醫(yī)學微生物學支原體立克次體PPT課件

1、第19章 支原體 Mycoplasma,微生物學教研室,.,2,概念：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，也是在無生命培養(yǎng)基上生長繁殖的最小微生物。其特點為細胞膜含固醇，能通過細菌濾器；高度多形性、形成分枝的長絲；含DNA和RNA，二分裂繁殖等。,.,3,柔膜體綱,支原體目,支原體科 無膽甾原體科 螺原體科,支原體屬 脲原體屬,主要病原性支原體,肺炎支原體 M.pneumoniae 人型支原體 M. Nominis 生殖器支原體 M.genitalium 穿透支原體 M . penetraus 溶脲脲原體 U.urealyticum,.,5,第一節(jié) 概 述,.,6,一、生物學性狀,1.

2、形態(tài)結(jié)構(gòu),最小的原核細胞生物；球形、球桿形、長絲狀及分枝狀等多 種形態(tài)； G-，著色困難，常 用Giemsa染色法染 成淡紫色。,.,7,.,8,細胞膜由 蛋白質(zhì)和脂質(zhì)（固醇）組成三層結(jié)構(gòu),.,9,.,10,特殊的頂端結(jié)構(gòu)： 粘附宿主上皮 細胞表面，與支原 體的致病有關(guān)。,2. 培養(yǎng)特性:荷包蛋樣菌落,培養(yǎng)基中含人或動物的血清(1020%)及酵母浸液。 多數(shù)支原體能在雞胚絨毛尿囊膜或細胞培養(yǎng)中生長。,.,12,固體培養(yǎng)基： 27天長出直徑約10600m的典型的“荷包蛋樣”菌落：低倍鏡下見菌落呈圓形，心致密隆起，深入瓊脂，外周由顆粒包繞。 液體培養(yǎng)基： 清亮,需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察,.,13

3、,.,14,支原體是污染細胞培養(yǎng)的重要原因之一,.,15,支原體與細菌L型的異同點,不同點,缺乏細胞壁，形態(tài)多樣，能通過濾菌器。 固體培養(yǎng)菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。 臨床表現(xiàn)相似間質(zhì)性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等,相同點,.,16,支原體 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附細胞 致病性,肺炎支原體 + 紅細胞 肺炎、支氣管炎 人型支原體 + 泌尿生殖道感染 生殖器支原體 + 泌尿生殖道感染 穿透支原體 + + 紅細胞 條件感染 CD4+T細胞 多見于艾滋病 巨噬細胞 溶脲脲原體 + 泌尿生殖道感染 流產(chǎn)及不孕不育,3、生化反應(yīng),.,17,溶脲脲原體分解尿素產(chǎn)氨，是酚紅變紅，液體清亮，為陽性（右）,.,1

4、8,（四）抗原結(jié)構(gòu) 來自細胞膜，胞膜外層蛋白質(zhì)是主要抗原， 常用生長抑制試驗(GIT)與代謝抑制試驗 (MIT)鑒定。 GIT是將吸有型特異性抗血清的濾紙片置于接種有支原體的固體培養(yǎng)基上， 經(jīng)孵育出現(xiàn)同型血清抑制該型支原體生長現(xiàn)象。 MIT是將支原體接種在含有抗血清培養(yǎng)基中，若抗體與支原體型一致，則抑制該支原體不能分解葡萄糖產(chǎn)酸。此兩種方法可將支原體分成若干血清型。,.,19,（五）抵抗力 對脂溶劑化學消毒劑敏感，對結(jié) 晶紫、醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力； 對影響細胞壁合成的抗生素如青 霉素類天然耐受，但對干擾蛋白 質(zhì)合成的抗生素如強力霉素等敏感。,.,20,二、致病性與免疫性,頂端結(jié)構(gòu)與宿主細胞

5、上受體結(jié)合而粘附于細胞上,莢膜或微莢膜的抗吞噬作用,產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物,超抗原，刺激炎癥細胞分泌大量細胞因子,粘附、侵入CD4 T淋巴細胞（穿透支原體）,.,21,免疫性 體液免疫：抗膜蛋白的抗體包括 IgM、IgG和SIgA 細胞免疫：主要是特異性CD4Th1 細胞分泌細胞因子,.,22,第二節(jié) 主要致病性支原體,.,23,一 肺炎支原體,是下呼吸道重要的致病性支原體，所引起的人類支原體肺炎占細菌性肺炎50%左右，其病理變化以間質(zhì)性肺炎為主，又稱之原發(fā)性非典型性肺炎。 癥狀輕，與胸片嚴重程度不符,.,24,（一）致病性 1.主要經(jīng)飛沫傳播，但大多數(shù)發(fā)生于夏 末秋初，515歲青少年發(fā)病率最高。

6、2.含特殊的頂端結(jié)構(gòu)：P1表面蛋白（170 kDa）和P30（32 kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。 3.肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎癥細胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起組織損傷。,致病性與免疫性,.,25,所致疾病-支原體肺炎,傳播途徑 經(jīng)飛沫傳播 發(fā)病年齡 兒童及青少年多見 潛伏期 23W 臨床表現(xiàn) 發(fā)熱（約39）、頭痛、持續(xù)性頑固咳嗽、胸痛等。一般經(jīng)310d主要癥狀消失，但咳嗽可以持續(xù)1個月之久。,.,26,.,27,.,28,免疫性 血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細胞； 呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對防止

