PBS緩沖液的配制方法

1、PBS緩沖液配方無(wú)論是在免疫組織化學(xué)還是細(xì)胞培養(yǎng)中，都經(jīng)常使用PBS緩沖液。以下是我們實(shí)驗(yàn)室的配方，供您參考。我們的實(shí)驗(yàn)室配方：溶液：0.1摩爾/升磷酸二氫鉀；1.361克磷酸二氫鉀(KH2PO4，分子量136.09)，加入雙蒸水至100毫升。乙溶液：0.1摩爾/升磷酸氫二鈉；1.78克氫二鈉(Na2HPO4.2H2O，分子量177.99)，加入雙蒸水至100毫升。或3.58克氫二鈉(Na2HPO4.12H2O，分子量358.14)，并加入雙蒸水至100毫升。ph-溶液a(毫升)-溶液b(毫升)5.60 - 9.50 - 0.255.91 - 9.00 - 1.006.24 - 8.00 -

2、2.006.47 - 7.00 - 3.006.64 - 6.00 - 4.006.81 - 5.00 - 5.006.98 - 4.00 - 6.007.17 - 3.00 - 7.007.38 - 2.00 - 8.007.73 - 1.00 - 9.008.04 - 0.50 - 9.50一般來(lái)說(shuō)，用于免疫組織化學(xué)的PBS只含有na2hpo 412H2O(磷酸氫二鈉)磷酸二氫鈉氯化鈉用于細(xì)胞培養(yǎng)的PBS應(yīng)該含有氯化鉀稱(chēng)取8克氯化鈉、0.2克KCl、1.44克Na2HPO4和0.24克KH2PO4，溶于800毫升蒸餾水中，用鹽酸調(diào)節(jié)溶液的酸堿度至7.4，最后加入蒸餾水至1L恒量，至0.01

3、米磷酸鹽緩沖鹽水稱(chēng)取8克氯化鈉、0.2克KCl、3.63克Na2HPO4 12H2O和0.24克KH2PO4，將其溶解在900毫升雙蒸水中，用鹽酸調(diào)節(jié)酸堿度至7.4，加水至恒定體積的1L，并在常溫下儲(chǔ)存以備后用。PBS是最常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)室緩沖液，但其配方不同。以下是我的總結(jié)：母液的制備：0.2MNa2HPO4:稱(chēng)取71.6克h2hpo 4-12H2O，將其溶解在1000毫升水中0.2摩爾磷酸氫二鈉：稱(chēng)取31.2摩爾磷酸氫二鈉-2H2O，將其溶解在1000毫升水中不同濃度鉛的制備(ph=7.4):0.2毫升(酸堿度=7.4，100毫升):取19毫升0.2毫升/升磷酸氫二鈉和81毫升0.2毫升/升磷酸

4、氫二鈉。然后按照相應(yīng)的比例稀釋0.2毫升(酸堿度=7.4)，如：0.1毫升(酸堿度=7.4):取500毫升0.2毫升，用水稀釋至1000毫升。0.01毫升(酸堿度=7.4):取50毫升0.2毫升，用水稀釋至1000毫升。0.02毫升(酸堿度=7.4):取100毫升0.2 MPB，用水稀釋至1000毫升。如果需要氯化鈉，加入0.9%(克/100毫升)的氯化鈉。其他：其他0.2毫升(100毫升)不同酸堿度的配方：ph0.2亞硫酸氫鈉(毫升)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.

5、531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.50.57.88.591.57.97938.05.394.7磷酸鹽緩沖液、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉緩沖液配方磷酸鹽緩沖液試劑：Na2SO 4 H2O Na2SO 4 H2O制備方法：制備時(shí)，通常先制備0.2摩爾/升磷酸氫二鈉和0.2摩爾/升磷酸氫二鈉，然后按一定比例混合得到0.2摩爾/升磷酸鹽緩沖溶液?？筛鶕?jù)需要制備不同濃度的鉛和PBS。(1)0.2摩爾/升Na2HPO4；稱(chēng)取Na2HPO4.12H

