人教版高中生物選擇性必修3生物技術(shù)與工程第3章34蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用練習(xí)2

e蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用

一、單選題

I.如圖為蛋白質(zhì)工程操作的基本思路，下列敘述不正確的是()

A.圖中①代表轉(zhuǎn)錄，②代表翻譯，④代表分子設(shè)計，⑤代表DNA合成

B.因為蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)十分好雜，所以蛋白質(zhì)工程是一項難度很大的工程

C.蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是對基因的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計

D.從圖中可以看出蛋白質(zhì)工程的基本途徑與中心法則是相反的

2.枯草桿菌蛋白酹能催化蛋白質(zhì)水解為氨基酸，在有機(jī)溶劑中也能催化多肽的合成。這些

堿性蛋白酶具有重要的應(yīng)用價值，被廣泛應(yīng)用于洗滌劑、制革及絲綢工業(yè)。1987年福什特

通過將枯草桿菌蛋白酶分子表面的Asp(99)和Glu(156)改成Lys,而導(dǎo)致了活性中心

His(64)質(zhì)子pKa從7下降到6,使酶在pH=6時的活力提高10倍。下列說法正確的是()

A.完成氨基酸的替換需要通過改造某因?qū)崿F(xiàn)

B.該成果體現(xiàn)了蛋白質(zhì)工程在培育新物種方面具有獨特的優(yōu)勢

C.經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的枯草桿菌蛋白酶活性提高這一性狀不可遺傳

D.蛋白質(zhì)工程最終要達(dá)到的目的是獲取編碼蛋白質(zhì)的基因序列信息

3.蛋白質(zhì)工程又稱第二代基因工程。下列關(guān)于基因工程與蛋白質(zhì)工程的敘述，正確的是

()

A.蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)

B.基因工程需時基因進(jìn)行操作，蛋白質(zhì)工程不對基因進(jìn)行操作

C.通過蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)仍然是天然的蛋白質(zhì)

D.蛋白質(zhì)工程是在蛋白質(zhì)分子水平上直接改造蛋白質(zhì)的

4.0葡聚糖酶是一種在酒類、飼料等行業(yè)中具有重要用途的工業(yè)用酶。為提高p葡聚糖酶

的催化活性，科學(xué)家將其第20位，117位和165位賴氨酸突變?yōu)榻z氨酸。對B前聚糖酶結(jié)

構(gòu)的改造屬丁()

A.基因工程B.胚胎工程C.細(xì)胞工程D.蛋白質(zhì)工程

5.玉米的賴氨酸含量比較低，科學(xué)家將合成賴氨酸的關(guān)鍵睡——天冬氨酸激酹中352位的

蘇氨酸變成異亮氨酸，二氫毗咤二陵酸合成胸中104位的天冬氨酸變成異亮氨酸后，可大大

提高玉米中的賴氨酸含量，下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的敘述王確的是()

A.改造后的兩種酶是自然界中不曾存在的新型物質(zhì)

B.在分子水平上直接對兩種酣的宓基酸進(jìn)行改造

C.蛋白質(zhì)工程不需要構(gòu)建基因表達(dá)載體

D.蛋白質(zhì)工程不需要從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，直接設(shè)計其結(jié)構(gòu)

二、多選題

6.雜交瘤技術(shù)制備的鼠單抗（單克隆抗體）可誘導(dǎo)入體產(chǎn)生抗單抗抗體（ADAs）而降低其

治療效果。利用生物工程技術(shù)，可在小鼠體內(nèi)生產(chǎn)人鼠嵌合單抗，還可將人編碼抗體的基因

轉(zhuǎn)移至經(jīng)過人工改造的抗體基因缺失的小鼠中，使小鼠表達(dá)出完全人化單抗。下列敘述錯誤

的是（）

A.用雜交瘤技術(shù)制備單抗涉及動物細(xì)胞融合及動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

B.不同類型單抗的制備過程都涉及基因工程和蛋白質(zhì)工程技術(shù)

C.鼠單抗療效降低是由于ADAs與其發(fā)生了特異性結(jié)合

D.鼠單抗、人鼠嵌合單抗、完全人化單抗誘發(fā)產(chǎn)生ADAs的強(qiáng)度依次升高

7.人體內(nèi)的t—PA甯白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，但給心?；颊咦⑸淙?劑最

基因工程t—PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血。研究證實，將t—PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能

