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文檔簡(jiǎn)介
專(zhuān)題十五現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題
考綱要求1.基因工程(1)基因工程的誕生(I)。(2)基因工程的原理及技術(shù)(II)。(3)基因工
程的應(yīng)用(ll)o(4)蛋白質(zhì)工程(I)。2.克隆技術(shù)⑴植物的組織培養(yǎng)(ll)o(2)動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)
與體細(xì)胞克?。↖)。(3)細(xì)胞融合與單克隆抗體(II)。3.胚胎工程(1)動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程與胚
胎工程的理論基礎(chǔ)(I)。(2)胚胎干細(xì)胞的移植(I)。(3)胚胎工程的應(yīng)用(II)。4.生物技術(shù)的安
全性和倫理問(wèn)題(1)轉(zhuǎn)基因生物的安全性(I)。(2)生物武器對(duì)人類(lèi)的威脅(I)。(3)生物技術(shù)中的
倫理問(wèn)題(Do5.生態(tài)工程⑴簡(jiǎn)述生態(tài)工程的原理(II)o(2)生態(tài)工程的實(shí)例(【)。
□「丁IM—)
1.[2015?全國(guó)卷II]已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)(P),該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,由305個(gè)氨基
酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸,240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸,改變后的蛋白
質(zhì)S)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)從上述資料可知,若要改變蛋白質(zhì)的功能,可以考慮對(duì)蛋白質(zhì)的進(jìn)行改造。
(2)以P基因序列為基礎(chǔ),獲得巴基因的途徑有修飾基因或合成基因。所獲得的
基因表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的,中心法則的全部?jī)?nèi)容包括的復(fù)制,以及遺傳信息在不同分子之
間的流動(dòng),即:o
(3)蛋白質(zhì)工程也被稱(chēng)為第二代基因工程,其基木途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā),通過(guò)
和進(jìn)而確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核甘酸序列,據(jù)此獲得基因,再經(jīng)表達(dá)、
純化獲得蛋白質(zhì),之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物進(jìn)行鑒定。
2.[2014?新課標(biāo)全國(guó)卷I]某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免
疫5次,每次免疫,周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)
果如圖T15-1所示。
皿
32000
28000
24000
20000
16000
12
840100
第一次第二次笫三次第四次第五次免疫次數(shù)
圖TI5-1
若要制備雜交瘤細(xì)胞.需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)
的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目C0條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選
培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。
回答下列問(wèn)題:
(1)制備融合所需的B淋巴組胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則小鼠最少
需要經(jīng)過(guò)次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制
備B淋巴細(xì)胞的是小鼠,理由是
(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有
,體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是。
(3)雜交瘤細(xì)胞中有個(gè)細(xì)胞核,染色休數(shù)目最多是________條.
(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是o
3.[2015?重慶卷]某課題組為解決本地種奶牛產(chǎn)奶量低的問(wèn)題,引進(jìn)了含.高產(chǎn)奶基因但對(duì)本地
適應(yīng)性差的純種公牛。
(1)擬進(jìn)行如下雜交:
占A(具高產(chǎn)奶基因的純種)XWB(具適宜木地生長(zhǎng)基因的純種)一C
選擇B作為母本,原因之一是胚胎能在母體內(nèi)正常_______。若C中的母牛表現(xiàn)為適宜本地生長(zhǎng),
