2025屆高考生物二輪復(fù)習(xí)：生物技術(shù)（含解析）

專題十二-1生物技術(shù)

基礎(chǔ)鞏固

1.稀釋涂布平板法是分離菌種常用的方法，下列相關(guān)敘述不恰當(dāng)?shù)氖牵ǎ?/p>

A.固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至50℃左右時(shí)倒平板

B.倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影響菌的生長(zhǎng)

C.稀釋涂布平板法分離到的單菌落需進(jìn)一步劃線純化

D.稀釋涂布平板法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計(jì)數(shù)

2.如圖為兩種純化微生物的接種方法。下列相關(guān)描述正確的是（）

A.①為平板劃線法，所用接種工具為接種環(huán)

B.②為稀釋涂布平板法，所用接種工具為接種針

C.①②方法均可進(jìn)行微生物的分離與計(jì)數(shù)

D.②方法計(jì)數(shù)的微生物數(shù)量往往比實(shí)際數(shù)目多3.下列關(guān)于果酒、果醋和

腐乳制作的敘述，正確的是（）

A.腐乳制作過(guò)程中，有機(jī)物種類增加，含有的能量減少

B.缺氧、呈酸性的發(fā)酵液，酵母菌能大量生長(zhǎng)繁殖，醋酸菌則不能正常生長(zhǎng)

C.在糖源和氧氣都充足時(shí)，醋酸菌能將葡萄糖分解成乙醇和二氧化碳

D.為了防止發(fā)酵液受污染，應(yīng)將選取的葡萄先去枝梗，再?zèng)_洗多次然后使用

4.發(fā)酵工程一般包括菌種的選育、擴(kuò)大培養(yǎng)、培養(yǎng)基的配制、滅菌、接種、發(fā)酵、產(chǎn)品的分

離、提純等環(huán)節(jié)。下面有關(guān)分析正確的是（）

A.優(yōu)良菌種只能通過(guò)誘變育種或基因工程育種來(lái)獲得

B.擴(kuò)大培養(yǎng)的目的是提高接種時(shí)發(fā)酵罐中菌種的數(shù)目

C.發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是滅菌，特別是培養(yǎng)基和發(fā)酵罐必須進(jìn)行嚴(yán)格滅菌

D.若發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，可采用提取、純化措施來(lái)獲得產(chǎn)品

5.勤洗手是預(yù)防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒期間推出一款新型免洗洗

手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果，研究人員檢測(cè)了用凝膠洗手前后手部細(xì)菌的含量。凝膠

洗手前的檢測(cè)流程見(jiàn)下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是平板劃線法

B.除圖中操作外，還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

C.培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落只可能來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌

D.初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，需要用顯微鏡觀察菌體的形狀

6.某研究小組對(duì)非滅菌的一次性口罩中的微生物進(jìn)行檢測(cè)，部分操作如下：從口罩上剪取總

量9cm2樣品（體積近似1mL）,剪碎后加入已滅菌的生理鹽水中，定容至10mL,充分混

勻，得到樣液。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.取4個(gè)經(jīng)滅菌處理的培養(yǎng)皿，將冷卻到4（TC的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，待培養(yǎng)基凝固后，將平

板倒置

B.向前3個(gè)平板中分別加入1mL樣液，用涂布器將樣液涂布均勻

C.第4個(gè)平板不接種樣液并與前3個(gè)平板共同培養(yǎng)，可用于檢測(cè)是否有雜菌污染

D.若一段時(shí)間后，4個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)依次為31、42、35和0個(gè)，可計(jì)算出len?口罩樣

品中菌體數(shù)量為36個(gè)

7.某同學(xué)想利用如圖所示的裝置來(lái)制作葡萄酒和葡萄醋。下列敘述正確的是（）

充氣口飛排氣口

出料口三三三弓

A.制作果酒時(shí)，需要將發(fā)酵瓶裝滿發(fā)酵液

B.制作果醋時(shí)，圖中的充氣口應(yīng)保持開(kāi)放

C.開(kāi)始發(fā)酵前，先除去枝梗，之后將新鮮葡萄清洗干凈

D.酵母菌與醋酸菌呼吸作用產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所完全相同

8.微生物培養(yǎng)過(guò)程中，要十分重視無(wú)菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面也要進(jìn)行無(wú)菌操

作，防止雜菌污染，下列操作中錯(cuò)誤的是（）

①煮沸消毒可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽抱

②接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行

③家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌

④培養(yǎng)基要在干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌

⑤滅菌后的培養(yǎng)基要先調(diào)試pH值，然后在酒精燈火焰附近接種

A.①②③B.①②④C.②③④D.③④⑤

9.研究者用酸筍開(kāi)發(fā)具有降低膽固醇功能的益生菌。步驟一：酸筍發(fā)酵液接種到含有CaCCh

的固體培養(yǎng)基上，篩選出乳酸菌。步驟二：將乳酸菌接種到含有膽固醇的培養(yǎng)液中，篩選出

能夠降解膽固醇的乳酸菌。相關(guān)敘述不正確的是（）

A.腌制酸筍需要水封，為乳酸菌發(fā)酵提供無(wú)氧環(huán)境

B.將酸筍發(fā)酵液用稀釋涂布法接種到固體培養(yǎng)基中

C.溶鈣圈直徑與菌落直徑比值大的菌落為步驟一的目標(biāo)菌落

D.膽固醇屬于脂質(zhì)，主要為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源

10.甜米酒是我國(guó)的傳統(tǒng)酒種，某釀酒廠以無(wú)核黃皮果（富含維生素、有機(jī)酸及特殊的香味）

為輔料研制出黃皮果甜米酒。制作黃皮果甜米酒的工藝流程如圖1所示。甜酒曲含有微生物

和淀粉酶等，回答下列問(wèn)題：

甜酒曲黃酒高活性干酵母（YWBY）

糯米-浸泡-蒸煮一攤冷一落缸-主發(fā)酵-后發(fā)酵一壓榨一濾清一殺菌f檢驗(yàn)一成品（1）圖1中

黃皮果一干燥—稀碎

圖1

加入甜酒曲的目的除提供少量菌種外，還能;主發(fā)酵中酵母菌的呼吸作用方式為

（2）獲得高活性酵母過(guò)程中，需要用到選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基的要求是既要允許特定微生

物的生長(zhǎng)，又要O

（3）在制作黃皮果甜米酒的過(guò)程中，為確定黃酒高活性干酵母（YWBY）的添加量，研究人

員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示。根據(jù)制作黃皮果甜米酒的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，YWBY

