\*GB3④離心并判讀結(jié)果。=5\*GB3⑤陽性反應(yīng)（+++→++++）證實存在抗原。用單克隆抗體（達(dá)亞美2號稀釋液配制細(xì)胞懸液）方法檢測到弱陽性反應(yīng)（+→++），而用人類抗體（達(dá)亞美1號稀釋液配制細(xì)胞懸液）方法檢測到強陽性反應(yīng)（++++），提示可能存在變異抗原。29/50十、局限性：所使用的材料如被細(xì)菌或其它物質(zhì)污染，可能引起假陽性或假陰性結(jié)果；血清中的纖維蛋白殘留物，或紅細(xì)胞懸液中的聚集紅細(xì)胞，都可能阻滯非凝集的細(xì)胞，在凝膠頂端形成一條粉紅色條帶，而此時大多數(shù)紅細(xì)胞都沉積在微管的底部；必需嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，并使用我們推薦的儀器設(shè)備。應(yīng)該按照GLP操作程序定期檢查這些儀器設(shè)備；不使用達(dá)亞美2號稀釋液，而使用其它懸浮溶液，可能改變反應(yīng)；紅細(xì)胞懸液太濃或太稀都可能引起異常結(jié)果。十一、產(chǎn)品：達(dá)亞美卡（“DiaClonRhSubgroups+K”）4×12貨號：00212460×12貨號：002126112×12貨號：00212530/50亞洲人抗體篩查細(xì)胞達(dá)亞美反定細(xì)胞說明書32/50達(dá)亞美微量定型系統(tǒng)中使用的細(xì)胞試劑用于血型反定型：ID-DiaCellABO，ID-DiaCellABO/=1\*ROMANI-=2\*ROMANII和ABO/=1\*ROMANI-=2\*ROMANII-=3\*ROMANIII；用于抗體篩查：ID-DiaCell=1\*ROMANI-=2\*ROMANII，=1\*ROMANI-=2\*ROMANII-=3\*ROMANIII，ID-DiaCell=1\*ROMANI-=2\*ROMANII-=3\*ROMANIIIp(木瓜酶化)，=1\*ROMANI-=2\*ROMANII-=3\*ROMANIIIAsia(亞洲人專用)，ID-DiaCellPool；用于抗體鑒定：ID-Panel，ID-PanelP；特殊抗原：ID-Dia(Diego)陽性細(xì)胞，ID-I陰性細(xì)胞。在血型血清學(xué)中，常規(guī)使用測試細(xì)胞試劑，是為了檢測血液中是否存在抗-A、抗-B凝集素（血型反定型），以及檢測是否存在不規(guī)則抗體（抗體篩查和鑒定）。32/50在血型反定型中，根據(jù)各種需要和指南，采用A1、B型/A1、A2、B型/A1、A2、B、O型測試細(xì)胞試劑。在不規(guī)則抗體的檢測中，對抗原的組成有嚴(yán)格的要求。由于部分抗體有劑量效應(yīng)，篩查細(xì)胞應(yīng)含有假定劑量2倍的Rh、Duffy、Kidd和MNS血型系統(tǒng)抗原。有些指南要求篩查細(xì)胞中有Lewis抗原，有些要求含罕見的Kp(a)KEL3抗原。考慮到這些需要，達(dá)亞美公司采用間接抗球蛋白測試（IAT）、NaCl測試和二步法酶測試技術(shù)，為血型反定型、抗體篩查和鑒定提供了一套完整的測試細(xì)胞試劑。這些技術(shù)能增強某些抗體（尤其是Rh、Kell和Kidd血型系統(tǒng)抗體）的免疫學(xué)反應(yīng)。這些測試細(xì)胞試劑是專為達(dá)亞美微量定型系統(tǒng)設(shè)計的。已配制成濃度為0.8%的懸液，可直接使用。一、試劑所有測試細(xì)胞試劑均來源于人類，以0.8%（±0.1%）的濃度懸浮在緩沖懸浮介質(zhì)中。34/50防腐劑：抗生素（甲氧芐啶、磺胺甲惡唑）用于血型反定型：ID-DiaCellA1，A2，B，O/A1，A2，B/A1，B用于血型反定型和抗體篩查：ID-DiaCellABO/=1\*ROMANI-=2\*ROMANIIA1，A2，B，O/=1\*ROMANI，=2\*ROMANIIID-DiaCellABO/=1\*ROMANI-=2\*ROMANII-=3\*ROMANIIIA1、A2、B/=1\*ROMANI，=2\*ROMANII，=3\*ROMANIII用于抗體篩查（只用于O型獻(xiàn)血員）：ID-DiaCell=1\*ROMANI-=2\*ROMANIIR1wR1+R2R2（用于IAT和NaCl測試）ID-DiaCell=1\*ROMANI-=2\*ROMANII-=3\*ROMANIIIR1wR1+R2R2+rr（用于IAT和NaCl測試）ID-DiaCell=1\*ROMANI-=2\*ROMANII-=3\*ROMANIIIp木瓜酶化（用于酶測試技術(shù)）ID-DiaCellPoolR1R1+R2R22pooledcells(用于獻(xiàn)血員抗體篩查)ID-DiaCell=1\*ROMANI-=2\*ROMANII-=3\*ROMANIIIAsiaR1R1+R2R2+GP.MUR表型細(xì)胞34/50（用于IAT和冷凝集檢測）用于抗體鑒定（只用于O型獻(xiàn)血員）：ID-DiaPanel11瓶測試細(xì)胞（用于IAT和NaCl測試）ID-DiaPanelP11瓶木瓜酶化測試細(xì)胞（用于酶測試技術(shù)）特殊抗原：ID-Dia(Diego)陽性細(xì)胞ID-I陰性細(xì)胞儲藏于2-8℃穩(wěn)定性：見標(biāo)簽上的失效期注意：生產(chǎn)該產(chǎn)品的原材料，經(jīng)合格試劑檢測，未發(fā)現(xiàn)有HbsAg、HCV和HIV（1+2）反應(yīng)。