但產(chǎn)奶量并未提高,說(shuō)明高產(chǎn)奶是性狀。為獲得產(chǎn)奶量高且適宜本地生長(zhǎng)的母牛,根據(jù)現(xiàn)有類(lèi)
型,最佳雜交組合是,后代中出現(xiàn)這種母牛的概率是_______(假設(shè)兩對(duì)基因分別位于不同對(duì)
常染色體上)。
(2)用以上最住組合,按以下流程可加速獲得優(yōu)良個(gè)體。
供體公牛供梢
①I(mǎi)體外受精->|胚胎培養(yǎng)|->[胚胎移植到受體網(wǎng)T優(yōu)良個(gè)體-
供體母牛供卵③④⑤
圖T15-2
精子要具有受精能力,需對(duì)其進(jìn)行處理;卵子的成熟在過(guò)程中完成s在過(guò)程④的
培養(yǎng)基中含有葡萄糖,其作用是。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛,過(guò)程⑤前應(yīng)鑒定胚胎的
C子代母牛的優(yōu)良性狀與過(guò)程________的基因重組有關(guān)C
(3)為了提高已有胚胎的利用率,可采用技術(shù)。
4.[2014?重慶卷]為治理某廢棄采石場(chǎng)的生態(tài)環(huán)境,對(duì)其進(jìn)行公園化建設(shè)。
hhhh時(shí)間圖T15-3
(D對(duì)其進(jìn)行整理和覆土,并選擇適生植物進(jìn)行人工造林,不同恢復(fù)時(shí)期的植物物種數(shù)如圖所示。
必一3植物殘?bào)w及凋落物中的有機(jī)物被生態(tài)系統(tǒng)中的_______轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)物,使土壤條件得到改善;
同時(shí)由于人工林土壤中存在______________,導(dǎo)致群落中植物物種數(shù)增加;△一口人
工林抵抗力穩(wěn)定性的變化是;群落中植物物種數(shù)逐漸增加,物種之間加劇。
(2)通過(guò)人工林建設(shè)和園林景觀(guān)構(gòu)建,既改善了生態(tài)環(huán)境,又可提高社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益,這主要體現(xiàn)
了生態(tài)工程的原理。
【備考指津】
(1)本專(zhuān)題考查的主要內(nèi)容包括基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程,其中基因工程是考查的重點(diǎn)。
(2)本專(zhuān)題的題目往往以基因工程為核心,綜合考查細(xì)胞工程和胚胎工程方面的知識(shí),信息呈現(xiàn)形
式往往是示意圖,需要準(zhǔn)確識(shí)別田中涉及的技術(shù)名稱(chēng)。
(3)備考時(shí),要結(jié)合示意圖理解并熟記相關(guān)的知識(shí),并能熟練使用常用的生物學(xué)術(shù)語(yǔ)進(jìn)行答題。
考點(diǎn)一基因工程
I考例探究I
考向1基因工程的操作工具及步驟
1.限制酶、DNA連接酶、DM聚合酶和解旋酶的比較
限制酶DNA連接酶DNA聚合酶解旋酶
主要使雙鏈DNA分將切下來(lái)的將單個(gè)脫氧核使雙鏈DNA分
作用子每一條鏈中特DNA片段拼接成甘酸加到已有的子堿基對(duì)之間的
定部位的兩個(gè)核新的DNA分子核苜酸片段的末氫鍵斷裂,形成
苔酸之間的磷酸端,形成磷酸二單鏈DNA分子
二酯鍵斷開(kāi)酯鍵
作用
DNA分子DN4分子片段脫氧核甘酸DNA分子
底物
作用堿基對(duì)間的氫
磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵
部位鍵
作用形成黏性末端形成重組DNA形成新的DNA形成單鏈DNA
結(jié)果或平末端分子分子分子
參與的目的基因的獲
基因表達(dá)載體DNA的復(fù)制、
生理取,基因表達(dá)載DNA的復(fù)制
的構(gòu)建逆轉(zhuǎn)錄
過(guò)程體的構(gòu)建
2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心,其過(guò)程一般是用同一種限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的
基因和載體DNA(如質(zhì)粒),形成相同的黏性末端。用DNA連接酶將目的基因和載體DNA連接在一起,形
成重組DNA分子。
,;灘接
攜帶H的基因
的取組質(zhì)粒
供體細(xì)胞
圖T15-4
3.目的基因的檢測(cè)與鑒定
圖T15-5
1[2015?福建卷]微M是一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)作用。研究人員
構(gòu)建了含微陸基因的表達(dá)載體(如圖甲所示),并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中,用于干細(xì)胞基因治療的研
究。請(qǐng)回答:
注:bp表示堿基對(duì);載體和基因片段上
的小箭號(hào)表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。
甲乙
圖T15-6
(1)在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過(guò)程中,使用胰蛋臼的的目的是o
(2)構(gòu)建含G〃懷'基因的表達(dá)載體時(shí),需選擇圖甲中的_______限制酶進(jìn)行酶切。