顯著降低其出血副作用。對天然t—PA基因進(jìn)行改造，并使其在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，可制

造出改良t—PA蛋白。如圖表示相關(guān)的FI的基因、載體及限制酶。pCLYII為質(zhì)粒，新霉素

為抗生素。有關(guān)敘述正確的是（）

A.制造出性能優(yōu)異的改良t—PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程

B.用Xmal和Bglll切開pCLYII,才能使其與t—PA改良基因高效連接

C.選擇有新霉素抗性的大腸桿菌作為受體細(xì)胞進(jìn)行重組質(zhì)粒的篩選和鑒定

D.區(qū)分重組質(zhì)粒和原有質(zhì)粒的一個標(biāo)志是可以觀察mlacZ基因的表達(dá)情況

8.蛋白酶應(yīng)用于洗滌劑、制革及絲綢工業(yè)。某研究小組利用蛋白質(zhì)工程將該蛋白酶中第188

位丙氨酸替換為脯氨酸、第239位谷氨酰胺替換為精氨酸、第262位綴氨酸替換為痙氨酸，

結(jié)果發(fā)現(xiàn)該酶的催化活性大幅度提高。下列敘述正確的是（）

A.對枯草桿菌蛋白酶進(jìn)行改造通過直接改造蛋白酶的分了結(jié)構(gòu)來實現(xiàn)

B.通過基因工程和蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)的枯草桿菌蛋白酶的氨基酸序列相同

C.改造后的枯草桿菌蛋白的可能使空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變導(dǎo)致其催化活性提高

D.對枯草桿菌蛋白能進(jìn)行分子設(shè)計必須從預(yù)期蛋白酶的功能特點入手

9.蛋白質(zhì)工程就是通過對蛋白質(zhì)化學(xué)、蛋白質(zhì)晶體學(xué)和蛋白質(zhì)動力學(xué)的研究，獲得有關(guān)蛋

白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎(chǔ)上對編碼蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行有目的的設(shè)計和改

造，通過基因，程技術(shù)獲得可以表達(dá)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物，中華酮是一種瀕危野生動物。研

究者試圖通過蛋白質(zhì)工程改造中華境體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應(yīng)現(xiàn)在的水域環(huán)境。下

列有關(guān)說法錯誤的是（）

A.蛋白質(zhì)工程可定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)

B.改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實現(xiàn)

C.改造后的中華婚和現(xiàn)有中華鱷不再是同一物種

D.改造后的中華鱷的后代不具有改造的蛋白質(zhì)

10.新冠病毒通過棘突蛋芻（S蛋白）的活性域（RBD）與人體細(xì)胞表面的ACE2受體相互

作用感染細(xì)胞?？茖W(xué)家設(shè)計了一種臼然界中不存在的蛋白質(zhì)LCB1,可與S蛋白的RBD緊

密結(jié)合，以干擾新冠病毒的感染。下列說法合理的是（）

A.LCBI可能與S蛋白的抗體在結(jié)構(gòu)上類似

B.S蛋白的RBD結(jié)構(gòu)可為設(shè)計LCBI提供信息

C.設(shè)計LCB1時，需避免在結(jié)構(gòu)上與ACE2類似

D.生產(chǎn)LCB1涉及到基因工程的某些操作技術(shù)

三、選擇題組

閱讀下列材料回答下列小題

血友病是一種伴X染色體隱性遺傳病，其中A型血友病是由于FV1I1基因（主要在肝臟中表

達(dá)）發(fā)生基因突變導(dǎo)致丙的凝血因子VIII含量降低或功能異常，已發(fā)現(xiàn)FWI1基因突變類型達(dá)

3000多種。

相關(guān)腺病毒載體（AAV）是A型血友病基因治療常用載依，為單健DNA。FV1D基因的結(jié)構(gòu)

域包括AI—A2—B—A3—G-C2,改變Al結(jié)構(gòu)中基因序列，使309位的丙氨酸替換為絲氨

酸，可增加凝血因子VIII的分泌，利用AAV為載體將編輯后的FV1II基因插入到A型血友病猴

肝細(xì)胞基因組后，成功高表達(dá)出了凝血因子加，從而達(dá)到基因治療的目的。

11.下列對材料分析，正確的是（）

A.改變FV1U基因中的A1結(jié)構(gòu)域?qū)俣』蛲蛔?/p>

B.AAV堿基組成中喋吟堿基數(shù)等于喀唾堿基數(shù)

