噻蟲嗪對金銀花藥材質(zhì)量安全性評價研究

中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 碩士學位論文 學校代碼 1 0 0 2 3 學號 2 0 1 2 0 0 9 0 2 2 噻蟲嗪對金銀花藥材質(zhì)量安全性評價研究 T h eE v a l u a t i o nS t u d i e so fT h i a m e t h o x a mt ot h e Q u a l i t yS a f e t yo fH o n e y s u c k l eH e r b s 所院 姓名 指導教師 導師小組 學科專業(yè) 研究方向 完成日期 藥用植物研究所 劉亞南 丁萬隆研究員 丁萬隆研究員李勇副研究員 中藥學 藥用植物保護 二零一五年五月 萬方數(shù)據(jù) 國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 獨創(chuàng)性聲明 本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究 成果 論文中除了特別加以標注和致謝的地方外 不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的 研究成果 也不包含為獲得其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料 與我一同工 作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意 學位論文作者簽名 叫垂嘞 簽寧日期 伽脯二6 月f2 日 學位論文版權(quán)使用授權(quán)書 本學位論文作者完全了解j 匕京跡塑醫(yī)堂隨有關(guān)保存 使用學位論文的管理辦 法 有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤 允許論文被查閱和 借閱 本人授權(quán)j 匕哀坯塑醫(yī)堂瞳可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫 進行檢索 可以采用影印 縮印或掃描等復制手段保存 匯編學位論文 保密的學位論文在解密后適用本授權(quán)書 學位論文作者簽名 玉f 受 5 0 精密度R S D 1 3 3 2 3 氣相色譜法 G C G C 具有操作簡便 分析速度快 分離效能高 靈敏度高 應用范圍廣及可以同 時分離分析多種組分等優(yōu)點 廣泛的用于相對分子質(zhì)量較小 易氣化 氣化后又不發(fā) 生分解的農(nóng)藥殘留的分析 如有機氯 有機磷 擬除蟲菊酯等 Z h a o 等 8 4 j 采用G C 測 定中藥當歸中有機氯農(nóng)藥P C N B P C A D D E 等殘留 回收率為8 2 4 1 9 8 1 2 萬益群等 85 采用G C F P D 方法測定梔子中有機磷農(nóng)藥殘留時 方法檢出限為 0 0 1 1 0 0 1 5g g m L 回收率為8 5 5 1 0 7 8 3 2 4 液相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) L C M S 將液相色譜與質(zhì)譜串聯(lián)成為一個整機使用的檢測技術(shù) 現(xiàn)以電噴霧離子源和大氣 壓化學電離源等接口技術(shù)將液相色譜和質(zhì)譜連接起來 已成功地用于分析對熱不穩(wěn) 定 相對分子質(zhì)量較大 難以用氣相色譜分析的化合物檢測 具有檢測靈敏度高 選 擇性好 定性定量同時進行 結(jié)果可靠等優(yōu)點 L C M S 對簡單樣品可進行分析前凈 化 并具有幾乎通用的多殘留組分分析能力 是一種很有利用價值的高效率 高可靠 性分析技術(shù) J a n s s o n 等 8 6 采用液相色譜 質(zhì)譜方法分析水果和蔬菜中5 7 種農(nóng)藥殘留 回收率在7 0 10 0 吳永江等 影7 應用液 質(zhì)聯(lián)用的方法對鐵皮石斛和西洋參及制劑 中的多菌靈殘留進行分析 平均回收率在9 5 6 以上 3 2 5 氣相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用 G C M S 氣相色譜法用于中藥材中農(nóng)殘分析時常用的檢測器是氮磷檢測器 N P D 電子捕 獲檢測器 E C D 火焰光度檢測器 F P D 和I 質(zhì)譜檢測器 M S D 前3 種檢測器選擇性好 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 但無法同時檢測多類農(nóng)藥 而且不能確證殘留農(nóng)藥的結(jié)構(gòu) 質(zhì)譜具有很強的定性能力 而且采用選擇離子檢測模式可以排除基質(zhì)的干擾 進一步提高檢測的靈敏度 用于農(nóng) 藥殘留量檢測工作 特別是應用于農(nóng)藥代謝物 降解物的檢測和多殘留檢測等具有突 出的特點 