(3)經(jīng)酶切后的載體和基因進(jìn)行連接,連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有3種:單個(gè)載體自連、
GaW基因與載體正向連接、歷基因與載體反向連接(如圖甲所示)。為鑒定這3種連接方式,選擇枷&
I酶和咫加I酶對(duì)篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切,并對(duì)酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析,結(jié)果如圖乙所
不。圖中第________泳道顯布所鑒定的載體是止向連接的。
(4)將正向連接的表達(dá)載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后,為了檢測(cè)基因是否成功表達(dá),可用相應(yīng)的
________與提取的蛋白質(zhì)雜交。當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí),需進(jìn)行_______培養(yǎng)以得到更多
數(shù)量的細(xì)胞,用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)。
考向2基因工程的應(yīng)用
1.植物基因工程的應(yīng)用
項(xiàng)目
外源基因類(lèi)型及舉例成果舉例
類(lèi)型
抗蟲(chóng)基因:Br毒蛋白基因、
抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基抗蟲(chóng)水稻、抗蟲(chóng)棉、抗蟲(chóng)玉
蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑
因植物米
制劑基因、植物凝集素基因
①抗病毒基因;病毒外殼蛋
抗病轉(zhuǎn)基白基因、病毒復(fù)制酣基因抗病煙草、抗病小麥、抗病
因植物②抗真菌基因:幾丁質(zhì)酶基番茄、抗病甜椒
因、抗毒素合成基因
抗鹽堿和抗干旱的煙草、抗
抗逆轉(zhuǎn)基抗逆基因:滲透壓調(diào)節(jié)基因、
寒番茄、抗除草劑的大豆和玉
因植物抗凍蛋白基因、抗除草劑基因
米
優(yōu)良性狀基因:提高必需氨
改良品質(zhì)的基酸含量的蛋白質(zhì)編碼基因、高賴(lài)氨酸玉米、耐儲(chǔ)存番茄、
轉(zhuǎn)基因植物控制番茄成熟的基因、與花青新花色矮牽牛
素代謝有關(guān)的基因
2.動(dòng)物基因工程的應(yīng)用
目
外源基因類(lèi)型及舉例成果舉例
類(lèi)型
提高生長(zhǎng)速
度的轉(zhuǎn)基因外源生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)基因綿羊、轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)
動(dòng)物
改善畜產(chǎn)品
乳汁中含乳糖較少的轉(zhuǎn)基因
品質(zhì)的轉(zhuǎn)基腸乳糖酶基因
牛
因動(dòng)物
生產(chǎn)藥物的藥用蛋白基因+乳腺蛋轉(zhuǎn)基因動(dòng)物具有乳腺生物反
轉(zhuǎn)基因動(dòng)物白基因的啟動(dòng)子應(yīng)器
作器官移植外源的抗原決定基因表
供體的轉(zhuǎn)基達(dá)的調(diào)節(jié)因子或除去供體無(wú)免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因豬
因動(dòng)物的抗原決定基因
3.基因診斷
(1)概念:又稱(chēng)DNA診斷,是采用基因檢測(cè)的方法來(lái)判斷患者是否出現(xiàn)了基因異?;驍y帶病原體。
(2)方法:DNA分子雜交技術(shù)。它的基本原理是互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈,即
能夠雜交,這種結(jié)合是特異的,即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則進(jìn)行。當(dāng)用一段已知基因的單鏈作探針
(常用同位素、熒光分子等進(jìn)行標(biāo)記),與變性后的單鏈基因經(jīng)DM接觸時(shí),如果兩者的堿基完成配對(duì),
互補(bǔ)地結(jié)合成雙鏈,表明被測(cè)基因組DNA中含有己知的基因序列。
4.基因治療
(1)概念:利用正?;蛑脫Q或彌補(bǔ)缺陷基因的治療方法。
(2)方法:基因置換、基因修復(fù)、基因增補(bǔ)、基因失活等,如ADA基因缺陷癥的基因治療。
(3)基因治療的途徑
①體外基因治療:先從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),然后,在體外完成基因轉(zhuǎn)移,再篩選成功
轉(zhuǎn)移的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng),最后重新輸入患者體內(nèi)。
②體內(nèi)基因治療:用基因工程的方法,直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)移基因的治療方法。
2螢火蟲(chóng)發(fā)光是體內(nèi)熒光素酶催化一系列反應(yīng)所產(chǎn)生的現(xiàn)象。如果熒光素酶存在于植物體內(nèi),也可
使植物體發(fā)光。一直以來(lái)熒光素幅的唯一來(lái)源是從螢火蟲(chóng)腹部提取。但加利福尼亞大學(xué)的一組科學(xué)家成