7、再感染有較強保護作用； 出現(xiàn)IgE介導的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作,.,29,（一）分離培養(yǎng) 痰或咽拭子接種在SP-4培養(yǎng)基，挑選可疑菌落，經(jīng)形態(tài)學、糖發(fā)酵、溶血性、血細胞吸附試驗進行初步鑒定，進一步鑒定需用特異性抗血清做GIT與MIT實驗。,三、微生物學檢查法,.,30,三、微生物學檢查法,（二）血清學檢查 冷凝集試驗： 即用病人血清與人O型血紅細胞或自身紅細胞混合，4過夜時可發(fā)生凝集，而在37時這種凝集又分散解離開，但僅50左右的患者才出現(xiàn)陽性。此反應(yīng)為非特異性。 快速診斷 ELISA：檢測P1和P30蛋白mAbs PCR：從痰標本中檢測16S rRNA或 P1蛋白基因,.,31,E

8、LISA：此法敏感，特異性高，快速、經(jīng)濟，并可檢測IgM和IgG抗體，為目前診斷的可靠方法。檢測分子量190kDa的P1蛋白，3h可完成試驗，特異性高，敏感性為10 4CFUl標本。,.,32,防治原則 大環(huán)內(nèi)酯類藥物 喹諾酮類藥物,四、防治原則,.,33,二 解脲脲原體,溶脲脲原體 U.urealyticum 人型支原體 M. Nominis 生殖器支原體 M.genitalium,性傳播疾?。⊿TD）的病原體,.,34,解脲脲原體,通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起非淋菌性尿道炎，也能引起盆腔等部位的感染。還可通過胎盤感染胎兒，出現(xiàn)早產(chǎn)和死胎。也能引起婦女不孕不育癥。,常與衣原體、淋球菌合

9、并感染,.,35,1.寄居泌尿生殖道， 2.傳播途徑為性接觸和母嬰傳播。 3.致病機制,-粘附于宿主細胞表面，引起細胞膜損傷； -產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物如NH3，對宿主細胞有急性毒性作用； -磷脂酶損傷宿主的細胞膜。,解脲脲原體,.,36,2.引起非淋菌性尿道炎(NGU) ，上行感染，可引起前列腺炎或附睪炎；陰道炎和宮頸炎，并可導致流產(chǎn)。因為與人精子膜有共同抗原，對精子可造成免疫損傷而致不育。,常與衣原體、淋球菌合并感染,.,37,引起男性不孕的原因： Uu吸附于精子表面，使其運動受阻， 并蔽蓋了精子識別卵細胞的部位 Uu產(chǎn)生神經(jīng)氨酸樣物質(zhì)，干擾精子與 卵細胞結(jié)合。 Uu與精子膜有共同抗原，從而產(chǎn)生

10、抗 精子抗體,.,38,病原體檢測 接種液體培養(yǎng)基，分解尿素產(chǎn)堿，酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色；培養(yǎng)2448h，用低倍鏡觀察菌落，進一步鑒定需用特異抗血清做GIT與MIT。,三、微生物學檢查法,.,39,核酸檢測 PCR檢測： 檢測尿素酶基因、多帶抗原（MB-Ag）基因和16S rRNA基因。此法快速、特異，適宜于大批量標本檢測。,三、微生物學檢查法,.,40,生殖支原體,與泌尿生殖道感染有關(guān),人型支原體,能引起滲出性咽炎及尿道炎，也與卵 巢膿腫、產(chǎn)褥熱等有關(guān)。,.,41,思考題,1、名詞解釋：支原體(mycoplasma) 2、簡述致病性支原體的種類及其致病性。 3、支原體與細菌L型的比較,第

11、20章 立克次體 （Rickettsia）,概念 ：立克次體是一類以節(jié)肢動物為傳播媒介，嚴格活細胞內(nèi)寄生的原核細胞型微生物，可以引起斑疹傷寒、Q熱、恙蟲病、斑點熱等傳染病。,.,43,1906年首次被發(fā)現(xiàn)，第一個被發(fā)現(xiàn)的立克次體病是斑疹傷寒。為了紀念因研究斑疹傷寒被感染而犧牲的年僅39歲的醫(yī)師，將這類微生物統(tǒng)稱為立克次體。,.,44,立克次體的共同特點：,專性活細胞內(nèi)寄生，以二分裂方式繁殖,有DNA和RNA兩類核酸,球桿狀或多形態(tài)，革蘭染色陰性,寄生在吸血性節(jié)肢動物體內(nèi)，以節(jié)肢動物為傳播媒介或儲存宿主,引起自然疫源性疾病,對多種抗生素敏感,.,45,第一節(jié) 概 述,一、生物學性狀,大小: (0