適用于揮發(fā)和半揮發(fā)性有機殺蟲劑 除草劑等農(nóng)藥的殘留分析 主要包括 有機氯類 有機磷類 有機氮類 氨基甲酸酯類等化合物 H e n g e l 等 8 8 J 采用G C M S 法對蛇麻花中殺菌劑百菌清殘留進行測定 4 個添加濃度的回收率為7 9 1 0 3 吳 永江等 8 9 采用氣相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測中藥材中有機氯 有機磷及擬除蟲菊酯等 1 6 種農(nóng)藥殘留量 回收率在7 0 5 1 0 5 O 之間 相對標準偏差小于1 0 9 3 2 6 毛細管電泳 C E 和毛細管區(qū)帶電泳 C Z E C E 和C Z E 特別適合分離常規(guī)液相色譜難以分離的離子性化合物 C E 具有操作 簡單 分析速度快 運行成本低 柱高效的特點 C Z E 分離效率高 操作簡便 具有 很大靈活性 對許多分離參數(shù) 如緩沖液的組成和p H 值 毛細管的類型以及使用的 電場波形等都可以調(diào)節(jié) 其測定所需樣品量極少 一般只需幾毫升 黃寶美等 9 0 J 建立 了一種毛細管電泳法檢測青菜中有機磷農(nóng)藥敵百蟲的方法 最低檢出限為2 1 0 曲 m o l L 回收率為9 0 1 0 2 F r i a s G a r c i a 等 9 l 利用膠束動電色譜對固相微萃 取過程凈化的1 1 種三氮類除草劑進行了測定 3 2 7 超臨界流體色譜技術(shù) S F E 以超臨界流體作為色譜流動相的超臨界流體色譜 能通過調(diào)節(jié)壓力 溫度 流動 相組成多重梯度 選擇最佳色譜條件 S F E 既綜合了G C 與H P L C 的優(yōu)點 又彌補了 它們的不足 可在較低溫度下分析分子量較大 對熱不穩(wěn)定的化合物和極性較強的化 合物 S F E 的優(yōu)越性表現(xiàn)在 1 樣品在低溫下提取 可避免揮發(fā)性農(nóng)藥的損失和降解 大大提高了分析方法的可靠性 2 溶劑二氧化碳無毒 沒有溶劑殘留 環(huán)境污染小 排除了有機溶劑的再次污染 3 提取效率高 對樣品基質(zhì)復雜 成分微量的農(nóng)殘分析 尤為適用 4 可以與大部分G C 和H P L C 的檢測器相連接 如F I D F P D N P D 以 及M S 等連用 還可與紅P b F T I R M S 聯(lián)用 拓寬了其應用范圍 許多在G C 或 H P L C 上需經(jīng)過衍生化才能分析的農(nóng)藥 都可以用S F C 直接測定 萃取樣品無須分 離轉(zhuǎn)移 可減少各種人為的偶然誤差 5 操作簡單快速 適于常規(guī)分析 E L S a e i d 等 一n J 采用S F E 和S F C 技術(shù)對罐頭食品 水果 蔬菜中合成除菊酯 氨基甲酸類等農(nóng) 藥殘留進行分析 取得了準確 可靠的結(jié)果 L i n g 掣粥J 建立了一種S F E 在線提取并 分離中草藥中1 3 種有機氯農(nóng)藥殘留的分析方法 用氣相色譜 G C 電子捕獲檢測器 E C D 和質(zhì)譜 M S 測定殘留量 R S D 為5 3 1 平均回收率為7 8 1 2 1 3 2 8 生物學檢測技術(shù) 基于生物學原理的一些檢測技術(shù) 如酶抑制法 免疫分析法 生物傳感器法 活 z k q 20151027 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 體檢測法等 具有高效 快速 低成本的特點 彌補了色譜法的復雜 操作繁瑣 試 劑消耗量大 設(shè)備昂貴以及對極性和熱不穩(wěn)定農(nóng)藥的分析常常出現(xiàn)問題等方面的不 足 3 2 8 1 酶抑制法 主要用于測定有機磷與氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留 依據(jù)的原理主要是有機磷與氨基甲 酸酯農(nóng)藥的殺蟲機理 這兩類農(nóng)藥均屬乙酰膽堿脂酶抑制物 能夠抑制動物神經(jīng)系統(tǒng) 膽堿酯酶活性 造成神經(jīng)傳導介質(zhì)乙酰膽堿積累 影響神經(jīng)正常傳導造成昆蟲死亡 利用碘化硫代乙酰膽堿在p H 7 8 的溶液中被膽堿酯酶水解 生成硫代膽堿 硫代膽 堿使藍色的2 6 二氯靛粉褪色 褪色的程度與膽堿酯酶的活性成正相關(guān) 可在6 0 0n m 比色測定 酶活性越高 吸光值越低 當樣品提取液中有一定量的有機磷類農(nóng)藥或氨 基甲酸酯類農(nóng)藥存在時 酶活性受到抑制 吸光值較高 據(jù)此 可判斷樣品中有機磷 類農(nóng)藥或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留情況 近年來不少地方推出殘留農(nóng)藥測定儀 9 4 1 應用分光光度計的基本原理 辨析酶反 應過程中顯色深淺轉(zhuǎn)換成相應的抑制率 在儀器上以讀數(shù)形式表達 該方法檢測時 蔬菜中的水份 碳水化合物 