TCSTC-甘蔗梢腐病抗性評價技術規(guī)范編制說明

中國熱帶作物學會

團體標準《甘蔗梢腐病抗性評價技術規(guī)范》（征求意見稿）編制說明《甘蔗梢腐病抗性評價技術規(guī)范》起草組2023年5月一、工作簡況（一）任務來源甘蔗梢腐病作為一種氣傳為主的真菌性病害，自1896年在爪哇發(fā)現以來已有100多年歷史，在全世界多個蔗區(qū)廣泛發(fā)生，已成為一種世界范圍內的病害[1-3]。目前在我國各個蔗區(qū)均有發(fā)生[4-6]。近年來，梢腐病已由零星發(fā)生，轉變?yōu)榇竺娣e發(fā)生，并呈現出逐年增加趨勢，導致甘蔗減產減糖，經濟損失巨大。甘蔗梢腐病隨著其蔓延趨勢而逐漸受到科學家的重視，目前在病原菌分離鑒定、種系發(fā)育等方面已有比較全面和系統(tǒng)的研究ADDINNE.Ref.{1DB1C122-6118-41B7-80A4-45ABC6AC2E19}[7-10]。但對于影響甘蔗梢腐發(fā)生的因素仍有諸多不明確之處，對梢腐病防控造成了巨大挑戰(zhàn)。當前我國針對甘蔗梢腐病抗性評價尚無統(tǒng)一的技術規(guī)程。上世紀90年代廣西甘蔗研究所建立PBD田間5級法分級標準，但未能對甘蔗抗性水平作出分級評價[4]。張玉娟對不同甘蔗品種和實生苗進行了初步分級標準探討，但由于甘蔗生長受品種、栽培方式以及生態(tài)環(huán)境等多重因素影響，其以感病率作為聚類分析依據，對于客觀評價抗病性指導性不強[11]。不同生產管理部門制定的抗性評價標準，病情分級等指標不一。由于缺乏有效監(jiān)測導致生產上病害病情發(fā)現滯后、種植和施肥時間不合理等現象普遍存在，進一步導致防效不理想且成本高等諸多問題。如何精準地識別、監(jiān)測甘蔗梢腐病病害發(fā)生情況，是病害防控工作中應首要解決的關鍵問題。因此，亟需制定甘蔗梢腐病抗性評價技術規(guī)范，進而完善病害分級標準，為該病害的預警提供統(tǒng)一技術標準，切實實現甘蔗梢腐病的早發(fā)現、早防治，保障我國甘蔗產業(yè)的健康生產和發(fā)展。根據中國熱帶作物學會文件（中熱學字【2023】11號），關于第一批團體標準制定項目計劃的通知，由廣西大學、農業(yè)農村部農技推廣中心承擔《甘蔗梢腐病抗性評價技術規(guī)范》團體標準的制定工作，項目負責人為張木清教授。該項目的技術歸口單位為中國熱帶作物學會標準化技術委員會。（二）起草單位起草單位為廣西大學、農業(yè)農村部農技推廣技術中心、廣東農業(yè)科學院和廣西農業(yè)科學院。制標小組及任務進行分工如下（表1）。表1主要起草人任務分工序號姓名職稱所在單位任務分工1張木清教授廣西大學統(tǒng)籌標準制定、征集意見、組織協(xié)調2姚偉博士研究生廣西大學標準制定與技術支持3許譽芝教授廣西大學病害調研與分級分析4暴怡雪研究員廣西大學標準修改與編輯5史夢雅碩士研究生農業(yè)農村部農技推廣技術中心參與標準制定與修改6陳保善博士研究生廣西大學標準制定指導7姚姿婷副研究員廣西農業(yè)科學院病害調研與分級分析8鄒承武講師廣西大學參與本標準制定與修改9徐世強助理研究員廣東農業(yè)科學梢腐病病害調查與數據收集整理10王繼華研究員廣東農業(yè)科學院梢腐病病害調查與數據收集整理11王澤平副研究員廣西農業(yè)科學院梢腐病病害調查與數據收集整理12胡琴副教授廣西大學參與本標準制定與討論13黃江峰助理教授廣西大學參與本標準制定與修改14肖勝華助理教授廣西大學參與本標準制定與討論15余凡助理教授廣西大學參與本標準制定與討論16張積森教授廣西大學參與本標準制定與討論17蔣洪濤助理研究員廣西大學參與本標準制定與討論18林鎮(zhèn)越碩士研究生廣西大學梢腐病病害調查與數據收集整理19黃振博士研究生廣西大學梢腐病病害調查與數據收集整理20張桂英副教授廣西大學梢腐病病害調查與數據收集整