C.血友病女性患者的祖母與孫女也都是血友病患者

D.FVin基因突變類型達(dá)3000多種體現(xiàn)了基因突變的隨機(jī)性

12.下列對材料分析，錯誤的是（）

A.選擇肝細(xì)胞特異性的啟動子可使FVIII基因表達(dá)嚴(yán)格限于肝細(xì)胞

B.上述得到高衣達(dá)凝血因于V1H的操作過程屬于蛋白質(zhì)程

C.質(zhì)粒是基因工程常用的一種載體，在真核生物細(xì)胞中也有分布

D.將FVII1基因插入到猴肝細(xì)胞基因組并成功表達(dá)屬于體外基因治療

四、判斷題

13.蛋白質(zhì)工程是指對現(xiàn)有蛋白質(zhì)直接修飾改造以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（）

14.判斷下列表述是否正確。

（1）基因工程需要在分子水平對基因進(jìn)行操作，蛋白質(zhì)工程不需要對基因進(jìn)行操作。（）

（2）蛋白質(zhì)工程需要改變蛋白質(zhì)分子的所有氨基酸序列。（）

（3）蛋白質(zhì)工程可以改造酶，提高酶的熱穩(wěn)定性。（）

15.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作，定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)

構(gòu)（）

五、實驗題

16.回答下列（一）、（二）小題.

（一）造紙廠排放的污水中含大量木質(zhì)素，某些真菌能分泌漆陶，催化木質(zhì)素的降解.研究

人員從不同環(huán)境地表上采集土壤接種到含有木質(zhì)素及必需無機(jī)鹽的培養(yǎng)基中，經(jīng)過如下圖所

示的分離純化過程，最終篩選出了高產(chǎn)漆酶的白腐真菌。請回答下列問題：

（1）將土壤樣品接種到含有木質(zhì)素及必需無機(jī)鹽的培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)若干天的目的是

。培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中木質(zhì)素含量的培養(yǎng)液，接入新的培

養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)。

（2）在固體培養(yǎng)基上分離純化目的菌時，若需統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量，要每隔一定時間觀察

統(tǒng)計一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時間不足導(dǎo)致,或培養(yǎng)時間太長

導(dǎo)致o

（3）分離得到的菌種在液體培養(yǎng)基中大量增殖，對培養(yǎng)液離心，從（上清液/

沉淀）中收集漆酶。

（4）游離的漆酶穩(wěn)定性差，在環(huán)境中易受溫度、pH等因素的影響，在工業(yè)化應(yīng)用時，可采

用技術(shù)來解決這一問題。將用海藻酸鈉包埋處理的漆酶裝載成反應(yīng)柱，處理污水

時發(fā)現(xiàn)，在污水一次流經(jīng)反應(yīng)柱后，木質(zhì)素含量還是高于標(biāo)準(zhǔn)。在不增加柱高，保證適宜的

溫度、pH前提下，還可以改進(jìn)生產(chǎn)的措施是_________。

（二）干擾素是機(jī)體感染病毒時，宿主細(xì)胞產(chǎn)生的一類糖蛋白，具有抗病毒、抗腫瘤等作用，

科學(xué)家通過多種生物工程技術(shù)生產(chǎn)干擾素。

I.利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)干擾素

（1）把成熟的精子放入一定濃度的肝素溶液中，誘導(dǎo)其,再與卵母細(xì)胞融合形

成受精卵。圖中③過程最常用的技術(shù)是0

（2）在進(jìn)行過程⑤之前，需對早期胚胎進(jìn)行篩選和鑒定，科研人員取囊胚_(dá)________的細(xì)

胞，利用探針分別進(jìn)行了兩組鑒定:利用基因制備的探針進(jìn)行分子雜交，檢測目

的基因是否成功導(dǎo)入；利用SRY基因（位于Y染色體上）探針進(jìn)行檢測，將檢測反應(yīng)呈

（填“陽”或“陰”）性的胚胎進(jìn)行移植.