蛋白質(zhì) 脂等物質(zhì)不會對農(nóng)藥殘留物的檢測造成干擾 不必進行分離去雜 節(jié)省了大量預處理時間 該方法對常見農(nóng)藥的檢出限為O 3 m g k g 3 5m g k g 大都高于相應農(nóng)藥的最大殘留限量 因此只能作為定性的快 速初篩檢測法p 5 J 3 2 8 2 免疫分析法 主要有放射性免疫分析 酶免疫分析 多組份分析物免疫分析 免疫傳感器分析 等 9 7 9 9 最為常用的是酶聯(lián)免疫吸附分析法 酶聯(lián)免疫吸附分析 E n z y m e 1 i n k e d I m m u n o a d s o r b e n tA s s a y E L I S A 是應用免疫細胞化學中抗原與抗體之間高度特異性 的配合反應 使不同的農(nóng)產(chǎn)品有毒物質(zhì)殘留物及其代謝產(chǎn)物 抗原 與不同的添加酶 抗體 進行特異反應 而且反應的結(jié)果可以通過顯色直接反映出來 由于每種添加 酶抗體皆高度專一和敏感于特定的農(nóng)產(chǎn)品有毒物質(zhì)殘留物 因此這種反應具有很高的 特異性 敏感性與準確性 1 0 0 J 這種方法一般可檢測n g m L 1 的濃度 樣品準備量很少 檢測時間短 與常規(guī) 氣相 液相色譜法測定結(jié)果有著顯著的相關(guān)性 而且大大縮短了檢測時間 提高了檢 測結(jié)果的時效性 試劑盒可廣泛用于現(xiàn)場樣品和大量樣品的快速檢測 可準確定性 定量 但由于受到農(nóng)藥種類多 抗體制備難度大 在不能肯定樣本中的農(nóng)藥殘留種類 時檢測有一定的盲目性以及抗體依賴I 虱J l 進I 1 等影響 酶聯(lián)免疫法的應用范圍受到較 大的限制 1 0 1 1 0 2 3 2 8 3 生物傳感器法 生物傳感器法是目前農(nóng)藥殘留速測技術(shù)中的研究熱點 1 0 3 1 是由一種生物敏感部 1 4 z k q 20151027 萬方數(shù)據(jù) f 一困醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 件與轉(zhuǎn)換器緊密配合的分析裝置 這種生物敏感部件對特定化學物質(zhì)或生物活性物質(zhì) 具有選擇性和可逆響應 通過測定p H 電導等物理化學信號的變化 即可測得農(nóng)藥 殘留量 利用農(nóng)藥對靶標酶 如乙酰膽堿酯酶 活性的抑制作用 利用復合納米顆粒及納 米結(jié)構(gòu)增強酶電極的性能并以生物活性單元 如 酶 蛋白質(zhì) D N A 抗體 抗原 生物膜等 作為敏感基元 對被分析物具有高度選擇性的現(xiàn)代化分析儀器 納米生物 傳感器技術(shù)是目前新興的 在綜合生物工程學 微電子學 材料科學 分析化學等多 門學科地基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項生物新技術(shù) 它把納米材料和生物活性物質(zhì)巧妙地與 傳感器技術(shù) 計算機技術(shù)結(jié)合 是傳統(tǒng)的煩瑣的化學分析方法的一場革命 納米農(nóng)藥 殘留量傳感器在農(nóng)藥殘留的檢測中 除了具有上述靈敏度高 可接近常規(guī)儀器檢測標 準的優(yōu)點外 還具有結(jié)構(gòu)緊湊 操作簡便 檢測迅速 選擇性好等許多其它方法不可 比擬的優(yōu)勢 目前國際上已有N g e hN g w a i n b i 等研制成功了農(nóng)藥對硫磷的生物傳感器 國內(nèi)未見將納米傳感器技術(shù)與農(nóng)藥殘留量檢測相結(jié)合的農(nóng)藥傳感器研制成功的報道 3 2 8 4 活體檢測法 活體檢測法是使用活的生物直接測定 1 0 4 J 如農(nóng)藥與細菌作用后可影響細菌的發(fā) 光程度 通過測定細菌發(fā)光情況 則可測出農(nóng)藥殘留量 又如農(nóng)藥殘留會導致家蠅中 毒 使用敏感品系的家蠅為材料 用樣本喂食敏感家蠅后 根據(jù)家蠅死亡率便可測出 農(nóng)藥殘留量 一般在4 6h 內(nèi)可測出蔬菜是否含超量農(nóng)藥 但該法只對少數(shù)藥劑有反 應 無法分辨殘留農(nóng)藥的種類 準確性較低 使用家蠅檢測蔬菜中的農(nóng)藥殘留 過程 簡單 無須復雜儀器 農(nóng)戶便可白行檢測 缺點是檢測時間較長 僅適于田間未采收 農(nóng)作物 3 3 小結(jié) 隨著分析技術(shù)的不斷發(fā)展 農(nóng)藥殘留的檢測技術(shù)也在發(fā)生著日新月異的變化 不 斷引入新技術(shù) 比如生物學 現(xiàn)代基因工程技術(shù)等 會對今后的農(nóng)藥殘留前處理方式 和分析技術(shù) 帶來更新更快的發(fā)展 當前應開發(fā)簡單 快速 有效的樣品前處理技術(shù) 以及高靈敏度和高選擇性的多殘留同時檢測方法 同時積極開發(fā)低毒 高效 低殘留 易降解的農(nóng)藥 科學規(guī)范中藥材綠色種植生產(chǎn) 