土壤有效磷的測定ppt課件

1、土壤有效磷的測定,0.5mol/L NaHCO3 浸提鉬銻抗分光光度法（Olsen法） 崔玉玲 黑龍江省農(nóng)墾科學(xué)院測試中心13644545158,1,目錄,一、概述 二、 Olsen方法原理 三、主要儀器設(shè)備 四、試劑 五、操作步驟 六、結(jié)果計(jì)算 七、質(zhì)量控制,2,一、概述,土壤有效磷是土壤肥力的重要指標(biāo)之一，表明土壤的供磷水平，可以作為判斷施用磷肥的指標(biāo)，為推薦施肥提供依據(jù)。,3,一、概述,土壤有效磷含量只是一個相對的指標(biāo)，同一土壤用不同方法測得的有效磷量可以相差很多，即使用同一浸提劑，由于浸提條件如土液比、溫度、時間、振蕩方法不同其結(jié)果有很大差異，在相同條件下測

2、得的結(jié)果才有相互比較的意義。,4,1、浸提方法,浸提劑的選擇主要根據(jù)各種土壤的性質(zhì)而定。土壤有效磷測定采用的提取劑種類很多，目前應(yīng)用的主要測定方法有三種：Olsen法、 Bray法和Mehlich3法。,5,1、浸提方法,在目前使用較廣的幾種浸提劑中，一般認(rèn)為以 0.03mol/L NH4F- 0.025mol/LHCl (Bray法)浸提劑比較適合于風(fēng)化程度較高的酸性土壤；,6,1、浸提方法,石灰性土壤通常用 0.5 mol/L NaHCO3 (pH值為8.5)( Olsen法)浸提比較理想；對于中性和酸性水稻土NaHCO3法也有應(yīng)用。,7,1、浸提方法,Mehlich3法是近年來研究較多并

3、逐步推廣應(yīng)用的一種測試方法，其優(yōu)點(diǎn)主要是一次浸提可測定土壤中大部分有效養(yǎng)分，便于大批量分析；缺點(diǎn)是應(yīng)用時間不長，尚未建立土壤的豐缺指標(biāo)體系，需要進(jìn)行試驗(yàn)確定。,8,2、指標(biāo)體系,即使簡單地以“高”、“中”、“低”來分檔,不同提取方法的結(jié)果分起檔來其數(shù)值相差很遠(yuǎn);而且同一提取方法的結(jié)果對不同土壤,不同作物還應(yīng)該有不同的分檔標(biāo)準(zhǔn)。,9,2、指標(biāo)體系,單位：mg/kg,10,2、指標(biāo)體系,因此，在報告有效磷結(jié)果時必須同時說明所用的測定方法。,11,3、Olsen法的影響因素,浸提時間： Olsen法連續(xù)提取測定土壤有效磷的結(jié)果表明，0.5 mol/L NaHCO3溶液浸提出的土壤有效磷量隨振蕩時間而

4、增加。 將各次連續(xù)測定值與各參比標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果表明Olsen法對土壤有效磷進(jìn)行一次提取已經(jīng)能夠反應(yīng)土壤的有效磷水平，無需進(jìn)行多次提取。,12,3、Olsen法的影響因素,溫度： Olsen法不同溫度浸提土壤有效磷的試驗(yàn)結(jié)果表明：提取溫度對Olsen法測定土壤有效磷的結(jié)果影響極大，在1030范圍內(nèi)，有效磷測定值隨溫度升高而增加，溫度每升高1所增加的磷的平均值為0.44mgkg，且隨著土壤含磷量不同，其影響程度也不同。,13,二、 Olsen方法原理,石灰性土壤由于大量游離碳酸鈣存在，不能用酸溶液來提取有效磷。一般用碳酸鹽的堿溶液。由于碳酸根的同離子效應(yīng)，提取液中的 HCO3- 可和土壤