功地通過(guò)轉(zhuǎn)基因工程實(shí)現(xiàn)了將熒光素酶基因?qū)氪竽c桿菌體內(nèi),并在大腸桿菌體內(nèi)產(chǎn)生熒光素酶。請(qǐng)你
根據(jù)已有的知識(shí)回答下列有關(guān)問(wèn)題:
(1)在此轉(zhuǎn)基因工程中,目的基因是,具體操作過(guò)程中,圖T15?7所示的黏性末
端是由種限制酶作用產(chǎn)生的。
AATTCAATTGAATTC|AATTG
C
圖T15-7
(2)將此目的基因?qū)氪竽c檸菌體內(nèi)需要載體的幫助,則作為載體必須具備能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制
并穩(wěn)定保存以及(至少答出兩點(diǎn))等條件0
(3)本實(shí)驗(yàn)中將目的基因?qū)氪竽c桿菌的載體可以是(多選)。
A.質(zhì)粒B.動(dòng)物病毒
C.入噬菌體的衍生物D.植物病毒
(4)在此轉(zhuǎn)基因工程中,將體外重組DNA導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi),并使其在細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程
稱(chēng)為轉(zhuǎn)化。最常用的轉(zhuǎn)化方法是首先用C/+處理大腸桿菌,目的是
(5)目的基因在受體細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)錄出mR\A,可用技術(shù)來(lái)檢測(cè);目的基因是否表
達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì),除了通過(guò)大腸桿菌是否發(fā)光來(lái)確定外,還可以通過(guò)特異性反應(yīng)來(lái)判
斷。
I對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練I
1.圖T15-8為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程。請(qǐng)據(jù)圖回答:
棉花細(xì)胞愈傷組織癡雷
抗幼苗
圖T15-8
(1)進(jìn)行過(guò)程①,先要用到的酶是。
(2)基因工程核心步驟的名稱(chēng)是o
(3)在培育成功的轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的傳種接代過(guò)程中,抗蟲(chóng)基因和標(biāo)記基因是否遵循基因的自由組合
定律?______o為什么?0
(4)過(guò)程②采用最多的方法是o在實(shí)驗(yàn)室中,檢測(cè)抗蟲(chóng)基因是否整合到棉花細(xì)胞的DNA
分子上的方法是o
(5)經(jīng)過(guò)③過(guò)程形成愈傷組織的細(xì)胞分裂方式是o
(6)過(guò)程④所表達(dá)的兩個(gè)重要的生理現(xiàn)象是0
2.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGE)能促進(jìn)眼部視網(wǎng)膜血管的病理性生長(zhǎng)。臨床上可用VEGF抗體的Fab
片段(即抗體的活性片段)作為藥物治療視網(wǎng)膜病變。圖T15-9是利用大腸桿菌來(lái)大量合成該抗體片段的
技術(shù)路線(xiàn)圖,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
⑴科學(xué)家已經(jīng)測(cè)出VEGF抗體的Fab片段的氨基酸序列,因此可以通過(guò)法來(lái)獲取目的基因。
獲取目的基因后,還需要在其兩端加上限制酶〃%MH和勸。1的識(shí)別序列和啟動(dòng)子T7等序列,T7的位
置應(yīng)該在(填圖中序號(hào))處。
(2)大腸桿菌經(jīng)C-+處理,成為細(xì)胞,能吸收外源DNA,與重組質(zhì)?;旌吓囵B(yǎng)一段時(shí)間
后,培養(yǎng)基需添加以篩選目的菌株。將篩選出的大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),可以用
作為抗原與提取出的蛋白雜交來(lái)鑒定是否合成VEGF抗體的Fab片段蛋白。
考點(diǎn)二細(xì)胞工程
I考例探究I
考向1植物細(xì)胞工程
1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)
(1)原理:植物細(xì)胞具有全能性。
⑵過(guò)程:
人造胚乳
胚狀體?人工種子
和種皮
發(fā)育
脫分化愈傷再分化、由在
組織和君根、芽f植物體
圖T15-10
2.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)
植物去壁一原生
人
工
在
合
融
正
誘
細(xì)胞質(zhì)體導(dǎo)
AA再生壁雜種
質(zhì)
的脫分化、愈傷再分化.雜種
原
Lf生
細(xì)胞
體組織植株
植物去壁,原生,B
ABAB
細(xì)胞B質(zhì)體B
I
植物細(xì)胞融合植物組織培養(yǎng)
圖T1571
(1)去壁:酶解法,所用能為纖維素酶和果膠酶。
(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合:物理法一一離心、振動(dòng)、電激等:化學(xué)法一一常用聚乙一醇(PEG)作誘導(dǎo)劑。