的最佳接種量是%-YWBY接種量為0.12%時(shí)酒精含量最低的原因可能是

16

14

摘12

鑿8—0.06%YWBY接種量

\6-—0.08%YWBY接種量

4-1L0.10%YWBY接種量

2-—O-0.12%YWBY接種量

12345678910111213

發(fā)酵時(shí)間/天明

圖2

（4）研究人員發(fā)現(xiàn)從發(fā)酵第8天開(kāi)始，作為底物的還原糖的含量基本不再減少，可能的原因

是。

能力提高

n.細(xì)菌代謝產(chǎn)生的脂肽是一種生物表面活性劑，能有效分解環(huán)境中的石油等污染物，且分解

后的產(chǎn)物對(duì)自然環(huán)境無(wú)害。下列敘述正確的是（）

A.為篩選出高產(chǎn)脂肽的菌株，可在校園內(nèi)隨機(jī)采取土樣

B.用以石油為唯一碳源的液體培養(yǎng)基可分離得到單個(gè)菌落

c.使用顯微鏡直接計(jì)數(shù)所得的結(jié)果往往大于實(shí)際活菌數(shù)

D.可用干熱滅菌法對(duì)配制好的培養(yǎng)基和接種環(huán)進(jìn)行滅菌

12.細(xì)菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在與其他細(xì)菌的競(jìng)爭(zhēng)中占優(yōu)勢(shì)，其中tcel蛋白是一

種有毒性的分泌蛋白。研究人員利用野生型細(xì)菌X及其不同突變體進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：在固體

培養(yǎng)基表面放置一張能隔離細(xì)菌的濾膜，將一種菌（下層菌）滴加在濾膜上后再放置第二張

濾膜，滴加等量的另一種菌（上層菌），共同培養(yǎng)后，對(duì)上、下層菌計(jì)數(shù)得到的結(jié)果如圖所

示。下列敘述正確的是（）

(

啾

嶷6~

通

K映7姐

*、

然

通

3W

)T

上層菌：野生型野生型野生型

下層菌：野生型tcel-tciltcel突變體

雙突變體

A.實(shí)驗(yàn)中的培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基和濾膜均需要進(jìn)行消毒處理

B.對(duì)上、下層菌計(jì)數(shù)可以將濾膜菌體稀釋后采用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)

C.由甲、乙，丙三組結(jié)果可推測(cè)tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性

D.野生型細(xì)菌X在與tcel—tcil雙突變體和tcel突變體的競(jìng)爭(zhēng)中均占優(yōu)勢(shì)

13.稀釋涂布平板法和稀釋倒平板法是分離微生物的兩種方法。稀釋倒平板法是指將稀釋的菌

液和瓊脂混合，然后將其倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)。下列說(shuō)法正確的是（）

A.培養(yǎng)過(guò)程中所用的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿均可采用濕熱滅菌法

B.兩種方法均可通過(guò)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)活菌的準(zhǔn)確計(jì)數(shù)

C.稀釋倒平板法對(duì)好氧菌、熱敏感菌的分離效果優(yōu)于稀釋涂布平板法

D.為了防止培養(yǎng)基溫度過(guò)高殺死微生物，應(yīng)將瓊脂冷卻至室溫后再倒平板

14.利用楊木生產(chǎn)燃料乙醇的基本流程主要包括原料粉碎、提高纖維素濃度的預(yù)處理、釋放單

糖的酶解糖化、產(chǎn)生乙醇的微生物發(fā)酵、乙醇脫水的蒸儲(chǔ)工藝等步驟（預(yù)處理過(guò)程所需的果

膠酶常來(lái)自于黑曲霉等微生物）。下圖為發(fā)酵階段菌種接種量對(duì)發(fā)酵結(jié)果的影響。下列說(shuō)法

正確的是（）

殘

酒?酒精含量-殘?zhí)呛?

3

糖

精0

含

3含

量

5量

2

、9.0/

%0叫

v8.821

。

5。

一

8.61。

8.410嗎

8.25

8.00

78051015202530°

菌種接種量/%

A.培養(yǎng)黑曲霉時(shí)一般需將培養(yǎng)基調(diào)至酸性，果膠酶是黑曲霉分泌的一種單細(xì)胞蛋白

B.在伊紅一亞甲藍(lán)培養(yǎng)基上可篩選出高產(chǎn)纖維素酶的菌株用于酶解糖化過(guò)程

C.接種的菌種為酵母菌，當(dāng)接種量為12%左右時(shí)，發(fā)酵后的酒精含量與殘?zhí)呛肯嗟?/p>

D.接種量超過(guò)15%時(shí)酒精產(chǎn)量反而有所降低的原因可能是菌種生長(zhǎng)消耗大量的糖分

15.從自然界中篩選具有優(yōu)良性狀的菌種的一般步驟為：采集樣品-富集培養(yǎng)（使菌體數(shù)量增

多）—純種分離一性能測(cè)定，如圖a、b是采用兩種接種方法接種后純化培養(yǎng)的效果圖。下列

相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.可使用液體培養(yǎng)基進(jìn)行富集培養(yǎng)

B.為獲得純種的目的菌種，需對(duì)采集的樣品進(jìn)行滅菌

C.獲得圖a所示結(jié)果的接種過(guò)程中，接種環(huán)需灼燒滅菌4次

D.利用圖b計(jì)算出樣品中菌體濃度為5.85x108個(gè)/ml,則接種稀釋液的稀釋倍數(shù)為106倍

16.釀酒和釀醋在我國(guó)已經(jīng)有上千年的歷史?！洱R民要術(shù)》中有關(guān)于釀酒的記載：“浸曲三

日，如魚(yú)眼湯沸，酸米。其米絕令精細(xì)”；有關(guān)“動(dòng)酒?。ā磅　蓖按住保┓ā钡尼劥坠に?，“大率

酒一斗，用水三斗，合甕盛，置日中曝之。七日后當(dāng)臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停

置，勿移動(dòng)，撓攪之。數(shù)十日，醋成”。下列敘述不正確的是（）

A.各地釀酒的原材料不同，但發(fā)酵過(guò)程中起主要作用的均是酵母菌

B.溫度影響釀酒和釀醋，釀酒過(guò)程中，酵母菌的發(fā)酵溫度為30-35C

C.釀醋時(shí)，加水稀釋的目的是避免酒精濃度過(guò)高抑制醋酸菌的生長(zhǎng)繁殖

D.“衣（指菌膜）生”是醋酸菌在發(fā)酵液表面大量繁殖形成的菌膜

17.我國(guó)科學(xué)家對(duì)新疆小河墓地出土的古代發(fā)酵奶制品進(jìn)行國(guó)際首例研究，揭示人類對(duì)乳酸菌

的應(yīng)用、傳播和馴化歷史。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.乳酸菌是原核生物，其代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，因此制作奶酪時(shí)需密封處理

