制備色譜分離技術(shù)ppt課件

1、制備色譜分離技術(shù),1,一.制備色譜簡介,色譜法,利用不同物質(zhì)在兩項中具有不同分配系數(shù),通過兩相不斷的相對運動,實現(xiàn)分離,2,色譜的分類,操作方式,分析型,制備型,分析工具,分離技術(shù),3,制備色譜,制備色譜：是能分離純化制備一定量樣品 的色譜分離技術(shù),相間的吸附 分配系數(shù) 離子交換平衡值,相間滯留時間不同,實現(xiàn)分離 得到所需產(chǎn)品,4,色譜分離的重要性及應用,制備型色譜 最近幾年來引人注目的新型高效分離技 術(shù)，在生物，化工大分子的分離和純化 領(lǐng)域中將發(fā)揮越來越重要的作用。,廣泛,大孔吸附樹脂,離子交換色譜,硅膠色譜,5,色譜分離的重要性及應用,重要性：,在天然產(chǎn)物分離純化過程中，色譜技術(shù)是最有效的

2、方法。是因為色譜法具有常規(guī)分離方法無法比擬的分離效果和分離速度。,6,二：色譜分離的基本概念,（1） 固定相(A相，staionary phase）,固定相是色譜的一個基質(zhì),基質(zhì),待分離的化合物,可逆,吸附 溶解 交換,7,二：色譜分離的基本概念,固定相,固體物質(zhì),液體物質(zhì),吸附劑,凝膠,離子交換劑,固體在硅膠或纖維素上的溶液,8,二：色譜分離的基本概念,（2）,流動相：（B相，mobile phase）,流動相：推動固體相上待分離的物質(zhì)朝一個方 向移動的液體。,在制備色譜分離中一般稱為洗脫劑。,（3）分配系數(shù)：,分配系數(shù)：是指在一定條件下，某組分在固定相和 流動相中含量（濃度）的比值，常用K

3、表示。,分配系數(shù)是色譜分離純化物質(zhì)的主要依據(jù)。,9,二：色譜分離的基本概念,分配系數(shù),式中,固體相中的濃度,流動相中的濃度,分配系數(shù)是決定其中幾種物質(zhì)采用色譜方法能否分離的先決條件,差異越大，分離效果越理想,10,二：色譜分離的基本概念,分配系數(shù)主要與下列因素有關(guān)：, 被分離的物質(zhì)本身的性質(zhì), 固定相和流動相的性質(zhì), 色譜柱的溫度，一般情況下溫度與分配 系數(shù)成反比,11,三：色譜分離的特點,色譜法具有高超分離能力及效率，其特點如下：,（1） 分離效率高,能在較短的時間分離出較復雜的樣品。,（2） 靈敏度高,（3） 分析速度快,一般在幾分鐘或十幾分鐘內(nèi)可完成一個試樣的分析。,（4） 應用廣泛,可

4、用于有機、無機、低分子、高分子等幾乎所有化合物的分離測定。,12,四：色譜的分類,流動相和固 定相的狀態(tài),氣相色譜,氣固色譜,氣液色譜,液相色譜,液固色譜,液液色譜,超臨界流體色譜,13,四：色譜的分類,超臨界流體色譜,用超臨界流體（處于臨界溫度、臨界壓力以上的流體）作為流動相進行的色譜即為超臨界流體色譜。,由于超臨界流體的特性使得溶質(zhì)在超臨界流體中具有較大的溶解度和擴散系數(shù)，從而促進了組分的分離，具有較高的分離度。,14,五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應用,大孔吸附樹脂（macroporous adsorption resin）,是20世紀60年代發(fā)展起來的一種新型非離子型高分子聚合物吸劑，具有

5、大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其物理化學性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于酸堿及各種有機溶劑。,特點：吸附性能好，對有機成分選擇性較高，機械強度高，價格低廉， 再生處理方便。,應用：目前大孔吸附樹脂色譜被廣泛引用于天然藥物有效部位 及有效成分的分離和純化。,15,五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應用,大孔吸附樹脂柱色譜分離效果的影響因素,1.大孔吸附樹脂性質(zhì)的影響,（1）大孔吸附樹脂極性的影響,根據(jù)被分離物質(zhì)的極性大小來選擇不同類型的樹脂：,極性大的化合物，適用于在中極性的樹脂上分離,極性小的化合物，適用于在非極性的樹脂上分離,16,五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應用,例：黃岑黃酮具有多酚羥基結(jié)構(gòu)和糖苷鏈，具有一定的極性和親水性，有利于

6、中極性樹脂的吸附。它與烷基糖苷的結(jié)構(gòu)有一定的相似性，所以對于烷基糖苷的分離，選擇中極性樹脂的吸附較好。,通常樹脂的極性和被分離物質(zhì)的極性既不能相似，也不能相差太大,極性相似,注意,吸附力過強,被分離物不能被洗脫下來,極性相差大,吸附力過小,無法達到分離的目的,17,五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應用,（2）大孔吸附樹脂比表面積的影響,在樹脂具有適當?shù)目讖酱_保被分離物質(zhì)良好擴散的條件下，比表面積越大吸附量就越大。相同條件下應選擇比表面積較大的同類樹脂。,2.被分離物質(zhì)的性質(zhì)的影響,（1）被分離物質(zhì)極性大小的影響,由于極性大小是一個相對的概念，應根據(jù)分子中極性基團（如羧基，羥基，羰基等）與非極性基團（

7、如烷基等）的數(shù)目和大小來綜合判斷。,（2）被分離物質(zhì)分子大小的影響,化合物的分子體積越大，疏水性增加，對非極性吸附樹脂的吸附能力越強。分子體積大的化合物應選擇大孔徑樹脂。,18,五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應用,應用實例：對皂苷類化合物的分離,可行性分析： 皂苷由皂苷元與糖構(gòu)成。 皂苷根據(jù)苷元連接糖鏈數(shù)目的不同，可分為單糖鏈 皂苷、雙糖鏈皂苷 及三糖鏈皂苷。, 皂苷的化學結(jié)構(gòu)中，由于苷元具有不同程度的親脂 性，糖鏈具有較強的親水性，使皂苷成為一種表面 活性劑，水溶液振搖后能產(chǎn)生持久性的肥皂樣泡沫。 一些富含皂苷的植物提取物被用于制造乳化劑、洗 潔劑 和發(fā)泡劑等。,19,五：大孔吸附樹脂分離技術(shù)的應用,結(jié)論：與烷基多苷的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)有一定的相似 性，所以對于烷基多苷的分離可以借鑒皂 苷的分離方法。