《衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)》課件-16.空氣中衛(wèi)生微生物檢測(cè)

衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)空氣中衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)主講人學(xué)習(xí)目標(biāo)3能解讀公共場(chǎng)所、醫(yī)藥工業(yè)潔凈環(huán)境空氣微生物檢驗(yàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)能復(fù)述空氣衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)原理、能復(fù)述六級(jí)篩孔撞擊式微生物采樣器工作原理、操作與維護(hù)方法能歸納總結(jié)撞擊法、自然沉降法的操作流程與安全注意事項(xiàng)能辨析現(xiàn)場(chǎng)采樣點(diǎn)布置要求空氣4空氣生境特征0

1.空氣微生物的來(lái)源、種類(lèi)、分布及其危害0

2.空氣微生物的檢測(cè)與衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)0

3.空氣微生物污染及其預(yù)防0

4.CONT

ENTS空氣生境特征/01一、空氣生境特征大氣圈：電離層：不適合微生物生存；平流層（50km）:臭氧強(qiáng)氧化殺菌劑，在此層微生物很難生存；對(duì)流層(8～15km)：大氣中微生物能生存和擴(kuò)散的主要場(chǎng)所一、空氣生境特征缺乏營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和水分，日光輻射及大氣污染物等不利環(huán)境因素；云層:水分、氨、CO2光能自養(yǎng)型微生物；大氣凝結(jié)核提供無(wú)機(jī)鹽，在城市工業(yè)區(qū)可能有足夠的有機(jī)物供異養(yǎng)菌生長(zhǎng)；總體來(lái)說(shuō)，空氣不是微生物棲息的場(chǎng)所，空氣中無(wú)固有的微生物叢，空氣中微生物是暫時(shí)的、可變的

/02空氣微生物的來(lái)源、種類(lèi)