(3)植物體細(xì)胞雜交成功的標(biāo)志:雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁。
(4)優(yōu)點(diǎn):克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。
(5)變異類(lèi)型:染色體變異。
3花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線(xiàn)
處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)休作為部分遺傳物質(zhì)的供體
與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病的雜種植,株,流程如圖T15-12所示。
圖T15-12
據(jù)圖回答下列問(wèn)題:
(1)過(guò)程①所需的酶是o
(2)過(guò)程②后,在顯微鏡下觀(guān)察融合的活細(xì)胞中有供體的存在,這一特征可作為
初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志
(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是
o原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)____________再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。
(4)若分析再生植株的染色體變異類(lèi)型,應(yīng)剪取再生植株和植株的根尖,通過(guò)
、、染色和制片等過(guò)程制成裝片,然后在顯微鏡下觀(guān)察比較染色體的形態(tài)和
數(shù)目。
(5)對(duì)雜種植株進(jìn)行接種實(shí)瞼,可篩選出具有高抗性的雜種植株。
考向2動(dòng)物細(xì)胞丁程及單克隆抗體的制備
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程
幼齡動(dòng)物組織或胚胎胰翳酶單個(gè)細(xì)胞一細(xì)胞懸液麟細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)胰組包酶細(xì)胞懸液
傳代培養(yǎng)
細(xì)胞株或細(xì)胞系
圖T15-13
(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用
①生產(chǎn)生物制品:疫苗、干擾素、抗體等。
②作為基因工程中的受體細(xì)胞。
③檢測(cè)有毒物質(zhì)及毒性。
④科研方面:篩選抗癌藥物、治療和預(yù)防疾病。
2.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物
取供體動(dòng)一細(xì)胞一昧的的
物體細(xì)胞培養(yǎng)一體細(xì)胞
注入
體外電激.使
采集卵培養(yǎng)一減數(shù)第二次顯微操作一去核的細(xì)胞唯合
母細(xì)胞分裂中期吸出細(xì)胞卵母細(xì)
核及極體胞
胚胎生出與供體
重組細(xì)胞類(lèi)造?重組胚胎移植一受體雌____
性動(dòng)物一>遺傳基礎(chǔ)基
本相同的個(gè)體
圖T15-14
3.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用一一單克隆抗體的制備
(1)過(guò)程
B淋巴抗原效應(yīng)B淋未融合細(xì)胞]
細(xì)胞剌激巴細(xì)胞\A,B-B細(xì)胞選擇性雜交瘤
痛-瘤細(xì)胞但親至細(xì)胞
田幡姆削胞/癖合雜交病物胞J
克隆化培養(yǎng)雜交瘤J體外培養(yǎng)(培養(yǎng)液中)、單克降抗體
抗體檢測(cè)細(xì)胞I體內(nèi)培養(yǎng)(小鼠腹腔內(nèi)增殖)個(gè)
(能產(chǎn)生特定抗體)
圖T15-15
說(shuō)明:
①雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能無(wú)限增殖,乂能產(chǎn)生單一抗體。
②制名單克隆抗體過(guò)程中有兩次篩選;第一次篩選是將未融合的B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞以及B-B
細(xì)胞、瘤-瘤細(xì)胞通過(guò)選擇培養(yǎng)基淘汰,篩選出雜交瘤細(xì)胞:第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)
胞通過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選出來(lái)。因?yàn)閺捏w內(nèi)獲取的免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞有很多利因此形成的
雜交瘤細(xì)胞也就有很多種,所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
(2)單克隆抗體的應(yīng)用
①作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、
高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。
②用于?治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”,也有少量用于治療其他疾
病。
4單克隆抗體可用于疾病的診斷和治療,制備H7N9病毒單克隆抗體的流程如下:
