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…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線(xiàn)※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………第=page22頁(yè),總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè),總=sectionpages11頁(yè)2025年粵教版選修1生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍:全部知識(shí)點(diǎn);考試時(shí)間:120分鐘學(xué)校:______姓名:______班級(jí):______考號(hào):______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題,共16分)1、目前網(wǎng)絡(luò)傳言;單位面積的手機(jī)屏幕上細(xì)菌比馬桶按鈕上的多。兩生物興趣小組為辨別真?zhèn)芜M(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),過(guò)程及結(jié)果如下。下列敘述錯(cuò)誤的是()
A.本實(shí)驗(yàn)采用稀釋涂布平板法接種B.本實(shí)驗(yàn)不需要設(shè)置對(duì)照組實(shí)驗(yàn)C.本實(shí)驗(yàn)使用的培養(yǎng)基應(yīng)含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽D.兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同,可能因?yàn)闃颖緛?lái)源不同2、某種細(xì)菌菌株需要亮氨酸才能生長(zhǎng),但此菌株對(duì)鏈霉素敏感。實(shí)驗(yàn)者用誘變劑處理此菌株,想篩選出表格中細(xì)菌菌株類(lèi)型,則配制相應(yīng)選擇培養(yǎng)基類(lèi)型正確的是()。選項(xiàng)篩選出不需要亮氨酸的菌株篩選出抗鏈霉素的菌株篩選出不需要亮氨酸且抗鏈霉素的菌株AL+S+L-S-L+S-BL-S-L+S+L-S+CL-S+L+S+L-S-DL+S-L-S-L+S+
注:L代表亮氨酸,S代表鏈霉素;“+”代表加入,“-”代表不加入A.AB.BC.CD.D3、在恒溫箱培養(yǎng)微生物時(shí),平板要倒置的原因是A.利于通氣B.利于微生物的快速繁殖C.防止雜菌污染D.防止培養(yǎng)皿內(nèi)冷卻水流入培養(yǎng)基4、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是()A.計(jì)算、稱(chēng)量、倒平板、溶化、滅菌B.計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、倒平板、滅菌C.計(jì)算、稱(chēng)量、滅菌、溶化、倒平板D.計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板5、下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述,正確的是()A.在相同pH條件下,加酶洗衣粉的洗滌效果好于普通洗衣粉B.超過(guò)37℃的溫度條件下,加酶洗衣粉的中的酶會(huì)迅速失活C.蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶都是常用的酶制劑D.加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存,不會(huì)影響其中酶的活性6、下列有關(guān)果酒和果醋制作的敘述,正確的是()A.在果酒的制作過(guò)程中,應(yīng)先去除葡葡的枝梗,再?zèng)_洗干凈B.醋酸發(fā)酵時(shí),需要通氣的原因是促進(jìn)醋酸菌通過(guò)有氧呼吸產(chǎn)生醋酸C.為防止發(fā)酵液被污染,榨汁機(jī)和發(fā)酵瓶使用前都必須滅菌D.制作果酒時(shí),發(fā)酵瓶裝入葡萄汁后,應(yīng)封閉充氣口7、家庭中制作泡菜的方法:新鮮的蔬菜經(jīng)過(guò)整理、清潔后,放入徹底清洗并用白酒擦拭過(guò)的泡菜壇中,然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”,密封后置于溫度適宜的地方。下列與此過(guò)程相關(guān)的敘述,不正確的是()A.用白酒擦拭泡菜壇的目的是消毒B.加入“陳泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌種C.制作泡菜過(guò)程中,有機(jī)物的干重和種類(lèi)將減少D.制作泡菜過(guò)程中,溫度過(guò)高、腌制時(shí)間過(guò)短、食鹽用量過(guò)低容易造成亞硝酸鹽含量增加8、以下實(shí)驗(yàn)中關(guān)于酒精的使用有誤的是()A.去除色素,鑒定葉片光合作用產(chǎn)生淀粉B.制成固定液,觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂C.用75%酒精提取菠菜葉中色素D.植物組織培養(yǎng)前,對(duì)植物組織進(jìn)行消毒評(píng)卷人得分二、多選題(共5題,共10分)9、分析圖內(nèi)某種洗衣液盒上的資料;理解正確的是()
A.這種洗衣液較易清除衣服上的蛋清污漬B.在60℃以上的水中,蛋白酶會(huì)失去活性C.這種洗衣液對(duì)衣服上油漬也能較易清除D.該洗衣液不適合洗滌絲綢面料衣物10、有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微生物基本上都可以分解尿素“如細(xì)菌、真菌(酵母菌)、放線(xiàn)菌等”。下列關(guān)于能分解尿素的微生物的敘述正確的是()A.酵母菌能利用尿素做氮源,根本原因是其含有合成脲酶的基因B.尿素中的氮元素可用于合成細(xì)菌的蛋白質(zhì)C.在資源和空間不受限制的階段,若最初接種M個(gè)細(xì)菌,繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是2n×M個(gè)D.可以利用人工誘變、轉(zhuǎn)基因、多倍體育種等方法培育高效分解尿素的細(xì)菌11、黃粉蟲(chóng)可以吞食;降解塑料;利用黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染進(jìn)行生物降解,是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲(chóng)腸道中分離、純化目的微生物的過(guò)程,相關(guān)敘述正確的是()
A.富集培養(yǎng)基中含有酵母膏、蛋白胨、瓊脂等,蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和維生素B.分離、純化目的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源C.將轉(zhuǎn)接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱長(zhǎng)期保存D.與傳統(tǒng)填埋、焚燒相比,黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染的降解不會(huì)造成二次污染12、地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)70億噸,其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用,這是因?yàn)樗麄兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。研究者從牛的瘤胃中篩選產(chǎn)生纖維酶的纖維素分解菌,其篩選過(guò)程如圖1所示。將丙中的菌懸液轉(zhuǎn)接于含有稻草作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到若干菌落后用剛果紅處理,看到如圖2所示情況,下列有關(guān)敘述,錯(cuò)誤的是()