農(nóng)藥殘留問題已成為世界廣泛關(guān)注的中藥安全問題之一 與人類健康和貿(mào)易出口 有直接聯(lián)系 而中藥作為我國優(yōu)秀文化遺產(chǎn)的瑰寶 在治療疑難雜癥 養(yǎng)生調(diào)理等方 面為世界注目 因此 中藥材農(nóng)藥殘留的研究具有重要意義 應積極完善相關(guān)法律法 規(guī)及殘留限量標準 與國際標準接軌 確保中藥材產(chǎn)業(yè)健康穩(wěn)定的發(fā)展 1 0 5 1 z k q 20151027 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 4 中藥材生產(chǎn)中農(nóng)藥安全使用標準研究 隨著農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中大面積的推廣和使用 人們對安全和健康更加關(guān)注 因此 農(nóng)藥安全使用標準在有關(guān)農(nóng)作物和水果蔬菜上已經(jīng)做了比深入研究 其 農(nóng)藥合理使 用準則 1 0 6 一 七 由中華人民共和圍國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布 而中藥材 生產(chǎn)中農(nóng)藥安全使用標準的研究尚少 目前有對金銀花 枸杞 大青葉 浙貝 金線 蓮 白術(shù) 龍膽等藥材中農(nóng)藥安全使用標準進行研究 需要研究者們的進一步關(guān)注和 研究 張艷等 1 0 7 對三氯殺瞞醇在枸杞上的殘留動態(tài)進行了研究 三氯殺螨醇原始附著 量在1 5m g k g 1 以下 半衰期為5 7d 農(nóng)藥消解較快 殘留量低 施藥2 0d 后消 解率為9 0 以上 枸杞的采摘間隔期一般為7d 左右 該農(nóng)藥5 7d 的殘留量均在O 7 m g k g 1 以下 可以保證枸杞的安全食用 金鉞等 1 0 8 研究了百菌清在大青葉中的殘 留動態(tài) 百菌清高低濃度在大青葉上的降解符合雙室降解模式 且以選擇1 5d 作為降 解快慢的轉(zhuǎn)折點較合理 百菌清高低濃度前期半衰期分別為2 0 8 和3 2 6d 在大青葉 上的安全間隔期均為1 7d 樓健 1 0 9 研究了百菌清在浙貝上的殘留動態(tài) 測定了百菌 清在浙貝葉 塊根和土壤中的殘留量 百菌清在浙貝葉和土壤中的半衰期分別為4 8 和4 7d 根據(jù)本試驗的最終殘留數(shù)據(jù) 建議百菌清在浙貝上最后一次施藥與收獲的安 全間隔期為1 5d 較合理 劉海濤等 1 10 測定農(nóng)藥世高在龍膽生長期的降解動態(tài) 通過 計算農(nóng)藥世高在龍膽中的半衰期 從而制定農(nóng)藥世高的安全使用標準 在當?shù)氐臍夂?條件下 農(nóng)藥世高在龍膽莖葉上的半衰期為6 8 4 6 9 0d 龍膽規(guī)范化種植中 建議農(nóng) 藥世高噴施量應小于4 0 0g h m 2 安全使用間隔期為4 0d 邵清松等 1 1 1 研究了金線 蓮栽培中多菌靈殘留動態(tài)及安全使用標準 田間試驗分別采用推薦劑量 1 0k g h m 和1 5 倍推薦劑量 1 5k g h m 2 進行處理 2 年連續(xù)實驗結(jié)果表明 多菌靈在金線蓮 栽培基質(zhì)中的半衰期為7 0 1 8 5 1d 在根中殘留趨勢為先升后降 半衰期為4 9 3 5 7 1 d 在莖和葉中的消解半衰期分別為3 5 8 4 2 7 3 5 0 3 9 1d 若多菌靈在金線蓮植株 中的最高殘留限量推薦值為O 5 埏 1 1 r I l 每年以1 0k g h m 2 的劑量噴施4 次 最 后一次施藥和收獲時間的安全間隔期可推薦為2 8d 林建等 1 1 2 研究了多菌靈在白術(shù) 根 土壤中的殘留消解動態(tài) 并對其安全使用標準進行了討論 田問試驗分別用推薦 劑量 O 6 7 5k g h m 2 和1 5 倍推薦劑量 1 0 0 0k g h m 2 進行處理 2 年兩地結(jié)果表明 多菌靈5 0 W P 在白術(shù)土壤中的半衰期為6 5 1 7 9 8d 在根中殘留趨勢為先升后降 半衰期為4 5 1 6 5 0d 初加工后干樣多菌靈的殘留量為O 0 4 2 0 4 3 3m g k g 明顯 高于加工前新鮮樣品殘留量 如果多菌靈在白術(shù)及其土壤中的M R L 最大殘留限量 值推薦為0 2m g k g 建議按照常規(guī)劑量 O 6 7 5k g h m 2 每年噴施2 次 白術(shù)上最 后一次使用多菌靈距收獲的安全間隔期可考慮暫定為2 1d 孫楠等 1 1 3 研究了金銀花 規(guī)范化種植中農(nóng)藥啶蟲瞇的安全使用標準 3 啶蟲脒乳油在金銀花上施用后1 0 d 可 1 6 z k q 20151027 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 消解9 0 以上 半衰期1 4 8 1 6 4 d 農(nóng)藥啶蟲脒在金銀花中消解速度較快 建議金銀 