理（三）主要工作過程1、起草階段2013-2015年，起草工作組在我國廣西、云南、海南、廣東等甘蔗主要種植區(qū)進行了廣泛的甘蔗梢腐病病害調查（圖1-4），形成了基本的框架思路；根據多年田間調查情況及室內人工接種（活體和離體），確定了甘蔗梢腐病人工接種的方法和田間調查的要求，并進行了甘蔗梢腐病病原菌的形態(tài)特征和田間病害識別資料的收集、完善和整理工作（圖5-6）；2016-2018年在廣西叮當、廣西百色和云南德宏進行了100個現代甘蔗育種主要親本和種質的一新兩宿（五季）抗梢腐病的評價；2017-2021年，開始系統(tǒng)開展了甘蔗梢腐病新品種（系）、高代材料和親本的人工接種、自然發(fā)病等發(fā)病率和發(fā)病指數，評價了不同基因型的抗梢腐病能力。2022年1-6月，整理項目組完成關于甘蔗梢腐病病原菌分離鑒定等研究資料的收集[12-15]，同時整理國內外已有的相關資料，并根據標準制定要求補充完善甘蔗梢腐病田間鑒定和試驗設計、室內苗期鑒定和試驗設定、抗病性評價，包括完善甘蔗梢腐病的田間病害調查時間、方法、最高病情級別個體確認及調查流程等。2022年7-12月，為精準制定抗性評價中的田間鑒定標準和室內鑒定標準，繼續(xù)開展田間病害調查與室內接種實驗調查。2023年1月開始組織技術專家著手標準的起草工作，于2023年5月完成征求意見稿初稿，并在此基礎上按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的編寫要求和格式對標準初稿進行了進一步修改和完善，形成征求意見稿。圖1在廣西田間調研圖2在云南田間調研圖3在海南田間調研圖4在廣東田間調研圖5甘蔗梢腐病田間癥狀收集圖6甘蔗梢腐病田間癥狀收集2.征求意見階段2023年5月，標準制定小組完成征求意見稿的編寫后，于5月15日至6月15日發(fā)往有關單位/專家廣泛征求意見，擬發(fā)送《征求意見稿》的單位數：10個，專家20個。3.審定階段二、標準編制原則和確定標準主要內容的依據（一）編制原則本標準編制遵循“先進性、實用性、統(tǒng)一性、規(guī)范性”的原則，注重標準的通用性、適用性、配套性和可操作性，以保障甘蔗產業(yè)健康生產為目標，結合查閱資料及試驗研究嚴格按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第１部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定編寫。（二）主要內容的依據1）關于本標準的范圍本標準規(guī)定了甘蔗梢腐病抗病性鑒定技術和抗病性評價標準；規(guī)定了甘蔗梢腐病抗性鑒定的術語和定義、田間鑒定和試驗設計、室內苗期鑒定和試驗設定、病情調查、抗病性評價以及鑒定記載表格。本標準適用于我國非主要農作物品種登記中甘蔗品種梢腐病抗性鑒定和抗性評價。本標準同時適用于我國甘蔗品種區(qū)域試驗、生產試驗和自然誘發(fā)鑒定中的甘蔗梢腐病的病情調查和抗性評價；適用于甘蔗品種、品系及種質資源對甘蔗梢腐病抗性的田間鑒定和室內鑒定。2）關于規(guī)范性引用文件本標準引用了《廣西甘蔗主栽品種梢腐病田間抗性初步評價》[16]中包括抗性水平、高抗、中抗、感病、高感等術語和定義，以及引用了《引進甘蔗品種黑穗病抗性鑒定及結果分析》[17]中的“病情指數”。3）關于標準中的術語和定義甘蔗梢腐病是甘蔗上重要的真菌性病害，嚴重威脅甘蔗的品質和產量，目前尚未有規(guī)范的抗性評價技術體系。本標準對甘蔗梢腐病術語進行了介紹，并針對抗性評價調查統(tǒng)計中涉及到的病情級別、病害指數、發(fā)病率（發(fā)病程度）、抗病性鑒定等術語進行了定義。三、主要試驗或驗證的分析、綜述報告，技術經濟論證，預期的經濟效果（一）主要試驗或驗證的分析、綜述報告1）關于甘蔗梢腐病的識別與病原菌鑒定甘蔗梢腐?。