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DB12DB12/T521—2014牛結(jié)核病噬菌體檢測(cè)技術(shù)規(guī)范ThetechnicalstandardfordetectionofbovinetuberculosisbyMycobacteriophage2014-04-22發(fā)布2014-07-20實(shí)施天津市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布1在人工培養(yǎng)基上,細(xì)菌在噬菌體的作用下裂解形成的f有蓋離心管(50mL)g無菌試管(10mL)j平皿(90mm)2試管中。取2mL??诒欠置谖铮ɑ?mL保存液中的??诒欠置谖锩奘米訕悠罚┯?0mL有蓋離心管中,處理6.3.1陰性對(duì)照:吸取1mL滅菌完全培養(yǎng)基于10mL無菌試管中,為“浴鍋中孵育2h;6.3.5上述反應(yīng)管中分別加100μL殺病毒劑,充分混勻,置于室溫10min;6.3.6上述反應(yīng)管中分別加8mL完全培養(yǎng)基,混勻;6.3.7上述反應(yīng)管中分別加1mL指示細(xì)胞溶液,混勻;6.3.8快速將反應(yīng)管中所有的內(nèi)容物分別倒入相應(yīng)的空的90mm的無菌平皿中;立即加8mL冷卻至互融合成透明狀判定為陽性;平皿中無噬菌斑出現(xiàn)或噬菌斑數(shù)量<20個(gè)判8.4檢測(cè)結(jié)束后,實(shí)驗(yàn)用品和廢棄物,應(yīng)進(jìn)行高溫高3培養(yǎng)基和試劑配制方法
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