及其衛(wèi)生學(xué)意義一、空氣微生物污染的來(lái)源自然界：主要來(lái)源，土壤、水、腐爛物等；植物：某些細(xì)菌、真菌孢子；動(dòng)物：動(dòng)物帶菌和排菌量可能比人類(lèi)更大；人體：皮膚、毛發(fā)、口鼻、排泄物或分泌物；生產(chǎn)活動(dòng)：工業(yè)、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)；其他：醫(yī)院、微生物實(shí)驗(yàn)室；二、空氣微生物的種類(lèi)（1）空氣中的細(xì)菌細(xì)菌占絕大多數(shù)，有產(chǎn)芽孢和不產(chǎn)芽孢的，其中革蘭氏陽(yáng)性球菌占大多數(shù)通過(guò)空氣傳播的致病性細(xì)菌：結(jié)核分枝桿菌、白喉?xiàng)U菌、炭疽芽胞桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、百日咳桿菌、鼠疫桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌和腦膜炎奈瑟球菌等。二、空氣微生物的種類(lèi)（1）空氣中的細(xì)菌結(jié)核分枝桿菌結(jié)核桿菌是細(xì)長(zhǎng)型的，稍有彎曲，呈分枝狀排列；沒(méi)有鞭毛，也沒(méi)有芽胞。如果做抗酸染色，會(huì)呈陽(yáng)性反應(yīng)，所以它也叫做“抗酸桿菌”。結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌，俗稱(chēng)結(jié)核桿菌，是引起結(jié)核病的病原菌；結(jié)核桿菌可侵犯全身各個(gè)器官，但以肺結(jié)核為最多見(jiàn)（約占70%），危害也最大。肺結(jié)核是長(zhǎng)期嚴(yán)重危害公眾健康的慢性傳染病。除新型冠狀病毒感染外，在我國(guó)法定報(bào)告甲、乙類(lèi)傳染病中發(fā)病和死亡數(shù)排在第2位，至今仍為重要的傳染病。結(jié)核分枝桿菌據(jù)統(tǒng)計(jì)，2021年約有1060萬(wàn)新病例發(fā)生，至少有160萬(wàn)人死于該病，因?yàn)橥ㄟ^(guò)各種醫(yī)療手段挽救了7400萬(wàn)人的生命。我國(guó)建國(guó)前死亡率達(dá)200-300人/10萬(wàn)，居各種疾病死亡原因之首，目前死亡率19/10萬(wàn)，仍為其他傳染病之和的2倍。結(jié)核分枝桿菌肺結(jié)核患者在咳嗽、打噴嚏、大聲說(shuō)話時(shí)，會(huì)把帶有結(jié)核菌的飛沫播散到空氣中，周?chē)巳何霂в薪Y(jié)核菌的飛沫即可能受到傳染。健康人可能通過(guò)吸入傳染性肺結(jié)核患者噴出的飛沫而被感染。但是，一般人感染結(jié)核菌后不會(huì)發(fā)病，只有身體抵抗力低的時(shí)候才會(huì)發(fā)病。感染結(jié)核菌的人群一生中發(fā)生結(jié)核病的概率約為10%。感染結(jié)核菌但不發(fā)病的人，不會(huì)傳染他人。結(jié)核分枝桿菌卡介苗(BCG)是目前全球唯一獲得批準(zhǔn)且應(yīng)用最廣泛的結(jié)核病疫苗，自1921年首次應(yīng)用于人體以來(lái)，全球已約有80%的國(guó)家將其列入免疫規(guī)劃。卡介苗能有效預(yù)防嬰幼兒結(jié)核性腦膜炎和播散性結(jié)核病的發(fā)生。衛(wèi)生部要求2000年新生兒卡介苗接種率達(dá)90%。據(jù)統(tǒng)計(jì)新生兒時(shí)接種過(guò)的人以后的發(fā)病率比未接種過(guò)的減少約80%?？ń槊缡腔钜呙?，苗內(nèi)活菌數(shù)直接影響免疫效果，故目前已有凍干疫苗供應(yīng)。結(jié)核病疫苗：嗜肺軍團(tuán)菌軍團(tuán)菌屬屬于軍團(tuán)菌科，該菌屬比較復(fù)雜，現(xiàn)有58種，其中超過(guò)一半的細(xì)菌與人類(lèi)疾病有關(guān)，絕大多數(shù)病例均由嗜肺軍團(tuán)菌引起。二、空氣微生物的種類(lèi)（2）空氣中的真菌大氣中的真菌有40000種之多，真菌包子為主要部分，占優(yōu)勢(shì)的真菌包子屬又因地區(qū)而異?！罢嵩と朔巍薄稗r(nóng)民肺”二、空氣微生物的種類(lèi)（3）空氣中的病毒及其他微生物致病性病毒：SARS、H1N1、流行性感冒病毒、鼻病毒、腮腺炎病毒、風(fēng)疹病毒、麻疹病毒、水痘病毒、腺病毒、柯薩奇病毒A型、單純皰疹病毒和巨細(xì)胞病毒等。其他微生物：肺炎支原體和引起Q熱的貝納立克次體。三、空氣微生物的分布高度分布：微生物在空氣中的濃度與距離地面的高度呈對(duì)數(shù)下降。上海國(guó)際飯店細(xì)菌總數(shù)：1-4層 154-195CFU，輕度污染5層-74m54-82CFU，普通空氣三、空氣微生物的分布水平分布：城市細(xì)菌濃度高于農(nóng)村，鄉(xiāng)村的霉菌、花粉、植物孢子濃度高于城市。三、空氣微生物的分布時(shí)間分布：早晚多，中午（12-14點(diǎn)）少；夏季多，冬季少。四、空氣微生物的衛(wèi)生學(xué)意義正常情況下，對(duì)自然界氧、碳、硫、磷的循環(huán)起著重要作用?？諝馕⑸镂廴緦?duì)人類(lèi)健康、工業(yè)、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)等都會(huì)造成影響。呼吸道傳染病，傷口感染變態(tài)反應(yīng)污染食品……/03空氣微生物的檢驗(yàn)

及衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)一、空氣微生物的檢測(cè)自然沉降法慣性撞擊式采樣法液體撞擊式采樣器固體撞擊式采樣器：?jiǎn)渭?jí)、多級(jí)過(guò)濾阻留式采樣器靜電沉著類(lèi)采樣器自然沉降法空氣中微生物粒子在自身重力作用下，以垂直的自然方式沉降到瓊脂培養(yǎng)基上，于37℃條件下培養(yǎng)24h，計(jì)算菌落數(shù)；以cfu/皿或cfu/m3表示。制作采樣皿采樣點(diǎn)選擇暴露時(shí)間培養(yǎng)計(jì)數(shù)5min自然沉降法依據(jù)：原蘇聯(lián)奧梅梁斯基認(rèn)為，在100cm2培養(yǎng)基表面上，5min內(nèi)能落上約10L空氣所含的菌數(shù)。計(jì)算公式：

