T-SXSF 13-2025 沙棘葉及其茶中多酚含量的測定 分光光度法

ICS65.020.01CCSX04SXSF2024-12-30發(fā)布IT/SXSF13—2025前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4儀器 5試劑 6樣品制備 7測定 28結(jié)果計算 29重復(fù)性 3T/SXSF13－2025本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由山西省林學(xué)會提出并監(jiān)督管理。本文件由山西省林學(xué)會團體標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：山西省林業(yè)和草原科學(xué)研究院。本文件主要起草人：魏璐、田建華、史鵬、劉英翠、梁愛軍、朱建蕓、郭學(xué)斌、張春媛、李青輝、馬倩。1T/SXSF13—2025沙棘葉及其茶中多酚含量的測定分光光度法文件規(guī)定了沙棘葉及其茶中多酚含量測定的儀器、試劑、樣品制備、測定、結(jié)果計算和重復(fù)性等要求。本文件適用于采用分光光度法測定沙棘葉及其茶中多酚含量。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4儀器分析天平（精度0.1mg）、超聲提取器、分光光度計、粉碎機。5試劑5.1試劑和材料碳酸鈉（Na2CO3福林酚試劑，濃度1mol/L；沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥98%，相對分子質(zhì)量170.12；實驗用水，水質(zhì)達(dá)到GB/T6682規(guī)定的三級及以上。5.210%碳酸鈉溶液用分析天平稱取10mg碳酸鈉（Na2CO3）于100mL容量瓶中，加水定容。5.320%福林酚溶液量取10mL濃度1mol/L福林酚試劑于50mL容量瓶中，加水定容。5.4沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)工作液用分析天平稱取10mg沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品，在10mL容量瓶中加少許水溶解后定容，且須適時配用。分別吸取定容后溶液0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60mL置于10mL容量瓶中，加水定容，得濃度為10.0、20.0、30.0、40.0、50.0、60.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。6樣品制備2T/SXSF13－20256.1樣品要求新鮮、無病蟲害的沙棘葉，干葉不少于100g，濕葉不少于500g。沙棘葉茶樣品不少于6.2樣品處理樣品經(jīng)干燥，去除雜質(zhì)，粉碎，過60目篩，密封備用。6.3測試液的制備稱取處理好的樣品100mg(±0.5mg），置于錐形瓶中，加入70℃熱水40mL，用超聲提取器進(jìn)行超聲處理，超聲溫度32℃,超聲功率80W，超聲時間20min；對處理液進(jìn)行過濾，殘渣再加入70℃熱水30mL，再次進(jìn)行超聲處理，條件同前，重復(fù)兩次；三次超聲處理后的濾液合并至100mL容量瓶，加水定容，得測試液。7測定7.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別吸取沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)工作液、水（做空白對照用）各1mL，置于10mL試管中，每個試管內(nèi)分別加入20%福林酚試劑5.0mL，搖勻后反應(yīng)5min～8min。加入10%碳酸鈉溶液4.0mL，進(jìn)行超聲處理，超聲溫度32℃,超聲功率80W，超聲時間10min，靜置10min，如此反復(fù)3次，取出，冷卻至室溫，于760nm波長條件下測定沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)工作液的吸光度。以沒食子酸工作液濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性方程。7.2測試液的測定分別吸取測試液、水（做空白對照用）各1mL，置于10mL試管中，每個試管內(nèi)分別加入20%福林酚試劑5.0mL，搖勻后反應(yīng)5min～8min。加入10%碳酸鈉溶液4.0mL，進(jìn)行超聲處理，超聲溫度32℃,超聲功率80W，超聲時間10min，靜置10min，如此反復(fù)3次，取出，冷卻至室溫，于760nm波長條件下測定測試液的吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出測試液中多酚濃度。如果吸光度值超過60.0μg/mL沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)工作液的吸光度時，應(yīng)對測試液進(jìn)行適當(dāng)稀釋，再重新測定吸光度。8結(jié)果計算多酚含量按式（1）計算：式中：X—沙棘葉及葉茶中多酚的含量，單位為百分率（%）；c—由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得出的吸取測試液多酚濃度，單位為微克每毫升(μg/mLD—測試液定容后的稀釋倍數(shù)，如未進(jìn)行稀釋，則D=1；V—測試液定容體積，單位為毫升