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甘肅省部分普通高中2025屆三月份月考生物試題注意事項(xiàng):1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫在答題卡上。2.回答選擇題時(shí),選出每小題答案后,用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑,如需改動(dòng),用橡皮擦干凈后,再選涂其它答案標(biāo)號(hào)。回答非選擇題時(shí),將答案寫在答題卡上,寫在本試卷上無(wú)效。3.考試結(jié)束后,將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.胰腺癌死亡率高達(dá)90%,曾奪走了喬布斯的生命,近來(lái)發(fā)現(xiàn)胰腺癌患者血液中有一種含量較多的特殊物質(zhì)—一種名為HSATII的非編碼RNA(即不編碼蛋白質(zhì)的RNA),這一特殊RNA可以作為胰腺癌的生物標(biāo)記,用于胰腺癌的早期診斷,下列有關(guān)敘述正確的是A.這種特殊的非編碼RNA與mRNA徹底水解后,均可得到6種終產(chǎn)物B.核膜上的核孔可以讓蛋白質(zhì)和此種特殊的RNA自由進(jìn)出C.作為胰腺癌生物標(biāo)記的RNA,其翻譯成的蛋白質(zhì)中一般含20種氨基酸D.這種特殊的非編碼RNA在胰腺癌患者細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)合成2.下列有關(guān)種群特征的敘述,正確的是A.種群密度、出生率、死亡率、年齡結(jié)構(gòu)和性比率都是種群內(nèi)個(gè)體特征的統(tǒng)計(jì)值B.年齡金字塔底部的大小代表種群中最年輕年齡組的個(gè)體數(shù)C.出生率主要由性成熟的早晚、每次產(chǎn)仔數(shù)和每年生殖次數(shù)決定D.種群數(shù)量穩(wěn)定在K值時(shí),其性比率為1:13.最小存活種群是指保證種群在一個(gè)特定的時(shí)間內(nèi)能健康地生存所需的最小有效數(shù)量,這是一個(gè)種群的閾值,低于這個(gè)閾值,種群會(huì)趨向滅絕。下列敘述正確的是()A.小于最小有效數(shù)量的種群其基因的多樣性較低,適應(yīng)性較差B.越小的種群種內(nèi)斗爭(zhēng)越激烈,導(dǎo)致種群會(huì)較快地趨向絕滅C.種群的年齡組成和性別比例不會(huì)影響最小存活種群的大小D.大于閾值的種群存活時(shí)間較長(zhǎng),穩(wěn)定后不會(huì)發(fā)生生物進(jìn)化4.某植物花蕊的性別分化受兩對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因控制,顯性基因B和E共同存在時(shí),植株開兩性花,為野生型;僅有顯性基因E存在時(shí),植株的雄蕊會(huì)轉(zhuǎn)化成雌蕊,成為表現(xiàn)型為雙雌蕊的可育植物;只要不存在顯性基因E,植物表現(xiàn)為敗育。下列有關(guān)敘述不正確的是()A.表現(xiàn)為可育個(gè)體的基因型有6種B.BbEe個(gè)體自花傳粉,子代中敗育個(gè)體的比例為1/4C.BBEE和bbEE雜交,F(xiàn)1自交得到的F2代全部可育D.BBee和bbEE雜交,子代全部為野生型5.下列關(guān)于生物進(jìn)化的敘述,錯(cuò)誤的是()A.種群基因頻率的改變是產(chǎn)生生殖隔離的前提條件B.一個(gè)物種的形成或滅絕會(huì)影響若干其他物種的進(jìn)化C.無(wú)論是自然選擇還是人工選擇作用,都能使種群基因頻率發(fā)生定向改變D.若沒有其他因素影響,一個(gè)隨機(jī)交配小群體的基因頻率在各代保持不變6.研究表明,人體的乳腺癌細(xì)胞中染色體數(shù)目為48條,若用15N標(biāo)記乳腺癌細(xì)胞DNA的雙鏈,在含14N的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)5代,下列敘述正確的是()A.乳腺癌細(xì)胞間期染色體復(fù)制后,染色體與DNA數(shù)量均加倍B.第1代細(xì)胞在分裂中期時(shí),只有一半染色體上含有15N標(biāo)記C.乳腺細(xì)胞癌變的原理是基因突變,其染色體未發(fā)生變異D.使用RNA聚合酶抑制劑可以抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖7.下列有關(guān)生物進(jìn)化的敘述中正確的是A.基因頻率的改變標(biāo)志著新物種的產(chǎn)生B.自然選擇過(guò)程中直接選擇基因型,進(jìn)而導(dǎo)致種群基因頻率改變C.