pcr上崗證試題及答案2021

pcr上崗證試題及答案2021姓名：____________________

一、選擇題（每題2分，共20分）

1.PCR技術(shù)全稱是什么？

A.聚合酶鏈反應(yīng)

B.聚合酶反應(yīng)

C.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

D.聚合酶連串反應(yīng)

2.PCR技術(shù)中最關(guān)鍵的酶是什么？

A.Taq酶

B.DNA聚合酶

C.DNA連接酶

D.限制性核酸內(nèi)切酶

3.PCR技術(shù)中，以下哪個(gè)步驟不需要進(jìn)行？

A.變性

B.復(fù)性

C.延伸

D.洗脫

4.PCR反應(yīng)體系中，以下哪種物質(zhì)是必須的？

A.引物

B.dNTPs

C.Mg2+

D.以上都是

5.PCR技術(shù)可以用于以下哪個(gè)領(lǐng)域？

A.分子生物學(xué)

B.醫(yī)學(xué)診斷

C.基因編輯

D.以上都是

6.PCR技術(shù)中，以下哪個(gè)因素會(huì)影響擴(kuò)增效率？

A.引物設(shè)計(jì)

B.樣本質(zhì)量

C.反應(yīng)體系

D.以上都是

7.PCR技術(shù)中，以下哪個(gè)因素會(huì)影響特異性？

A.引物設(shè)計(jì)

B.樣本質(zhì)量

C.反應(yīng)體系

D.以上都是

8.PCR技術(shù)中，以下哪個(gè)因素會(huì)影響靈敏度？

A.引物設(shè)計(jì)

B.樣本質(zhì)量

C.反應(yīng)體系

D.以上都是

9.PCR技術(shù)中，以下哪個(gè)因素會(huì)影響穩(wěn)定性？

A.引物設(shè)計(jì)

B.樣本質(zhì)量

C.反應(yīng)體系

D.以上都是

10.PCR技術(shù)中，以下哪個(gè)因素會(huì)影響保真性？

A.引物設(shè)計(jì)

B.樣本質(zhì)量

C.反應(yīng)體系

D.以上都是

二、填空題（每題2分，共20分）

1.PCR技術(shù)的基本原理是__________。

2.PCR反應(yīng)體系中，變性、復(fù)性、延伸三個(gè)步驟的循環(huán)次數(shù)一般為__________。

3.PCR反應(yīng)體系中，引物的作用是__________。

4.PCR反應(yīng)體系中，dNTPs的作用是__________。

5.PCR反應(yīng)體系中，Mg2+的作用是__________。

6.PCR技術(shù)中，以下哪種因素會(huì)影響擴(kuò)增效率：__________。

7.PCR技術(shù)中，以下哪種因素會(huì)影響特異性：__________。

8.PCR技術(shù)中，以下哪種因素會(huì)影響靈敏度：__________。

9.PCR技術(shù)中，以下哪種因素會(huì)影響穩(wěn)定性：__________。

10.PCR技術(shù)中，以下哪種因素會(huì)影響保真性：__________。

三、判斷題（每題2分，共20分）

1.PCR技術(shù)可以用于檢測(cè)病毒的核酸序列。（）

2.PCR技術(shù)可以用于檢測(cè)細(xì)菌的核酸序列。（）

3.PCR技術(shù)可以用于檢測(cè)基因突變。（）

4.PCR技術(shù)可以用于基因克隆。（）

5.PCR技術(shù)可以用于基因編輯。（）

6.PCR技術(shù)可以用于基因表達(dá)分析。（）

7.PCR技術(shù)可以用于基因測(cè)序。（）

8.PCR技術(shù)可以用于檢測(cè)遺傳疾病。（）

9.PCR技術(shù)可以用于檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物。（）

10.PCR技術(shù)可以用于檢測(cè)藥物殘留。（）

四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）

1.簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的原理和基本步驟。

2.解釋PCR技術(shù)中引物的作用及其設(shè)計(jì)原則。

3.列舉PCR技術(shù)中可能出現(xiàn)的幾種常見問(wèn)題及其解決方法。

4.說(shuō)明PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)診斷中的應(yīng)用及其優(yōu)勢(shì)。

五、論述題（10分）

論述PCR技術(shù)在基因工程中的應(yīng)用及其重要性。

六、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（10分）

設(shè)計(jì)一個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)，用于檢測(cè)某基因序列是否存在突變。包括實(shí)驗(yàn)材料、試劑、儀器、實(shí)驗(yàn)步驟和預(yù)期結(jié)果。

試卷答案如下：

一、選擇題答案及解析思路：

1.A.聚合酶鏈反應(yīng)

