（高清版）DB51∕T 1521-2012 金針菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程　

DB51DB51/T1521—2012金針菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程2012-12-20發(fā)布2013-03-01實(shí)施四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 1 15生產(chǎn)工藝 3附錄A(資料性附錄)母種常用培養(yǎng)基及其配方 7附錄B(資料性附錄)原種和栽培種常用培養(yǎng)基及其配方 8Ⅱ本標(biāo)準(zhǔn)附錄A、附錄B為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則進(jìn)行編寫。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省農(nóng)業(yè)廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省食用菌菌種場、四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：唐利民、姜鄰、陳曉娟、王蓓、周潔、高興祥。1件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。NY5099無公害食品食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程中華人民共和國農(nóng)業(yè)部第62號(hào)令(2006)食用菌菌種管理辦法經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，也稱一級(jí)種。原種由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱二級(jí)種。2各級(jí)菌種場應(yīng)根據(jù)《食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定取得相應(yīng)的《食用菌菌種生產(chǎn)經(jīng)營許可證》。母種和原種由所在地縣級(jí)人民政府農(nóng)業(yè)行政主管部門審核，省級(jí)人民政府農(nóng)業(yè)行政主管部門核發(fā)，報(bào)農(nóng)業(yè)部備案。栽培種由所在地縣級(jí)人民政府農(nóng)業(yè)行政主管部門核發(fā)，報(bào)省級(jí)人民政府農(nóng)業(yè)行政主管部門備案。4.2技術(shù)人員各級(jí)菌種場應(yīng)按照《食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定配備經(jīng)省級(jí)人民政府農(nóng)業(yè)行政主管部門考核合格的生產(chǎn)技術(shù)人員和檢驗(yàn)人員。4.3場地環(huán)境要求應(yīng)符合NY/T528的規(guī)定。4.4廠房設(shè)置與布局4.4.1設(shè)置應(yīng)設(shè)置原材料庫、曬料場、配料分裝場、滅菌間、冷卻室、接種室、培養(yǎng)室、菌種檢驗(yàn)室、菌種貯存室和出菇試驗(yàn)場等。廠房建造從結(jié)構(gòu)和功能上應(yīng)滿足食用菌菌種生產(chǎn)的基本需要。4.4.2布局廠房按照菌種制種工藝流程布局，各操作環(huán)節(jié)按順序形成一條流水線，滅菌前的操作區(qū)域與滅菌后的操作區(qū)域相隔離，出菇場與菌種生產(chǎn)、培養(yǎng)車間隔離。儲(chǔ)料室(庫)、曬料場、廢物堆集場等帶有雜菌的區(qū)域應(yīng)處于場地的下風(fēng)口。4.5設(shè)施設(shè)備4.5.1基本設(shè)施4.5.1.1原材料庫防潮防雨、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源。4.5.1.2配料分裝場水電齊備，空間充裕，通風(fēng)良好，地面便于沖洗。水電齊備，空間充裕，通風(fēng)散熱。4.5.1.4冷卻室配備散熱設(shè)備，墻壁和地面便于沖洗消毒。