地理隔離使種群基因庫(kù)產(chǎn)生差別,必然導(dǎo)致生殖隔離D.可遺傳的變異為生物進(jìn)化提供原材料8.(10分)在一個(gè)果蠅種群中偶然發(fā)現(xiàn)一只突變型的雌果蠅,用該雌果蠅與一只野生型雄果蠅交配,F(xiàn)1中野生型與突變型之比為2∶1,雌雄個(gè)體之比也為2∶1。從遺傳學(xué)角度分析,下列解釋合理的是()A.該突變基因?yàn)槌H旧w顯性基因 B.該突變基因?yàn)閄染色體隱性基因C.該突變基因使得雄性個(gè)體致死 D.該突變基因使得雌配子致死二、非選擇題9.(10分)我國(guó)科學(xué)家培育抗蟲棉的流程如圖所示?;卮鹣铝杏嘘P(guān)問題。(l)基因工程中用到的基本工具酶是____________________。細(xì)菌的基因能整合到棉花細(xì)胞的DNA上并在棉花細(xì)胞中表達(dá)的原因是______________________________。(2)①過(guò)程是指____________________,該過(guò)程所依據(jù)的原理是____________________,常用于調(diào)節(jié)該過(guò)程的植物激素有________________________________________。(3)若要檢測(cè)Bt毒蛋白基因在棉花細(xì)胞中是否完全表達(dá),在分子水平上的檢測(cè)方法是_____________________。(4)為了保持抗蟲性狀,可利用抗蟲棉的體細(xì)胞脫分化產(chǎn)生愈傷組織,然后進(jìn)一步制造人工種子。人工種子的結(jié)構(gòu)包括____________________。10.(14分)人類的干擾素是由體內(nèi)免疫細(xì)胞合成并分泌的一種糖蛋白,具有抗病毒、抗菌和抗腫瘤等作用,并能參與人體免疫調(diào)節(jié),因而在臨床醫(yī)學(xué)上用途廣泛。干擾素的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法成本高、產(chǎn)量低,獲得的干擾素在體外不易保存,用生物技術(shù)手段可以解決這些問題。請(qǐng)聯(lián)系所學(xué)知識(shí)回答相關(guān)問題:(1)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)干擾素,其簡(jiǎn)要過(guò)程是:①?gòu)慕】等梭w的外周靜脈血中分離出能合成干擾素的免疫細(xì)胞,從其細(xì)胞質(zhì)中提取____________,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲取目的基因;②用限制酶處理載體和日的基因后,用DNA連接處理,形成重組載體,該載體的化學(xué)木質(zhì)是_________。③若選擇大腸桿菌作為受體細(xì)胞,常用的轉(zhuǎn)化方法是____________,在一定溫度條件下,完成轉(zhuǎn)化;④在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后,經(jīng)離心、分離等一系列處理措施后提取產(chǎn)物,對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行鑒定時(shí)可采用____________技術(shù)。(2)利用蛋白質(zhì)工程對(duì)干擾素進(jìn)行改造,基本途徑是:預(yù)期蛋白質(zhì)的功能→____________→____________→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。(3)利用細(xì)胞工程生產(chǎn)干擾素,其簡(jiǎn)要設(shè)計(jì)思路是:將能合成干擾素的免疫細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合,篩選出____________細(xì)胞,經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量干擾素。11.(14分)微生物在尿素工廠的廢水中難以生長(zhǎng)。研究人員利用2種載體固定脲酶,并比較脲酶對(duì)溫度變化的耐受性和脲酶對(duì)尿素廢水的降解能力,得到如圖所示結(jié)果,其中酶回收率(%):(固定化酶的總活力/脲酶凍干粉總活力)×l00%。請(qǐng)回答:(1)海藻酸鈉濃度過(guò)高時(shí)難以溶解,且形成的凝膠珠容易出現(xiàn)____現(xiàn)象,在海藻酸鈉完全溶化后再_______。(2)本研究固定脲酶的方法屬于_____,研究中可以通過(guò)____(寫出一種正確方法即可)增加凝膠珠的硬度和內(nèi)部交聯(lián)程度,以減少酶損失。