《衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)》課件-02-水中菌落總數(shù)測(cè)定

水中菌落總數(shù)測(cè)定2水中菌落總數(shù)的測(cè)定檢驗(yàn)依據(jù)：GB/T5750.12-2023方法：平皿計(jì)數(shù)法實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握生活飲用水菌落總數(shù)的測(cè)定方法掌握水源水菌落總數(shù)的測(cè)定方法判定水被細(xì)菌污染的程度和水的衛(wèi)生質(zhì)量知識(shí)準(zhǔn)備4菌落總數(shù)（Standardplated-countbacteria)在一定條件下，經(jīng)一定時(shí)間培養(yǎng)后所得1mL水樣中的微生物菌落個(gè)數(shù)。實(shí)驗(yàn)方法5實(shí)驗(yàn)器材水樣1、4號(hào)—自來(lái)水2、5號(hào)—水源水3、6號(hào)—桶裝水培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)方法6設(shè)備、器材無(wú)菌工作臺(tái)、酒精燈、滅菌吸管、滅菌試管、稀釋液、滅菌平皿、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器、菌落計(jì)數(shù)器、天平、電爐等；實(shí)驗(yàn)方法檢驗(yàn)程序生活飲用水水源水傾注培養(yǎng)基培養(yǎng)接種平皿稀釋菌落計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)方法生活飲用水——用滅菌吸管吸取1mL充分混勻的水樣，注入滅菌平皿中水源水吸取1mL充分混勻的水樣，注入盛有9mL滅菌生理鹽水的試管中，混勻制成1:10稀釋液；吸取1:10的稀釋液1mL注入盛有9mL滅菌生理鹽水的試管中，混勻制成1:100稀釋液；按同法依次稀釋成1:1000,1:10000稀釋液等備用；根據(jù)對(duì)水樣污染情況的估計(jì)，選擇3個(gè)適宜稀釋度進(jìn)行檢測(cè)；實(shí)驗(yàn)方法檢驗(yàn)程序注意事項(xiàng)10每遞增稀釋一次，必須更換一支1mL滅菌吸管每個(gè)稀釋度制作2個(gè)平皿同時(shí)做空白試驗(yàn)注意事項(xiàng)11傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基溫度：46℃左右用量：15mL~20mL培養(yǎng)溫度：36士1℃時(shí)間：48士2h注意事項(xiàng)12無(wú)菌操作；進(jìn)行稀釋時(shí),吸管口不得與下一個(gè)稀釋液接觸；從開始稀釋到傾注最后一個(gè)平皿所用時(shí)間不宜超過(guò)15min；稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少，稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象，不可作為水樣計(jì)數(shù)報(bào)告的依據(jù)；考慮水中含抑菌物質(zhì)應(yīng)提前作好稀釋用試管和各稀釋度培養(yǎng)皿的標(biāo)記；若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng)，則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效；實(shí)驗(yàn)結(jié)果13實(shí)驗(yàn)結(jié)果14菌落計(jì)數(shù)及報(bào)告方法記下各平板的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度兩個(gè)平板的平均菌落數(shù)選擇平均菌落數(shù)在30~300之間者進(jìn)行計(jì)算不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法15只有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí)，則將該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告（見(jiàn)表中實(shí)例1）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式（CFU/mL）10-110-210-311365164201640016000不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法16若有兩個(gè)稀釋度，其生長(zhǎng)的菌落數(shù)均在30~300之間，則視二者之比值來(lái)決定（見(jiàn)表中實(shí)例2、3、4）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)兩個(gè)稀釋度菌落數(shù)之比菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式（CFU/mL）10-110-210-322760295661.6377503800032890271602.227100270004150308215001500不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法17若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見(jiàn)表中實(shí)例5）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式（CFU/mL）10-110-210-35多不可計(jì)1650513513000510000不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法18若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見(jiàn)表中實(shí)例6）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式（CFU/mL）10-110-210-3627115270270不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法19若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300之間，則應(yīng)以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見(jiàn)表中實(shí)例7）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式（CFU/mL）10-110-210-37多不可計(jì)305123050031000不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法20若所有稀釋度的平板上均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以未檢出報(bào)告之不要用“多不可計(jì)”報(bào)告21實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)兩個(gè)稀釋度菌落數(shù)之比菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式（CFU/mL）10-110-210-31136516420---1640016000或1.6×10422760295661.63775038000或3.8×10432890271602.22710027000或2.7×1044150308215001500或1.5×1035多不可計(jì)1650513---513000510000或5.1×105627115---2702707多不可計(jì)30512---3050031000或3.1×104思考題22平皿計(jì)數(shù)法測(cè)定的細(xì)菌數(shù)量是樣品中的實(shí)際菌數(shù)嗎？為什么？某樣品菌落總數(shù)測(cè)定時(shí)，所有稀釋度平板上都無(wú)菌落生長(zhǎng)，試分析出現(xiàn)此結(jié)果的原因有哪些？某種雞廠對(duì)生產(chǎn)用水井的水樣進(jìn)行菌落總數(shù)測(cè)定時(shí)，按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)將水樣處理及培養(yǎng)后，培養(yǎng)皿