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PAGEPAGE10課題2土壤中分解尿素的細菌的分別與計數(shù)1.在微生物學中,將允許特定種類的微生物生長,同時抑制或者阻擋其他種類微生物生長的培育基稱做()A.鑒別培育基 B.加富培育基C.選擇培育基 D.基礎(chǔ)培育基解析:選擇培育基可選擇目標微生物,同時抑制或阻擋其他微生物生長。答案:C2.測定土壤中某細菌和真菌數(shù)量的過程中,和真菌相比,細菌須要選用稀釋倍數(shù)更高的稀釋液進行平板培育的緣由是()A.細菌個體小,真菌個體大B.細菌易稀釋,真菌不易稀釋C.在土壤中細菌比真菌多D.隨機的,沒有緣由解析:在土壤中,細菌比真菌多,所以為了確保獲得菌落數(shù)在30~300之間的培育平板,測定細菌數(shù)量時一般選用104、105和106倍的稀釋液進行平板培育,而測定真菌數(shù)量時一般選用102、103和104倍的稀釋液進行平板培育。答案:C3.下列能選擇出分解尿素的細菌的培育基是()A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、瓊脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、瓊脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水解析:分解尿素的細菌能利用尿素,因此選擇培育基中應只有尿素這一種氮源。此外,培育基中還應含有碳源。答案:A4.能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是()A.稀釋涂布平板法B.干脆計數(shù)法C.重量法D.比濁法解析:利用稀釋涂布平板法能夠在不影響細菌生存的狀況下將細菌個體從固體培育基上分別出來,并可依據(jù)菌落數(shù)測定出樣品活菌數(shù),故稀釋涂布平板法可用于測定樣品活菌數(shù)。干脆計數(shù)法計得的是活菌和死菌的總和。答案:A5.下列關(guān)于微生物分別和培育的敘述,錯誤的是()A.微生物培育前,需對培育基進行消毒B.測定土壤樣品中的細菌數(shù)目,常用菌落計數(shù)法C.分別土壤中不同的微生物,要采納不同的稀釋度D.分別能分解尿素的細菌,要以尿素作為培育基中唯一的氮源解析:微生物培育前,需對培育基進行滅菌,而不是消毒;測定土壤樣品中的細菌數(shù)目,常用菌落計數(shù)法,而一般不用活菌計數(shù)法;分別土壤中不同的微生物,要采納不同的稀釋度以便能選擇出菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù);分別能分解尿素的細菌,要以尿素作為培育基中唯一的氮源。答案:A6.下列是關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)”試驗操作的敘述,錯誤的是()A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104,105,106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上C.將試驗組和比照組平板倒置,37℃恒溫培育24~48hD.確定比照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的試驗組平板進行計數(shù)解析:檢測土壤中細菌總數(shù)時,用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板;取104,105,106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上,將試驗組和比照組平板倒置,37℃恒溫培育24~48h。在確定比照組無菌后,選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù)。答案:D7.下列屬于菌種鑒定重要依據(jù)的是()A.細菌的大小、形態(tài)和顏色B.菌落的大小、形態(tài)和顏色C.有無鞭毛D.培育基的不同解析:不同種類的細菌所形成的菌落在大小、形態(tài)、光澤度、顏色、硬度、透亮度等方面具有不同的特征,所以,每種細菌在肯定條件下所形成的菌落,可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。單個的細菌用肉眼是看不見的,故細菌的個體特征不能作為菌種鑒定的依據(jù)。答案:B8.若大腸桿菌和圓褐固氮菌混合在一起,采納下列哪組培育基可將它們分別?()A.加食鹽的培育基和牛肉膏蛋白胨培育基B.伊紅美藍培育基和無氮培育基C.斜面培育基和液體培育基D.加青霉素的培育基和液體培育基解析:大腸桿菌的代謝產(chǎn)物可與伊紅美藍結(jié)合,使菌落呈黑色;圓褐固氮菌能自行固氮,可用無氮培育基選擇。答案:B9.某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌的污染狀況而進行了試驗。試驗包括制備培育基、滅菌、接種及培育、菌落視察計數(shù)。請回答與此試驗相關(guān)的問題。(1)培育基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌供應了和。除此之外,培育基還必需含有的基本成分是和。