II.利用家蠶細(xì)胞生產(chǎn)干擾素

（3）將干擾素基因?qū)肱囵B(yǎng)的家蠶細(xì)胞時，需要載體協(xié)助，而載體一般不選擇

（填“噬菌體”或“昆蟲病毒”），原因是o

（4）在培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，增大細(xì)胞貼壁生長

的附著面積，避免細(xì)胞之,可,從而增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量。

六、綜合題

17.心腦血管疾病引發(fā)的血栓并發(fā)癥嚴(yán)重威脅人類生命，居各種疾病死亡率首位。臨床上常

用組織型纖溶酶原激活劑作為溶解血栓、搶救心肌梗死患者的特效藥。然而，tPA因注射

劑量大容易誘發(fā)顱內(nèi)出血，為了提高IPA臨床應(yīng)用的可行性，科學(xué)家研發(fā)了一種顱內(nèi)出血傾

向大幅度降低的優(yōu)質(zhì)tPA突變蛋白。據(jù)此回答下列問題：

（1）人IPA由527個氨基酸構(gòu)成（如卜.圖所示），基礎(chǔ)研究顯示，將tPA第84位的半胱氨酸

替換為絲氨酸，所形成的突變蛋白溶解血松有效性明顯提高“對tPA的改造必須通過_____

獲得tPA突變基因而不是直接改造蛋白質(zhì)。

（2）tPA突變基因最終需要與P質(zhì)粒重組才能構(gòu)建基因表達(dá)載體。P質(zhì)粒DNA分子上有①復(fù)

制原點，可以保證B質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能；②多個限制的切位點，便于；③標(biāo)

記基因和相關(guān)的啟動子。

（3）基因表達(dá)載體進(jìn)入受體細(xì)胞中并在細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為o

（4）為檢測IPA基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可采用進(jìn)行檢測。除此之外，還可以使用PCR

技術(shù)，實驗組以待測樣本DNA為模板，使用引物1：5'TACCAAGTGATCTGCAGA3,,引

物2：（填引物的核甘酸序列）進(jìn)行PCR擴(kuò)增；同時以模板的組別作為陰性對

照組。若，說明目的基因?qū)氤晒Α?/p>

18.基因工程又叫做DNA重組技術(shù)，蛋白質(zhì)工程是在它的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因

工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。

（I）是基因工程的核心，包括復(fù)制原點、后動于、、終止

子、標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是__________________________________。

（2）蛋白質(zhì)的合成過程是按照克里克提出的進(jìn)行的。基因工程原則上只能生產(chǎn)

蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)工程可制造新的蛋白質(zhì)，它的基本途徑是:

從預(yù)期蛋白質(zhì)的功能出發(fā)TT推測應(yīng)有的氨基酸序列一找

到相對應(yīng)的脫氧核甘酸序列（基因）。

（3）上述過程設(shè)計的脫氧核甘酸序列（基因）（填"是''或"不是”）唯一的，理

由是0

參考答案:

1.c

【解析】

【分析】

1、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾

或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的

需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）

2、蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，又稱為第二代的基

因工程。

3、基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列,

找到相對應(yīng)的脫氧核甘酸序列（基因）或合成新的基因，從而獲得所需要的蛋白質(zhì)。

【詳解】

A、圖中①代表轉(zhuǎn)錄，②代表翻譯，④代表分子設(shè)計，⑤代表DNA合成，A正確；

B、因為蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，所以蛋白質(zhì)工程是一項難度很大的工程，B正確；

C、蛋白質(zhì)工程的目的是對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計，通過基因合成或修飾實現(xiàn)，C錯誤:

D、從圖中可以看出蛋白質(zhì)工程的基本途徑與中心法則是相反的，D正確。

故選C。

2.A

【解析】

【分析】

蛋白質(zhì)工程是將控制蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行修飾改造或合成新的基因，然后運用基因工程合成新

的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)工程的過程：預(yù)期蛋白質(zhì)功能T設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)一推測應(yīng)有氨基酸

序列T找到對應(yīng)的脫氧核甘酸序列（基因）。

【詳解】

A、氨基酸的的排列順序是由基因決定的，因此完成氨基酸的替換需要通過改造基因?qū)崿F(xiàn)，

A正確；

B、該成果培育了新品種，而不是新物種，B錯誤；

C、經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的枯草桿菌蛋白酶的基因發(fā)生了改變，因此經(jīng)蛋白質(zhì)工程改造后的

枯草桿菌蛋白酶活性提高這一性狀可以遺傳，C錯誤；

D、蛋白質(zhì)工程是在深入了解蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，它最終要達(dá)到

的目的是改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì)，滿足人類的需求，D錯誤。

故選Ao

3.A

【解析】

【分析】

1、蛋白質(zhì)工程：指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾

或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的

需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋占質(zhì)）。

2、蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有

的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核甘酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑；以卜.