花規(guī)范化種植中施用3 啶蟲脒乳油的安全間隔期應控制在5 d 以上 施藥量應控制在 1 8 7 5g 1 1 I I l 之以內(nèi) 以保證金銀花使用安全 同時 孫楠等 1 1 4 研究了金銀花栽培中 農(nóng)藥三唑酮安全使用標準 金銀花中三唑酮的降解符合一級動力學模式 其半衰期為 1 4 7 1 6 8d 建議金銀花上最后一次使用三唑酮時問和采收時間的安全間隔期為1 0d 施藥量應控制在3 4 2g h m 之以內(nèi) 陳美艷等 1 研究了吡蟲啉在枸杞中的殘留動態(tài) 吡蟲啉在枸杞中的半衰期為1 6 3d 施藥1 0d 后殘留量降至0 0 1 2 6m g k g 最終殘 留量在0 0 0 2m g k g 1 以下 在正常噴藥濃度的加倍劑量2 0 0 0 倍條件下 安全采收間 隔期為5d 以上 5 討論 隨著當前中藥材野生資源的匱乏以及人們對其需求的不斷增長 中藥材作為一種 經(jīng)濟作物 其中大部分品種的來源都是通過人工種植 人工種植同時也帶來的蟲害嚴 重發(fā)生 又因為我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中防治病蟲害主要依靠化學農(nóng)藥手段 所以中藥材農(nóng)藥 殘留以及農(nóng)藥對中藥藥材質(zhì)量的影響等問題相繼出現(xiàn) 因此 我們可以看到中藥材生 產(chǎn)中農(nóng)藥安全使用研究所面臨的一些問題以及對中藥材生產(chǎn)的重大意義 在生產(chǎn)中農(nóng)藥防治中藥材病蟲害的選擇 病蟲害對中藥材的生長 產(chǎn)量及有效藥 用成分都有嚴重影響 因此對中藥材的大規(guī)模生產(chǎn)中病蟲害的防治 合適農(nóng)藥選擇及 其用量均受到重視 建立農(nóng)藥安全使用標準 目前對農(nóng)藥殘留的研究大多停留在檢測分析階段 但是 檢測并不是目的 只有從源頭抓起 控制農(nóng)藥使用量 才能保證中藥材的品質(zhì) 因此 分別對每一種藥材的病蟲害發(fā)生規(guī)律來選用農(nóng)藥 通過研究該農(nóng)藥對病蟲害的防治效 果及殘留動態(tài) 規(guī)定農(nóng)藥使用的安全間隔期 從而制定出一系列的農(nóng)藥安全使用標準 使中藥材的種植規(guī)范化 標準化 科學化 農(nóng)藥對中藥材有效成分的影響 農(nóng)藥的施藥量會直接影響到中藥材有效成分的含 量以及臨床療效 因此 在考察農(nóng)藥安全使用的研究中應同時考察農(nóng)藥對藥材有效成 分的影響 合理選擇農(nóng)藥 確保中藥材的生產(chǎn)和質(zhì)量 綜上 我們以金銀花為研究對象 選取具有代表性的第二代新煙堿類農(nóng)藥一噻蟲 嗪 從噻蟲嗪對金銀花主要害蟲一蚜蟲的防治效果 在金銀花上的殘留動態(tài)及其對金 銀花有效成分的影響角度入手 對金銀花生產(chǎn)中農(nóng)藥噻蟲嗪安全使用標準進行了研 究 從而對噻蟲嗪對金銀花藥材質(zhì)量安全性評價進行研究 本研究的技術(shù)路線如下 z k q 20151027 萬方數(shù)據(jù) 國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 z k q 20151027 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 第二章金銀花生產(chǎn)中病蟲害發(fā)生及農(nóng)藥施用 現(xiàn)狀調(diào)查研究 我國金銀花產(chǎn)地主要集中在山東 河北和河南三省 北京 天津 湖南 四川 安徽 重慶等地也有栽培 金銀花是我國傳統(tǒng)大宗中藥材 因其獨特的藥用價值 金 銀花市場需求量的迅猛增長刺激了金銀花種植產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和壯大 同時 也帶來了種 植區(qū)病蟲害的嚴重發(fā)生 n 1 1 引 中藥材中農(nóng)藥殘留量直接來自栽培過程中農(nóng)藥的使用 即農(nóng)藥品種的選擇和使用方法 目前 金銀花生產(chǎn)中農(nóng)藥的使用因沒有具體的規(guī)范化 管理 農(nóng)民在使用時非常混亂 農(nóng)藥使用頻繁 為了更好的進行試驗設(shè)計 必須要掌 握金銀花產(chǎn)地的病蟲害發(fā)生及農(nóng)藥施用情況 為此 本課題組對金銀花主產(chǎn)區(qū)金銀花 的種植現(xiàn)狀和病蟲害防治中農(nóng)藥的使用情況進行了實地調(diào)查 1 材料與方法 1 1 調(diào)查地點 金銀花主產(chǎn)區(qū) 實地調(diào)查地區(qū)有河北巨鹿縣 山東平邑縣 蒼山縣 1 2 調(diào)查內(nèi)容 主要考察金銀花農(nóng)戶種植地 金銀花種植基地 金銀花集貿(mào)市場 金銀花協(xié)會 加工企業(yè)以及政府主管部門 調(diào)查問卷內(nèi)容包括 1 被訪人性別 年齡 文化水平 2 金銀花種植面積 3 金銀花種植年限 