(2)對培育基進行滅菌,應當采納的方法是
。
(3)為了盡快視察到細菌培育的試驗結(jié)果,應將接種了湖水樣品的平板置于中培育,培育的溫度設(shè)定在37℃。要使該試驗所得結(jié)果牢靠,還應當同時在另一平板上接種作為比照試驗。
(4)培育20h后,視察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說明湖水樣品中有(填“一”或“多”)種細菌。一般說來,菌落總數(shù)越多,湖水遭遇細菌污染的程度越。
(5)假如提高培育基中NaCl的濃度,可以用于篩選耐細菌,這種培育基被稱為。
解析:(1)蛋白胨來源于動物材料,含有維生素、糖和有機氮等養(yǎng)分物質(zhì),主要是為微生物供應氮源。培育微生物的培育基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽。(2)試驗室的滅菌方法一般有灼燒滅菌(適合于接種工具的滅菌)、干熱滅菌(適合于耐高溫的、須要保持干燥的物品的滅菌)、高壓蒸汽滅菌(適合于培育基等的滅菌)。(3)要想使微生物快速繁殖,就要將平板置于相宜的條件下,特殊是溫度要相宜,所以要置于恒溫培育箱中。比照組應接種無菌水,以解除其他因素的干擾。(4)不同的細菌形成的菌落具有不同的形態(tài),細菌菌落的特征是識別不同細菌的主要依據(jù)。菌落一般是由一個細菌細胞繁殖而來的,菌落多則說明細菌的數(shù)目多。(5)加入了特定的物質(zhì),用于篩選各種特定細菌的培育基就是選擇培育基。例如,加入了NaCl就可以用于篩選耐鹽細菌。答案:(1)氮源(碳源,不作要求)碳源無機鹽水(2)高壓蒸汽滅菌法(3)恒溫培育箱無菌水(4)多高(5)鹽(或NaCl)選擇培育基10.請回答下列與大腸桿菌有關(guān)的問題。(1)大腸桿菌的同化作用類型是。
(2)下表是某公司研發(fā)的一種檢測大腸桿菌菌群的培育基的配方。成分含量/g蛋白胨10.0乳糖5.0蔗糖5.0K2HPO42.0顯色劑0.2瓊脂12.0將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000mL依據(jù)用途劃分,該培育基屬于(填“選擇”或“鑒別”)培育基。該培育基中的碳源是。
(3)培育大腸桿菌時,為防止雜菌污染,需對培育基和培育皿進行。
(4)現(xiàn)有1L水樣,用無菌吸管吸取1mL轉(zhuǎn)至盛有9mL無菌水的試管中,依次稀釋到103稀釋度。各取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到3個培育基上培育,一段時間后記錄的菌落數(shù)分別為55,56,57,則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為。
解析:(1)大腸桿菌不能制造有機物,必需利用現(xiàn)成的有機物來合成組成自身的物質(zhì),屬于異養(yǎng)型生物。(2)依據(jù)題表中培育基的配方可看出,該培育基中添加了顯色劑,可推斷此培育基為鑒別培育基。(3)培育大腸桿菌等微生物時,為防止雜菌污染,須要對培育基和培育皿進行滅菌。(4)依據(jù)公式計算:每升原水樣中大腸桿菌數(shù)=(55+56+57)÷3÷0.1×103×103=5.6×108。答案:(1)異養(yǎng)型(2)鑒別乳糖、蔗糖(蛋白胨)(3)滅菌(4)5.6×108實力提升1.下列操作須要在酒精燈火焰旁進行的有()①土壤取樣②稱取土壤③稀釋土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培育A.①②③④⑤ B.②③④⑤C.③④⑤ D.②③④解析:除了土壤取樣和微生物的培育不便于在酒精燈火焰旁進行外,其他均要在酒精燈火焰旁進行,以防止雜菌污染。答案:D2.下列關(guān)于能分解尿素的細菌的說法,正確的是()A.該細菌能分解尿素的緣由是其能合成蛋白酶B.分別該細菌時以尿素作為唯一碳源C.含有大量尿素的環(huán)境誘導該細菌產(chǎn)生了分解尿素的特性D.用以尿素為唯一氮源且添加了酸堿緩沖劑的培育基培育該細菌,不會使酚紅指示劑變紅解析:酶具有專一性,分解尿素的細菌之所以能分解尿素是因為它能合成并分泌脲酶;分別能分解尿素的細菌時以尿素作為唯一氮源;環(huán)境中含有的大量的尿素對分解尿素的細菌起了選擇作用,而非誘導作用;該菌產(chǎn)生的脲酶把尿素分解為氨后,使pH上升,可使酚紅指示劑變紅,但添加酸堿緩沖劑后,阻擋了pH的上升,因此培育基中酚紅指示劑不變紅。答案:D3.從土壤中分別分解尿素的細菌的試驗過程如下圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.選肥沃、潮濕的土壤,在距表層3cm的深處取樣B.圖中A應為加入蒸餾水,B應為高壓蒸汽滅菌C.統(tǒng)計土樣中尿素分解菌的活菌數(shù)目宜采納稀釋涂布平板法接種D.