4.5.1.5接種室配備降溫、除塵設(shè)備，四周墻面及屋頂、地面光潔，可清洗消毒。4.5.1.6培養(yǎng)室具有與生產(chǎn)量相適應(yīng)的培養(yǎng)室面積。培養(yǎng)室應(yīng)具備控溫和通風(fēng)換氣設(shè)備，通風(fēng)良好，無直射陽光，能密閉熏蒸消毒殺蟲。具備防蚊蟲、鼠害設(shè)施。3備、接種工具、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)架、烘箱、除濕機(jī)、電冰箱、質(zhì)量檢測儀器設(shè)備及其它工器具。5生產(chǎn)工藝菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)、栽培種(三級(jí)種)。原材料配制→分裝→滅菌→冷卻擺斜面→無菌檢驗(yàn)→接種→培養(yǎng)→檢驗(yàn)→成品。以配制1000mlPDA培養(yǎng)基為例，選無青皮、未發(fā)芽的新鮮馬鈴薯洗凈、去皮、去芽眼，稱取200g切成5m左右的薄片。加水1200ml左右煮20～30分鐘，煮至熟而不爛，用先預(yù)濕的4層紗布過濾。取濾裝量為試管長度的1/5～1/4,管口不能粘上培養(yǎng)基。4滅菌結(jié)束，自然降壓至零。打開鍋蓋，利用余熱烘干棉塞。將試每批次隨機(jī)抽取3%～5%的試管置于28℃恒溫培養(yǎng)72h,無微生物菌落出現(xiàn)，即為滅菌合格。5.2.5.1接種室(箱)消毒方法清潔接種室(箱)后，用氣霧消毒劑熏蒸，接種室熏蒸2h～3h,接種箱熏蒸30min。并用紫外燈照射。凈化工作臺(tái)臺(tái)面先用75%酒精或其它消毒劑擦拭消毒，開機(jī)30min后接種。左手平托母種試管和待接種試管，并使管口位于火焰上方無菌區(qū)域，但不直接接種后置于23℃~25℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。定期檢查，及時(shí)揀出污染和不合格個(gè)體。菌絲白色、整齊、均勻，無角變、無雜菌，生活力強(qiáng)，培使用750ml無色或近無色專用玻璃菌種瓶，或850ml～1000ml耐126℃高溫白色半透明塑料菌種瓶。按培養(yǎng)基配方備料→預(yù)濕和拌料→裝瓶→高壓滅菌→冷卻(至30℃左右)→接種→培養(yǎng)、檢查→成嚴(yán)格控制含水量60%～65%。培養(yǎng)料裝至瓶肩處，稍作壓實(shí)，松緊適度。將瓶口和外瓶壁洗擦干凈，封瓶口。5培養(yǎng)基中，于28℃恒溫培養(yǎng)72h,無微生物長出為滅菌合格。5.3.5接種室(箱)消毒接種室(箱)用氣霧消毒劑熏蒸，接種室熏蒸2h～3h,接種箱熏蒸40min,并用紫外線燈照射。接種前30min,用衛(wèi)生消毒劑噴霧降塵消毒。檢查、核對(duì)菌種。接種人員換上接種工作服。接種人員的手用75%酒精棉球擦拭消毒，接種鉤和母培養(yǎng)室內(nèi)控制室溫23℃~25℃,空氣相對(duì)濕度60%～70%,保持空氣清新，避光培養(yǎng)。定期檢查菌菌絲白色、整齊、均勻，無角變、無雜菌、無病蟲，生活力強(qiáng)，培——栽培種的容器還可選用規(guī)格為12cm~15cm×2——菌種袋裝料時(shí)要求袋面平整無皺褶，袋內(nèi)料面無空隙，松緊適度，用手輕壓袋面有彈性為宜；——栽培種也可以采用常壓滅菌。常壓滅菌時(shí)，宜在4h內(nèi)使滅菌鍋內(nèi)溫度達(dá)100℃,保持恒溫12h~6菌種生產(chǎn)各環(huán)節(jié)均應(yīng)做好原始記錄，存檔備查。各級(jí)菌種都應(yīng)留樣備查。各級(jí)菌種各個(gè)批次留樣數(shù)量不得少于3支(瓶、袋),至該批菌種正常生產(chǎn)條件下出菇后方可處置。(資料性附錄)A.1PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基)馬鈴薯200g,葡萄糖20g,馬鈴薯200g,麥麩50g,葡萄糖20g,瓊脂20g,水1000m1,pH值自然。黃豆芽200g,葡萄糖20g,瓊脂20g,水1000ml,pH值自然。A.4洋蔥醬油培養(yǎng)基洋蔥汁*100ml,醬油50ml,蔗糖50g,瓊脂20g,水850ml,pH值自然。8(資