(3)制作凝膠珠時(shí),剛?cè)芑妮d體需____后才可與脲酶混合。使用的注射器前端小孔的內(nèi)徑不宜過(guò)大,以防止凝膠珠體積過(guò)大影響____。(4)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,更適合用于固定化脲酶的載體是____,其依據(jù)是____。12.某小組得到一盆雜合體的名貴花卉,欲利用植物組織培養(yǎng)進(jìn)行擴(kuò)大種植?;卮鹣铝袉栴}:(1)配制植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常用的凝固劑是_______。(2)以該名貴花卉的葉和花瓣組織為材料,在一定條件下進(jìn)行培養(yǎng),經(jīng)過(guò)_______形成愈傷組織,再轉(zhuǎn)接到含有_______________的培養(yǎng)基上,就可以誘導(dǎo)其________成胚狀體或叢芽,經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝后制成人工種子。與天然種子相比,人工種子具有的優(yōu)點(diǎn)有_______________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(3)要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的花卉,_______(填“能”或“不能”)采用該名貴花卉的花粉粒作為組織培養(yǎng)的材料,原因是_______________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】
A.RNA徹底水解后有6種產(chǎn)物,包括4種堿基、核糖和磷酸,A項(xiàng)正確;B.細(xì)胞質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)可通過(guò)核孔進(jìn)入細(xì)胞核,此種特殊的RNA可通過(guò)核孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),但不能自由進(jìn)出,B項(xiàng)錯(cuò)誤;C.這種可作為胰腺癌生物標(biāo)記的RNA屬于非編碼RNA,不能翻譯形成蛋白質(zhì),C項(xiàng)錯(cuò)誤;D.這種特殊的非編碼RNA(HSATⅡ)是在細(xì)胞核中轉(zhuǎn)錄形成的,D項(xiàng)錯(cuò)誤;因此,本題答案選A。2、C【解析】
本題考查種群的數(shù)量特征,要求考生明確種群的數(shù)量特征及其相互關(guān)系,知道種群密度是最基本的數(shù)量特征?!驹斀狻緼、種群密度是種群內(nèi)個(gè)體數(shù)量的統(tǒng)計(jì)值,A錯(cuò)誤;
B、年齡金字塔底部的大小代表種群中幼年年齡組的個(gè)體數(shù),B錯(cuò)誤;
C、出生率主要由性成熟的早晚、每次產(chǎn)仔數(shù)和每年生殖次數(shù)決定,C正確;
D、種群數(shù)量穩(wěn)定在K值時(shí),其出生率和死亡率相當(dāng)、遷出率與遷入率相當(dāng),但其性比率未必是1:1,D錯(cuò)誤。
故選C。3、A【解析】
種群的數(shù)量特征包括種群密度、年齡組成、性別比例、出生率、死亡率、遷入率和遷出率。【詳解】A、當(dāng)種群數(shù)量小于最小有效數(shù)量時(shí),因?yàn)閿?shù)量少,基因的多樣性較低,適應(yīng)性較差,A正確;B、種群數(shù)量越大種內(nèi)斗爭(zhēng)越激烈,越小的種群種內(nèi)斗爭(zhēng)相對(duì)較小,B錯(cuò)誤;C、種群的年齡組成和性別比例都會(huì)影響種群的數(shù)量,C錯(cuò)誤;D、大于閾值的種群存活時(shí)間較長(zhǎng),穩(wěn)定后基因頻率仍會(huì)改變,仍會(huì)發(fā)生生物進(jìn)化,D錯(cuò)誤。故選A。4、D【解析】
1、基因分離定律和自由組合定律的實(shí)質(zhì):進(jìn)行有性生殖的生物在進(jìn)行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子的過(guò)程中,位于同源染色體上的等位基因隨同源染色體分離而分離,分別進(jìn)入不同的配子中,隨配子獨(dú)立遺傳給后代,同時(shí),位于非同源染色體上的非等位基因進(jìn)行自由組合。