按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。

【詳解】

A、蛋白質(zhì)工程是在基因二程基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程，是在分子水平上對基因分

子直接進(jìn)行操作，A正確；

B、基因工程和蛋白質(zhì)工程都需對基因進(jìn)行分子水平操作，B錯誤；

C、通過蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)不再是天然的蛋白質(zhì)，是?種新的蛋白質(zhì)，C錯誤；

D、蛋白質(zhì)工程目的是改造蛋白質(zhì)，但對蛋白質(zhì)的改造需要通過改造相應(yīng)基因結(jié)構(gòu)來實現(xiàn)，

D錯誤。

故選A。

4.D

【解析】

【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基

因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

【詳解】

根據(jù)題干”為提高P葡聚糖酶的催化活性，科學(xué)家將其第20位、117位和165位賴氨酸突變

為絲氨酸”可知，該過程中氨基酸的序列發(fā)生改變，因此改造后的葡聚糖能空間結(jié)構(gòu)也發(fā)生

了改變，該技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程。

故選Do

5.A

【解析】

【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)

進(jìn)行改造，或制造一種新蛋白質(zhì)的技術(shù)。在該工程中，引起蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)改變的原因是

組成該蛋白質(zhì)肽鏈的氨基酸序列發(fā)生了改變。

【詳解】

A、結(jié)合分析可知，兩種酶的改造是通過蛋白質(zhì)工程實現(xiàn)的，蛋白質(zhì)工程可以生產(chǎn)自然界中

不曾存在的新型物質(zhì)，A正確：

B、對于兩種酶的氨基酸改造是通過基因改造實現(xiàn)的，B錯誤；

C、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，基因工程是蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)，故蛋白質(zhì)工程

都需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，C錯誤：

D、蛋白質(zhì)T程的i寸程：預(yù)期蛋白質(zhì)功能一設(shè)計預(yù)期的赤白質(zhì)結(jié)構(gòu)一椎測應(yīng)有氨基酸序列一

找到對應(yīng)的脫氧核甘酸序列（基因），故蛋白質(zhì)工程需要從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，D錯誤。

故選Ao

6.BD

【解析】

【分析】

在制備過程單克隆抗體中需要將抗原首先注入生物體內(nèi)，是共產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴

細(xì)胞，再用動物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，并篩選出能大量增殖和產(chǎn)

生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，最后經(jīng)過體外或體內(nèi)培養(yǎng)，獲取單克隆抗體。

【詳解】

A、雜交瘤技術(shù)制備單抗涉及動物細(xì)胞融合（骨微瘤細(xì)胞與B細(xì)胞的融合）和動物細(xì)胞培養(yǎng)

技術(shù)，A正確；

B、不同類型單抗的制備遼程并不都涉及基因工程和蛋白質(zhì)工程技術(shù)，比如：雜交瘤技術(shù)制

備的鼠單抗就不涉及基因工程和蛋白質(zhì)工程技術(shù)，B錯誤；

C、鼠單抗進(jìn)入人體后能誘導(dǎo)入體產(chǎn)生ADAs,ADAs與鼠單抗特異性結(jié)合導(dǎo)致鼠單抗療效

下降，C正確；

D、結(jié)合題意可知，該技大鼠表達(dá)出完全人化單抗，故鼠單抗、人鼠嵌合單抗、完全人化單

抗誘發(fā)產(chǎn)生ADAs的強(qiáng)度依次降低，D錯誤。

故選BDo

7.ABD

【解析】

【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基

因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或者制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)生活需求。

【詳解】

A、根據(jù)題干“對天然t-PA基因進(jìn)行改造，并使其在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，可制造出改良

I—PA蛋白”可知，制造出性能優(yōu)異的改良1—PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程，A正確；

B、目的基因的黏性末端圖中已經(jīng)給出，觀察各限制酶的識別序列可知所使用的限制酶為

Xmal和BglII,要想把目的基因與載體pCLYll拼接起來需要得到相同的黏性末端，因此

運載體pCLYll也需要XmaI和BglII切割，B正確；

C、由干標(biāo)記基因存在干原有質(zhì)粒匕若未連接目的基因的質(zhì)粒導(dǎo)入到大腸桿菌中.這叱大

腸桿菌也可以獲得新霉素的抗性，因此選擇有新霉素抗性的大腸桿菌作為受體細(xì)胞不能進(jìn)行

重組質(zhì)粒的篩選和鑒定，C錯誤；

D、區(qū)分重組質(zhì)粒和原有質(zhì)粒的一個標(biāo)志可以觀察mlacZ基因的表達(dá)情況，由于重組質(zhì)粒拼

接了目的基因，破壞了mlacZ基因，因此在重組質(zhì)粒中該基因不表達(dá)，菌落呈現(xiàn)白色，而原

有基因由于該基因保存完整，可以表達(dá)，所以菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。

故選ABD.