A.②過(guò)程是涂布器取乙中的菌液均勻的涂布在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)表面B.甲、乙試管中的液體都屬于液體培養(yǎng)基,主要作用是稀釋菌種C.Ⅰ號(hào)、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基都屬于固體培養(yǎng)基,配置時(shí)先滅菌后調(diào)節(jié)pHD.可挑取圖2中周?chē)霈F(xiàn)透明圈的菌落,用平板劃線(xiàn)法繼續(xù)純化13、有關(guān)下列四圖的說(shuō)法,正確的是()
A.Ⅰ圖中,F(xiàn)分別表示四個(gè)興奮性神經(jīng)元,在神經(jīng)元C的任一點(diǎn)給予一定強(qiáng)度的刺激,兩個(gè)電流表a、b一定都能發(fā)生偏轉(zhuǎn)B.Ⅱ圖中,對(duì)向光彎曲的植物而言,若莖背光側(cè)為Q點(diǎn)對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)素濃度,則莖向光側(cè)可能為S點(diǎn)對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)素濃度C.Ⅲ圖中,曲線(xiàn)可以表示泡菜腌制過(guò)程中,亞硝酸鹽含量的變化D.Ⅳ圖中曲線(xiàn)可以表示葡萄酒發(fā)酵過(guò)程中,酵母菌線(xiàn)粒體內(nèi)ATP產(chǎn)生量隨氧氣濃度的變化情況評(píng)卷人得分三、填空題(共5題,共10分)14、當(dāng)_________________通過(guò)凝膠時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)_______________進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程_________________,移動(dòng)速度__________________;而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)_________________進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動(dòng),路程_________________,移動(dòng)速度_______________________。15、為了加速膨脹,可以將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱,這樣做的目的是___________16、PCR一般需要經(jīng)歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為_(kāi)_____________三步。變性時(shí),需要將溫度上升到_________________℃以上時(shí),雙鏈DNA解旋為單鏈。復(fù)性時(shí),溫度要下降到_________________℃左右,延伸時(shí),溫度再上升到_________________℃左右。17、玫瑰精油是制作高級(jí)香水的主要成分,能使人產(chǎn)生愉悅感。實(shí)驗(yàn)室玫瑰精油的粗提取,將玫瑰花瓣與清水的質(zhì)量按_____,用___________法進(jìn)行提取。玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,_________溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,能隨水蒸氣一同蒸餾。18、以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí),每100mL血液需要加入3g___________,目的是_______________。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共36分)19、已知固定化酶技術(shù)可應(yīng)用于高濃度有機(jī)廢水的處理;科研人員對(duì)固定化蛋白酶進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)研究。
實(shí)驗(yàn)一:選擇大孔樹(shù)脂;活性炭和硅膠為載體制備固定化蛋白酶;三種載體固定化效果如圖1。
實(shí)驗(yàn)二:各取pH值分別為4.5;5.0、5.5、6.0、6.5、7.0高濃度污水500mL;分別與等量不同載體的固定化酶混合,在37℃水浴中反應(yīng)6h。測(cè)定每個(gè)反應(yīng)器中氨基酸的產(chǎn)生速率,結(jié)果如圖2。
(1)固定化酶技術(shù)一般不用包埋法;理由是_______。圖1可知,三種載體蛋白酶固定化率最高的________。與直接使用水溶性酶相比,固定化酶處理高濃度污水的優(yōu)點(diǎn)是_______。
(2)實(shí)驗(yàn)二的自變量是_________;因變量是___________,無(wú)關(guān)變量是______(至少寫(xiě)兩點(diǎn))。
(3)從圖2中可得出的結(jié)論:________;。20、蘋(píng)果樹(shù)腐爛病由真菌感染引起;是限制蘋(píng)果產(chǎn)量的重要因素之一,目前該病以化學(xué)防治為主。為了開(kāi)發(fā)生物防治的途徑,研究者擬從土壤中分離篩選出能抑制蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌生長(zhǎng)的芽孢桿菌。實(shí)驗(yàn)流程如圖1:
(1)分離篩選土壤中的芽孢桿菌。
圖1中①取5g土壤加入____________mL無(wú)菌水中充分震蕩得到10-1的土壤懸液。進(jìn)行系列稀釋后用___________法進(jìn)行接種;每個(gè)濃度重復(fù)3次。將接種后的平板________,以防止冷凝水滴落造成污染。37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí),根據(jù)__________特征鑒別出芽孢桿菌并進(jìn)一步純化。
(2)篩選能抑制蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌生長(zhǎng)的芽孢桿菌。
圖1中;應(yīng)取直徑為5mm的____________的菌落移置于A處,B處接種______。培養(yǎng)3~5天,測(cè)量并計(jì)算抑菌率。篩選出抑菌率最高的菌株,抑菌效果如圖2。請(qǐng)將抑菌率的計(jì)算公式補(bǔ)充完整:抑菌率(%)=_____/(D-5)×100%(用圖2中的字母表示)
(3)測(cè)定篩選出的抗菌菌株對(duì)感染了蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌枝條的抑菌率。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程如表1;請(qǐng)?jiān)诳瞻滋幯a(bǔ)充相關(guān)內(nèi)容。_______
在相同且適宜的條件下培養(yǎng);7天后測(cè)量并計(jì)算抑菌率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2。
由表中數(shù)據(jù)可知:發(fā)酵原液對(duì)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌有明顯的抑制作用。依據(jù)是隨著發(fā)酵濾液稀釋倍數(shù)的不斷增加;__________。