6、2O 31.2g克(或NaH2PO4H2O 27.6g克)，加入蒸餾水至1000毫升溶解。(2)0.2毫升/升Na2HPO4:稱(chēng)取NaHPO4.12H2O 71.632g克(或Na2HPO47H2O 53.6g克或Na2HPO42H2O 35.6g克)，加入蒸餾水至1000毫升溶解。(3)制備0.2摩爾/升的磷酸氫二鈉，其酸堿度為7.4:取19毫升0.2摩爾/升的磷酸氫二鈉和81毫升0.2摩爾/升的磷酸氫二鈉，充分混合，得到0.2摩爾/升的磷酸氫二鈉(酸堿度約為7.4 7.5)。如果酸堿度高或低，可以通過(guò)改變兩者的比例來(lái)調(diào)節(jié)，并且可以在室溫下儲(chǔ)存。0.2毫升/升磷酸鹽緩沖溶液(pH 5.7 8

7、.0)0.2摩爾/升磷酸氫二鈉(毫升)5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 81.563 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.07.2 28.0 72.07.3 23.0 67.07.4 19.0 81.07.5 16.0 84.07.6 13.0 87.07.7 10.5 89.57.8 8.5 91.57.97

8、.0 93.08.05.3 94.7我在網(wǎng)上搜索了很多關(guān)于磷酸鹽緩沖液的帖子，但是我還是不能確定正確的答案?，F(xiàn)在把它們聯(lián)系起來(lái)，希望一些專(zhuān)家能參與討論。我會(huì)整理出最終的正確答案，并提供給每個(gè)人。PBS可以是三種解決方案的英文縮寫(xiě)，它們是1.磷酸鹽緩沖溶液(磷酸鹽緩沖溶液)，2.磷酸鹽緩沖鹽水和3.磷酸鹽緩沖鈉，不同的制備方法，不同的酸堿度，不同的生物功能。除非另有說(shuō)明，生物學(xué)中常用的PBS是中性磷酸鹽緩沖溶液。不含鈣和鎂離子的磷酸鹽緩沖鹽水(0.15毫升/升酸堿度7.2)氯化鈉8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g克(Na2HPO412H2O為2.89克)KH2PO4 0.2g將上

9、述試劑依次溶于1 000毫升去離子水中，115高壓滅菌10分鐘 15分鐘，4冰箱保存?zhèn)溆?。該溶液可用于制備和稀釋?xì)胞分散劑以及洗滌細(xì)胞培養(yǎng)物。我們都使用第二種類(lèi)型問(wèn)題1:為什么使用第三種或第一種磷酸鹽緩沖鹽水？很多年來(lái)，我一直認(rèn)為PBS是磷酸鹽緩沖溶液，另外兩個(gè)表達(dá)的英文名字很常見(jiàn)，但我一直認(rèn)為它們是相似的東西。這是我第一次聽(tīng)說(shuō)不同的中文翻譯。我公司使用的PBS種類(lèi)很多，抗體組使用的中和PBS配方比較簡(jiǎn)單，不含鉀離子，只起到緩沖酸堿度的作用；Na _ 2 HPO _ 4 KH _ 2 PO _ 4可以以不同的比例均勻混合，得到不同PH值的緩沖溶液，用于不同的目的，在分子生物學(xué)中有著廣泛的應(yīng)用。

10、對(duì)于活細(xì)胞或細(xì)菌的處理，為了保持滲透壓，將加入其他溶液，其中最常見(jiàn)的是氯化鈉和KCl來(lái)調(diào)節(jié)離子濃度。這些是個(gè)人理解，歡迎批評(píng)。問(wèn)題2:既然抗體組的PBS可以緩沖酸堿度，加入80G NACL有什么效果？你需要平衡滲透壓?jiǎn)?？還有，是不是因?yàn)榧?xì)胞上的鈉鉀泵增加了鉀離子？血清中沒(méi)有細(xì)胞。你怎么能談?wù)撯c鉀泵？我認(rèn)為這場(chǎng)比賽的原因?qū)嶋H上是模擬了血清中的緩沖環(huán)境。血清中沒(méi)有細(xì)胞，那么你怎么能談?wù)撯c鉀泵呢？我沒(méi)說(shuō)血清。我們用的沒(méi)有加K，我是說(shuō)有K的那個(gè)問(wèn)題3:沒(méi)有NACL會(huì)發(fā)生什么？如何省錢(qián)在中和磷酸鹽緩沖液中，氯化鈉的主要功能應(yīng)該是維持一定的離子濃度以維持抗體活性。當(dāng)離子濃度過(guò)高或過(guò)低時(shí)，蛋白質(zhì)會(huì)變性，抗體