北步RNA或DNA9H7N9抗原基因一7
抗原蛋白一小鼠受體細(xì)胞
注射
小鼠
獲取
__細(xì)胞I攀>細(xì)他口一酸f4警
無(wú)限增殖調(diào)控基因卿近堵不抗體
圖T15T6
(1)過(guò)程②用到的工具酶是,進(jìn)行過(guò)程③前必須先構(gòu)建____________。
(2)過(guò)程③常用的方法是。H7N9抗原基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是
_____________________________________,可采用技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。
(3)細(xì)胞II應(yīng)具有的特點(diǎn)是o體外培養(yǎng)細(xì)胞II,首先應(yīng)保證其處于
______________的環(huán)境。
(4)若要預(yù)防H7N9禽流感,則可用圖中的作為疫苗。
I對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練I
1.科學(xué)家以番茄(2A)和馬鈴薯(4A)為材料,利用圖T15?17中的技術(shù)得到“番茄一馬鈴薯”植株。
請(qǐng)叵答下列問(wèn)題:
圖T15-17
(1)獲得a、b所用的酶為,c和d的名稱(chēng)依次是
(2)圖示技術(shù)名稱(chēng)是;由d培育成植株的過(guò)程運(yùn)用的技術(shù)手段是
,其依據(jù)的原理是O
(3)過(guò)程②稱(chēng)為,所用的化學(xué)誘導(dǎo)劑一般是,過(guò)程③成功的
標(biāo)志是。
(4)過(guò)程④是,過(guò)程⑤增殖的方式為,誘導(dǎo)f中植株生根過(guò)程中培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素
與細(xì)胞分裂素的比值較過(guò)程④____________(填“高”或"低”);最終獲得的“番茄一馬鈴薯”屬于
倍體植株。
2.胰島B細(xì)胞移植是一種有效治療糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物(RPE)可定向誘導(dǎo)人羊
膜間充質(zhì)干細(xì)胞(hAMSCs)分化成挾島B細(xì)胞。請(qǐng)回答卜.列問(wèn)題:
(1)取人羊膜組織刮除血塊、上皮細(xì)胞,沖洗后剪碎,然后用胰蛋白酶處理,制成hAMSCs懸液。將
細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng),先后出現(xiàn)、現(xiàn)象,直至細(xì)胞停止分裂增
殖,這時(shí)需要將細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)處理,然后進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
(2)取傳至第3代的hAMSCs放入細(xì)胞培養(yǎng)板,同時(shí)加入RPE進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)。該代hAMSCs能保
持細(xì)胞正常的v誘導(dǎo)分化培養(yǎng)15天后,提取細(xì)胞的,用胰島素基因作探針
進(jìn)行分子雜交,可初步檢測(cè)hAMSCs是否分化成胰島B細(xì)胞。
(3)用人的雜交瘤細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)人源單克隆抗體難以成功,因此單克隆抗體大都來(lái)自鼠源。但鼠源單
抗在人體內(nèi)使用時(shí)會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫原性,為解決這一問(wèn)題,科學(xué)家發(fā)明了嵌合抗體。大致過(guò)程如圖
T15-18所示:
嵌合抗體能降低鼠源抗體的免疫原性,從圖中可以推測(cè),免疫原性的產(chǎn)生主要與抗體的
(填“V區(qū)”或“C區(qū)”)有關(guān)。構(gòu)建的人鼠嵌合抗體基因表達(dá)載體除了標(biāo)記基因和目的基
因外,還有,
啟動(dòng)子儀VL人CL
cx{'
啟動(dòng)fIRVH人CH
HH
抗體示意圖
腫瘤抗原免疫小鼠表達(dá)教體;
0
0轉(zhuǎn)染細(xì)胞
取小鼠B淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞
11構(gòu)建
雜交瘤細(xì)胞株U>獲取抗體%、VH基因
抗體分泌細(xì)胞
0
鼠源單克隆抗體嵌合抗體
圖H5-18
(4)科學(xué)家利用細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)證明,分化的細(xì)胞中存在“閑置不用”的結(jié)構(gòu)基因。他們把大鼠肝腫
瘤細(xì)胞和小鼠成纖維細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞,篩選出含有兩套肝細(xì)胞染色體和一套成纖維細(xì)胞染色體的
細(xì)胞。這些細(xì)胞既保持了合成大鼠肝細(xì)胞3種特異蛋白的能力,也合成了小鼠肝細(xì)胞的這3種蛋白,但
是在正常的小鼠成纖維細(xì)胞中從不合成這些。由此可見(jiàn),融合實(shí)驗(yàn)證明了小鼠成纖維細(xì)胞
考點(diǎn)三胚胎工程
I考例探究I