B.乳酸菌基因組演化是本身的適應(yīng)性演化和人類長(zhǎng)時(shí)間馴化的共同結(jié)果

C.乳酸菌發(fā)酵生產(chǎn)的奶酪中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)更易吸收，避免引起乳糖不耐受

D.為了縮短發(fā)酵時(shí)間、確保品質(zhì)穩(wěn)定，工業(yè)上大規(guī)模生產(chǎn)奶酪采用的是純凈的乳酸菌

18.青梅果實(shí)中含有大量的齊墩果酸、丙酮酸等活性物質(zhì)，常制作成具有保健功能的青梅飲

品，其中青梅酒和青梅醋深受人們喜愛(ài)，其制作流程如下圖。下列敘述正確的是（）

青梅鮮果一破碎一酶解包箜青梅漿雪靖遜］~?酒渣分離一后發(fā)酵一滅菌裝瓶一青梅酒

反應(yīng)①」———?過(guò)濾一滅菌裝瓶一青梅醋

A.生物A和生物C都能進(jìn)行無(wú)氧呼吸并產(chǎn)生CO2

B.可以用胰蛋白酶和果膠酶進(jìn)行酶解以破壞細(xì)胞壁

C.由反應(yīng)①到反應(yīng)②需要提高溫度并改善通氣狀況

D.可用澄清的石灰水來(lái)檢測(cè)溶液B中是否含有乙醇

19.在中國(guó)，龍山文化時(shí)期（約公元前4000至4200年）已經(jīng)有酒器的出現(xiàn)，《周禮天宮》中

也記載了主管王室、官用造酒事的“酒正”“酒人”等官職，顯示了當(dāng)時(shí)的釀酒業(yè)已經(jīng)專業(yè)化。

下列有關(guān)發(fā)酵工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.制作果酒時(shí)酵母菌一般來(lái)自果實(shí)的表皮，制作過(guò)程需保持持續(xù)通氣

B.制作泡菜時(shí)，腌制時(shí)間過(guò)短可能會(huì)導(dǎo)致亞硝酸含量偏高

C.“釀酒不成反成醋”可能是發(fā)酵容器密封不嚴(yán)，醋酸菌進(jìn)行有氧呼吸的結(jié)果

D.制作腐乳時(shí)毛霉產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基酸

20.小白菜根系部分微生物具有分解有機(jī)磷的能力，科研人員從中篩選出了分解能力強(qiáng)的菌

株，并對(duì)培養(yǎng)條件的優(yōu)化進(jìn)行了研究，以期為微生物肥料的開(kāi)發(fā)提供依據(jù)，部分研究步驟如

下。

步驟1：小白菜根系微生物的分離純化

取10g小白菜根系土壤加入盛有90mL無(wú)菌水的錐形瓶中，充分搖勻并依次進(jìn)行等比稀釋。

分別將稀釋度10-2?IO*、10-3?IO?10-6?IO*的菌液接種到真菌、放線菌、細(xì)菌的培養(yǎng)基

中，置于適宜條件下培養(yǎng)。

步驟2：小白菜根系解磷微生物的篩選

挑取步驟1中培養(yǎng)基上的不同單菌落接種到有機(jī)磷培養(yǎng)基A上，培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察菌落及

透明圈大?。ü腆w培養(yǎng)基中有機(jī)磷在微生物的作用下溶解，會(huì)在菌落周?chē)纬赏该魅Γ?，結(jié)

果如下圖（圖中字母和數(shù)字組合代表菌株種類）。

步驟3：菌株解磷能力的測(cè)定

將初步篩選的3種菌株分別接種到有機(jī)磷培養(yǎng)基B中進(jìn)行培養(yǎng)，定期取上清液，測(cè)定溶液中

可溶性磷含量。

步驟4：解磷菌株培養(yǎng)條件的優(yōu)化

配制有機(jī)磷培養(yǎng)基時(shí)分別使用葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、甘露醇作為碳源，并分別設(shè)置不

同轉(zhuǎn)速進(jìn)行搖床培養(yǎng)，72小時(shí)后檢測(cè)培養(yǎng)液中可溶性磷含量，結(jié)果如下圖。

35O35O

霸

容30O30O

潮

潮

25OO

胸*25

杳

春20O20O

涌?

O

(15(15O

gvOgFO

.10m.10

LmOlO

L5l/5

)O)O

蔗糖可溶性淀粉甘露醇120140160180200220

碳源轉(zhuǎn)速「min"

回答下列問(wèn)題。

（1）步驟1取不同稀釋度菌液接種到不同種類培養(yǎng)基的原因是O

（2）步驟2使用的接種工具為,接種前需進(jìn)行,以防止雜菌污染。接種

時(shí)，可根據(jù)菌落的挑取不同類型菌株分別接種到培養(yǎng)基A上。培養(yǎng)結(jié)果初步表明，

FG5解磷能力最強(qiáng)，依據(jù)是o

（3）與步驟2中培養(yǎng)基A相比，步驟3中培養(yǎng)基B在成分上的主要差異是。經(jīng)測(cè)

定，培養(yǎng)FG5的上清液中,則可確認(rèn)FG5的解磷能力最強(qiáng)。

（4）步驟4進(jìn)行搖床培養(yǎng)時(shí)，轉(zhuǎn)速過(guò)低溶液中可溶性磷含量不高，可能原因是，但

轉(zhuǎn)速過(guò)高容易導(dǎo)致,從而影響其解磷能力。

（5）綜上研究，在實(shí)驗(yàn)條件下為更好地實(shí)現(xiàn)有機(jī)磷的降解，你的建議是。

思維拓展

21.我國(guó)勞動(dòng)人民利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作出大量美味食品，如醬油、腐乳、豆豉等，傳承和發(fā)

揚(yáng)了中華優(yōu)秀傳統(tǒng)飲食文化。隨著科技的發(fā)展，現(xiàn)代發(fā)酵工程在食品領(lǐng)域的應(yīng)用更加廣泛。

下列關(guān)于發(fā)酵的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.工業(yè)化生產(chǎn)啤酒時(shí)，酵母菌的繁殖主要在主發(fā)酵階段完成

B.腐乳和果醋都是在厭氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生的傳統(tǒng)食品

C.水封泡菜壇的目的是隔絕空氣，確保壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵處于無(wú)氧環(huán)境中

D.泡菜“咸而不酸”是因?yàn)辂}水濃度過(guò)高，抑制了乳酸菌發(fā)酵

22.乳酸鏈球菌素（Nisin）是乳酸鏈球菌分泌的一種抗菌肽。研究者對(duì)Nisin發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程相