(4)請(qǐng)你說(shuō)出與化學(xué)防治相比,生物防治的優(yōu)勢(shì)是__________。21、青霉素?;?;又稱(chēng)為青霉素酰胺酶或青霉素氨基水解酶。該酶主要從大腸埃希菌胞內(nèi)酶和巨大芽孢桿菌胞外酶中獲得,該酶已大規(guī)模應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)頭孢類(lèi)抗生素。某制藥廠致力開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品,生產(chǎn)頭孢類(lèi)抗生素藥物。欲通過(guò)人工誘變的方法獲得高產(chǎn)青霉素?;傅奈⑸?,制備并固定化青霉素?;?。根據(jù)相關(guān)信息回答問(wèn)題:
(1)在獲得髙產(chǎn)青霉素?;傅奈⑸飼r(shí),從理論上分析選擇對(duì)______進(jìn)行誘變處理后,篩選出的髙產(chǎn)菌株更有利于生產(chǎn),原因是______;而菌體可以繼續(xù)進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)。
(2)在研究中發(fā)現(xiàn),髙產(chǎn)菌株會(huì)產(chǎn)生多種分子量不同的酶,且均不會(huì)被RNA酶降解。在分離純化青霉素?;笗r(shí),適合采用______法;之后需要對(duì)其純度進(jìn)一步鑒定,使用最多的方法是______。
(3)除顯微鏡直接計(jì)數(shù)法外,還常用______法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),其原理是______。為防止人員感染和污染環(huán)境,實(shí)驗(yàn)人員離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí),一定要做的事情是______。22、某同學(xué)對(duì)“血紅蛋白的提取和分離”實(shí)驗(yàn)進(jìn)行改進(jìn)和研究;實(shí)驗(yàn)步驟如圖1所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)血紅蛋白由4條肽鏈組成;包括_________________,血紅蛋白因含有_______而呈紅色,這有利于對(duì)提取過(guò)程的監(jiān)測(cè)。
(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是____________________________。將樣品稀釋后轉(zhuǎn)移至離心管中;離心后選取_______(填“上層”或“下層”)暗紅色的紅細(xì)胞液體并將其轉(zhuǎn)人燒杯中,加入5倍體積的______________進(jìn)行洗滌。
(3)待紅細(xì)胞破裂釋放血紅蛋白后;將得到的混合溶液充分?jǐn)嚢璨㈦x心,結(jié)果如圖2所示。血紅蛋白分布在圖2的_______(填序號(hào))層,用濾紙過(guò)濾,可得到含血紅蛋白的濾液。
(4)將濾液裝入透析袋中,可除去_______的雜質(zhì)。評(píng)卷人得分五、綜合題(共4題,共16分)23、血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分;具有重要的運(yùn)輸功能。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問(wèn)題:
(1)將實(shí)驗(yàn)流程補(bǔ)充完整:A為_(kāi)_________,B為_(kāi)_________。凝膠色譜法是根據(jù)_________而達(dá)到分離蛋白質(zhì)的有效方法。
(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除_________,洗滌干凈的標(biāo)志是_________。在實(shí)驗(yàn)流程A中發(fā)揮作用的試劑有__________。
(3)在洗脫過(guò)程中,如果紅色區(qū)帶不均勻,可能的原因有_______。通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)血紅蛋白樣品進(jìn)行純度鑒定時(shí),凝膠上出現(xiàn)________條電泳條帶說(shuō)明血紅蛋白分子純度為100%。24、胡蘿卜素是一種常用的食用色素;可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得,流程如下:
(1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時(shí),可選用___________或平板劃線(xiàn)法接種。采用平板劃線(xiàn)法接種時(shí)需先灼燒接種環(huán),其目的是_________。
(2)培養(yǎng)酵母菌R時(shí),培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R生長(zhǎng)提供__________和__________。
(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),干燥過(guò)程應(yīng)控制好溫度和______以防止胡蘿卜素分解;萃取過(guò)程中宜采用______方式加熱以防止溫度過(guò)高;萃取液濃縮前需進(jìn)行過(guò)濾,其目的是_______。
(4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素。鑒定過(guò)程中需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣品作為_(kāi)_____。25、石棉黃果柑是當(dāng)?shù)靥厣?;?00多年的種植歷史,果實(shí)色澤鮮艷。新鮮柑橘皮中含有2%-3%的精油,是食品香精;化妝品香精和香水配料的優(yōu)質(zhì)原料。柑橘皮精油中含有多種低分子的抗菌物質(zhì)和抗氧化成分,作為果蔬類(lèi)天然保鮮劑,能有效地抑菌防腐。
(1)植物芳香油的提取方法有壓榨、蒸餾和_______________。柑橘皮精油的制備通常用壓榨而不適宜水中蒸餾的原因是________________。
(2)研究表明;柑橘皮精油具有抗菌消炎;抗氧化作用。某實(shí)驗(yàn)小組為測(cè)定柑橘皮精油抑菌情況做了如下實(shí)驗(yàn):
①培養(yǎng)基的配制。配制_______________培養(yǎng)基和馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基待用。本實(shí)驗(yàn)選用固體培養(yǎng)基的原因是________________。
②制備菌體濃度為106-107個(gè)/mL的菌懸液;備用。
③將各種待測(cè)菌懸液各取0.1ml均勻涂布于相應(yīng)培養(yǎng)基的表面,制成含菌平板。將平板用彩筆平均劃分為4個(gè)區(qū)域,用滅菌后直徑為5.5mm的圓形濾紙片蘸取體積分?jǐn)?shù)為100%柑橘皮精油分別輕輕貼于其中兩個(gè)區(qū)域,另外兩個(gè)區(qū)域作為對(duì)照,對(duì)照組的處理方法是_______________。
④接種細(xì)菌的平板置于培養(yǎng)箱中37℃下培養(yǎng)24小時(shí);接種霉菌的平板置于培養(yǎng)箱28℃下培養(yǎng)48小時(shí)。每種菌涂布3個(gè)平板,測(cè)定抑菌圈直徑,求平均值。結(jié)果如下:
柑橘皮精油對(duì)供試菌的抑菌圈直徑(單位:mm)。組別供試菌種大腸桿菌白色葡萄球菌青霉菌青霉菌對(duì)照組000柑橘皮精油組34.229.514.1
注:表中數(shù)據(jù)為抑菌圈直徑平均值。
⑤表格中0代表_______________。由表得出的結(jié)論是_______________。26、回答下列關(guān)于生物技術(shù)實(shí)踐的問(wèn)題。
(1)某同學(xué)利用鮮蘋(píng)果汁來(lái)制作果酒和果醋時(shí),在發(fā)酵裝置的排氣口上連接的膠管長(zhǎng)而彎曲的目的是__________。在利用果酒進(jìn)行果醋發(fā)酵之前,需要調(diào)整的發(fā)酵條件是__________。