4 金銀花病蟲害高發(fā)期 5 對金 銀花主要病蟲害的熟悉程度 6 金銀花病蟲害種類 7 常用農(nóng)藥種類 8 病蟲 害防治技術(shù) 9 農(nóng)藥施用技術(shù) 1 3 數(shù)據(jù)分析 調(diào)查問卷結(jié)果用E x c e l 軟件統(tǒng)計 繪圖 2 結(jié)果與分析 在實地考察過程中 向當?shù)胤N植戶 金銀花合作社 金銀花協(xié)會以及金銀花企業(yè) 等發(fā)放調(diào)查問卷3 0 0 份 收回有效問卷2 5 5 份 問卷回收率為8 5 統(tǒng)計結(jié)果如下 1 9 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 2 1 金銀花栽培情況的調(diào)查 根據(jù)調(diào)查統(tǒng)計結(jié)果 當?shù)剞r(nóng)戶種植金銀花的種苗主要是自家育苗 占7 8 5 7 而 種苗來自當?shù)仄髽I(yè)公司 農(nóng)村合作社 金銀花協(xié)會的比例均較小 各占7 1 4 圖2 圈當?shù)仄髽I(yè)公司 農(nóng)村合作社 圈金銀花協(xié)會 口自己育苗 圖2 金銀花種苗來源的統(tǒng)計結(jié)果 F i g 2S t a t i s t i c so fh o n e y s u c k l es e e ds o u r c e s 2 2 金銀花病蟲害發(fā)生情況的調(diào)查 根據(jù)對金銀花田間蟲害調(diào)查的統(tǒng)計結(jié)果 蚜蟲占2 8 1 3 棉鈴蟲占2 2 9 2 金 銀花尺蠖占8 3 3 蠐螬占8 3 3 紅蜘蛛占8 3 3 咖啡虎天牛占6 2 5 山楂葉螨 占5 2 1 金銀花葉蜂占4 1 7 忍冬細蛾占3 1 3 木蠹蛾類占3 1 3 等 圖3 山楂葉螨 金銀花葉蜂 忍冬細蛾 木蠹蛾類 紅蜘蛛 咖啡虎天牛 棉鈴蟲 蠐螬 金銀花尺蠖 蚜蟲 圖3 金銀花田問蟲害統(tǒng)計結(jié)果 F i g 3S t a t i s t i c so fh o n e y s u c k l ef i e l dp e s t s 2 0 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 根據(jù)對金銀花田問病害調(diào)查的統(tǒng)計結(jié)果 白粉病占3 5 8 2 褐斑病占1 9 4 0 葉斑病占1 0 4 5 根腐病占1 6 4 2 白絹病占5 9 7 炭疽病占4 4 8 黃葉病占7 4 6 圖4 黃葉病 炭疽病 白絹病 根腐病 葉斑病 褐斑病 白粉病 051 01 52 02 53 03 54 0 圖4 金銀花田間病害統(tǒng)計結(jié)果 F i g 4S t a t i s t i c so fh o n e y s u e k l ef i e l dD i s e a s e 調(diào)查發(fā)現(xiàn) 花農(nóng)普遍認同春季和夏季是病蟲害的高發(fā)季節(jié) 但對秋季 特別 是秋末冬初交替季節(jié)病蟲害防治不夠重視 而該階段正值病原菌和害蟲越冬階段 也是預防和殺死越冬害蟲和病原菌的關(guān)鍵時期 如能合理用藥和相關(guān)措施 將能 起到事半功倍的效果 白粉病和蚜蟲的在金銀花栽培上的發(fā)生和為害最為普遍 應結(jié)合當?shù)氐耐寥篮蜌夂颦h(huán)境 針對上述病害和害蟲做出相應的防治對策 2 3 金銀花種植戶農(nóng)藥施用情況的調(diào)查 用于防治金銀花田間蟲害的農(nóng)藥中 吡蟲啉占3 2 4 3 噻蟲嗪占5 4 1 高效氯 氟氰菊酯占1 3 5 1 阿維菌素占1 7 5 7 樂果占9 4 6 殺滅菊酯占6 7 6 敵敵畏 占4 0 5 辛硫磷占1 3 5 毒死蜱占1 3 5 甲維鹽占6 7 6 其他占1 3 5 圖5 2 1 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 其他 阿維菌素 敵敵畏 樂果 殺火菊酯 毒死蜱 辛硫磷 高效氯氟氰菊酯 噻蟲嗪 u 比蟲啉 0 51 01 52 02 5 3 0 圖5 金銀花蟲害防治常用農(nóng)藥統(tǒng)計結(jié)果 F i g 5S t a t i s t i c so fc o n t r o l i n gh o n e y s u c k l ep e s tc o m m o n l yu s e dp e s t i c i d e s 用于金銀花田間病害防治的農(nóng)藥中 多菌靈占4 3 1 4 甲基托布津占1 3 7 3 代森錳鋅占1 1 7 6 多抗菌素占9 8 0 波爾多液占5 8 8 退菌特占5 8 8 百菌 清占3 9 2 三唑酮1 9 6 其他占3 9 2 圖6 其他 多抗菌素 代森錳鋅 百菌清 三唑酮 退菌特 波爾多液 甲基托布津 多菌靈 0 1 02 03 0 4 05 0 圖6 金銀花病害防治常用農(nóng)藥統(tǒng)計結(jié)果 F i