解析思路：PCR的全稱即為聚合酶鏈反應(yīng)，故選A。

2.A.Taq酶

解析思路：Taq酶是從熱穩(wěn)定性DNA聚合酶中提取的，用于PCR反應(yīng)中的DNA合成，故選A。

3.D.洗脫

解析思路：PCR的基本步驟包括變性、復(fù)性和延伸，不包括洗脫，故選D。

4.D.以上都是

解析思路：PCR反應(yīng)體系中需要引物來(lái)定向擴(kuò)增特定序列，dNTPs作為DNA合成的原料，Mg2+作為酶的激活劑，故選D。

5.D.以上都是

解析思路：PCR技術(shù)廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷、基因工程等領(lǐng)域，故選D。

6.D.以上都是

解析思路：擴(kuò)增效率受引物設(shè)計(jì)、樣本質(zhì)量、反應(yīng)體系等因素影響，故選D。

7.A.引物設(shè)計(jì)

解析思路：引物設(shè)計(jì)直接決定了擴(kuò)增的特異性，故選A。

8.D.以上都是

解析思路：靈敏度受樣本質(zhì)量、反應(yīng)體系等因素影響，故選D。

9.C.反應(yīng)體系

解析思路：反應(yīng)體系中的成分和比例會(huì)影響PCR的穩(wěn)定性，故選C。

10.A.引物設(shè)計(jì)

解析思路：引物設(shè)計(jì)決定了擴(kuò)增的保真性，故選A。

二、填空題答案及解析思路：

1.聚合酶鏈反應(yīng)

解析思路：根據(jù)PCR的全稱直接填寫。

2.變性、復(fù)性、延伸三個(gè)步驟的循環(huán)次數(shù)一般為25-35次

解析思路：根據(jù)PCR技術(shù)的基本步驟和循環(huán)次數(shù)填寫。

3.引物的作用是定向擴(kuò)增特定序列

解析思路：引物作為DNA合成的起始點(diǎn)，可以定向擴(kuò)增目標(biāo)序列。

4.dNTPs的作用是作為DNA合成的原料

解析思路：dNTPs是DNA合成的原料，用于構(gòu)建新的DNA鏈。

5.Mg2+的作用是作為酶的激活劑

解析思路：Mg2+可以激活DNA聚合酶，提高其活性。

6.以下哪種因素會(huì)影響擴(kuò)增效率：引物設(shè)計(jì)、樣本質(zhì)量、反應(yīng)體系

解析思路：這三個(gè)因素都會(huì)影響PCR的擴(kuò)增效率。

7.以下哪種因素會(huì)影響特異性：引物設(shè)計(jì)

解析思路：引物設(shè)計(jì)決定了擴(kuò)增的特異性。

8.以下哪種因素會(huì)影響靈敏度：樣本質(zhì)量、反應(yīng)體系

解析思路：這兩個(gè)因素會(huì)影響PCR的靈敏度。

9.以下哪種因素會(huì)影響穩(wěn)定性：反應(yīng)體系

解析思路：反應(yīng)體系中的成分和比例會(huì)影響PCR的穩(wěn)定性。

10.以下哪種因素會(huì)影響保真性：引物設(shè)計(jì)

解析思路：引物設(shè)計(jì)決定了擴(kuò)增的保真性。

三、判斷題答案：

1.√

2.√

3.√

4.√

5.√

6.√

7.√

8.√

9.√

10.√

四、簡(jiǎn)答題答案及解析思路：

1.PCR技術(shù)的原理和基本步驟：

-原理：利用DNA聚合酶在特定引物的作用下，復(fù)制特定DNA序列。

-步驟：變性、復(fù)性、延伸。

2.解釋PCR技術(shù)中引物的作用及其設(shè)計(jì)原則：

-作用：定向擴(kuò)增特定序列。

-設(shè)計(jì)原則：確保引物特異性、避免二級(jí)結(jié)構(gòu)、保證Tm值相近。

3.列舉PCR技術(shù)中可能出現(xiàn)的幾種常見問(wèn)題及其解決方法：

-問(wèn)題：非特異性擴(kuò)增、擴(kuò)增效率低、假陽(yáng)性結(jié)果等。

-解決方法：優(yōu)化反應(yīng)條件、調(diào)整引物設(shè)計(jì)、增加循環(huán)次數(shù)等。

4.說(shuō)明PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)診斷中的應(yīng)用及其優(yōu)勢(shì)：

-應(yīng)用：檢測(cè)病原體、遺傳疾病、腫瘤標(biāo)志物等。

-優(yōu)勢(shì)：快速、靈敏、特異、簡(jiǎn)便。

五、論述題答案：

論述PCR技術(shù)在基因工程中的應(yīng)用及其重要性：

-應(yīng)用：基因克隆、基因編輯、基因表達(dá)分析等。

-重要性：提高基因研究效率、推動(dòng)生物技術(shù)發(fā)展。

六、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題答案：

設(shè)計(jì)一個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)，用于檢測(cè)某