關(guān)指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果如圖。下列敘述不正確的是（）

A.適度提高乳酸鏈球菌接種量可縮短N(yùn)isin發(fā)酵生產(chǎn)周期

B.發(fā)酵的中后期適量補(bǔ)加蔗糖溶液可促進(jìn)菌體生長(zhǎng)

C.向發(fā)酵罐內(nèi)適時(shí)適量添加堿溶液可提高Nisin產(chǎn)量

D.發(fā)酵結(jié)束后主要通過(guò)收獲并破碎菌體以分離獲得Nisin產(chǎn)品

23.為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示.下列敘述正確的

是（）

A.圖中I、II區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從HI區(qū)挑取單菌落

B.倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整

C.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的

D.菌落周?chē)睦w維素被降解后，可被剛果紅染成紅色

24.某雜種植株的獲取過(guò)程如圖所示，下列有關(guān)分析正確的是（）

一c保溫冊(cè)，八長(zhǎng)吸掉口酶液II駕4心原原生質(zhì)體

撕去下表皮⑤

＞細(xì)胞雜交一雜交植株

先心消酶溶液及滲透壓穩(wěn)原生質(zhì)體沉厚牛已沂于

彗成定劑,葉段漂浮其上于培養(yǎng)皿底與雅翼于細(xì)胞碎片

A.葉片經(jīng)消毒后需用流水多次沖洗，以避免消毒劑長(zhǎng)時(shí)間作用而產(chǎn)生毒害作用

B.圖示①過(guò)程采用酶解法獲取原生質(zhì)體時(shí)，可用聚乙二醇調(diào)節(jié)滲透壓

C.圖示②過(guò)程通過(guò)抽真空處理使酶溶液滲入細(xì)胞間隙，提高酶解效率

D.經(jīng)④過(guò)程獲得的雜種細(xì)胞經(jīng)鑒定和篩選后進(jìn)行植物組培，獲得的幼苗即可用于生產(chǎn)實(shí)踐

25.發(fā)酵工程在工業(yè)生產(chǎn)上得到廣泛的應(yīng)用，下圖是發(fā)酵工程生產(chǎn)產(chǎn)品的流程簡(jiǎn)圖。下列敘述

錯(cuò)誤的是（）

從自然界分離的菌種

II+

?@?

II

生產(chǎn)用菌種原料

I

擴(kuò)大培養(yǎng)培養(yǎng)基配制

發(fā)酵罐

內(nèi).酵

分離|提純

I~I

⑥⑦

A.若生產(chǎn)人胰島素的工程菌是通過(guò)①獲得的，則①是基因工程

B.在生產(chǎn)實(shí)踐中，培養(yǎng)基的配方需要經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)才能確定

C.發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是④，需嚴(yán)格控制溫度、pH等條件

D.若⑥是微生物本身，可采用過(guò)濾、沉淀等方法將菌體分離

26.隔夜菜到底能不能吃一直是爭(zhēng)議比較大的話題。隔夜菜中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽與人

體中某些蛋白質(zhì)的分解物合成亞硝胺類化合物，這些亞硝胺類化合物容易引發(fā)癌癥。某興趣

小組進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)不同儲(chǔ)存條件下隔夜菜中的亞硝酸鹽含量和菌落總數(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表

所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）

表1不同菜品在不同儲(chǔ)存條件下的亞硝酸鹽含量（單位:mg/kg）

Oh6h12h24h

樣品名稱

/4℃25℃4℃25℃4℃25℃

紅燒牛肉<1<1<1<1<1<13.2

炒大白菜<1<1<1<112.8<1>100

涼拌黃瓜<1<1<1<114.2<130.4

表2不同菜品在不同儲(chǔ)存條件下的菌落總數(shù)（單位:個(gè)）

樣品名稱Oh6h12h24h

/4℃25℃4℃25℃4℃25℃

紅燒牛肉<100<100100<1006.2xl05<1004.8xl08

炒大白菜<100<1002.2X104<1004.4xl07<1005.9xl08

涼拌黃瓜7.1X1058.3X1051.9xl069.2X1054.4xl089.5X1051.9xl09

A.統(tǒng)計(jì)菜品中的菌落數(shù)時(shí)，可以采用稀釋涂布平板法或平板劃線法

B.低溫下菜品中亞硝酸鹽含量、菌落總數(shù)均較少與酶的變性失活有關(guān)

C.菜品中菌落總數(shù)越多，亞硝酸鹽含量越高

D.相對(duì)于肉類菜品，蔬菜類菜品更不適于隔夜食用

27.“（卬》）糜、糖化、發(fā)酵、壓榨、陳儲(chǔ)”是即墨老酒生產(chǎn)的五個(gè)環(huán)節(jié)。“熠糜”，將泡好的大黃

米放入鍋中不斷添漿加溫熬煮、攪拌而制成紅棕色、錚亮、黏稠的粥；“糖化”，將好的糜降

溫到適當(dāng)?shù)臏囟群蠹尤岁惙溓⒉粩鄶嚢瑁蛊渚鶆虻幕旌显谝黄?；“發(fā)酵”，將糖化好的

糜放上酵母發(fā)酵。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.靖糜的主要目的是除去發(fā)酵產(chǎn)品中的雜菌，利于酵母菌繁殖

B.糖化階段降溫的目的是防止殺死陳伏麥曲中的微生物

C.發(fā)酵初期要適當(dāng)提供02,發(fā)酵過(guò)程中需調(diào)節(jié)pH并保持適宜的溫度

D.陳儲(chǔ)有利于老酒中醇與酸發(fā)生反應(yīng)，使酒更加芳香

28.我國(guó)利用微生物發(fā)酵制作食品的歷史悠久，在多種文獻(xiàn)中均有記載。①《齊民要術(shù)》中記

載：“作鹽水，令極咸，于鹽水中洗菜，即內(nèi)雍中?！雹凇侗鄙骄平?jīng)》中記載：“每壇加蠟三

錢(qián)，竹葉五片，隔水煮開(kāi)，乘熱灌封壇口。”③《齊民要術(shù)》中利用谷物釀制食醋的工藝，主

要發(fā)酵過(guò)程為：糖化一酒化一醋化。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.①是泡菜制作過(guò)程，鹽水應(yīng)煮沸冷卻后使用，以防止殺死發(fā)酵菌

B.②中加熱殺菌保存酒液的原理，與釀酒使用的巴氏消毒法基本相同

C.③中氧氣充足時(shí)糖先轉(zhuǎn)化為酒再轉(zhuǎn)化為醋，氧氣不足時(shí)糖直接轉(zhuǎn)化為醋

D.③中從酒化到醋化的過(guò)程需要移至溫度較高的環(huán)境中，并通氣

29.啤酒發(fā)酵依賴于發(fā)酵工程，產(chǎn)品質(zhì)檢可應(yīng)用“電子舌”，電子舌可根據(jù)不同滋味信號(hào)傳感器

呈現(xiàn)的響應(yīng)值對(duì)啤酒風(fēng)味進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果如圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