g 6S t a t i s t i c so fc o n t r o l i n gh o n e y s u c k l ed i s e a s ec o m m o n l yu s e dp e s t i c i d e s 在農(nóng)藥使用方面 5 4 8 4 的農(nóng)戶能夠嚴格按照農(nóng)藥使用說明操作 1 9 3 5 的農(nóng)戶 根據(jù)金銀花病蟲害發(fā)生及為害情況靈活用藥 2 5 8 1 的農(nóng)戶憑借個人經(jīng)驗用藥 圖7 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 囹農(nóng)藥使用說明書 病蟲害為害情況 口經(jīng)驗 圖7 農(nóng)藥使用情況的統(tǒng)計結(jié)果 F i g 7S t a t i s t i c so fp e s t i c i d e su s a g e 在用藥時期的選擇上 4 5 1 6 9 6 的農(nóng)戶在病蟲害尚未發(fā)生時就提前噴灑農(nóng)藥進行防 治 5 4 8 4 的農(nóng)戶在金銀花病蟲害已經(jīng)發(fā)生 但為害較輕時進行防治 而在病蟲害為 害較重時才開始用藥的幾乎沒有 圖8 圖8 農(nóng)藥施用時期的統(tǒng)計結(jié)果 F i g 8S t a t i s t i c so fp e s t i c i d ea p p l i c a t i o np e r i o d 根據(jù)上述調(diào)查統(tǒng)計結(jié)果 在防治金銀花病蟲害時 多數(shù)花農(nóng)用藥比較單一 防治 病害和蟲害常用多菌靈和吡蟲啉 缺乏針對性和科學性 另外 花農(nóng)不科學 不規(guī)范 用藥較為普遍 用藥過程中多憑借個人經(jīng)驗 導致病蟲害抗藥性增強 而且花農(nóng)對特 定蟲害的發(fā)生特點和為害習性缺乏深入的認識和了解 用藥針對性較差 導致用藥混 亂且用藥量大但防治效果卻不佳 這是造成金銀花農(nóng)藥殘留超標的主要因素之一 剛時 輕重 前較嚴 生生生 發(fā)發(fā)發(fā)害害害蟲蟲蟲病病病 圖 口 眺鈣 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 3 本章小結(jié) 經(jīng)過此次實地考察和調(diào)研 對金銀花主產(chǎn)區(qū)的種植栽培現(xiàn)狀 病蟲害發(fā)生及農(nóng)藥 施用現(xiàn)狀等方面有了較全面的了解 當?shù)睾苌儆凶约号嘤男缕贩N 農(nóng)戶大多是通過扦插等方式育苗 只有少數(shù)企業(yè) 有自己培育的品種 金銀花種植品種呈現(xiàn)出明顯的地域性 例如 巨鹿縣主要是種植 巨花一號 而平邑 蒼山主要是 九豐一號 魯峰一號 金銀花產(chǎn)業(yè)需要積極 研究培育金銀花新品種 并在當?shù)赝茝V種植 提高產(chǎn)量的同時也能提高品質(zhì) 在金銀花栽培過程中 病蟲害依然困繞著許多種植戶 蚜蟲和棉鈴蟲是為害金銀 花的主要害蟲 他們從金銀花的葉和花中汲取營養(yǎng) 導致金銀花產(chǎn)量及品質(zhì)下降 白 粉病和褐斑病是為害金銀花的主要病害 他們主要侵染金銀花的枝葉 導致金銀花產(chǎn) 量下降 今年 金銀花根腐病的發(fā)生較為嚴重 金銀花地上部葉片出現(xiàn)明顯的褪綠和 枯斑 可能與當?shù)亟衲暧炅砍渑娴扔嘘P(guān) 針對田問病蟲害 種植戶多使用吡蟲啉和多菌靈 還有噻蟲嗪 甲維鹽等 農(nóng)戶 農(nóng)藥施用相對單一 高效 低毒 低殘留農(nóng)藥還有待推廣 種植戶多根據(jù)使用說明防 治金銀花病蟲害 防治措施相對較科學 但是也有部分人根據(jù)自己經(jīng)驗用藥 缺乏規(guī) 范的技術(shù)指導 同時 個別地區(qū)仍在使用敵敵畏等違禁劇毒農(nóng)藥 也有將各種殺菌殺 蟲農(nóng)藥混用的 甚至將殺菌農(nóng)藥用來防治蟲害的 上述不合理 不科學的農(nóng)藥施用嚴 重影響了金銀花的質(zhì)量以及金銀花產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展 應在今后的金銀花種植環(huán)節(jié)盡快 解決 首先 應通過科技創(chuàng)新 選育金銀花抗病抗蟲優(yōu)良新品種 藥廠大力研發(fā)并選 擇高效 低毒 低殘留的農(nóng)藥 拒絕生產(chǎn)劇毒農(nóng)藥 其次 科學引導 提供技術(shù)指導 提高農(nóng)戶的種植技術(shù)和藥材安全意識 最后 金銀花協(xié)會 金銀花合作社等政府管理 部門 積極發(fā)揚自己的職能 規(guī)范種植戶在金銀花的栽培 采摘及產(chǎn)品加工等方面 使金銀花種植栽培規(guī)范化 科學化 2 4 萬方數(shù)據(jù) 中困醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 