8.CD

【解析】

【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生.物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基

因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或者制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)生活需求。

【詳解】

A、對枯草桿菌蛋白酶進(jìn)行改造通過基因來實現(xiàn)，A錯誤；

B、基因工程生產(chǎn)的蛋白質(zhì)是自然界已有的蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不存在

的新型蛋白質(zhì)分子，兩者的氨基酸序列不同，B錯誤；

C、該蛋白酶中第188位丙氨酸替換為脯氨酸、第239位谷氨酰胺替換為精氨酸、第262位

繳氨酸替換為亮氨酸，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該酶的催化活性大幅度提高，其原因可能是改變了蛋白酶的

空間結(jié)構(gòu)，提高了酶與底物的親和力，C正確；

D、對蛋白質(zhì)進(jìn)行分子設(shè)t-應(yīng)從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計，D正確。

故選CDo

9.CD

【解析】

【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或

基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需

求。也就是說，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含

多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。

基本流程：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)T設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)一推測應(yīng)有的氨基酸序列一找

到相對應(yīng)的核糖核甘酸序列（RNA）T找到相對應(yīng)的脫氧核糖核甘酸序列（DNA）.

【詳解】

A、蛋白質(zhì)工程可以通過改造基因來定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)，A正確；

B、因為基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成，所以改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實現(xiàn)，B正確；

C、改造后的中華酮具有新的性狀，但其和現(xiàn)有中華絹之間沒有生殖隔離，仍是同一物種，

C錯誤；

D、蛋白質(zhì)工程改造的是基因，可以遺傳給子代，因此改造后的中華鮑的后代也具有改造的

蛋白質(zhì)，D錯誤。

故選CDo

10.ABD

【解析】

【分析】

I、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾

或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造種新的或白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的

需求。

2、蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界己存在的蛋白質(zhì)。

3、蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，乂稱為第二代的基

因工程。

4、基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列,

找到相對應(yīng)的脫氧核甘酸牛列（基因）以I：是蛋白質(zhì)工程特有的途徑。

【詳解】

A、S蛋白的抗體能與S蛋白RBD特異性結(jié)合，而根據(jù)題干可知：LCB1可與S蛋白RBD

緊密結(jié)合，說明LCB1可能與S蛋白的抗體在結(jié)構(gòu).上類似，A正確：

B、由于LCB1可與S蛋白RBD緊密結(jié)合，故LCB1可依據(jù)S蛋白的RBD結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計，