酸味

?LI

▼L2

OL3

A.啤酒主要經(jīng)酵母菌和乳酸菌發(fā)酵制成

B.發(fā)酵原料應(yīng)含有糖類作為發(fā)酵菌種的碳源

C.發(fā)酵液L1和L2口味相似，而L3澀味較強(qiáng)

D.菌種選育可依賴于誘變育種或基因工程育種

30.反硝化細(xì)菌是一類能將硝態(tài)氮（NO3—N）通過(guò)一系列中間產(chǎn)物（NO2,NO、N2O）還原

為氣態(tài)氮（N2）的細(xì)菌群，反硝化作用也是產(chǎn)堿過(guò)程。反硝化細(xì)菌對(duì)于解決水體富營(yíng)養(yǎng)化和

亞硝酸鹽對(duì)水生動(dòng)物的毒害，具有十分重要的意義。某課題小組通過(guò)采集活性污泥樣品，并

從中分離反硝化細(xì)菌，研究影響菌株反硝化作用的主要環(huán)境因素，為反硝化細(xì)菌在養(yǎng)殖廢水

處理應(yīng)用中提供理論指導(dǎo)。反硝化細(xì)菌的分離和鑒定流程如下，回答下列問(wèn)題：

樣品采臬卜叵臬培養(yǎng)H反硝化細(xì)菌檢舞H輔釋雄布卜療弓實(shí)驗(yàn)H幽腫鱉定

（1）將采集的活性污泥樣品1mL加入到裝有9mL、pH7.2的磷酸鹽緩沖液的100mL燒杯

中，取樣接種到富集培養(yǎng)基中培養(yǎng)，富集培養(yǎng)基的成分有：KNO32g,FeSO40.2g,

KH2PO41.0g,MgSO40.5g,NaC12g,CaCO35g,其中為反硝化細(xì)菌提供氮源的是富集

培養(yǎng)的目的是。

（2）將富集后的樣品進(jìn)行梯度稀釋后，使用（填工具）將樣液均勻涂布在BTB培養(yǎng)基

（BTB培養(yǎng)基初始pH=6.8,BTB是酸堿指示劑，酸性條件下為黃色，中性條件下為綠色，堿

性條件下為藍(lán)色）上，每個(gè)稀釋度下涂布3個(gè)培養(yǎng)基是為了,放在30℃環(huán)境中培養(yǎng)2?

3天后，挑選周?chē)@色的單菌落在固體培養(yǎng)基上劃線分離，獲得純菌株。

（3）將液體培養(yǎng)基導(dǎo)入大試管中，將杜氏小試管倒立放入大試管中，試管中的氣體排盡，接

入純菌株，30℃恒溫培養(yǎng)5?7d,觀察到小管內(nèi)有氣泡，檢測(cè)到N2O,即可鑒定純菌株為目的

菌。不能依據(jù)培養(yǎng)液中硝酸鹽的濃度變低來(lái)鑒定目的菌，原因是0

(4)向幾組等量的滅菌后的反硝化培養(yǎng)基中分別以1%、3%、5%、7%和10%的接種量接入

菌株N1,在30℃,120r/min搖床震蕩培養(yǎng)，24h后測(cè)量NO；—N等指標(biāo)，結(jié)果如右圖所示：

①本研究的目的是o

②當(dāng)投菌量達(dá)到時(shí)，反硝化效果最好，NO；—N和總脫氮率均較高。當(dāng)投菌量繼續(xù)增

加，NO：—N和總脫氮率反而下降，推測(cè)可能的原因是(答1點(diǎn))。

301OO

-D-NOT-N濃度-

9O

(25

I。總脫氮率8O

j

M7O

?20*NO3、N降解窣

)6O線

、

超<

5O

曜

影15

N4O幽

J

Z103O

O

N2O

51O

0

1234567891011

投菌量/%

答案以及解析

1.答案：B

解析：A、固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至50℃左右時(shí)倒平板，固體培養(yǎng)基中含有瓊脂，40℃

左右會(huì)凝固，因此溫度過(guò)低會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基凝固無(wú)法倒平板，A正確；B、倒好的平板需要冷卻

后使用，且不宜久存，以免表面干燥，影響接種后微生物的生長(zhǎng)，B錯(cuò)誤；C、稀釋涂布平板

法分離到的單菌落仍需進(jìn)一步劃線純化，以利于菌種保藏，C正確；D、稀釋涂布平板法既可

用于微生物的分離，也可用于微生物的計(jì)數(shù)，D正確。故選B。

2.答案：A

解析：A、圖①純化微生物的接種方法為平板劃線法，所用接種工具為接種環(huán)或接種針，A

正確；B、圖②純化微生物的接種方法為稀釋涂布平板法，所用接種工具為涂布器，B錯(cuò)誤；

C、稀釋涂布平板法可進(jìn)行微生物的分離與計(jì)數(shù)，而平板劃線法不能用于微生物的計(jì)數(shù)，C錯(cuò)

誤；D、稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的微生物數(shù)量往往比實(shí)際數(shù)目少，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在

一起時(shí)，平板上觀察到的仍然是一個(gè)菌落，D錯(cuò)誤。故選A。

3.答案：A

解析：A、腐乳制作過(guò)程中，毛霉等微生物將豆腐中的蛋白質(zhì)、脂肪分解成小分子有機(jī)物并

利用其中一部分能量，因此腐乳制作過(guò)程中有機(jī)物種類增多，但有機(jī)物的干重減少，含有的

能量減少，A正確；B、酵母菌在氧氣充足的情況下能大量生長(zhǎng)繁殖，缺氧條件下酵母菌主要

通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，在缺氧、酸性的發(fā)酵液中酵母菌可以存活，而其他微生物則因無(wú)法

適應(yīng)這一環(huán)境而被抑制，B錯(cuò)誤；C、醋酸菌為需氧菌，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡

萄糖分解成醋酸，C錯(cuò)誤；D、為了防止發(fā)酵液受污染，應(yīng)將選取的葡萄先沖洗再去枝梗，沖

洗是還不能進(jìn)行多次沖洗，防止酵母菌洗掉，D錯(cuò)誤。故選A。

4.答案：B

解析：A、用于發(fā)酵的菌種可以從自然界中篩選，也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲

得，A錯(cuò)誤；B、擴(kuò)大培養(yǎng)的目的是增大接種時(shí)發(fā)酵罐中菌種的數(shù)目，加快發(fā)酵過(guò)程的進(jìn)程，

B正確；C、發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過(guò)程，C錯(cuò)誤；D、若發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，