(2)在泡菜的腌制過(guò)程中,需要進(jìn)行密封發(fā)酵,原因是_____;并注意控制腌制的__________等;還要跟蹤檢測(cè)腌制過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽的含量,其原理是在_________條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與________________________結(jié)合形成玫瑰色染料。
(3)腐乳制作過(guò)程中防止雜菌污染的措施有__________(答出兩點(diǎn)即可)。腐乳易被人體吸收的原因是_________________。參考答案一、選擇題(共8題,共16分)1、B【分析】【分析】
1;微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽;此外還要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō),含C、N的化合物既是碳源,也是氮源,即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用。
2;兩種純化細(xì)菌的方法的比較:
【詳解】
A.由圖中菌落的均勻分布可知本實(shí)驗(yàn)采用的是稀釋涂布平板法接種;A正確;
B.本實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置空白對(duì)照組;以排除無(wú)關(guān)變量的影響,B錯(cuò)誤;
C.培養(yǎng)基的基本成分包括水;無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源等;故本實(shí)驗(yàn)使用的培養(yǎng)基應(yīng)含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽,C正確;
D.通過(guò)觀察菌落的形態(tài);大??;可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物,兩組報(bào)道結(jié)果不同,可能是手機(jī)的取樣環(huán)境和馬桶的取樣環(huán)境都不相同,D正確。
?故選B。
【點(diǎn)睛】
本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí),要求考生能夠識(shí)記培養(yǎng)基的成分,掌握微生物分離和計(jì)數(shù)的方法,能夠根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)實(shí)驗(yàn)誤差的原因等。2、B【分析】【分析】
表中所列均為選擇培養(yǎng)基;選擇培養(yǎng)基是指通過(guò)培養(yǎng)特殊的培養(yǎng)基,培養(yǎng)混合的微生物,僅得到或篩選出所需要的微生物,其他不需要的微生物則不能生存。細(xì)菌細(xì)胞壁的成分是肽聚糖,鏈霉素可以破壞肽聚糖而使細(xì)菌死亡。
【詳解】
根據(jù)題目要求;篩選不需要亮氨酸的菌株時(shí),培養(yǎng)基中不需要添加亮氨酸,應(yīng)使用的培養(yǎng)基為不加L,能生存的就是不需要亮氨酸的細(xì)菌;篩選抗鏈霉素的菌株時(shí),需要向培養(yǎng)基中添加鏈霉素S,而L可加可不加,能抵抗鏈霉素的細(xì)菌就能在培養(yǎng)基生存下來(lái);篩選不需要亮氨酸且抗鏈霉素的菌株時(shí),需要向培養(yǎng)基中添加鏈霉素,但不添加亮氨酸,應(yīng)用的培養(yǎng)基為L(zhǎng)-;S+,能在培養(yǎng)基上生存的細(xì)菌,即是所需要的菌種,B正確,ACD錯(cuò)誤。
故選B。3、D【分析】【分析】
平板冷凝后皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠;凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,若將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。
【詳解】
進(jìn)行恒溫培養(yǎng)時(shí),要將培養(yǎng)皿倒置,如果正放培養(yǎng)皿,則皿蓋上形成的水滴會(huì)落入培養(yǎng)基表面并且擴(kuò)散開(kāi),如果培養(yǎng)皿中已形成菌落,則會(huì)導(dǎo)致菌落間相互影響,很難再分成單菌落,達(dá)不到分離的目的,甚至造成污染;因此恒溫培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)皿必須倒置,主要是防止培養(yǎng)皿內(nèi)冷卻水流入培養(yǎng)基,D正確。4、D【分析】【分析】
制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是:計(jì)算;稱(chēng)量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。
【詳解】
根據(jù)以上分析可知,制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是:計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。綜上所述,D正確,A、B、C錯(cuò)誤。5、C【分析】【分析】
酶的特性:具有高效性;專(zhuān)一性和作用條件較溫和;高溫、過(guò)酸、過(guò)堿都會(huì)使酶的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞,使酶永久失活。
【詳解】
A;酶的催化作用需適宜的pH值;pH不適宜時(shí),加酶洗衣粉洗滌效果不一定好于普通洗衣粉,A錯(cuò)誤;
B;加酶洗衣粉中的酶是科學(xué)家通過(guò)基因工程生產(chǎn)出的能夠耐酸、耐堿、忍受表面活性劑和較高溫度的酶;因此在超過(guò)37℃中加酶洗衣粉中的酶不會(huì)迅速失活,B錯(cuò)誤;
C;加酶洗衣粉中常用的酶制劑有四類(lèi):蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶;其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶,C正確;
D;加酶洗衣粉中的酶經(jīng)過(guò)了特殊的化學(xué)物質(zhì)的包裹;使之與其他成分隔離,加酶洗衣粉受潮后,包裹酶的物質(zhì)被分解了,酶被釋放出來(lái),會(huì)受到外界環(huán)境的影響,從而會(huì)導(dǎo)致酶的活性降低,D錯(cuò)誤。
故選C。6、D【分析】【分析】
1.在利用酵母菌發(fā)酵時(shí);最好是先通入足夠的無(wú)菌空氣,在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖,再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵;酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃~25℃,pH最好是弱酸性。
2.醋酸菌是好氧型細(xì)菌;當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下,可將乙醇(酒精)氧化成醋酸;當(dāng)氧氣;糖源都充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃~35℃。
【詳解】
A;在果酒的制作過(guò)程中;應(yīng)先沖洗干凈,再去除葡葡的枝梗,以免雜菌污染,A錯(cuò)誤;
B;醋酸發(fā)酵階段需要通氣的原因是醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感;當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí),即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣,也會(huì)引起醋酸菌死亡,B錯(cuò)誤;
C;榨汁機(jī)要清洗干凈;并晾干;發(fā)酵瓶要清洗干凈,用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒,C錯(cuò)誤;