≒okkahboengdisease）是由鐮孢菌種復合體引起的氣傳性真菌性病害[12-15]。高溫多濕環(huán)境條件下，病株及腐生在植物殘體上的病原菌不斷積累、可隨氣流傳播，傳播擴散速度快，梢腐病菌以分生孢子的形式飄落到甘蔗心葉上，隨著雨水滲入到生長點部位，并在適宜條件下萌發(fā)侵染甘蔗[18]。該病害主要危害甘蔗的生長點和幼葉部位。感染梢腐病的典型癥狀為：初期葉片基部褪綠，出現輕微皺縮呈波紋狀；隨后形成紅褐色條紋狀病斑；嚴重時梢部腐爛，節(jié)間扭曲縮短，甚至整株甘蔗枯死，導致甘蔗產量和糖分顯著下降[19]。標準起草單位的科研人員在我國主要甘蔗種植區(qū)包括廣西、云南、海南、廣東等進行廣泛調研，收集不同地區(qū)甘蔗梢腐病癥狀的圖片資料，熟悉掌握甘蔗梢腐病癥狀的特點，這對于該病害的調查及抗性鑒定具有重要支撐作用。同時，科研人員形成了一套系統(tǒng)完善的病原鐮孢菌分離鑒定的方法，并對不同種鐮孢菌的形態(tài)特征進行了詳細描述，有助于各類科研單位更深層次了解甘蔗梢腐病，將其納入標準內容。該項內容作為資料性附錄編制。2）關于甘蔗梢腐病的分級標準葉片發(fā)病癥狀是田間調查中判斷甘蔗梢腐病發(fā)生程度的重要指標，病斑面積及葉片癥狀分別是人工離體和活體針刺接種判斷病害發(fā)生程度的指標。本標準根據項目組科研人員從2013年至今持續(xù)開展的甘蔗梢腐病室內接種鑒定和田間病害調查工作，整理和記錄了各類發(fā)病癥狀，整理標準如下：①田間梢腐病嚴重程度分為0-4級：0級表示甘蔗葉上沒有梢腐病癥狀。1級只有1-2片葉出現輕微的癥狀，即葉基或其他部位有黃化現象，紡錘體稍有皺折。在褪綠部分出現一些不規(guī)則的紅色條紋和斑點。2級包括具有以下癥狀的3-4片葉子，即新葉明顯變黃、皺縮、輕微扭曲和變短。其他的葉片扭曲或糾結在一起，并出現一些褐色的斑點，植物仍可繼續(xù)生長。3級表示4張葉片以上有癥狀，或多片葉明顯褶皺、扭曲、纏繞，有明顯的紅褐色條病斑，葉子變短并呈匕首狀，生長受阻，但蔗株尚未出現頂腐。4級表示心葉和生長點腐爛死亡，梢部幼嫩組織形成頂腐狀，整個頂端死亡或長出側芽。表2甘蔗梢腐病田間調查分級標準發(fā)病等級發(fā)病癥狀0無癥狀11~2張葉片有癥狀，即葉片基部或其他部分褪綠；輕微皺縮呈波紋狀；有少許紅褐色斑點或條紋。23~4張葉片有以下癥狀，即心葉皺縮呈階梯狀，顯著黃化、扭曲、糾纏且有紅褐色條紋；葉片纏繞扭曲或缺刻，出現褐色病斑。34張葉片以上有以上癥狀，或多片葉明顯褶皺、扭曲、纏繞，有明顯的紅褐色條病斑，葉子變短并呈匕首狀，生長受阻，但蔗株尚未出現頂腐4心葉和生長點腐爛死亡，梢部幼嫩組織形成頂腐狀，整個頂端死亡或長出側芽②活體接種鑒定梢腐病嚴重程度分為0-4級：0級表示甘蔗葉上基本沒有梢腐病癥狀。1級表示針刺接種的部位出現輕微皺縮呈波紋狀，葉片上有少許紅褐色斑點或條紋。2級表示接種的傷口處出現顯著褪綠黃化和扭曲現象，葉片開始出現褐色病斑。3級表示葉片受害面積加大，出現明顯褶皺、扭曲、纏繞，有明顯的紅褐色條病斑。4級表示心葉和生長點腐爛，梢部幼嫩組織形成頂腐狀，直至蔗株死亡。表3甘蔗梢腐病活體鑒定分級標準發(fā)病等級發(fā)病癥狀0基本無癥狀1針刺部位輕微皺縮呈波紋狀，葉片出現少許紅褐色斑點或條紋2傷口處出現顯著褪綠黃化和扭曲現象，葉片開始出現褐色病斑3葉片受害面積加大，出現明顯褶皺、扭曲、纏繞，有明顯的紅褐色條病斑4心葉和生長點腐爛，梢部幼嫩組織形成頂腐狀，直至蔗株死亡③離體接種鑒定梢腐病嚴重程度分為0-4級：0級表示甘蔗葉上基本沒有梢腐病癥狀。1級表示離體接種的葉片剪接處出現輕微褪綠癥狀。2級表示葉片出現褪綠黃化病斑，蔓延約為1cm左右。3級表示葉片褪綠黃化面積迅速加大，并出現明顯的紅褐色條病斑。4級表示整個葉片幾乎均為紅褐色條病斑，出現腐爛現象。