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文檔簡介
軟骨素硫酸乙酰肝素一、化學結構分析多糖分子是由糖苷鍵連接不同單糖分子形成的線性或有支鏈的鏈狀結構單糖組成不同糖苷鍵連接方式和位置的不同分子量的不同黏度法采用毛細管黏度計測定多糖樣品的特性黏度,再利用馬克一霍溫克方程求得分子量。
其中K和a被稱為馬克-霍溫克參數,與聚合物種類,溶劑種類和溫度有關。對于給定溫度下的某種聚合物溶液,在一定分子量范圍內,K和a是與分子量無關的常數。
此方法所需測量設備簡單、操作容易,所測得分子量在20000-200000之間,稱為黏均分子量。(二)分子量測定
高效液相色譜法
高效液相色譜技術中的凝膠排阻色譜法(分子排阻色譜法)可用于多糖分子量的測定。根據所測樣品的分子量大小選擇一定排阻范圍的專用凝膠柱,采用示差折光檢測器進行檢測。(二)分子量測定電泳法
此法所需樣品量小、分析速度較快且可同時分析多個樣品。對于帶有電荷的多糖可直接進行電泳分析,而不帶電荷的多糖也可通過酸性熒光標記試劑衍生后進行電泳分析。將待測樣品與已知分子量的一系列標準品的電泳結果進行比對,可得出待測樣品的分子量。(二)分子量測定質譜法
質譜技術的基本原理是樣品分子離子化后,根據不同離子間質量與所帶電荷比(m/z)的差異來分離并確定分子量,是目前測定分子量最精確的方法。與前述方法相比,質譜法具有測定精度高、分析所需樣品量少、儀器操作高度自動化等優(yōu)點。(二)分子量測定
光散射法
光束通過介質時會在入射光束方向以外的方向觀察到光的散射,當光束照射多糖溶液時,可根據在規(guī)定角度處所測得的散射光與入射光強的關系公式推算出多糖的分子量。
常用的激光小角光散射儀利用激光的高準直性和高強度,測定時可采用稀溶液,且無需對濃度和角度外推,具有測定速度快且精度高的特點。此法檢測所得的分子量為重均分子量。測量范圍在10~10000kDa(二)分子量測定
膜滲透壓法
一定濃度溶液的滲透壓具有溶質依數性,在多糖水溶液和水溶液之間設置一個只允許水分子自由通過的半透膜,測定滲透壓并利用滲透壓與多糖溶液中多糖分子數的關系公式可推算出多糖的分子量。
此法檢測所得
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