5、溶液中的 Ca2+ 生成 CaCO3 沉淀，從而抑制了 Ca2+的活度而使某些活性較大的 CaP (磷酸鈣鹽) 被提取出來。,14,二、方法原理,酸性土壤中的磷主要是以FeP （磷酸鐵鹽）、Al-P （磷酸鋁鹽）的形態(tài)存在，碳酸鹽的堿溶液在酸性土壤中因 pH 提高而使 Fe-P 、Al-P 水解而部分被提取，也降低了鋁和鐵離子的活性，在浸提液中由于 Ca 、 Fe 、 Al 濃度較低，不會產(chǎn)生磷的次生沉淀。,15,二、方法原理,此外，碳酸氫鈉堿溶液中存在著OH-、HCO3-、CO32-等陰離子，有利于吸附態(tài)磷的置換。 因此NaHCO3不僅適用于石灰性土壤，也適應(yīng)于中性和酸性水稻土壤中速效磷的提

6、取。,16,三、主要儀器設(shè)備,1、可控溫的往復(fù)振蕩機(jī)： 本法浸提溫度對測定結(jié)果影響很大。因此必須嚴(yán)格控制浸提時的溫度條件，本方法要求是251 ，用恒溫振蕩機(jī)進(jìn)行提取。,17,三、主要儀器設(shè)備,2、分光光度計(jì) 波長為880nm或700nm 波長不能達(dá)到880nm時可用700nm，浸出液有顏色時可用活性炭脫色。,18,物質(zhì)顏色和吸收光顏色的關(guān)系 吸 收 光 物質(zhì)顏色 顏 色 波 長(nm) 黃 綠 紫 400 450 黃 藍(lán) 450 480 橙 綠 藍(lán) 480 490 紅 藍(lán) 綠 490 500 紫 紅 綠 500 560 紫 黃 綠 560 580 藍(lán) 黃 580 600 綠 藍(lán) 綠 600 6

7、50 藍(lán) 綠 紅 650 750,19,三、主要儀器設(shè)備,3、酸度計(jì) 可準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH到8.5,20,四、試劑,1、 0.5 mol/L NaHCO3浸提液 稱取42.0g NaHCO3 于800mL水中，稀釋定容至1L。以50%（m/V）NaOH 溶液調(diào)節(jié)浸提液的pH至8.5（用pH計(jì)測定） 。貯存于聚乙烯或玻璃瓶中，用塞塞緊。此溶液曝于空氣中可因失去CO2而使pH增高，使用前應(yīng)檢查pH是否改變并校準(zhǔn)。,21,四、試劑,2、無磷活性炭 活性炭常含有磷，應(yīng)做空白試驗(yàn)，檢驗(yàn)有無磷存在。如含磷較多，須先用HCl（1+1）浸泡過夜，在平板漏斗上抽氣過濾，用蒸餾水沖冼多次至無 Cl-為止；再用0.5 m

8、ol/L NaHCO3浸泡過夜，在平板漏斗上抽氣過濾，每次用少量蒸餾水淋洗多次，并檢查到無磷為止，烘干備用。 如含磷較少，則直接用NaHCO3 處理即可。,22,四、試劑,3、鉬銻抗貯備液 稱取酒石酸銻鉀0.3g，溶于100毫升水中，制成0.3的溶液。 () 稱取10.0g 鉬酸銨溶于約60 300mL 水中，冷卻。 () 另取181mL 濃硫酸緩緩注入約800mL水中，攪勻冷卻 。 (),23,四、試劑,將稀硫酸溶液()注入鉬酸銨溶液()中，邊加邊攪動；再將100mL 0.3的酒石酸銻鉀溶液() 加入到鉬酸銨液中，最后用水稀釋至2L，貯于棕色瓶中，此貯備液鉬酸銨濃度為0.5%，硫酸濃度為3.

