醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 第四章 細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則 學(xué)習(xí)資料

第四章細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷與防治原則病原菌檢測(cè)血清學(xué)診斷

第一節(jié)細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷采取標(biāo)本應(yīng)無(wú)菌操作；不同情況（如病期、分布、排出部位等）采不同標(biāo)本。并盡可能采集病變明顯部位的材料；采集標(biāo)本應(yīng)在使用抗生素之前；標(biāo)本必須新鮮，盡快送檢，注意冷藏（少數(shù)應(yīng)保暖）；測(cè)抗體時(shí)盡量采集雙份血清：急性期、恢復(fù)期。

一、標(biāo)本采集與送檢的原則病原菌檢測(cè)病原菌的檢測(cè)程序病原菌檢測(cè)標(biāo)本直接涂片鏡檢（檢測(cè)細(xì)菌形態(tài)特征）分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)明確診斷藥物敏感試驗(yàn)檢測(cè)抗原檢測(cè)核酸形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查顯微鏡放大法染色法普通光學(xué)顯微鏡電子顯微鏡復(fù)染色法：用2種以上染料革蘭染色抗酸染色負(fù)染色法：墨汁負(fù)染熒光顯微鏡（掌握－實(shí)驗(yàn)課）

細(xì)菌的人工培養(yǎng)

培養(yǎng)基細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基cultruemedium用人工方法配制而成的，專供微生物生長(zhǎng)繁殖使用的混合營(yíng)養(yǎng)物制品。常用培養(yǎng)基種類

1、按物理性狀分：液體培養(yǎng)基+1.5-2.5%瓊脂固體培養(yǎng)基+0.3-0.5%瓊脂半固體培養(yǎng)基2、按營(yíng)養(yǎng)組成和用途分厭氧培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基+血液、血清、生長(zhǎng)因子等+化學(xué)物質(zhì)，抑制某些細(xì)菌、利于另外一些細(xì)菌生長(zhǎng)，如：SS培養(yǎng)基利用生化反應(yīng)鑒別細(xì)菌，如：葡萄糖、乳糖等固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況菌落（S型）菌苔

菌落（R型）菌落（colony）：

單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。液體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況混濁、沉淀、菌膜沉淀生長(zhǎng)混濁生長(zhǎng)表面生長(zhǎng)半固體體培養(yǎng)基中云霧狀生長(zhǎng)沿穿刺線生長(zhǎng)有鞭毛細(xì)菌無(wú)鞭毛細(xì)菌（二）細(xì)菌的鑒定

1.

形態(tài)學(xué)鑒定：

2.生化試驗(yàn)鑒定：對(duì)糖和蛋白質(zhì)的分解，檢測(cè)腸道菌

3.

血清學(xué)鑒定：已知抗體檢測(cè)未知的純培養(yǎng)菌

4.

動(dòng)物試驗(yàn)：測(cè)定細(xì)菌毒力

病原菌檢測(cè)（掌握－實(shí)驗(yàn)課）

（三）細(xì)菌抗原的檢測(cè)

EIA,IF,

ELISA,

Westernblot,對(duì)流免疫電泳（四）檢測(cè)細(xì)菌核酸

核酸雜交

PCR

基因芯片（genechips）病原菌檢測(cè)

用已知細(xì)菌或特異性抗原檢測(cè)血清中的有無(wú)

相應(yīng)特異性抗體及其動(dòng)態(tài)學(xué)變化。適用于抗原性較強(qiáng)的細(xì)菌或病程較長(zhǎng)的感染

性疾病的診斷，或流調(diào)、疫苗接種后效果評(píng)價(jià)。

若恢復(fù)期或一周后血清抗體效價(jià)比早期升高

4倍或4倍以上，有診斷意義。

血清學(xué)診斷第二節(jié)細(xì)菌感染的防治原則一、人工主動(dòng)免疫：主要用于預(yù)防（一）疫苗

第一代：死疫苗，減毒活疫苗

第二代：亞單位疫苗、基因工程疫苗

第三代：重組載體疫苗、核酸疫苗等（二）類毒素

死疫苗與活疫苗的比較種類活疫苗死疫苗制備特點(diǎn)減毒或無(wú)毒死菌，保持免疫原性制備方法非正常培養(yǎng)理化方法接種次數(shù)1次，量小，可在體內(nèi)增殖，類似輕型感染或隱性感染2-3次，量大，在體內(nèi)不增殖，發(fā)熱或局部腫痛反應(yīng)等免疫類型體液免疫，細(xì)胞免疫體液免疫免疫效果好，維持時(shí)間長(zhǎng)（1-5年）較差，維持時(shí)間短（0.5-1年）安全性保存可能毒力回復(fù)不易保存好易保存人工主動(dòng)免疫（二）類毒素

(toxoid)

外毒素經(jīng)0.3%-0.4%甲醛處理失去毒性，保留抗原性精制抗毒素：加入佐劑，延緩吸收，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體聯(lián)合疫苗：如百白破三聯(lián)疫苗

二、人工被動(dòng)免疫：主要用于緊急預(yù)防和治療抗毒素（含抗體的免疫血清）血清丙種球蛋白其他免疫制劑：IFN-γ，CSF等。第二節(jié)細(xì)菌感染的防治原則種類：

抗毒素（含抗體的免疫血清）類毒素/外毒素免疫產(chǎn)生用于外毒素的治療和緊急預(yù)防注意I型超敏反應(yīng)

血清丙種球蛋白其他免疫制劑：IFN-γ，CSF等。人工被動(dòng)免疫四細(xì)菌感染的治療一、抗菌藥物的種類抗菌藥物包括抗生素和化學(xué)合成抗菌藥物二、抗菌藥物的主要作用機(jī)制影響細(xì)胞壁的合成:青霉素影響細(xì)胞膜的功能:多粘菌素影響蛋白質(zhì)的合成:鏈霉素(30S),紅霉素(50S)影響核酸代謝:氧氟沙星四細(xì)菌感染的治療三、用藥原則選擇合適的藥物劑量要適當(dāng)交替用藥聯(lián)合用藥小結(jié)細(xì)菌分離鑒定的程序