可采過(guò)濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來(lái)，D錯(cuò)誤。故選B。

5.答案：ACD

解析：A、平板劃線無(wú)法得知稀釋倍數(shù)，不能用于活菌計(jì)數(shù)，故統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)

量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；B、除圖中操作外，還需要設(shè)置一組未接種

的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，以驗(yàn)證培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B正確；C、由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞

連在一起時(shí)，平板上顯示的只是一個(gè)菌落，故培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落可能來(lái)源于樣品稀釋液中

的一個(gè)、甚至幾個(gè)活菌，C錯(cuò)誤；D、由于菌落肉眼可見(jiàn)，故初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，

可用肉眼觀察菌體的形態(tài)特征，D錯(cuò)誤。故選ACD。

6.答案：ABD

解析：A、培養(yǎng)基要冷卻到50℃左右時(shí)開(kāi)始倒平板。溫度過(guò)高會(huì)燙手，過(guò)低培養(yǎng)基又會(huì)凝

固，A錯(cuò)誤；B、用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)細(xì)菌數(shù)量時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液的量一般不

超過(guò)0.1mL,其原因是避免培養(yǎng)基表面的菌液出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果，B

錯(cuò)誤；C、培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了作為對(duì)照組，第4個(gè)平板不接種樣液并與前3個(gè)平

板共同培養(yǎng)，可用于檢測(cè)是否有雜菌污染，C正確；D、第4個(gè)平板沒(méi)有菌落形成，說(shuō)明沒(méi)有

雜菌污染，且前三個(gè)平板長(zhǎng)出的菌落數(shù)均在30?300之間，說(shuō)明操作中的稀釋倍數(shù)(10倍)

是合適的。若接種的樣液是0.1ml,則9cm2口罩樣品中菌體數(shù)量為(31+42+35)

=36:0.1x10=3600個(gè)，則len?口罩樣品中菌體數(shù)量為400個(gè)，D錯(cuò)誤。故選ABD。

7.答案：B

解析：A、在用果酒制作果醋的過(guò)程中，發(fā)酵瓶不能裝滿發(fā)酵液，以促使酵母菌在發(fā)酵前期

大量繁殖，通殺避免發(fā)酵液溢出，A錯(cuò)誤；B、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，

醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，制作果醋時(shí)，圖中的充氣口應(yīng)保持開(kāi)放，B正確；C、進(jìn)行發(fā)酵前，

通常要先取新鮮葡萄，用清水沖洗1?2次，再去除葡萄枝梗和腐爛的籽粒，以防止雜菌污

染，C錯(cuò)誤；D、酵母菌屬于兼性厭氧菌，其進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所是線粒體基質(zhì)，

進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)；醋酸菌屬于原核生物，其進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生

CO2的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，故酵母菌與醋酸菌呼吸作用產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所不一定相同，D錯(cuò)

誤。故選B。

8.答案：D

解析：①100℃煮沸5~6min可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽抱，因而能起到消毒的作

用，①正確；②酒精燈火焰附近存在一個(gè)無(wú)菌區(qū)，無(wú)菌操作時(shí)，接種操作要在酒精燈火焰附

近進(jìn)行，②正確；③利用葡萄制作葡萄酒利用的是附著于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以

家庭制作葡萄酒時(shí)將容器進(jìn)行滅菌，但葡萄不進(jìn)行滅菌，以免殺死酵母菌，③錯(cuò)誤；④培養(yǎng)

基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，該滅菌方法屬于濕熱滅菌，④錯(cuò)誤；⑤滅菌后的培養(yǎng)基要需

要進(jìn)行倒平板，而調(diào)試pH值操作應(yīng)該在滅菌前，接種操作需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，⑤

錯(cuò)誤。故選D。

9.答案:D

解析：A、腌制酸筍是利用乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，而乳酸菌是厭氧型微生物，所以腌制酸筍

需要水封，為乳酸菌發(fā)酵提供無(wú)氧環(huán)境，A正確；B、將酸筍發(fā)酵液接種到固體培養(yǎng)基中可以

采用稀釋涂布平板法，B正確；C、溶鈣圈直徑與菌落直徑比值越大，表明該菌落產(chǎn)生的乳酸

越多，即為目標(biāo)菌落，C正確；D、膽固醇只含有C、H、。三種元素，不含N元素，所以不

能為微生物生長(zhǎng)提供氮源，D錯(cuò)誤。故選D。

10.答案：（1）將淀粉分解（進(jìn)行糖化）；有氧呼吸和無(wú)氧呼吸

（2）抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)

（3）0.10；接種量較大，菌數(shù)增長(zhǎng)過(guò)快導(dǎo)致葡萄糖消耗過(guò)多，用于酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精

的葡萄糖減少

（4）酵母菌發(fā)酵過(guò)程中pH降低和酒精的積累對(duì)酵母菌的代謝產(chǎn)生了抑制作用

解析：（1）圖1中加入的甜酒曲含微生物和淀粉酶等，加入甜酒曲的目的除提供少量菌種

外，還能促進(jìn)蒸熟糯米的淀粉分解；主發(fā)酵中酵母菌先進(jìn)行菌體的繁殖，再進(jìn)行發(fā)酵，主發(fā)

酵中酵母菌的呼吸作用方式為有氧呼吸和無(wú)氧呼吸。

（2）選擇培養(yǎng)基的要求是既要允許特定微生物的生長(zhǎng)，又要抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。

（3）據(jù)圖2可知，接種量為0.1%時(shí)，達(dá)到最大酒精含量時(shí)，產(chǎn)酒精量比其它接種量高，因

此最佳接種量為0.1%。據(jù)圖2可知，接種量為0.12%時(shí)，酒精含量最低，原因可能是接種量

較大，菌數(shù)劇增過(guò)快導(dǎo)致葡萄糖消耗過(guò)多，用于酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精的葡萄糖減少。

（4）研究人員發(fā)現(xiàn)從發(fā)酵第8天開(kāi)始，作為底物的還原糖的含量基本不再減少，可能的原因

是酵母菌發(fā)酵過(guò)程中pH降低和酒精的積累對(duì)酵母菌的代謝產(chǎn)生了抑制作用。

n.答案：c

解析：A、為篩選出高產(chǎn)脂肽的菌株可在石油污染的土壤中采取土樣，A錯(cuò)誤；

B、以石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基可分離得到單個(gè)菌落，B錯(cuò)誤；

C、由于顯微鏡直接計(jì)數(shù)無(wú)法區(qū)分死菌和活菌，所以使用顯微鏡直接計(jì)數(shù)所得的結(jié)果往往大

于實(shí)際活菌數(shù)，C正確；

D、培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，接種環(huán)采用灼燒滅菌，D錯(cuò)誤。

