六核酸類藥物的含量測定方法職業(yè)教育醫(yī)學生物技術專業(yè)教學課件

職業(yè)教育醫(yī)學生物技術專業(yè)教學資源庫六

核酸類藥物的含量測定方法職業(yè)教育醫(yī)學生物技術專業(yè)教學資源庫1滴定分析法2紫外-可見分光光度法3高效液相色譜法核酸類藥物的含量測定方法職業(yè)教育醫(yī)學生物技術專業(yè)教學資源庫取本品約0.1g，精密稱定，加冰醋酸20mL與乙酸酐10mL，微熱使其溶解，放冷，照電位滴定法[《中國藥典》(2010年版)]，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定結果用空白試驗進行校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于12.91mg的氟胞嘧啶。氟胞嘧啶的含量測定精確稱取本品0.2g，加冰醋酸40mL，溫熱使其溶解，冷卻后再加無水乙酸40mL溶解后，加入氯化甲基玫瑰苯胺指示劑1~2滴，用過氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至終點(溶液由紫色變?yōu)榈G色)，并將滴定結果用空白試驗進行校正，即得。每1mL過氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于13.51mg的6-氨基嘌呤。6-氨基嘌呤的含量測定1.基于氟胞嘧啶、6-氨基嘌呤等核酸類藥物的弱堿性，在非水溶液冰醋酸中的堿性增強，用酸性滴定液直接滴定，終點較為明顯，可得到比較滿意的結果。職業(yè)教育醫(yī)學生物技術專業(yè)教學資源庫阿糖腺苷的含量測定精密稱取本品適量，加鹽酸溶液(0.01mol/L)制成每1mL約含10μg的溶液，依照紫外-可見分光光度法[《中國藥典》(2010年版)]，在258nm處測定吸光度，按C10H13N5O4的吸收系數(shù)E1%lcm為556計算，即得。2.紫外-可見分光光度法的定量分析有很高的靈敏度，可測至10-7~10-4g/mL，相對誤差可達1%以下，在藥物的含量測定中應用廣泛。職業(yè)教育醫(yī)學生物技術專業(yè)教學資源庫(1)內(nèi)標法加校正因子測定供試品中主成分含量按各藥品項下的規(guī)定，精密稱(量)取對照品和內(nèi)標物質(zhì)，分別配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子測定用的對照溶液。取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測量對照品和內(nèi)標物質(zhì)的峰面積或峰高，計算校正因子。再取各藥品項下含有內(nèi)標物質(zhì)的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖，測量供試品中待測成分和內(nèi)標物質(zhì)的峰面積或峰高，計算含量。3.高效液相色譜法職業(yè)教育醫(yī)學生物技術專業(yè)教學資源庫①色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(10:90)為流動相；檢驗波長為248nm。理論塔板數(shù)按肌苷峰計算不少于2000。②測定：取本品適量，精密稱定，加水溶解制成每1mL水中約含20μg的溶液，精密量取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。(2)外標法測供試品中主成分含量按各藥品項下的規(guī)定，精密稱量取對照品和供試品，配制成溶液，分別精