在加入酚紅的鑒別培育基上,有紅色環(huán)帶出現(xiàn)的是尿素分解菌解析:土壤樣品的溶解和稀釋應用無菌水,A應為加入無菌水制得土壤浸出液,B應為對土壤浸出液進行梯度稀釋。土壤樣品不能滅菌處理,滅菌會導致其中的細菌等全部死亡。答案:B4.下列不屬于微生物計數(shù)方法的是()A.平板劃線法 B.稀釋涂布平板法C.顯微鏡干脆計數(shù) D.濾膜法解析:平板劃線法可用于菌種的純化和分別,不能用于計數(shù)。稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目,顯微鏡干脆計數(shù)也是測定微生物數(shù)量的常用方法。濾膜法常用于檢測水樣中大腸桿菌的數(shù)目,通常是將已知體積的水樣過濾后,將濾膜放到伊紅美藍培育基上培育,依據(jù)培育基上黑色菌落的數(shù)目,計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。答案:A5.將硝化細菌接種到下列培育基中,其中可以長出硝化細菌菌落的是()A.無氮培育基,試管密閉B.無氮培育基,試管口用棉塞塞住C.含氮(無機氮源)培育基,試管密閉D.含氮(無機氮源)培育基,試管口用棉塞塞住解析:硝化細菌是自養(yǎng)需氧型微生物,利用的是無機氮源,因此培育硝化細菌須要含無機氮源的培育基,試管口應用棉塞塞住。答案:D6.★“篩選”是生物學中培育生物新類型常用的手段。下列做法不行能篩選勝利的有()A.在無氮培育基上篩選圓褐固氮菌B.在不含精氨酸的培育液中篩選能合成精氨酸的微生物C.用含青霉素的培育基篩選酵母菌和霉菌D.用不含碳源的培育基篩選根瘤菌解析:根瘤菌是異養(yǎng)型生物,在不含碳源的培育基上不能生長。答案:D7.★試驗測定鏈霉素對3種細菌的抗生素效應,用3種細菌在事先打算好的瓊脂塊平板上畫3條平行線(3條線均與下圖中的鏈霉素帶接觸),將平板置于37℃條件下恒溫培育3d,結(jié)果如下圖所示。依據(jù)試驗結(jié)果分析以下敘述,錯誤的是()A.鏈霉素能阻擋結(jié)核桿菌的生長B.鏈霉素對結(jié)核桿菌的抑制作用比對霍亂菌更有效C.鏈霉素對結(jié)核桿菌的抑制作用比對傷寒桿菌更有效D.鏈霉素可以用于治療傷寒病人解析:由題圖可知,鏈霉素能阻擋霍亂菌和結(jié)核桿菌的生長繁殖,不能阻擋傷寒桿菌的生長繁殖,所以它不能用于治療感染傷寒桿菌的病人。鏈霉素對結(jié)核桿菌的抑制作用比對霍亂菌更有效。答案:D8.高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的好用性。探討者從熱泉中篩選了能高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如下頁左上圖所示?;卮鹣铝袉栴}。(1)①過程稱為,②過程是為了
。
(2)Ⅰ號培育基稱為(按功能分);該培育基中除了加入淀粉外,還需加入的另一種重要的養(yǎng)分成分為。
A.瓊脂 B.葡萄糖C.硝酸銨 D.碳酸氫鈉(3)一般要對配制的培育基進行高壓滅菌,其中“高壓”是為了。
解析:(1)圖示中①過程后試管中單位體積內(nèi)微生物數(shù)量削減,所以①過程稱為稀釋。②過程是將試管內(nèi)液體培育基中的微生物涂布在培育皿中的固體培育基上,所以②過程是為了篩選單個菌落。(2)Ⅰ號培育基的功能是篩選,所以為選擇培育基。該培育基中除了加入淀粉外,還需加入另一種重要的養(yǎng)分成分——硝酸銨,以作為培育微生物的氮源。(3)一般要對配制的培育基進行高壓蒸汽滅菌,其中“高壓”是為了殺死培育基中的芽孢。答案:(1)稀釋篩選單個菌落(或篩選)(2)選擇培育基C(3)殺死培育基中的芽孢9.苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴峻危害。小明同學打算依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分別篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題。(1)酚降解菌富集培育基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有。
(2)將采集到的樣品接種培育,苯酚用量應隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而漸漸,以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集,應進一步,以便于菌落計數(shù)與分別。制備平板培育基時除了須要水、養(yǎng)分物質(zhì)外,還必需添加。
(3)下圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。
(4)采納比色測定法(運用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應,下表中1~5號比色管的苯酚濃度應分別為
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