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DB41DB41/T1525—2018豬圓環(huán)病毒Ⅱ型實時熒光PCR檢測方法2018-01-03發(fā)布2018-04-03實施河南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1豬圓環(huán)病毒Ⅱ型實時熒光PCR檢測方法2.1.2酚/氯仿/異戊醇混合液(25:24:1)、0.01mol/L（pH7.2）的磷酸鹽緩沖），2.1.3消化液Ⅱ、陽性對照、陰性對照（見附錄A），置-20℃保存。實時熒光定量PCR儀，高速冷凍離心機（12000×g以上二級生物安全柜，恒溫水浴鍋，2℃~，－采集疑似PCV2感染豬的肺臟、肝臟、腎臟、脾臟用無菌注射器自耳靜脈或前腔靜脈采集血液3mL～5mL，待血清析出后直接吸取至無菌Eppend管中，編號備用；用無菌注射器先吸入抗凝劑（阿氏液）2mL～3mL2采集的樣品密封后，采用保溫壺或保溫桶加冰密封，盡快運送到實驗室。樣品在2℃~8℃條件上清液，將無菌離心管倒置于吸水紙上，吸干液體；不同無菌離心管應(yīng)在吸3在質(zhì)量控制標準成立的前提下，樣品Ct值＞32.0或無，且無特定擴增曲線，判定為PCV2核酸陰在質(zhì)量控制標準成立的前提下，樣品29.0＜Ct值≤32.04試劑的配制A.60.01mol/L（pH7.2）的磷酸鹽緩沖）：A.6.30.01mol/LPBS的配制：A液14mL，565'-FAM-TTACCAGCAATCAGACCCCGTT7

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