2、由題意知,E、e和B、b獨(dú)立遺傳,因此遵循自由組合定律,且B_E_為兩性花(野生型),bbE_為雙雌蕊可育植物,B_ee、bbee為敗育。【詳解】A、表現(xiàn)為可育個(gè)體的基因型有6種,包括BBEE、BbEE、bbEE、BBEe、BbEe、bbEe,A正確;B、BbEe個(gè)體自花傳粉,子代中只要含有ee就都敗育,所以比例是1/4,B正確;C、BBEE和bbEE雜交,得到F1BbEE,F(xiàn)1自交得到的F2代都含有E,全部可育,C正確;D.BBee和bbEE雜交,BBee是不育的,無(wú)法完成雜交實(shí)驗(yàn),D錯(cuò)誤。故選D。5、D【解析】
現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的基本觀點(diǎn):種群是生物進(jìn)化的基本單位。生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)在于種群基因頻率的改變;突變和基因重組、自然選擇及隔離是物種形成過(guò)程的三個(gè)基本環(huán)節(jié)。通過(guò)它們的綜合作用。種群產(chǎn)生分化。最終導(dǎo)致新物種的形成。其中突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料,自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進(jìn)化的方向,隔離是新物種形成的必要條件?!驹斀狻緼、種群基因頻率的改變實(shí)際上就是種群的進(jìn)化,而當(dāng)基因頻率改變累積到一定的程度不同,就產(chǎn)生了生殖隔離,所以種群基因頻率的改變是產(chǎn)生生殖隔離的前提條件,A正確;B、一個(gè)物種的形成或滅絕,會(huì)影響到若干其他物種的進(jìn)化,因?yàn)樯锱c生物之間存在共同進(jìn)化,B正確;C、無(wú)論是自然選擇還是人工選擇作用,都能使種群基因頻率發(fā)生定向改變,從而決定生物進(jìn)化的方向,C正確;D、雖然沒有其他因素影響,但是由于群體數(shù)量較少,因此小群體的基因頻率在各代可能會(huì)發(fā)生改變,D錯(cuò)誤。故選D。解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記和理解現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的基本觀點(diǎn),明確生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變、新物種產(chǎn)生的標(biāo)志是生殖隔離。6、D【解析】
1、DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制,以兩條鏈作為模板進(jìn)行的。2、(1)間期:進(jìn)行DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成;(2)前期:核膜、核仁逐漸解體消失,出現(xiàn)紡錘體和染色體;(3)中期:染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰;(4)后期:著絲點(diǎn)分裂,姐妹染色單體分開成為染色體,并均勻地移向兩極;(5)末期:核膜、核仁重建、紡錘體和染色體消失?!驹斀狻緼、間期染色體復(fù)制后,DNA分子數(shù)目加倍,而染色體數(shù)目不變,A錯(cuò)誤;B、由于DNA的復(fù)制方式是半保留復(fù)制,所以第1代細(xì)胞在分裂中期時(shí),每條染色體上都有15N標(biāo)記,B錯(cuò)誤;C、乳腺細(xì)胞癌變的原理是基因突變(堿基對(duì)發(fā)生了堿基對(duì)的增添、缺失和替換),染色體上DNA分子的堿基排列順序發(fā)生改變,C錯(cuò)誤;D、使用RNA聚合酶抑制劑可以抑制癌細(xì)胞中基因的表達(dá),進(jìn)而抑制癌細(xì)胞的增殖,D正確。故選D。解答本題的B選項(xiàng)中,需要結(jié)合半保留復(fù)制和細(xì)胞分裂的特點(diǎn)進(jìn)行分析。7、D【解析】
種群是生物進(jìn)化的基本單位,生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變。突變和基因重組,自然選擇及隔離是物種形成過(guò)程的三個(gè)基本環(huán)節(jié),通過(guò)它們的綜合作用,種群產(chǎn)生分化,最終導(dǎo)致新物種形成。在這個(gè)過(guò)程中,突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料,自然選擇使種群的基因頻率定向改變并決定生物進(jìn)化的方向,隔離是新物種形成的必要條件?!驹斀狻緼、生殖隔離標(biāo)志著新物種的產(chǎn)生,A錯(cuò)誤;B、自然選擇過(guò)程中直接選擇表現(xiàn)型,間接選擇基因型,B錯(cuò)誤;C、地理隔離不一定導(dǎo)致生殖隔離,C錯(cuò)誤;D、可遺傳的變異為生物進(jìn)化提供原材料,D正確。故選D。8、C【解析】