然而，現(xiàn)有檢測方法不能保證該產(chǎn)品中不含傳染物質(zhì)。我們應(yīng)把來源于人血的這些產(chǎn)品，看作是有潛在傳染性的物質(zhì)。36/50二、其它必備試劑：在達(dá)亞美卡“LISSCoombs+Enzymetest”中，3根微管的凝膠介質(zhì)中含有多特異性抗人球蛋白（AHG）血清（用于間接抗球蛋白測試IAT），其余3管含中性凝膠（用于酶測試技術(shù)）。在達(dá)亞美卡“LISSCoombs”中，6根微管的凝膠介質(zhì)中均含有多特異性抗人球蛋白（AHG）血清（用于間接抗球蛋白測試IAT）。在達(dá)亞美卡“CoombsAnti-IgG”中，6根微管的凝膠介質(zhì)中均含有兔抗-IgG（用于IAT）。在達(dá)亞美卡“NaCl，Enzymetestandcoldaggl.”中，6根微管中均含中性凝膠介質(zhì)（用于用于酶測試技術(shù)或NaCl測試）。在達(dá)亞美卡“血型反定型+抗體篩查”中，3根微管中含中性凝膠介質(zhì)，其余3根微管的凝膠介質(zhì)中含有多特異性抗人球蛋白（AHG）血清（用于IAT）。36/50達(dá)亞美2號稀釋液（ID-Diluent2）：用于配制紅細(xì)胞懸液的低離子溶液（用于自控）。ID-Papain：木瓜酶溶液，可直接使用（用于酶測試的自控）。（請看有關(guān)的包裝內(nèi)插頁）三、其它必備材料：達(dá)亞美分液器達(dá)亞美加樣槍達(dá)亞美工作臺達(dá)亞美槍頭（加樣槍配套槍頭）試管（裝懸液用）達(dá)亞美孵育器（37℃）達(dá)亞美離心機（可同時離心6、12或24張卡）四、樣品材料：38/50用常規(guī)靜脈穿刺法抽取血樣。血樣最好用枸櫞酸鹽、EDTA、肝素或CPD-A抗凝。為了得到可靠的結(jié)果，必須強調(diào)一定要使用新鮮收集的血液。當(dāng)需要用血清（而非血漿）來進(jìn)行血型反定型時，必須仔細(xì)清洗血清?？捎谑褂们?，以1000-1500g的轉(zhuǎn)速將血清離心10分鐘，以避免纖維蛋白殘留物干擾反應(yīng)類型。五、達(dá)亞美測試細(xì)胞試劑的使用：所有測試細(xì)胞試劑僅用于達(dá)亞美微量定型系統(tǒng)的達(dá)亞美卡中；應(yīng)嚴(yán)格按達(dá)亞美卡包裝內(nèi)插頁的測試步驟來進(jìn)行操作；在使用前應(yīng)將試劑瓶顛倒幾次，輕輕地混勻紅細(xì)胞，或?qū)⒃噭┢糠廊胱詣蛹訕酉到y(tǒng)（如ID-Sampler=2\*ROMANII，ID-Sampler=2\*ROMANIIF，ID-Sampler=3\*ROMANIIIM）中；39/50在使用時要確保測試細(xì)胞達(dá)到室溫（18-25℃）；在操作過程中，檢查測試細(xì)胞是否保持混懸狀態(tài)。如有細(xì)胞沉淀，應(yīng)該重新混勻（自動加樣系統(tǒng)ID-Sampler=2\*ROMANIIF和ID-Sampler=3\*ROMANIIIM有自動混勻裝置）；在達(dá)亞美系統(tǒng)中，準(zhǔn)確加樣是非常重要的。使用達(dá)亞美加樣槍（ID-Pipetors）進(jìn)行連續(xù)加樣。除非單個病人的急診檢測，我們不應(yīng)使用試劑瓶配套滴管，因其加樣體積不準(zhǔn)確且不能重復(fù)；避免測試細(xì)胞試劑的污染；當(dāng)記錄反應(yīng)時，應(yīng)保證抗原表與試劑瓶相對應(yīng)；用完后，蓋上試劑瓶，并將其重新放回冰箱。六、局限性：1.所使用的材料如被細(xì)菌或其它物質(zhì)污染，可能引起假陽性或假陰性結(jié)果；必需嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，并使用我們推薦的儀器設(shè)備。應(yīng)該按照GLP操作程序定期檢查這些儀器設(shè)備；39/50七、產(chǎn)品：ID-DiaCellABO4瓶/套(A1，A2，B，O)4×10ml貨號：003619ID-DiaCellABO3瓶/套(A1，A2，B)3×10ml貨號：003617ID-DiaCellABO2瓶/套(A1，B)2×10ml貨號：003624ID-DiaCellABO單瓶(A1)1×10ml貨號：003620ID-DiaCellABO單瓶(A2)1×10ml貨號：0