1.胚胎工程的操作流程分析
圖T1579
(1)胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)
①能夠移入受體的生理基礎(chǔ):哺乳動(dòng)物發(fā)情排卵后,不管是否妊娠,在一段時(shí)間內(nèi),同種動(dòng)物的供、
受體生殖器官的生理變化是相同的。
②收集的生理基礎(chǔ):早期胚胎形成后,在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子宮建立組織上的聯(lián)系,而是處于
游離狀態(tài)。
③在受體內(nèi)能夠存活的生理基礎(chǔ):受體對(duì)移入子宮的外天胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)C
④供體胚胎正常發(fā)育的生理基礎(chǔ):供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,且不影響供
體胚胎的遺傳特性。
(2)胚胎移植的實(shí)質(zhì):早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)換,而胚胎本身的遺傳物質(zhì)并
不發(fā)生改變,因此各種性狀能保持其原來(lái)的優(yōu)良特性。
(3)胚胎移植的優(yōu)勢(shì):充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖潛力,從而大大縮短了供體本身的繁殖周期,
大大推動(dòng)了畜牧業(yè)的發(fā)展。
(4)胚胎移植過(guò)程中兩次使用激素:第一次常用孕激素對(duì)受、供體進(jìn)行同期發(fā)情處理;第二次用促
性腺激素處理供體使其超數(shù)排卵,
(5)胚胎移植過(guò)程中的兩次檢查:第一次對(duì)收集的胚胎進(jìn)行檢查;第二次對(duì)受體母畜是否妊娠進(jìn)行
檢查。
2.試管動(dòng)物與克隆動(dòng)物的比較
比較項(xiàng)目試管動(dòng)物克隆動(dòng)物
核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎(分割)
技術(shù)基礎(chǔ)體外受精、胚胎移植
移植
實(shí)例試管牛多利羊
良種雌性的卵母細(xì)胞良種雄性的精子黑面綿羊白面綿羊
去核卵母細(xì)胞乳腺細(xì)胞核
卵母細(xì)溫體外培養(yǎng)精子3外獲能
移植
1~?體外受精」
[第絲分裂)重組細(xì)胞
過(guò)程矗J電脈沖刺激
上胚胎移植)早期胚胎
,胚胎移植
雌性受體(提供子宮)另一頭母綿羊的子宮
“妊嫌、出生)
、妊娠、出生
良贏(yíng)代克隆綿羊
生殖方式有性生殖無(wú)性生殖
遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)自?xún)蓚€(gè)個(gè)體遺傳物質(zhì)大部分來(lái)自供核生物體
5人的血清白蛋白在臨床上需求量很大,通常是從人血口提取。由于艾滋病病毒(HIY)等人類(lèi)感染
性病原體造成的威脅與日俱增,使人.們對(duì)血液制品顧慮重重。如果應(yīng)用?定的生物工程技術(shù),將人的
而清白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細(xì)胞中,利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)人而清白蛋白就成為可能C大.致過(guò)程加下:
a.將人體血清白蛋白基因?qū)搿按菩阅膛E咛ァ奔?xì)胞,形成重組細(xì)胞①;
b.取出重組細(xì)胞①的細(xì)胞核,注入去核牛卵母細(xì)胞中,形成重組細(xì)胞②;
c.電脈沖刺激重組細(xì)胞②促使其形成早期胚胎;
d.將早期胚胎移植到母牛的子宮內(nèi),最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。
請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)重組細(xì)胞①和②中的(填“①”或"②”)實(shí)現(xiàn)了基因的重組。
(2)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程a中要選擇“雌性奶牛胚胎”的原因是。
(3)實(shí)驗(yàn)過(guò)程b利用的技術(shù)是,胚胎工程操作中的最后環(huán)節(jié)是。
(4)若將早期胚胎分離成若干個(gè)胚胎細(xì)胞,讓其分別發(fā)育成小牛,這些小牛的基因型
(填“相同”或“不同”),理由是,此頊技術(shù)稱(chēng)
為O
(5)運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動(dòng)物的早期胚胎中獲得胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞),培養(yǎng)如下:早期胚
胎一內(nèi)細(xì)胞團(tuán)一胚胎干細(xì)胞。在培養(yǎng)過(guò)程中,必須用處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán),使之分散成單個(gè)細(xì)胞。
(6)培養(yǎng)哺乳動(dòng)物早期胚胎的營(yíng)養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外,還需要添加維生素、
激素、氨基酸、核甘酸以及等物質(zhì).