D;酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵時(shí)需要無(wú)氧環(huán)境;因此裝入葡萄汁后,應(yīng)封閉發(fā)酵裝置的充氣口,D正確。
故選D。
【點(diǎn)睛】7、C【分析】1;泡菜的制作原理:泡菜的制作離不開(kāi)乳酸菌。在無(wú)氧條件下;乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。
2;泡菜在腌制過(guò)程中;乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化。
(1)發(fā)酵初期:以不抗酸的大腸桿菌和酵母菌的活動(dòng)為主;同時(shí)還有一部分硝酸鹽還原菌活動(dòng)。該時(shí)期利用了氧氣,產(chǎn)生了厭氧環(huán)境,乳酸菌才開(kāi)始活動(dòng)。此時(shí)乳酸菌和乳酸的量都比較少,而由于硝酸鹽還原菌的活動(dòng),亞硝酸鹽含量有所增加。
(2)發(fā)酵中期:由于乳酸菌產(chǎn)生了大量乳酸;其他細(xì)菌活動(dòng)受到抑制,只有乳酸菌活動(dòng)增強(qiáng)。此時(shí)期乳酸菌數(shù)量達(dá)到最高峰,乳酸的量繼續(xù)積累。由于硝酸鹽還原菌受抑制,同時(shí)形成的亞硝酸鹽又被分解,因而亞硝酸鹽含量下降。所以在整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中,亞硝酸鹽的含量表現(xiàn)為先增加后下降的趨勢(shì)。
(3)發(fā)酵后期:由于乳酸的積累;酸度繼續(xù)增長(zhǎng),乳酸菌活動(dòng)也受到抑制。乳酸菌數(shù)量下降,而硝酸鹽還原菌完全被抑制。
【詳解】
A;制作泡菜時(shí);所用的泡菜壇要用白酒擦拭消毒,防止雜菌污染,A正確;
B;陳泡菜水中含有乳酸菌;故加入“陳泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌種,B正確;
C;制作泡菜的過(guò)程中;乳酸菌無(wú)氧呼吸作用消耗有機(jī)物,有機(jī)物的干重降低,但由于一些中間物質(zhì)的產(chǎn)生,有機(jī)物的種類(lèi)將增多,C錯(cuò)誤;
D;泡菜腌制時(shí)間過(guò)長(zhǎng);食鹽用量過(guò)低,溫度過(guò)高,都容易造成細(xì)菌大量滋生,亞硝酸鹽含量增加,D正確。
故選C。
【點(diǎn)睛】8、C【分析】【分析】
酒精是生物實(shí)驗(yàn)常用試劑之一:
1;如檢測(cè)脂肪實(shí)驗(yàn)中需用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液洗去浮色。
2;觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)和低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實(shí)驗(yàn)中都需用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精對(duì)材料進(jìn)行解離。
3;綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中需用無(wú)水酒精來(lái)提取色素。
4;果酒和果醋制作實(shí)驗(yàn)中可用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精進(jìn)行消毒。
5;證明光合作用產(chǎn)物有淀粉需用95%酒精對(duì)綠色葉片進(jìn)行酒精水浴脫色;便于碘液染色等。
【詳解】
A;觀察光合作用產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn)中;可以用酒精去除色素,即進(jìn)行脫色處理,用碘蒸氣處理,可以鑒定淀粉,A正確;
B;酒精可以和冰醋酸制成固定液;用于觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂,B正確;
C;提取菠菜葉中色素用無(wú)水乙醇;C錯(cuò)誤;
D;植物組織進(jìn)行消毒可以用70%的酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒;D正確。
故選C。二、多選題(共5題,共10分)9、A:B:D【分析】【分析】
加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉;目前常用的酶制劑有四類(lèi):蛋白酶;脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶,其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶也能分別將大分子的脂肪、淀粉水解為小分子物質(zhì),使洗衣粉具有更好的去污能力。
【詳解】
A;蛋清污漬的主要成分是蛋白質(zhì);該洗衣粉中含有蛋白酶,因此這種洗衣粉較易清除衣服上的蛋清污漬,A正確;
B;高溫會(huì)使酶變性失活;使用該洗衣粉時(shí)不能用60℃以上的水,說(shuō)明在60℃以上的水中,蛋白酶會(huì)失去活性,B正確;
C;根據(jù)酶的專(zhuān)一性原理可知;蛋白酶能夠水解蛋白質(zhì)污漬,但是不能水解油漬,C錯(cuò)誤;
D;該洗衣粉中含有蛋白酶;能水解蛋白質(zhì),因此不能洗滌毛料、絲綢等富含蛋白質(zhì)的衣料,D正確。
故選ABD。10、A:B:C【分析】【分析】
絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖;但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,利用尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基,可以從土壤中分離出分解尿素的微生物。
【詳解】
A;脲酶能夠?qū)⒛蛩亟到獬砂焙投趸?;因此酵母菌能利用尿素做氮源,根本原因是其含有合成脲酶的基因,A正確;
B;蛋白質(zhì)組成元素包括N;因此尿素中的氮元素可用于合成細(xì)菌的蛋白質(zhì),B正確;
C、在資源和空間不受限制的階段,細(xì)菌為“J”形增長(zhǎng),其分裂方式為二分裂生殖,因此最初接種M個(gè)細(xì)菌,繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是2n×M個(gè);C正確;
D;細(xì)菌為原核生物;沒(méi)有染色體,因此不能用多倍體育種等方法培育高效分解尿素的細(xì)菌,D錯(cuò)誤。
故選ABC。11、B:D【分析】【分析】
1;分離菌株的思路:
(1)自然界中目的菌株的篩選:
①依據(jù):根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求;到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。
②實(shí)例:PCR技術(shù)過(guò)程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶;就是從熱泉中篩選出來(lái)的Taq細(xì)菌中提取出來(lái)的。
(2)實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選:
①原理:人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng);溫度、pH等);同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。
2;統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法:
(1)稀釋涂布平板法(間接):
①當(dāng)樣品的稀釋庋足夠高時(shí);培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。