分析題意可知,后代雌雄個(gè)體之比為2:1,說(shuō)明雄性有一半死亡,與性別相關(guān)聯(lián),所以突變基因在X染色體上,并且可能含有該突變基因的雄性個(gè)體致死。因此此處只需再判斷是顯性突變還是隱性突變即可?!驹斀狻緼、根據(jù)上述分析可知,該突變基因在X染色體上,A錯(cuò)誤;B、若該突變基因?yàn)閄染色體隱性基因,則突變雌蠅的基因型為XaXa,野生型雄性的基因型為XAY,子一代基因型為XAXa、XaY,即F1中野生型與突變型之比應(yīng)為1∶1,雌雄個(gè)體之比也為1∶1,與題意不符,B錯(cuò)誤;C、若該突變基因?yàn)轱@性基因,且該突變基因純合子致死,則突變雌蠅的基因型為XAXa,野生型雄性的基因型為XaY,子一代基因型為XAXa、XaXa、XAY(致死)、XaY,即F1中野生型與突變型之比應(yīng)為2∶1,雌雄個(gè)體之比也為2∶1,符合題意,C正確;D、由于雌配子與雄配子結(jié)合形成雄性和雌性的概率相同,若該突變基因使得雌配子致死,則后代性別比例不受影響,D錯(cuò)誤。故選C。二、非選擇題9、限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)、DNA連接酶不同生物的DNA結(jié)構(gòu)相似,且生物界共用一套密碼子植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞具有全能性生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素抗原——抗體雜交胚狀體、人造胚乳和人工種皮【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原—﹣抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】(1)基因工程的基本工具是限制性核酸內(nèi)切酶(簡(jiǎn)稱限制酶)、DNA連接酶和基因運(yùn)載體,其中屬于工具酶的是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶;生物的DNA分子都由四種脫氧核苷酸構(gòu)成,具有雙螺旋結(jié)構(gòu),所以異源DNA片段可以進(jìn)行連接,并且生物界共用一套密碼子,基因的表達(dá)機(jī)制相同,所以一種生物的基因可以在另一種生物的細(xì)胞中表達(dá)。(2)①過(guò)程為植物的組織培養(yǎng),其依據(jù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性,該過(guò)程包括脫分化和再分化兩個(gè)階段。誘導(dǎo)脫分化和再分化的植物激素主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的值適中,促進(jìn)愈傷組織形成;生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的值高,促進(jìn)根分化,抑制芽形成;生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的值低,促進(jìn)芽分化,抑制根形成。(3)如果毒蛋白基因在棉花細(xì)胞中完全表達(dá),則棉花細(xì)胞中能合成毒蛋白,使棉花植株具有抗蟲性狀,所以在分子水平上,采用抗原—抗體雜交的方法,使用特異的抗體檢測(cè)棉花細(xì)胞中是否存在毒蛋白,能確認(rèn)毒蛋白基因在棉花細(xì)胞中是否完全表達(dá)。(4)人工種子是用愈傷組織培養(yǎng)成的胚狀體,加入人造胚乳,再用人工種皮包裹而成的。本題考查了基因工程在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用,要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟等,掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié),能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確解答。10、mRNADNA用Ca2+處理,使其成為感受態(tài)細(xì)胞抗原抗體雜交設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測(cè)氨基酸序列雜交瘤【解析】