I對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練I
毛角蛋白II型中間絲(KIFH)基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFH基因的高絨質(zhì)絨山
羊的簡(jiǎn)單流程如圖T15?20所示。請(qǐng)回答:
圖T15-20
(1)將KIFH基因?qū)胧荏w細(xì)胞內(nèi),獲得轉(zhuǎn)KIFH基因的高絨質(zhì)絨山羊,這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的
原理是。從基因文庫(kù)中獲得的KIFII基因可用技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。過(guò)程①中最常用的運(yùn)
載工具是________。
(2)在過(guò)程②中,用處理,將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞.在培養(yǎng)過(guò)程中,將成纖
維細(xì)胞置于的混合氣體培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
⑶在過(guò)程③中,用處理以獲取更多的卵(母)細(xì)胞,在體外培養(yǎng)到
期,通過(guò)顯微操作進(jìn)行去核處理。
(4)從重組細(xì)胞到早期胚胎過(guò)程中所用的胚胎工程技術(shù)是。在胚胎移植前,通過(guò)
技術(shù)可獲得較多胚胎。
考點(diǎn)四生態(tài)工程
I考例探究I
1.生態(tài)工程的原理
項(xiàng)目理論基礎(chǔ)意義實(shí)例
物質(zhì)循可避免環(huán)境污染及
生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循
環(huán)再生其對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性無(wú)廢棄物農(nóng)業(yè)
環(huán)
原理和發(fā)展的影響
生物多樣性程度“三北防護(hù)林”建
物種多
高,可提高系統(tǒng)的抵設(shè)中的問(wèn)題,珊瑚礁
樣性原生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性
抗力穩(wěn)定性,提高系生態(tài)系統(tǒng)的生物多樣
理
統(tǒng)的生產(chǎn)力性問(wèn)題
協(xié)調(diào)與生物數(shù)量不能超過(guò)
生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)太湖富營(yíng)養(yǎng)化問(wèn)
平衡環(huán)境容納量;生物與
與平衡題,過(guò)度放牧等
原理環(huán)境相適應(yīng)
同時(shí)注重經(jīng)濟(jì)、生林業(yè)建設(shè)中自然系
整體性社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、自然
態(tài)、社會(huì)效益,保障統(tǒng)與社會(huì)、經(jīng)濟(jì)系統(tǒng)
原理構(gòu)成復(fù)合系統(tǒng)
系統(tǒng)的協(xié)調(diào)與穩(wěn)定的關(guān)系問(wèn)題
系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功改善和優(yōu)化系統(tǒng)的
系統(tǒng)學(xué)桑基魚(yú)塘
能原理:分布式優(yōu)于結(jié)構(gòu)以改善功能
集中式和環(huán)式
系統(tǒng)整體性原理:
保持很高的系統(tǒng)生珊瑚礁中藻類(lèi)和珊
整體功能大于各部分
產(chǎn)力瑚蟲(chóng)的關(guān)系
之和
2.生態(tài)農(nóng)業(yè)常見(jiàn)類(lèi)型
(1)?;~(yú)塘模式
?;~(yú)塘是人工建立的高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng),做到蠶糞養(yǎng)魚(yú)肥塘,塘泥肥田、肥桑,從而獲
得稻、魚(yú)、蠶繭三豐收,如圖T15-21所示。
加工廠(chǎng)
蠶繭
桑基
蠶糞I塘泥塘泥
圖T15?21
?;~(yú)塘中的能量多級(jí)利用和物質(zhì)循環(huán)利用:桑葉喂蠶,蠶產(chǎn)蠶絲:桑樹(shù)的枯枝落葉和蠶糞落到魚(yú)
塘中,作為魚(yú)的飼料,經(jīng)過(guò)魚(yú)塘內(nèi)的食物鏈過(guò)程,可以促進(jìn)魚(yú)的生長(zhǎng);甘蔗可以榨糖,糖渣喂豬,豬的
排泄物進(jìn)入魚(yú)塘;魚(yú)的排泄物及其他未利用的有機(jī)物和底泥經(jīng)微生物的分解,又可作為桑樹(shù)和甘蔗的有
機(jī)肥札
(2)沼氣農(nóng)田立體養(yǎng)殖模式(如圖T15-22所示)
沼
渣
'
沼
液
作
肥
料
6南京古泉生態(tài)農(nóng)場(chǎng)是生態(tài)衣業(yè)的典范。該農(nóng)場(chǎng)將養(yǎng)豬、養(yǎng)魚(yú)、沼氣工程、養(yǎng)鴨、種植農(nóng)作物、養(yǎng)
蘑菇、種桑養(yǎng)蠶、種植果樹(shù)等多個(gè)生產(chǎn)過(guò)程合理地有機(jī)結(jié)合起來(lái),成為一種高效良性的循環(huán),生態(tài)效益
達(dá)到了良性發(fā)展。請(qǐng)根據(jù)此生態(tài)衣場(chǎng)的特點(diǎn),完成下列問(wèn)題:
農(nóng)田
/\
無(wú)機(jī)物桔稈
\/
沼氣池
I
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