②通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中大約含有的活菌數(shù)。
(2)利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。
【詳解】
A;富集培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基;不應(yīng)含有瓊脂,A錯(cuò)誤;
B;分離、純化能降解PVC塑料膜的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源;B正確;
C;轉(zhuǎn)接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱臨時(shí)保存;對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種,可用甘油管藏的方法,C錯(cuò)誤;
D;如果對(duì)白色污染進(jìn)行傳統(tǒng)填埋、焚燒容易造成二次污染;黃粉蟲(chóng)腸道微生物對(duì)白色污染的降解不會(huì),D正確。
故選BD。12、A:B:C【分析】分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)的原理:①土壤中存在著大量纖維素分解酶;包括真菌;細(xì)菌和放線(xiàn)菌等,它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶,可以把纖維素分解為纖維二糖,進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用,故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中,纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng),其他微生物則不能生長(zhǎng)。②在培養(yǎng)基中加入剛果紅,可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被分解后,紅色復(fù)合物不能形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,從而可篩選纖維素分解菌。
【詳解】
A;根據(jù)Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上菌落分布均勻可知;②過(guò)程是用涂布器取乙中的樣品稀釋液均勻的涂布在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)表面,即乙中是分解纖維素菌的樣品稀釋液,不是菌液,A錯(cuò)誤;
B;液體培養(yǎng)基的作用是讓菌體增殖;而不是稀釋菌種,甲、乙試管中的液體都是樣品稀釋液,捕食液體培養(yǎng)基,B錯(cuò)誤;
C;配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板;故需要先調(diào)pH,再滅菌,C錯(cuò)誤;
D;剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物;若菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈,說(shuō)明纖維素分解菌將纖維素進(jìn)行了分解,可挑取該菌落用平板劃線(xiàn)法繼續(xù)純化該菌體,D正確。
故選ABC。13、A:C【分析】【分析】
本題考查興奮的傳導(dǎo)和傳遞特點(diǎn);植物向光性的原理、泡菜制作過(guò)程中亞硝酸鹽的含量變化、有氧呼吸的影響因素等知識(shí);知識(shí)跨度大,要求學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)能夠靈活運(yùn)用。
Ⅰ圖中,C、D、E、F分別表示四個(gè)興奮性神經(jīng)元,在C上給予一個(gè)適宜的刺激,產(chǎn)生的興奮可通過(guò)突觸傳遞到D神經(jīng)元和F神經(jīng)元,所以a、b電流表能檢測(cè)到電位變化。Ⅱ圖中;P;Q、R點(diǎn)對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)素濃度均為促進(jìn)作用,S點(diǎn)對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)素濃度為抑制作用。莖的向光生長(zhǎng)中,背光側(cè)和向光側(cè)的生長(zhǎng)素濃度均為促進(jìn)作用,且背光側(cè)的生長(zhǎng)素濃度大于向光側(cè)。酵母菌既可以進(jìn)行有氧呼吸,又可以進(jìn)行無(wú)氧呼吸,無(wú)氧呼吸的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),有氧呼吸的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線(xiàn)粒體。
【詳解】
A;興奮在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)是雙向的;興奮在突觸處的傳遞是單向的;C、D、E、F分別表示四個(gè)興奮性神經(jīng)元,所以刺激C神經(jīng)元,興奮能傳到兩個(gè)電流表的位置,兩個(gè)電流表都發(fā)生偏轉(zhuǎn),A正確;
B;對(duì)向光彎曲的植物而言;背光側(cè)生長(zhǎng)素的濃度大于向光側(cè),且背光側(cè)的生長(zhǎng)速度大于向光側(cè),若莖背光側(cè)為Q點(diǎn)(促進(jìn)作用最強(qiáng))對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)素濃度,則莖向光側(cè)對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)素濃度應(yīng)小于Q點(diǎn),B錯(cuò)誤;
C;泡菜制作過(guò)程中亞硝酸鹽是先增加;然后逐漸減低,最后穩(wěn)定在較低水平,所以Ⅲ圖中,曲線(xiàn)可以表示泡菜腌制過(guò)程中,亞硝酸鹽含量的變化,C正確;
D;氧氣濃度為0時(shí);細(xì)胞只能進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生ATP,但場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)不是線(xiàn)粒體,D錯(cuò)誤。
故選AC。三、填空題(共5題,共10分)14、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)容易較長(zhǎng)較慢無(wú)法路程較短較快15、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】不但可以節(jié)約時(shí)間,而且可以除去凝膠中可能帶有的微生物,排除凝膠內(nèi)的空氣16、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】變性、復(fù)性、和延伸90507217、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】1:4水蒸氣蒸餾難18、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】檸檬酸鈉防止血液凝固四、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共36分)19、略
【分析】【分析】
常用的固定化技術(shù):物理吸附法;化學(xué)結(jié)合法和包埋法。
【詳解】
(1)常用物理吸附法或化學(xué)結(jié)合法固定化酶;而不用包埋法,是因?yàn)槊阜肿虞^小,容易從包埋材料中漏出。由圖可知,活性炭組固定化酶的效率最高,達(dá)到將近60%。固定化酶的優(yōu)點(diǎn)是:可反復(fù)利用,易與反應(yīng)物分離。
(2)實(shí)驗(yàn)二的自變量是pH和三種載體固定化酶;因變量是氨基酸產(chǎn)生速率。溫度;污水的量等屬于無(wú)關(guān)變量。