C=50000N/A·tC—細(xì)菌濃度（cfu/m3）A—采樣面積（cm2）t--暴露時(shí)間（min）N—平皿上的菌落數(shù)直徑為9cm的培養(yǎng)皿，采樣5min，培養(yǎng)得到菌落數(shù)為10cfu，計(jì)算：C=50000*10/[(3.14*4.52)*5]=1572cfu/m3自然沉降法優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單方便臟環(huán)境采樣效率較好缺點(diǎn)：采樣效率普遍低于采樣器法不適用于在有氣流環(huán)境中使用不適宜檢測(cè)小的帶菌粒子慣性撞擊式采樣法利用抽氣裝置在單位時(shí)間內(nèi)將一定容量的含有微生物粒子的空氣，通過(guò)某些裝置形成高速氣流，氣流中的微生物粒子隨之高速運(yùn)動(dòng)，當(dāng)氣流改變方向時(shí)，運(yùn)動(dòng)的粒子因慣性繼續(xù)向前撞擊并粘集于培養(yǎng)基表面上。液體撞擊式采樣器固體撞擊式采樣器慣性撞擊式采樣法單級(jí)固體撞擊式采樣器：JWL型采樣器為代表。將空氣中不同大小的含菌粒子撞擊于一個(gè)采集面上，只能測(cè)定空氣中微生物的濃度。多級(jí)固體撞擊式采樣器：Anderson采樣器為代表。將空氣中不同大小的含菌顆粒采集于不同采集面，既可測(cè)定空氣微生物的濃度，又可了解粒子大小分布情況。六級(jí)篩孔撞擊式空氣微生物采樣器使用方法及步驟（霍爾德儀器）_嗶哩嗶哩_bilibili過(guò)濾阻留式采樣器利用抽氣裝置，使空氣通過(guò)濾材，而使微生物粒子阻留在濾材上。優(yōu)點(diǎn)：可在各種氣溫下應(yīng)用，采集效率高。缺點(diǎn)：阻留在濾材上的微生物受到通過(guò)濾材氣流的不斷沖擊，有可能被吹干致死，且濾膜孔易堵塞，難以保持穩(wěn)定的采氣量。靜電沉著類(lèi)采樣器利用高壓靜電場(chǎng)，使空氣中的微生物粒子帶上一定量的電荷后，被相反電荷的采集面所吸附，使空氣微生物采集下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)：對(duì)氣流的阻力很小，能允許較大的采氣量，可將大量空氣中采集的微生物濃縮于少量的采樣液中，有利于檢測(cè)空氣含量很少的微生物。一、空氣微生物的檢測(cè)選用采樣方法應(yīng)考慮的因素：