B正確；

C、由題干信息分析可知，新冠病毒是通過其表面的S蛋白的RBD與人體細(xì)胞表面的ACE2

受體相互作用；而人工合成的LCB1可識別并緊密結(jié)合S蛋白的RBD,阻止S蛋白的RBD

與ACE2受體結(jié)合，由此說明LCBI可能與ACE2受體的某些區(qū)域結(jié)構(gòu)類似，C錯誤；

D、可用蛋白質(zhì)工程進(jìn)行LCB1的設(shè)計和生產(chǎn)，而蛋白質(zhì)工程是建立在基因工程的基礎(chǔ)之上

的，因此生產(chǎn)LCB1用到了基因工程的操作技術(shù)，D正確。

故選ABD。

【點睛】

11.A

12.D

【解析】

【分析】

1、基因突變：（1）DNA分子中發(fā)生堿基的替換、增添或缺失，而引起的基因堿基序列的改

變，叫作基因突變“（2）基因突變的特點：普遍性、隨機(jī)性、不定向性、多害少利性等。

2、基因治療（genetherapy］是指將外正?；?qū)氚屑?xì)胞，以糾正或補(bǔ)償缺陷和異?；蛞?/p>

起的疾病，以達(dá)到治療目的?；蛑委煹陌屑?xì)胞主要分為兩大類:體細(xì)胞和生殖細(xì)胞。

【詳解】

I.A、改變FVDI基因中的A1結(jié)構(gòu)域，使309位的丙氨酸替換為絲氨酸，即替換了FVHI基因的

堿基對，故屬于基因突變，A正確；

B、AAV的遺傳物質(zhì)是單鏈DNA,堿基組成中噤吟堿基數(shù)不定等丁喀呢堿基數(shù)，B錯誤：

C、血友病是一種伴X染色體隱性遺傳病，血友病女性患者的祖母與孫女不一定是血友病患

者，但至少是攜帶者，C縉誤；

D、FVUI基因突變類型達(dá)3000多種體現(xiàn)了基因突變的不定向性，D錯誤。

故選A。

2.A、選擇肝細(xì)胞特異性的啟動子，可使FVII1基因表達(dá)嚴(yán)格限于肝細(xì)胞，A正確；

B、上述通過基因工程手段改造已畬的編碼蛋白質(zhì)的基因得到高表達(dá)凝血因于VIII的操作過程

屬于蛋白質(zhì)工程，B正確；

C、質(zhì)粒是基因工程常用的一種載體，在真核生物細(xì)胞中也有分布，C正確：

D、將FVD1基因插入到猴肝細(xì)胞基因組并成功表達(dá)屬于體內(nèi)基因治療，D錯誤。

故選D。

13.錯誤

【解析】

略

14.⑴錯誤

(2)錯誤

(3)正確

【解析】

(1)

基因工程和蛋白質(zhì)工程都需對基因進(jìn)行分子水平操作，口攵錯誤。

(2)

蛋白質(zhì)工程需要改變蛋白質(zhì)分子的少數(shù)氨基酸序列，而不是全部的氨基酸序列，故錯誤。

(3)

蛋白質(zhì)工程可以改造能的結(jié)構(gòu)，從而提高酶的熱穩(wěn)定性，故正確。

15.錯誤

【解析】

【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對基因分子直接進(jìn)行操作，進(jìn)而定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)，故

錯誤。

16.增加目的菌的數(shù)量低遺漏菌落的種類和數(shù)目菌落粘連影響計數(shù)、培養(yǎng)基表

面干燥脫水上消液酶的固定化減慢流速，多次流入獲能顯微注射滋養(yǎng)

層干擾素陰噬菌體噬菌體的宿主細(xì)胞是細(xì)菌，而不是家蠶細(xì)胞接觸抑制

【解析】

1、從混合樣品中獲得某種微生物的方法通常有兩種：(】)可利用該分離對象對某一營養(yǎng)物

質(zhì)有一“嗜好”的原理，專門在培養(yǎng)基中加入或不加該營養(yǎng)物質(zhì)，從而使它成為一種選擇培養(yǎng)

基(如在含高濃度NaCl的培養(yǎng)基上分離金黃色葡萄糖洋菌，在不含N的培養(yǎng)基上分離圓褐

固氮菌)；或根據(jù)分離對象對pH、溫度和氧氣濃度的喜好，改變培養(yǎng)環(huán)境的埋化性質(zhì)，使環(huán)

境條件最適宜該微生物的生存，從而達(dá)到分離的目的。（2）可利用該分離對象對某種抑菌物

質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物，經(jīng)培養(yǎng)后，原來占優(yōu)勢的微生物生長受抑制，而

分離對象卻可?乘機(jī)大大增殖，使之在數(shù)量上占優(yōu)勢（如在加入青霉素的培養(yǎng)基上分離真核微

生物）。

2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR

技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包

括目的基因、后動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞

不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和

花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸?/p>

物細(xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)抱法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)

基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)：②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄

出了mRNA分子雜交技術(shù)：③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗體雜交技術(shù).個體水

平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（-）（1）將土壤樣品接種到含有木質(zhì)素及必需無機(jī)鹽的培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)若干天的目的是

增加目的菌的數(shù)量。培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中木質(zhì)素含量最少的培養(yǎng)液（說明漆酶產(chǎn)

量最高），接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，目的是對目的菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

<2）區(qū)分菌落種類的依據(jù)是菌落的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等特征，統(tǒng)計菌落種類和

數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以有效防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)