(3)由圖2可知;在pH4.5至7之間,硅膠固定的蛋白酶活性最低,蛋白酶在三種載體上的最適pH均為5.5左右。
【點(diǎn)睛】
由于細(xì)胞體積大,酶分子?。惑w積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合,而體積小的酶容易從包埋材料中漏出,故酶更適合化學(xué)結(jié)合法或物理吸附法固定,細(xì)胞更適合包埋法固定?!窘馕觥棵阜肿虞^小,容易從包埋材料中漏出活性炭可反復(fù)利用,易與反應(yīng)物分離pH和三種載體固定化酶氨基酸的產(chǎn)生速率溫度、污水的量、固定化蛋白酶的量和反應(yīng)時(shí)間在pH4.5至7之間,硅膠固定的蛋白酶活性最低(或活性炭固定的蛋白酶活性最高)蛋白酶在三種載體上的最適pH均為5.5左右20、略
【分析】【分析】
自然界中目的菌株的篩選的依據(jù)是根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求;到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找.實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選的原理是利用選擇培養(yǎng)基人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng);溫度.pH等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。
微生物的滅菌方法主要有高壓蒸汽滅菌法;干熱滅菌和灼燒滅菌;接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法。
【詳解】
(1)要得到10-1的土壤懸液;圖1中①取5g土壤,則應(yīng)該加入45mL無(wú)菌水中充分震蕩。再繼續(xù)進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)ㄟ^(guò)稀釋涂布平板法進(jìn)行接種,每個(gè)濃度重復(fù)3次;避免冷凝水滴落造成污染,故將接種后的平板倒置放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí),根據(jù)菌落特征鑒別出芽孢桿菌并進(jìn)一步純化。
(2)通過(guò)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的對(duì)照原則和單因素變量原則;在圖1中,對(duì)照組的A處只接種蘋(píng)果腐爛病菌,實(shí)驗(yàn)組在A處接觸了蘋(píng)果腐爛病菌的四周接種B芽孢桿菌,培養(yǎng)3~5天,測(cè)量并計(jì)算抑菌率。通過(guò)圖2可的對(duì)照組,可測(cè)定A處蘋(píng)果腐爛病菌的直徑,且接種時(shí)蘋(píng)果腐爛病菌的直徑為5mm,則蘋(píng)果腐爛病菌的生長(zhǎng)直徑為D-5,實(shí)驗(yàn)組在A接種蘋(píng)果腐爛病菌的四周接種了芽孢桿菌,且有一定的抑菌效果,抑制蘋(píng)果腐爛病菌直徑的長(zhǎng)度為D-d,故抑菌率(%)=(D-d)/(D-5)×100%。
(3)通過(guò)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的對(duì)照原則和單因素變量原則以及無(wú)關(guān)變量適宜且相同分析表1;可知選材應(yīng)該選取“紅富士”品種健康的果樹(shù)枝條進(jìn)行消毒和打孔。通過(guò)單因素變量原則可知,對(duì)照組涂抹等量的無(wú)菌水,則實(shí)驗(yàn)組應(yīng)該涂抹等量的篩選出來(lái)的具有抗菌作用的芽孢桿菌。通過(guò)表2中數(shù)據(jù)分析可知:隨著發(fā)酵濾液稀釋倍數(shù)的不斷增加,病斑面積不斷擴(kuò)大,抑菌率逐漸降低,故發(fā)酵原液(即不稀釋的芽孢桿菌菌液)對(duì)蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌有明顯的抑制作用。
(4)生物防治與化學(xué)防治相比;生物防治具有降低環(huán)境污染;減少化學(xué)藥劑在果實(shí)中的殘留;對(duì)其他生物擾動(dòng)小等的優(yōu)勢(shì)。
【點(diǎn)睛】
本題主要考查目的菌株的篩選、接種方法和培養(yǎng)基的配制注意事項(xiàng)等相關(guān)知識(shí),意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作的識(shí)記、理解與運(yùn)用。【解析】45涂布平板倒置菌落蘋(píng)果腐爛病菌芽孢桿菌D-d健康不同稀釋倍數(shù)的抗菌菌株發(fā)酵濾液病斑面積不斷擴(kuò)大,抑菌率逐漸降低降低環(huán)境污染;減少化學(xué)藥劑在果實(shí)中的殘留;對(duì)其他生物擾動(dòng)小21、略
【分析】【分析】
1;“一個(gè)菌落”是同種細(xì)菌的群體;在生態(tài)學(xué)中屬于一個(gè)種群。稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里,將聚集在一起的菌種分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。在進(jìn)行菌種純化時(shí),還可以采用平板劃線(xiàn)法進(jìn)行。
2;分離計(jì)數(shù)微生物的方法:顯微鏡直接計(jì)數(shù)法和稀釋涂布平板法。
3;分離純化蛋白質(zhì)的方法:凝膠色譜法和凝膠電泳法。
【詳解】
(1)在獲得髙產(chǎn)青霉素?;傅奈⑸飼r(shí);從理論上分析選擇對(duì)巨大芽孢桿菌進(jìn)行誘變處理后,篩選出的髙產(chǎn)菌株更有利于生產(chǎn),原因是巨大芽孢桿菌產(chǎn)生的青霉素酰胺酶是胞外酶,對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行分離提純即可獲得青霉素?;?,而菌體可以繼續(xù)進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)。
(2)在研究中發(fā)現(xiàn);髙產(chǎn)菌株會(huì)產(chǎn)生多種分子量不同的酶,且均不會(huì)被RNA酶降解。在分離純化青霉素?;笗r(shí),適合采用透析和凝膠色譜法;之后需要對(duì)其純度進(jìn)一步鑒定,使用最多的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。
(3)除顯微鏡直接計(jì)數(shù)法外;還常用稀釋涂布平板法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),其原理是在稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落來(lái)源于(稀釋液中的)一個(gè)活菌。為防止人員感染和污染環(huán)境,實(shí)驗(yàn)人員離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí),一定要做的事情是洗手或用酒精對(duì)雙手消毒等;使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理,防止被細(xì)菌感染。
【點(diǎn)睛】
本題綜合考查了微生物的培養(yǎng)、分離、純化的方法步驟等內(nèi)容,同時(shí)考查了學(xué)生的識(shí)記能力和分析問(wèn)題的能力,運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力。【解析】巨大芽孢桿菌巨大芽孢桿菌產(chǎn)生的青霉素酰胺酶是胞外酶,對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行分離提純即可獲得青霉素?;竿肝龊湍z色譜SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳稀釋涂布平板在稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落來(lái)源于(稀釋液中的)一個(gè)活菌洗手或用酒精對(duì)雙手消毒等、使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理22、略