（1）采樣器的靈敏度（2）采樣效率（3）重復(fù)性（4）微生物存活率（5）使用方便（6）易于分析（7）可區(qū)分粒子大?。?）價(jià)格一、空氣微生物的檢測(cè)一般情況下，可選單級(jí)固體撞擊式采樣器。多級(jí)固體撞擊式采樣器較準(zhǔn)確，但采樣復(fù)雜，瓊脂消耗較多，只在做空氣微生物的顆粒大小測(cè)定時(shí)應(yīng)用。在空氣微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的研究中，可選用液體撞擊式采樣器。自然沉降法可適用要求不高的場(chǎng)所。二、空氣微生物的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以細(xì)菌作為標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌選用的指標(biāo)是菌落總數(shù)，cfu/皿或cfu/m3我國(guó)公共場(chǎng)所空氣細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)撞擊法（cfu/m3）沉降法（cfu/皿）適用范圍≤1000≤103~5星級(jí)賓館、飯店≤1500≤102星級(jí)以下賓館和非星級(jí)帶空調(diào)賓館、飯店≤2500≤30普通飯店、招待所、酒吧、茶座、咖啡廳、圖書(shū)館、博物館、美術(shù)館、飛機(jī)客艙≤4000≤40音樂(lè)廳、影劇院、錄像廳、游戲廳、舞廳、理發(fā)店、美容院、游泳館、體育館、醫(yī)院候診室、候機(jī)室、旅客列車(chē)車(chē)廂、輪船客艙、飯館（餐廳）≤7000≤75展覽館、商店、書(shū)店、候車(chē)室、侯船室二、空氣微生物的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)WHO推薦的醫(yī)院各部門(mén)空氣細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別撞擊法（cfu/m3）適用范圍I級(jí)區(qū)＜10器官移植、心血管、矯形等外科手術(shù)室保護(hù)性隔離等，灌注或配制注射液實(shí)驗(yàn)室II級(jí)區(qū)＜200無(wú)菌或手術(shù)室、供應(yīng)室、嬰兒室、中心滅菌單位術(shù)后恢復(fù)室、早產(chǎn)兒及產(chǎn)房、石膏室（如在手術(shù)室內(nèi)）、重癥監(jiān)護(hù)病房III級(jí)區(qū)200～500一般病房、治療室、放射室、衣帽室、小手術(shù)室浴室、按摩室、盥洗室IV級(jí)區(qū)傳染病科、放射性核素室V級(jí)區(qū)衛(wèi)生間、儲(chǔ)藏室、太平間等二、空氣微生物的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)20022022/04空氣微生物污染及其預(yù)防一、空氣微生物污染1.傳播方式塵埃(dust)：空氣微生物的重要載體。飛沫(droplet)：微生物存在于呼吸道噴出的飛沫中。飛沫核(dropletnuclei)：小飛沫蒸發(fā)后剩下的核心。一、空氣微生物污染2.微生物氣溶膠概念特性感染性對(duì)健康的影響監(jiān)測(cè)與應(yīng)用①概念氣溶膠（aerosol）：是指固體或液體微粒在空氣介質(zhì)中的分散體系。被分散的物質(zhì)（固體或液體）稱(chēng)為分散相，空氣則稱(chēng)為分散介質(zhì)。直徑在0.001μm-100μm。微生物氣溶膠（microbialaerosol）：分散相中含有微生物粒子的氣溶膠，根據(jù)微生物種類(lèi)不同，可分為細(xì)菌氣溶膠、真菌氣溶膠、病毒氣溶膠。②特性一般氣溶膠的物理特性：具有沉降、凝聚吸附、撞擊、帶電荷、擴(kuò)散等作用。微生物的生物特性：存活、衰亡、突變等。③感染性微生物氣溶膠的感染性與微生物氣溶膠粒子直徑大小、數(shù)量、微生物在空氣中的生存能力、機(jī)體免疫力等有關(guān)。粒徑＞5μm時(shí)，60％可受阻于鼻腔；粒徑4-5μm時(shí)，粒子被吸入，可到達(dá)支氣管和次級(jí)支氣管；粒徑l-4μm時(shí)，粒子大部分可直接到達(dá)肺深部(細(xì)支氣管、呼吸支氣管、肺泡)；粒徑＜1μm時(shí)，大部分停留于肺部，少部分因動(dòng)力學(xué)關(guān)系又隨呼氣而排出。④對(duì)健康的影響傳播呼吸道傳染病引起變態(tài)反應(yīng)：農(nóng)民肺、棉塵熱、蔗渣塵肺、花粉病、塵螨過(guò)敏傷口感染食品變質(zhì)農(nóng)民肺在生產(chǎn)勞動(dòng)過(guò)程中因反復(fù)吸入含有高溫放線菌及其孢子的霉變谷草粉塵而發(fā)生的一種外源性過(guò)敏性肺泡炎?；疾〕跗跁?huì)出現(xiàn)畏寒、高熱、頭痛、呼吸困難、胸悶惡心等癥狀，容易被誤診為感冒而被忽視；如未及時(shí)檢查治療，加上長(zhǎng)期接觸這些粉塵，病情可能長(zhǎng)期反復(fù)難以治愈，出現(xiàn)咳嗽咳痰、呼吸障礙、乏力，肺部出現(xiàn)肺間質(zhì)纖維化，造成肺氣腫、支氣管擴(kuò)張，甚至癌癥等并發(fā)癥。⑤監(jiān)測(cè)與應(yīng)用