中藥制劑一般雜質(zhì)檢查-砷鹽檢查法

中藥制劑雜質(zhì)檢查技術(shù)——砷鹽檢查法案例導(dǎo)入科學(xué)證實(shí)光緒皇帝死于砒霜中毒

2008年北京市公安局法醫(yī)檢驗(yàn)鑒定中心，中國原子能科學(xué)研究院反應(yīng)堆工程研究設(shè)計(jì)所，清西陵文物管理處共同發(fā)布了歷時(shí)5年研究的成果《清光緒帝死因研究工作報(bào)告》（以下簡(jiǎn)稱《報(bào)告》）

《報(bào)告》稱通過對(duì)光緒皇帝頭發(fā)樣本進(jìn)行法醫(yī)學(xué)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)含砷量遠(yuǎn)超過正常值，僅頭發(fā)殘?jiān)械呐烤透哌_(dá)201.5毫克，而正常人口服砒霜60—200毫克就會(huì)中毒身亡如何進(jìn)行砷鹽檢查?砷鹽和砒霜有什么關(guān)系?中藥制劑中砷鹽的來源有哪些?案例導(dǎo)入科學(xué)證實(shí)光緒皇帝死于砒霜中毒

砷鹽檢查法一、概述砒霜是一種急性劇毒物質(zhì)，無臭無味，為白色霜狀粉末，化學(xué)成分為三氧化二砷（As2O3）。部分中藥方劑中含有砒霜，記載其有“劫痰截瘧，殺蟲，蝕惡肉，治寒痰哮喘”的功效

1.砷鹽與砒霜砷鹽是藥物中存在的微量的砷化物和砷酸鹽。其中砷可以三價(jià)、五價(jià)或有機(jī)狀態(tài)的形式存在一、概述

2.砷鹽的來源砷鹽檢查法中藥材栽培種植階段：除草劑、殺蟲劑、磷酸鹽肥料等中藥制劑生產(chǎn)過程：無機(jī)試劑、搪瓷反應(yīng)器等一、概述

3.砷鹽的檢查方法砷鹽檢查法對(duì)照法：比較供試品溶液與一定量的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下處理所呈現(xiàn)的產(chǎn)物顏色的深淺，《中國藥典》收載砷鹽檢查第一法（古蔡氏法）和第二法（Ag-DDC）法含量測(cè)定法：原子吸收分光光度法（AAS）、電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定部分中藥制劑中砷鹽的含量二、第一法：古蔡氏法1.測(cè)定原理砷鹽檢查法金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與供試品中的微量砷鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與相同條件下一定量的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所產(chǎn)生的砷斑比較，以判定供試品中砷鹽是否超過限量As3++3Zn+3H+→3Zn2++AsH3

（反應(yīng)快）AsO33-+3Zn+9H+→3Zn2++3H2O+AsH3（反應(yīng)快）AsO43-+4Zn+11H+→4Zn2++4H2O+AsH3（反應(yīng)慢）砷鹽與鋅和鹽酸作用AsH3+2HgBr2→2HBr+AsH(HgBr)2(黃色)2As(HgBr)3+AsH3→3AsH(HgBr)2(棕色)

砷化氫與溴化汞試紙作用2.儀器用具古蔡氏法檢砷裝置，分析天平（感量0.1mg）、量瓶（100ml、1000ml）、量筒（10ml）、恒溫水浴鍋、馬弗爐、坩堝、干燥器、變色硅膠、定量濾紙鹽酸、碘化鉀、鋅粒、酸性氯化亞錫試液、標(biāo)準(zhǔn)砷溶液、溴化汞試紙、醋酸鉛棉花等砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法3.測(cè)定方法砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法搭建儀器裝置（醋酸鉛棉花準(zhǔn)備、溴化汞試紙準(zhǔn)備）標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備（標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml）供試品檢查（中藥制劑需經(jīng)有機(jī)破壞后使砷鹽游離出來）4.注意事項(xiàng)砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法醋酸鉛棉花的作用：吸收H2S，避免形成PbS色斑4.注意事項(xiàng)砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法碘化鉀/KI和氯化亞錫SnCl2的作用：還原劑，加快反應(yīng)速度將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷，加快反應(yīng)速度AsO33-KISnCl2AsO43-AsH3慢快＋5＋3將I2還原為I-，循環(huán)利用4.注意事項(xiàng)砷鹽檢查法二、第一法：古蔡氏法碘化鉀KI和氯化亞錫SnCl2的作用：還原劑，加快反應(yīng)速度與Zn粒表面形成Zn-Sn齊SnCl2抑制銻化氫的生成三、第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）1.測(cè)定原理本法既可以用于藥品中的砷鹽限量檢查，又可以測(cè)定砷鹽含量砷鹽檢查法金屬鋅與酸反應(yīng)生成新生態(tài)的氫，與供試品中的微量砷鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，用二乙基二硫代氨基甲酸銀的三氯甲烷溶液吸收（含二乙胺），生成紅色膠態(tài)銀，與相同條件下一定量的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所產(chǎn)生的產(chǎn)物比較顏色，或在510nm條件下測(cè)定吸光度，以判定供試品中砷鹽是否超過限量2.儀器用具砷鹽檢查法三、第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）Ag-DDC法檢砷裝置，分析天平（感量0.1mg）、量瓶（100ml、1000ml）、量筒（10ml）、恒溫水浴鍋、馬弗爐、坩堝、干燥器、變色硅膠、定量濾紙等鹽酸、碘化鉀、鋅粒、酸性氯化亞錫試液、標(biāo)準(zhǔn)砷溶液、二乙基二硫代氨基甲酸銀試液、三氯甲烷、醋酸鉛棉花等3.測(cè)定方法砷鹽檢查法三、第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）搭建儀器裝置（醋酸鉛棉花準(zhǔn)備、Ag-DDC試液準(zhǔn)備）標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備（標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml）供試品檢查（中藥制劑需經(jīng)有機(jī)破壞后使砷鹽游離出來）對(duì)照法含量測(cè)定法：照紫外-可見分光光度法，在510nm處測(cè)定吸光度4.注意事項(xiàng)二乙基二硫代氨基甲酸銀試液的配制：試液中加入三乙胺是為了中和反應(yīng)生成的二乙基二硫代氨基甲酸二乙基二硫代氨基甲酸銀試液為淺黃綠色，測(cè)吸光度時(shí)，須以此試液為空白砷鹽檢查法三、第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法）操作時(shí)由于在25～40℃水浴中反應(yīng)45分鐘后，平底玻璃管中有部分三氯甲烷揮發(fā)，故比色前應(yīng)添加三氯甲烷至5ml，搖勻鏈接未來崗位砷鹽是中藥飲片和中藥制劑中常見的毒性雜質(zhì)，砷鹽限量檢查可以有效控制某些藥材中微量砷鹽的含量，對(duì)于保證藥品安全性和純度有著重要意義作為一名藥品檢驗(yàn)人員，須牢固樹立“質(zhì)量第一、安全操作”的意識(shí)，牢固掌握砷鹽檢查的操作方法和注