9、26mol/L (1/2H2SO4)。,24,四、試劑,4、鉬銻抗顯色劑 稱取0.50g 抗壞血酸(左旋)溶于100mL鉬銻抗貯備液中。 (有效期24小時，如貯于2-8冰箱中，則有效期7天。),25,四、試劑,5、磷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（100 mg/L） 稱取0.4394g KH2PO4 (105烘2小時) 溶于約200mL 水中，加入5mL 濃H2SO4，轉(zhuǎn)移入1L 容量瓶中，用水定容，可較長時間保存。,26,四、試劑,6、磷標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（5 mg/L ） 取磷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液用0.5 mol/L NaHCO3準(zhǔn)確稀釋20倍即為磷標(biāo)準(zhǔn)工作液，此液不宜久存。,27,五、操作步驟,1、稱取通過1mm (1

10、8號篩)篩子的風(fēng)干土樣2.50g（精確0.01g）于干燥的200或250mL塑料瓶中，加入0.5 mol/L NaHCO3溶液50mL，塞緊瓶塞，在振蕩器上振蕩30min(速率為每分鐘180次， 251 )，,28,然后立即用無磷濾紙過濾，濾液承接于干燥的三角瓶中，最初78ml濾液棄去，同時做空白試驗(yàn)。,29,常用標(biāo)準(zhǔn)篩對照數(shù)據(jù)表,30,五、操作步驟,2、如發(fā)現(xiàn)濾液的顏色較深，應(yīng)向土壤懸濁液中加入約0.3-0.5g 無磷活性炭粉，搖勻后立即過濾，也可在振蕩前加入活性炭。 活性炭和濾紙是否含磷可進(jìn)行空白試驗(yàn)來驗(yàn)證。,31,五、操作步驟,3、吸取濾液10.00mL于三角瓶中（含磷量高時少吸，同時應(yīng)

11、補(bǔ)加0.5 mol/L NaHCO3溶液至10.00mL）（注1），然后加入鉬銻抗顯色劑5.00mL，慢慢搖動，使CO2逸出，再準(zhǔn)確加入10.00mL水，充分搖勻，逐盡CO2，在室溫高于15 處放置30min后，進(jìn)行比色。,32,五、操作步驟,4、以空白溶液為參比液，使用1cm比色皿，在分光光度計(jì)上，用880nm或700nm波長進(jìn)行比色，測讀吸光度。,33,五、操作步驟,注1: 如果吸取濾液10mL于50mL容量瓶中，加水和鉬銻抗試劑后，會產(chǎn)生大量的CO2氣體，由于容量瓶瓶口小， CO2氣體不易逸出，在搖勻過程中，常造成試液外溢，導(dǎo)致測定誤差。為了克服這個缺點(diǎn)，可以準(zhǔn)確加入提取液、水和鉬銻抗試

12、劑于三角瓶中，混勻，顯色。,34,五、操作步驟,5、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制： (1) 分別準(zhǔn)確吸取5mg/L磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液0、2.50、5.00、10.00、15.00、20.00、25.00mL于50mL容量瓶中，用0.5 mol/L NaHCO3溶液定容。此標(biāo)準(zhǔn)系列中磷的濃度依次為0、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50mg/L 。,35,五、操作步驟,(2) 吸取標(biāo)準(zhǔn)系列溶液各10.00mL于三角瓶中，同樣品處理顯色（五、3），測讀吸光度。 (3) 以上述標(biāo)準(zhǔn)系列的磷濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)繪制曲線。,36,六、結(jié)果計(jì)算,1、樣品的吸取體積為10mL時： 有效P (mg/kg)=C20 C從標(biāo)準(zhǔn)曲線求得查得濃 度， mg/L； 20浸提時的液土比 50mL/2.50 g。,37,六、結(jié)果計(jì)算,2、樣品的吸取體積小于10mL時： 有效P (mg/kg)=C2010/V C從標(biāo)準(zhǔn)曲線求得查