12、.3m-0.6m)(0.8m -2.0m) 形態(tài): 類似球桿菌,多形性 (球形、啞鈴形、長桿狀或絲狀等) 染色: Giemsa染色法: 紫色或藍色 馬氏染色法(Macchiavello stain): 紅色 排列: 散在于細胞漿中、核旁成堆 (斑點熱立克次體在胞漿或核內(nèi)) 培養(yǎng): 專性細胞內(nèi)(活細胞內(nèi))寄生 培養(yǎng)方法: 雞胚卵黃囊內(nèi)接種，組織細胞培養(yǎng) 動物接種,.,47,.,48,抗原構(gòu)造： 群特異性抗原,種特異性外膜抗原 外斐反應(yīng)(Weil-Felix reaction):斑疹傷寒等立克次體與變形桿菌某些X菌株（ OX19、OX2、OXk ）有共同的耐熱多糖類抗原。利用這些變形桿菌菌株代替立

13、克次體抗原，進行定量非特異凝集反應(yīng)（交叉凝集反應(yīng)），以檢測人或動物血清中的相應(yīng)抗體。協(xié)助診斷斑疹傷寒,恙蟲病,滴度超過1:160有意義.,.,49,立克次體,變形桿菌,抗體,抗體,交叉反應(yīng),外裴氏反應(yīng)示意圖,.,50,抵抗力: 熱、消毒劑: 較弱(56,數(shù)分鐘,0.5%石碳酸、 0.5%來蘇,75%酒精中數(shù)分鐘) 抗生素: 敏 感:氯霉素和四環(huán)素 不敏感:磺胺類，磺胺藥刺激生長 低溫、干燥: 較強(-20或冷凍干燥半年以上),.,51,二、致病性與免疫性,傳播媒介：吸血節(jié)肢動物，如虱、蚤、蜱、螨等。 致病物質(zhì)：脂多糖（發(fā)熱、微循環(huán)障礙、DIC、休克 磷脂酶A（溶解宿主細胞膜或吞噬體膜） 微莢膜

14、（粘附、抗吞噬）,.,52,致病過程 體虱 鼠蚤 人體 局部淋巴結(jié)及小血管內(nèi)皮細胞 恙螨 第一次入血 全身小血管內(nèi)皮細胞 高熱、皮疹 神經(jīng)系統(tǒng)癥狀 臨床癥狀 第二次入血 心血管系統(tǒng)癥狀,生長繁殖,大量繁殖,.,53,致病機制： 立克次體 虱、蚤、蜱、螨等叮咬或其糞便污染傷口 局部淋巴組織或小血管內(nèi)皮細胞 中增殖 立克次體血癥 （第一次） 經(jīng)血流 全身小血管內(nèi)皮細胞 大量增殖 立克次體血癥（第二次）、毒血癥和各種臨床癥狀。,.,54,螨蟲,蜱,.,55,吃飽的跳蚤,人體虱,.,56,致病性與免疫性,所致疾病 人畜共患性疾病 流行性斑疹傷寒 地方性斑疹傷寒 恙蟲病 Q熱,.,57,免疫性： 以細胞

15、免疫為主，體液免疫為輔。 多數(shù)可獲得持久的免疫。,三、微生物學診斷與防治,病原體的分離培養(yǎng)與鑒定,血清學試驗（外斐反應(yīng)、ELISA）,控制和消滅媒介昆蟲； 抗生素治療（氯霉素、四環(huán)素，但禁用磺胺類藥物）； 全細胞滅活疫苗,立克次體易引起實驗室感染，注意無菌操作！,.,59,第二節(jié) 主要致病性立克次體,.,60,一、普氏立克次體 (R. prowazekii),流行性斑疹傷寒（epidemic typhus） 虱型斑疹傷寒（louse-borne typhus）,.,61,流行環(huán)節(jié) 傳染源： 病人 儲存宿主： 病人 傳播媒介： 人虱 傳播方式： 人 人虱 人,.,62,.,63,所致疾病流行性斑

16、疹傷寒 臨床表現(xiàn): 潛伏期 （1014d） 高熱、頭痛、肌肉痛等 （47d） 皮疹 神經(jīng)、心血管和其他器官病變,.,64,免疫力 病后免疫持久 與地方性斑疹傷寒 有交叉免疫,.,65,二、斑疹傷寒立克次體 (R. typhi),莫氏立克次體（R. mooseri） 地方性斑疹傷寒（endemic typhus） 鼠型斑疹傷寒（murine typhus）,.,66,流行環(huán)節(jié) 傳染源：鼠 儲存宿主：嚙齒類動物(主要為老鼠) 傳播媒介：鼠蚤或鼠虱 傳播方式：鼠 鼠蚤 人 人虱 鼠蚤 鼠虱 鼠,.,67,鼠蚤,.,68,所致疾病地方性斑疹傷寒 臨床表現(xiàn)： 與流行性斑疹傷寒相似，但病情較輕，發(fā)病緩慢，持續(xù)時間短，很少侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng),.,69,免疫力 病后免疫持久 與流行性斑疹傷寒 有交叉免疫,.,70,三、恙蟲病立克次體 (R. tsutsugamushi),恙蟲?。╝kamushi disease， or yochu