故選C。

12.答案：C

解析：A、為避免雜菌的污染，實(shí)驗(yàn)中的濾膜、培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基等均需滅菌處理，A錯(cuò)

誤；B、對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法是稀釋涂布平板法，具體方法是：先將菌體進(jìn)行梯度稀釋，

再涂布到濾膜的表面，待菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)進(jìn)行計(jì)數(shù)，不能用顯微鏡直接計(jì)數(shù)的原因是顯微鏡直

接計(jì)數(shù)不能區(qū)分死菌和活菌，B錯(cuò)誤；C、tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白，乙組中野生型

可產(chǎn)生tcel蛋白作用于tcel-tcil雙突變體，后者無(wú)法產(chǎn)生tcil蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野

生菌在競(jìng)爭(zhēng)中占據(jù)優(yōu)勢(shì)；而在丙組中，野生型可產(chǎn)生tcel蛋白作用于tcel突變體，后者可以

產(chǎn)生tcil蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生長(zhǎng)受到抑制，由此推測(cè)，tcil蛋白能夠中和

tcel蛋白的毒性，C正確；D、由甲組、乙組可知，野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體的競(jìng)

爭(zhēng)中均占優(yōu)勢(shì)，由甲組、丙組可知，野生型細(xì)菌X在與tcel突變體的競(jìng)爭(zhēng)中不占優(yōu)勢(shì)，D錯(cuò)

誤。故選C。

13.答案：A

解析：A、培養(yǎng)過(guò)程中所用的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿均可采用高壓蒸汽滅菌法，A錯(cuò)誤；

B、兩種方法均可通過(guò)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)活菌的估算，B錯(cuò)誤；

C、稀釋倒平板法對(duì)好氧菌、熱敏感菌的分離效果優(yōu)于稀釋涂布平板法，C正確；

D、為了防止培養(yǎng)基溫度過(guò)高殺死微生物，應(yīng)將瓊脂冷卻至50攝氏度左右后再倒平板，D錯(cuò)

誤。

故選C。

14.答案：D

解析：A、培養(yǎng)黑曲霉時(shí)一般需將培養(yǎng)基調(diào)至酸性，但單細(xì)胞蛋白指微生物菌體，果膠酶不

屬于單細(xì)胞蛋白，A錯(cuò)誤；

B、伊紅一亞甲藍(lán)培養(yǎng)基是鑒定大腸桿菌的培養(yǎng)基，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)該用剛果紅培養(yǎng)基篩選高產(chǎn)纖

維素酶菌株，B錯(cuò)誤；

C、酒精發(fā)酵的菌種為酵母菌，當(dāng)接種量為12%左右時(shí)，發(fā)酵后的酒精含量與殘?zhí)堑暮壳?/p>

線有交點(diǎn)，但兩者的縱坐標(biāo)數(shù)值及單位均不同，故發(fā)酵后二者含量不同，C錯(cuò)誤；

D、由圖可知，菌種接種量為15%時(shí)對(duì)應(yīng)的酒精含量達(dá)到最大值，接種量超過(guò)15%,菌種數(shù)

量大，自身的生長(zhǎng)會(huì)大量消耗反應(yīng)物，導(dǎo)致酒精產(chǎn)量降低，D正確。

故選D。

15.答案:B

解析：A、與使用固體培養(yǎng)基相比，使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)菌種時(shí)，菌體可以分布在整個(gè)培養(yǎng)

基中，可充分利用其中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，提高培養(yǎng)液中氧氣含量，菌體數(shù)量增加的更快，A正

確；

B、需要從采集的樣品分離得到目的菌種，不能對(duì)樣品進(jìn)行滅菌，B錯(cuò)誤;

C、圖a所示結(jié)果的接種次數(shù)為3次，接種環(huán)需滅菌4次，C正確；

D、利用稀釋涂布平板法計(jì)算菌體濃度的方法為：菌落數(shù)一接種液體積x稀釋倍數(shù)，而用于計(jì)

數(shù)的平板的菌落數(shù)應(yīng)在30-300之間，因此58.5個(gè)+0.1mlx稀釋倍數(shù)=5.85x108個(gè)/ml,計(jì)算得出

稀釋倍數(shù)為倍，D正確。

故選B。

16.答案:B

解析：A、各地釀酒的原材料不同，但發(fā)酵過(guò)程中都是利用酵母菌的無(wú)氧呼吸，A正確；

B、溫度影響釀酒和釀醋，釀酒過(guò)程中，酵母菌的發(fā)酵溫度為18-30C,B錯(cuò)誤；

C、加水的目的是對(duì)“酒”進(jìn)行稀釋，避免酒精濃度過(guò)高殺死醋酸菌（失水過(guò)多），C正確；

D、醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，“衣”位于變酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌在發(fā)酵液

表面進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖形成的，D正確。

故選Bo

17.答案：A

解析：A、乳酸菌是一種原核生物，其代謝類型為異養(yǎng)厭氧型，A錯(cuò)誤；

B、適應(yīng)性演化是指物種在特定環(huán)境的選擇下，進(jìn)化出有利于提高其適應(yīng)性的表型，所以乳

酸菌基因組演化是本身的適應(yīng)性演化和人類長(zhǎng)時(shí)間馴化的共同結(jié)果，B正確；

C、乳酸菌發(fā)酵生產(chǎn)的奶酪的形成是因?yàn)槲⑸锇l(fā)酵過(guò)程產(chǎn)生的酸性物質(zhì)使可溶的奶蛋白變

性形成不溶的凝塊，奶酪再經(jīng)過(guò)微生物發(fā)酵，將牛奶中蛋白質(zhì)分解成小分子，有利于蛋白質(zhì)

的消化和吸收，避免引起乳糖不耐受，C正確；

D、工業(yè)上大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)，通常會(huì)先通過(guò)微生物培養(yǎng)技術(shù)獲得單一純凈菌種，再將它們接種

到物料中進(jìn)行發(fā)酵，與傳統(tǒng)發(fā)酵相比，這種方法的好處是可以縮短發(fā)酵時(shí)間，確保品質(zhì)穩(wěn)

定，D正確。

故選Ao

18.答案:C

解析：A、生物A為酵母菌，生物C為醋酸菌，前者無(wú)氧呼吸能產(chǎn)生CO2,后者無(wú)氧呼吸不

能產(chǎn)生CO2,A錯(cuò)誤；

B、根據(jù)酶的專一性，可以用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行酶解以破壞細(xì)胞壁，B錯(cuò)誤；

C、由酒精發(fā)酵轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岚l(fā)酵，需要通入無(wú)菌空氣、提高發(fā)酵溫度，C正確；