表4甘蔗梢腐病離體鑒定分級標準發(fā)病等級發(fā)病癥狀0基本無癥狀1葉片剪接處出現輕微褪綠癥狀2葉片出現褪綠黃化病斑，蔓延約為1cm左右3葉片褪綠黃化面積迅速加大，并出現明顯的紅褐色條病斑4整個葉片幾乎均為紅褐色條病斑，出現腐爛現象發(fā)病率計算公式：發(fā)病率（%）=病株數/調查總株數×100病情指數計算公式：病情指數=[∑(ni×vi)/4N]×100，n代表所在病級的樣本數，v代表發(fā)病等級，N代表調查總株數。3）關于甘蔗梢腐病的田間調查方法項目組成員2013-2021年間，基于不同育種單位和年份所選育的甘蔗品種和高代育種材料600余份，在廣西大學扶綏農業(yè)試驗站進行田間病害調查。當地海拔69.5m，年平均日照1693h，總輻射108.4Kcal/cm，平均無霜期346天，降雨量1050~1300mm，并收集試驗期間每日氣溫和降雨量（圖7）。田間土壤為紅壤土，前茬作物為甘蔗。采取隨機區(qū)組設計，3次重復，4-5行區(qū)，行長7-10m，行距1-1.2m，小區(qū)面積33.5-50.0m2。其中宿根蔗下種期為頭年3-4月，翌年2月收獲。新植蔗下種期為翌年3-4月，翌年6月下旬-7月上旬調查各區(qū)試點甘蔗梢腐病發(fā)病情況，記錄其發(fā)病表型。圖72018-2022年扶綏農業(yè)試驗站日氣溫、降雨量和濕度多年來在我國甘蔗主蔗區(qū)田間開展甘蔗梢腐病病害調查，結合查閱相關資料數據，當地、氣溫、降雨量和濕度以及病害發(fā)生特點，基本明確了甘蔗梢腐病在我國主蔗區(qū)的年度發(fā)生動態(tài)趨勢，總體表現全年均有病害發(fā)生，其中6-9月份相對高溫潮濕季節(jié)為病害的易爆發(fā)期。因此，6-9月份最利于病害爆發(fā)，應進行密集調查；10月份至翌年5月份病害發(fā)生頻率降低，可適當降低調查頻次。4）關于檔案保存要求甘蔗梢腐病的田間調查數據和人工接種數據應做好妥當保存，用于生產追溯以及為未來的病害發(fā)生趨勢分析提供數據依據，要求檔案保存期3年以上。（二）技術經濟論證、預期的經濟效果本項目實行標準制定、調研與實際生產相結合的模式，由廣西大學和農業(yè)農村部農技推廣技術中心制定調研與試驗方案，在多年多點梢腐病害調查、定點監(jiān)測等相關數據的基礎上，深入甘蔗種植區(qū)一線，積極與當地農技人員及蔗農交流，從2013年至今持續(xù)開展甘蔗梢腐病的室內接種篩選和田間接種調查工作，整理和記錄各類發(fā)病癥狀，探討甘蔗新品種抗病性差異和各地甘蔗梢腐病區(qū)域性發(fā)生特點，綜合形成實用性強、可操作性高的團體標準。本標準的制定和實施，將規(guī)范并逐步完善甘蔗梢腐病田間抗性評價體系，為甘蔗梢腐病的分級提供統(tǒng)一技術標準，做到早發(fā)現、早預防，降低甘蔗梢腐病對我國甘蔗產業(yè)健康生產的影響，促進產業(yè)發(fā)展，其將具有巨大的社會效益和經濟效益。四、采用國際標準和國外先進標準的程度本標準沒有采用國際標準。五、與現行的法律法規(guī)和強制性國家標準的關系經檢索，本標準與有關現行標準、法律、法規(guī)和強制性標準沒有沖突。六、重大分歧意見的處理經過和依據本標準制定過程中尚未出現重大分歧意見。七、標準作為強制性或推薦性標準的建議建議本標準作為推薦性標準發(fā)布實施。甘蔗梢腐病是我國甘蔗種植區(qū)廣泛分布且非常重要的真菌性病害，目前尚無系統(tǒng)的抗性評價體系和標準來規(guī)范其監(jiān)測和防治，因此推薦使用本標準。八、貫徹標準的要求和措施建議（包括組織實施、技術措施、過渡辦法等）標準發(fā)布后，建議通過培訓、咨詢等形式在廣西、云南、海南、廣東、福建等主要甘蔗種植區(qū)進行推廣應用。九、廢止現行有關標準的建議本標準為首次發(fā)布。十、其他應予說明的事項無

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