致遺漏菌落的種類和數(shù)目，或培養(yǎng)時間太長導(dǎo)致菌落粘連影響計數(shù)、培養(yǎng)基表面干燥脫水影

響菌落數(shù)目的統(tǒng)計。

（3）由于該菌產(chǎn)生的酶能夠分解培養(yǎng)基中的木質(zhì)素，因此該酶屬于分泌蛋白，因此在上清

液中可以能夠收集到該酶，

（4）應(yīng)用時發(fā)現(xiàn)游離的漆酶穩(wěn)定性差，在環(huán)境中易受溫度、pH等因素的影響，這在定程

度上限制了漆酶的工業(yè)化應(yīng)用，可采用固定化技術(shù)或蛋白質(zhì)工程技術(shù)解決這一類問題，即利

用固定化技術(shù)固定化酹。在不增加柱高的前提下，保證適宜的溫度、pH前提下，改進(jìn)生產(chǎn)

工藝流程的措施是減慢流速、多次流入。

（二）（1）一定濃度的肝素溶液能誘導(dǎo)精子獲能體外受精后，需對早期胚胎進(jìn)行胚胎移植，

使胚胎在母體內(nèi)發(fā)育。圖中③過程最常用的技術(shù)是顯微注射法。

（2）在胚胎移植⑤前，需對早期胚胎進(jìn)行篩選和鑒定，科研人員取囊胚滋井層的細(xì)胞。利

川干擾素基因制備的探針進(jìn)行分子雜交，檢測目的基因?qū)胧欠癯晒?。乳腺生物反?yīng)器采用

的是雌性生物，故利用SRY基因（位于Y染色體上）探針進(jìn)行檢測，將檢測反應(yīng)呈陰性的

胚胎為雌性，進(jìn)行移植。

（3）若將干擾素基因?qū)肱囵B(yǎng)的家蠶細(xì)胞時，需要載體協(xié)助，而載體一般不選擇噬菌體，

原因是噬菌體的宿主細(xì)胞是細(xì)菌而不是家蠶。

（4）培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠

放入反應(yīng)器中，這樣可以增大細(xì)胞貼壁生長的附著面積，防止接觸抑制，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)

量，也有利于空氣交換。

【點睛】

本題考杳基因工程和動物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記PCR技術(shù)的條件；識記動物

細(xì)胞培養(yǎng)的條件，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。

17.（1）基因修飾（或基因合成）

⑵自我復(fù)制目的基因（外DNA）的插入

⑶轉(zhuǎn)化

（4）DNA分子雜交5TCGCATGTTGTGACGAAT3，以tPA突變基因片段為模

板實驗組與陽性對照組的結(jié)果?致，且陰性對照組無擴(kuò)增產(chǎn)物

【解析】

【分析】

1、目的基因的獲取的方法有：從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終

止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點等。

3、將目的基因?qū)胧荏w組胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>

植物細(xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將R的基因?qū)雱游锛?xì)胞最

有效的方法是：顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4、目的基因的檢測與鑒定：

（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因，可采用DNA

分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,可采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的

基因是否翻譯成蛋白質(zhì)可，采用抗原-抗體雜交技術(shù)。

（2）個體水平上的鑒定：如抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

5、PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的簡稱，指在引物指導(dǎo)下由酣催化的對特定模板（克隆或基因組

DNA)的擴(kuò)增反應(yīng)，是模疚體內(nèi)DNA復(fù)制過程，在體外特異性擴(kuò)增DNA片段的一種技術(shù),

在分子生物學(xué)中有廣泛的應(yīng)用，包括用于DNA作圖、DNA測序、分子系統(tǒng)遺傳學(xué)等°

(1)

任何一種天然蛋白質(zhì)都是由基因編碼的，改造了基因即對蛋白質(zhì)進(jìn)行了改造，而且改造過的

蛋白質(zhì)可以遺傳下去。如果對蛋白質(zhì)直接進(jìn)行改造，即使改造成功，被改造過的蛋白質(zhì)分子

還是無法遺傳，還有對基因進(jìn)行改造，比對蛋白質(zhì)直接改造要容易操作，難度要小得多；所

以對tPA的改造必須通過基因合成獲得tPA突變基因，而不是直接改造蛋白質(zhì)。

(2)

基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止了、

標(biāo)記基因和復(fù)制原點等，其中，復(fù)制原點，是DNA復(fù)制的起點，作用是帶動目的基因復(fù)制:

基因表達(dá)載體要有多個限制酶切位點，是因為酶切位點越多