1.基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成.(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等.(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法.(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等.2.蛋白質(zhì)過(guò)程的基本途徑是:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)?!驹斀狻浚?)①這里用反轉(zhuǎn)錄法提取目的基因,根據(jù)反轉(zhuǎn)錄的概念可知,要想獲得合成干擾素的基因,需要從能合成干擾素的免疫細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中提取mRNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲取目的基因;②基因表達(dá)載體構(gòu)建的方法是,首先用限制酶處理載體和目的基因后,這里的載體通常是質(zhì)粒,一種主要存在于原核細(xì)胞內(nèi)的小型環(huán)狀DNA分子,然后用DNA連接酶把經(jīng)過(guò)切割的質(zhì)粒和目的基因連接起來(lái),形成重組載體。③若選擇大腸桿菌作為受體細(xì)胞,通常用感受態(tài)細(xì)胞法處理,具體做法是用Ca2+處理,使其成為感受態(tài)細(xì)胞,從而提高轉(zhuǎn)化的成功率;④檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)的方法是抗原--抗體雜交,本實(shí)驗(yàn)中需要采用相應(yīng)的抗體對(duì)獲得的產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)。(2)結(jié)合分析中的蛋白質(zhì)工程的操作流程可知,改造干擾素的基本途徑是:預(yù)期蛋白質(zhì)的功能→設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→推測(cè)氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列,然后對(duì)該序列進(jìn)行人工合成。(3)若利用細(xì)胞工程生產(chǎn)干擾素,其簡(jiǎn)要設(shè)計(jì)思路是:將能合成干擾素的免疫細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合,篩選出雜交瘤細(xì)胞,該雜交瘤細(xì)胞既能大量繁殖、又能產(chǎn)生干擾素,故對(duì)該細(xì)胞大量培養(yǎng)可獲得大量干擾素。熟知基因工程的操作步驟及其原理是解答本題的關(guān)鍵!熟知蛋白質(zhì)工程的原理和雜交瘤技術(shù)的應(yīng)用是本題的另一關(guān)鍵點(diǎn)。11、拖尾等加水定容包埋法適當(dāng)增加包埋載體濃度(或適當(dāng)增加CaCl2溶液濃度或適當(dāng)延長(zhǎng)凝膠珠在CaCl2溶液中的浸泡時(shí)間)冷卻至室溫膠珠內(nèi)外物質(zhì)交換效率海藻酸鈉海藻酸鈉固定化酶的熱穩(wěn)定高,尿素分解效率高【解析】
據(jù)圖1分析可知:隨溫度升高,三種酶的回收率均有所下降;據(jù)圖2分析可知,海藻酸鈉的尿素分解效率高?!驹斀狻浚?)海藻酸鈉使用時(shí)濃度不宜過(guò)高,因濃度過(guò)高時(shí)難以溶解,且形成的凝膠珠容易出現(xiàn)拖尾等現(xiàn)象;在海藻酸鈉完全溶化后再加水定容。(2)本研究用海藻酸鈉固定脲酶的方法稱為包埋法;為增加凝膠珠的硬度和內(nèi)部交聯(lián)程度,以減少酶損失,可通過(guò)適當(dāng)增加包埋載體濃度(或適當(dāng)增加CaCl2溶液濃度或適當(dāng)延長(zhǎng)凝膠珠在CaCl2溶液中的浸泡時(shí)間)等措施實(shí)現(xiàn)。(3)海藻酸鈉溶液冷卻至常溫后,才可與脲酶混合,避免高溫使酶失活;充分?jǐn)嚢璨⒒旌暇鶆蜣D(zhuǎn)入注射器,使用的注射器前端小孔的內(nèi)徑不宜過(guò)大,以防止凝膠珠體積過(guò)大影響膠珠內(nèi)外物質(zhì)交換效率。(4)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知:圖1中海藻酸鈉固定化酶的回收率受溫度影響較小,且圖2中海藻酸鈉固定化酶的催化效率最高,故固定化脲酶的載體更適合選擇海藻酸鈉。明確固定化酶的原理及流程,并能結(jié)合題圖分析作答是解答本題的關(guān)鍵。12、瓊脂脫分化不同激素成分再分化可
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