D、澄清的石灰水是用來(lái)檢測(cè)CO2的，檢測(cè)是否含有乙醇需要用酸性重銘酸鉀溶液，D錯(cuò)

誤。

故選c。

19.答案：A

解析：A、果酒制作時(shí)酵母菌一般來(lái)自果實(shí)的表皮，在發(fā)酵前期通氣可以保證酵母菌大量繁

殖，但后期酒精發(fā)酵應(yīng)保持無(wú)氧條件，A錯(cuò)誤；B、在制作泡菜的過(guò)程中，要注意控制溫度、

時(shí)間和食鹽的用量，溫度過(guò)高、食鹽用量過(guò)低、腌制時(shí)間過(guò)短，容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞

硝酸鹽含量增加，B正確；C、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，“釀酒不

成反成醋”可能是發(fā)酵容器密封不嚴(yán)，醋酸菌進(jìn)行有氧呼吸的結(jié)果，C正確；D、參與腐乳制

作的微生物主要是毛霉，毛霉產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基

酸，D正確。故選A。

20.答案：（1）土壤中含有的真菌、放線菌和細(xì)菌的數(shù)量有差異，且真菌、放線菌和細(xì)菌對(duì)

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求有差異

（2）涂布器；滅菌；顏色、形狀、大小、透明度、光滑程度等；FG5形成的菌落表現(xiàn)為透明

圈直徑與菌落直徑比值最大

（3）不含瓊脂；可溶性磷含量最高

（4）培養(yǎng)液中溶解氧含量低，且解磷菌與培養(yǎng)液不能充分混合；轉(zhuǎn)速過(guò)高容易導(dǎo)致解磷菌生

長(zhǎng)繁殖受阻

（5）為更好地實(shí)現(xiàn)有機(jī)磷的降解，可使用甘露醇作為碳源制備培養(yǎng)基，同時(shí)在培養(yǎng)過(guò)程中將

轉(zhuǎn)速設(shè)定在180r.min」左右

解析：（1）步驟1取不同稀釋度菌液接種到不同種類培養(yǎng)基的原因是土壤中含有的真菌、放

線菌和細(xì)菌的數(shù)量有差異，因而用不同的稀釋倍數(shù)，將不同稀釋度的菌液涂布在不同種類的

培養(yǎng)基上的目的是篩選出真菌、放線菌和細(xì)菌。

（2）步驟2接種的方法是稀釋涂布平板法，因而使用的接種工具為涂布器，接種前需進(jìn)行灼

燒滅菌其具體操作是引燃涂布器上的酒精直至燃盡，而后冷卻后進(jìn)行涂布，其目的是防止雜

菌污染。接種時(shí)，可根據(jù)菌落的顏色、形狀、大小、透明度、光滑程度等挑取不同類型菌株

分別接種到培養(yǎng)基A上。培養(yǎng)結(jié)果初步表明，F(xiàn)G5解磷能力最強(qiáng)，因?yàn)樵摼浔憩F(xiàn)出的透明

圈直徑與菌落直徑比值最大，

（3）與步驟2中培養(yǎng)基A相比，步驟3中培養(yǎng)基B在成分上的主要差異是其中不含有瓊

脂，為液體培養(yǎng)基。經(jīng)測(cè)定，培養(yǎng)FG5的上清液中可溶性磷含量最高，則可確認(rèn)FG5的解磷

能力最強(qiáng)，

（4）步驟4進(jìn)行搖床培養(yǎng)時(shí)，轉(zhuǎn)速過(guò)低溶液中可溶性磷含量不高，可能由于培養(yǎng)液中溶解氧

含量低，且解磷菌與培養(yǎng)液不能充分混合，因而導(dǎo)致培養(yǎng)液中的有機(jī)磷不能充分被分解，但

轉(zhuǎn)速過(guò)高容易導(dǎo)致解磷菌生長(zhǎng)繁殖受阻，從而影響其解磷能力。

（5）根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，在實(shí)驗(yàn)條件下為更好地實(shí)現(xiàn)有機(jī)磷的降解，可使用甘露醇作為碳源

制備培養(yǎng)基，同時(shí)在培養(yǎng)過(guò)程中獎(jiǎng)轉(zhuǎn)速設(shè)定在180r.min」左右最適宜解磷菌的生長(zhǎng)。

21.答案：B

解析：酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成，A正確；腐乳

和果醋都是在有氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生的傳統(tǒng)食品，B錯(cuò)誤；乳酸菌是厭氧菌，水封泡菜壇可以

隔絕空氣，確保壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵處于無(wú)氧環(huán)境中，C正確；制作泡菜時(shí)，如果鹽水濃度過(guò)

高，乳酸菌會(huì)通過(guò)滲透作用失水，其生長(zhǎng)受到抑制，因此制作出的泡菜會(huì)“咸而不酸”，D正

確。

22.答案:D

解析：A、適量提高乳酸鏈球菌的接種量，可以使菌體數(shù)量增加較快，進(jìn)而使Nisin濃度更快提

高,因此可以縮短發(fā)酵生產(chǎn)周期，在較短時(shí)間收獲產(chǎn)品,A正確;B、蔗糖是乳酸鏈球菌的營(yíng)養(yǎng)物

質(zhì)，隨著發(fā)酵的進(jìn)行,發(fā)酵液中蔗糖含量逐漸降低，因此中后期補(bǔ)加一定量的蔗糖溶液利于菌體

生長(zhǎng),B正確;C、乳酸菌生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸會(huì)使發(fā)酵罐內(nèi)pH下降，因此在發(fā)酵過(guò)程中向發(fā)

酵罐內(nèi)適時(shí)適量添加堿液,可以創(chuàng)造適于Nisin生產(chǎn)的pH條件,C正確;D、如果發(fā)酵產(chǎn)品是微

生物細(xì)胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用過(guò)濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥獲得產(chǎn)品。如果產(chǎn)

品是分泌到發(fā)酵液中的，可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)奶崛?、分離和純化措施從發(fā)酵液中獲得

產(chǎn)品。Nisin為乳酸鏈球菌的分泌產(chǎn)物,主要存在于發(fā)酵液,D錯(cuò)誤。

23.答案：A

解析：本題主要考查平板劃線法的相關(guān)使用技巧。I區(qū)、II區(qū)沒(méi)有出現(xiàn)單菌落,說(shuō)明細(xì)菌數(shù)量

太多,故應(yīng)從HI區(qū)挑取單菌落,A正確，倒平板后不需要晃動(dòng);B錯(cuò)誤;出現(xiàn)單菌落即達(dá)到了菌種純

化的目的,C錯(cuò)誤;剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并

不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng),D錯(cuò)誤。

24.答案：C

解析：A、葉片經(jīng)消毒后需用無(wú)菌水沖洗，以避