【分析】【分析】
1;血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有:
(1)樣品處理:①紅細(xì)胞的洗滌;②血紅蛋白的釋放,③分離血紅蛋白溶液;
(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液;②透析;
(3)純化:調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì);
(4)純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。
2;將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中;離心后,可以明顯看到試管中的溶液分為4層,從上向下依次是有機(jī)溶劑層、脂類(lèi)物質(zhì)層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層,即第三層為紅色透明的血紅蛋白溶液層。
【詳解】
(1)血紅蛋白由4條肽鏈組成;包括2條α肽鏈和2條β肽鏈;血紅蛋白因含有血紅素而呈紅色,這有利于對(duì)提取過(guò)程的觀察及監(jiān)測(cè)。
(2)紅細(xì)胞浸潤(rùn)在血漿中;血漿中含豐富的血漿蛋白,洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白,以利于血紅蛋白的分離和純化;將樣品稀釋后轉(zhuǎn)移至離心管中,離心后選取下層暗紅色的紅細(xì)胞液體并將其轉(zhuǎn)入燒杯中,加入5倍體積的生理鹽水進(jìn)行洗滌。
(3)將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中;離心后,可以明顯看到試管中的溶液分為4層,從上向下依次是有機(jī)溶劑層;脂類(lèi)物質(zhì)層、血紅蛋白溶液和紅細(xì)胞破碎物沉淀層,即第三層為紅色透明的血紅蛋白溶液層,由分析可知,血紅蛋白分布在圖2的③層。
(4)將濾液裝入透析袋中;透析袋具有選擇透過(guò)性,分子量小的可以通過(guò),分子量大的蛋白質(zhì)等則不能通過(guò),故透析可除去分子量較小的雜質(zhì)。
【點(diǎn)睛】
易錯(cuò)點(diǎn):血紅蛋白是紅細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸氧氣的蛋白質(zhì),血漿蛋白是血漿內(nèi)的大分子蛋白質(zhì),可以維持血漿滲透壓,提取血紅蛋白時(shí)注意將二者先分離?!窘馕觥?條α一肽鏈和2條β肽鏈血紅素去除雜蛋白,以利于血紅蛋白的分離和純化下層生理鹽水③分子量較小五、綜合題(共4題,共16分)23、略
【分析】【分析】
蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步:樣品處理;粗分離、純化、純度鑒定。樣品處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放和分離血紅蛋白溶液;通過(guò)透析對(duì)血紅蛋白溶液進(jìn)行粗分離;透析的原理是透析袋能使小分子自由進(jìn)出而大分子則保留在袋內(nèi),從而除去分子量較小的雜質(zhì);然后通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量魘雜質(zhì)蛋白除去,從而對(duì)樣品進(jìn)一步純合,最后SDS—聚丙烯酰凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。在B過(guò)程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0)的目的是模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境(保持體外pH和體內(nèi)一致、保持蛋白質(zhì)的正常結(jié)構(gòu)、維持洗脫所需的壓力等合理答案均可);如果紅色區(qū)帶均勻一致的移動(dòng),說(shuō)明色譜柱制作成功。
【詳解】
(1)樣品處理過(guò)程為:紅細(xì)胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析;所以A表示血紅蛋白的釋放,B表示樣品的加入和洗脫。凝膠色譜法的原理是分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快,分子小的進(jìn)入多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長(zhǎng),流動(dòng)慢,從而根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小達(dá)到分離蛋白質(zhì)的有效方法。
(2)用紅細(xì)胞的等滲溶液洗滌紅細(xì)胞可以除去血漿蛋白;由于蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì),若洗滌次數(shù)過(guò)少,難以除去血漿蛋白;離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀。達(dá)不到分離紅細(xì)胞的效果。若離心后的上清液中沒(méi)有黃色,說(shuō)明洗滌干凈。將紅細(xì)胞置于蒸餾水中可使紅細(xì)胞吸水漲破,釋放出血紅蛋白;甲苯可以溶解細(xì)胞膜,以利于血紅蛋白的釋放,所以實(shí)驗(yàn)流程A中發(fā)揮作用的試劑有蒸餾水和甲苯。
(3)裝填凝膠色譜柱時(shí);色譜柱內(nèi)裝填要緊密,不能有氣泡存在,否則氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果,導(dǎo)致紅色區(qū)帶不均勻。血紅蛋白中含有4條多肽鏈,其中兩條是ɑ鏈,兩條是β鏈,兩種分子量不同的多肽鏈,所以通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)血紅蛋白樣品進(jìn)行純度鑒定時(shí),凝膠上出現(xiàn)2條電泳條帶說(shuō)明血紅蛋白分子純度為100%。
【點(diǎn)睛】
本題考查血紅蛋白的提取和分離,對(duì)于此類(lèi)試題,需要考生注意的細(xì)節(jié)較多,如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用、實(shí)驗(yàn)步驟等,需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累?!窘馕觥垦t蛋白的釋放樣品的加入和洗脫相對(duì)分子質(zhì)量的大小雜蛋白(血漿蛋白)離心后的上清液不再呈黃色蒸餾水和甲苯色譜柱裝填不緊密,有氣泡224、略
【分析】【分析】
【詳解】
(1)微生物接種常用稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法,為了避免其它雜菌的污染,接種過(guò)程要進(jìn)行無(wú)菌操作,接種前對(duì)接種環(huán)灼燒就是為了殺滅接種環(huán)上的微生物。
(2)蔗糖主要提供碳源,也可以作為能源物質(zhì),硝酸鹽含氮元素,可提供氮源。
(3)胡蘿卜素不是很穩(wěn)定,溫度過(guò)高、干燥時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致其分解;由于萃取劑往往具有揮發(fā)性,且易燃燒,如果直接加熱揮發(fā)出來(lái)的有機(jī)溶劑遇明火易燃燒爆炸;萃取后需將原料中的固體物濾去。
(4)用標(biāo)準(zhǔn)樣品可對(duì)照檢查提取出來(lái)的胡蘿卜素的純度?!窘馕觥竣?稀釋涂
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