實(shí)訓(xùn)中藥制劑的薄層色譜鑒別講解

實(shí)訓(xùn)中藥制劑的薄層色譜鑒別【實(shí)訓(xùn)目標(biāo)】1.掌握中藥制劑的薄層色譜鑒別技術(shù)。2.學(xué)會(huì)板藍(lán)根顆粒的薄層色譜鑒別?！緝x器、材料與試劑】1.儀器電子天平、超聲儀、硅膠G薄層板、微升毛細(xì)管、展開(kāi)缸、玻璃噴霧瓶、錐形瓶、研缽、過(guò)濾裝置、容量瓶等。【儀器、材料與試劑】2.材料板藍(lán)根顆粒；板藍(lán)根（對(duì)照藥材）；亮氨酸對(duì)照品；精氨酸對(duì)照品；L-脯氨酸對(duì)照品。3.試劑乙醇；正丁醇；冰醋酸；茚三酮試液等?！緦?shí)訓(xùn)原理】板藍(lán)根顆粒為板藍(lán)根經(jīng)加工制成的顆粒劑。除含有靛藍(lán)、芥子苷、靛玉紅等成分外，尚含有精氨酸、脯氨酸、谷氨酸、β-氨基丁酸、纈氨酸、亮氨酸等多種氨基酸類成分。板藍(lán)根經(jīng)乙醇超聲提取，提取液在硅膠薄層板上展開(kāi)分離，精氨酸、L-脯氨酸、亮氨酸與茚三酮在105℃發(fā)生顯色反應(yīng)，呈現(xiàn)相應(yīng)顏色斑點(diǎn)，從而判斷板藍(lán)根是否存在?！緦?shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟】1.供試品溶液的制備取本品2g，研細(xì)，加乙醇10ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。2.對(duì)照藥材溶液的制備取板藍(lán)根對(duì)照藥材0.5g，加乙醇20ml，同法制成對(duì)照藥材溶液?！緦?shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟】3.對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取亮氨酸對(duì)照品、精氨酸、L-脯氨酸對(duì)照品10mg，分別置10ml容量瓶中加乙醇制成每1ml各含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。4.展開(kāi)劑的配制分別量取正丁醇19ml、冰醋酸5ml、水5ml置于分液漏斗中，振搖混勻，作為展開(kāi)劑?！緦?shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟】5.點(diǎn)樣將已在110℃活化30分鐘的硅膠G薄層板，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無(wú)麻點(diǎn)，無(wú)氣泡，無(wú)破損及污染，用定量微升毛細(xì)管吸取供試品溶液及對(duì)照品溶液各5～10μl、對(duì)照藥材溶液2μl，垂直方向小心接觸板面使成圓點(diǎn)狀，點(diǎn)樣基線距底邊10mm，點(diǎn)間距離為10mm。【實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟】6.展開(kāi)在展開(kāi)缸中加入正丁醇-冰醋酸-水（19:5:5）20ml，密閉放置10分鐘，迅速放入薄層板，密閉，展開(kāi)，在展開(kāi)約15cm時(shí)將薄層板取出，迅速在展開(kāi)劑的前沿處做記號(hào)，晾干。【實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟】7.顯色和檢視用玻璃噴霧瓶噴以茚三酮試液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點(diǎn)?！舅颊亍炕瘜W(xué)試劑的正確使用和廢液的正確處理，使學(xué)生養(yǎng)成自我安全防護(hù)及環(huán)保意識(shí)【實(shí)訓(xùn)提示】①薄層板使用前多需活化，活化條件為110℃，30min；②點(diǎn)樣時(shí)不能損壞薄層表面；③使用新鮮溶劑配制展開(kāi)劑；④配制多元展開(kāi)劑時(shí)，各種溶劑應(yīng)分別量取后再混合；【實(shí)訓(xùn)提示】⑤保持恒溫恒濕；⑥展開(kāi)缸應(yīng)密閉良好；⑦展開(kāi)