第三章噻蟲嗪防治金銀花蚜蟲的田間防效評價 金銀花生產(chǎn)上 病蟲害的發(fā)生為害較為普遍 其中金銀花蚜蟲尤為嚴重 5 1 8 2 3 金銀花蚜蟲以成蟲 幼蟲刺吸葉片汁液 造成葉片卷縮發(fā)黃 花蕾期會導致花蕾畸形 同時 蚜蟲分泌的蜜露還易引發(fā)煙煤病的發(fā)生 影響金銀花正常的光合作用 造成金 銀花減產(chǎn) 7 1 1 9 另外 蚜蟲為害還會對金銀花藥材質(zhì)量產(chǎn)生影響 1 2 0 1 2 1 噻蟲嗪 t h i a m e t h o x a m 是第二代新煙堿類殺蟲劑 與吡蟲啉相比 二者的R 和R 2 以及雜環(huán) 結(jié)構(gòu)存在差異 致使噻蟲嗪對刺吸式和咀嚼式口器害蟲的觸殺及胃毒活性顯著提高 5 6 5 7 0 噻蟲嗪已被廣泛用于藥材蚜蟲等害蟲的防治 為研究噻蟲嗪對金銀花蚜蟲的防治 效果 分別于2 0 1 3 年和2 0 1 4 年在中國醫(yī)學科學院藥用植物研究所金銀花試驗地和北 京市植物保護站順義金銀花試驗地開展田問試驗 研究了不同稀釋倍數(shù)2 5 噻蟲嗪水 分散粒劑對金銀花蚜蟲的防治效果 最佳使用劑量及施用安全性 通過試驗數(shù)據(jù)論證 了2 5 噻蟲嗪水分散粒劑對金銀花蚜蟲防治效果及最佳使用濃度 1 材料與方法 1 1 供試藥劑 試驗藥劑 2 5 噻蟲嗪水分散粒劑 先正達 中國 有限公司 對照藥劑 lO L t 蟲啉可濕性粉劑 江蘇克勝農(nóng)藥有限公司 1 2 調(diào)查對象 包括中華忍冬圓尾蚜A m p h i c e r c i d u ss i n i l o n i c e r i c o l aZ h a n g 和胡蘿卜微管蚜 S e m i a p h h e r a c 彪i T a k a h a s h i 1 3 試驗地點 分別于2 0 1 3 和2 0 1 4 年在中國醫(yī)學科學院藥用植物研究所金銀花試驗地布置田間 試驗 兩年的小區(qū)設(shè)計相同 金銀花品種為四季花 2 0 1 4 年在北京市植物保護站順義 金銀花試驗地實施田間試驗 金銀花品種為大毛花 兩處試驗地均栽種金銀花多年 之前未噴施過噻蟲嗪 萬方數(shù)據(jù) 國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 1 4 試驗處理 設(shè)2 5 噻蟲嗪水分散粒劑5 0 0 0 倍液 A 組 總有效成分量是5 0m g L 2 5 噻蟲嗪水分散粒劑1 0 0 0 0 倍液 B 組 總有效成分量是2 5m g L 2 5 噻蟲嗪水分 散粒劑1 5 0 0 0 倍液 c 組 總有效成分量是1 6 7m g L 參考陳美艷 1 2 2 1 孫楠 1 2 3 1 劉清浩等 1 2 4 1 選用對蚜蟲防治效果最佳的1 0 1 1 1 L 蟲啉可濕性粉劑2 0 0 0 倍液 D 組 作為對照藥劑處理 其總有效成分量是5 0m g L 一 以清水作為空白對照 E 組 每個處理3 次重復 見表2 不同處理間設(shè)保護行 每個處理調(diào)查1 5 株 每株金銀 花在東 西 南 北 中5 個方位隨機選取長約3 0c m 的枝條調(diào)查蚜蟲數(shù)量 并掛牌 標記 表2 田間試驗不同藥劑處理 T a b l e 2D i f f e r e n tp e s t i c i d et r e a t m e n to ff i e l dt e s t 分別于2 0 1 3 年5 月2 4 日 2 0 1 4 年5 月1 2 日 5 月1 3 日噴藥 每株均勻噴3 0 0m L 用藥一次 先噴清水對照組 然后由低到高噴噻蟲嗪藥劑 清洗噴霧器后噴灑吡蟲啉 藥劑 用藥當天均晴好 微風 2 0 1 3 年分別于用藥1 3 5 7 1 0d 后調(diào)查枝條上 的蟲口數(shù) 2 0 1 4 年有所調(diào)整 分別于用藥1 3 7 1 0 1 4d 后調(diào)查枝條上的蟲口數(shù) 同時觀察金銀花植株生長是否異常 分別計算蟲口減退率和防治效果 調(diào)查結(jié)果用鄧 肯氏新復極差 D M R T 法進行統(tǒng)計分析 1 2 5 1 2 刀 計算公式如下 蟲口減退率 型嚆鏟棚 防治效呆c 竺堡塑景號萼導喜云詈菩嚳 l 璽O O 一珂照擔里U 藏退畢 2 6 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 2 結(jié)果與分析 2 1 不同藥劑處理對金銀花的安全性 田間調(diào)查發(fā)現(xiàn) 藥劑處理后金銀花的株形 葉色 花蕾 生長狀況等均與空白對 照基本一致 未發(fā)現(xiàn)藥害現(xiàn)象 說明2 5 噻蟲嗪水分散粒劑可用于金銀花蚜蟲的防治 供試濃度及使用劑量不會影響金銀花正常生長及 2 22 0 1 3 年2 5 噻蟲嗪水分散粒劑對金銀花蚜蟲的防治效果 調(diào)查發(fā)現(xiàn) 2 5 噻蟲嗪水分散粒劑對金銀花蚜蟲具有良好的防治效果 見表3 圖9 用藥1d 后 各藥劑處理對金銀花蚜蟲的防治效果均低于7 0 說明2 5 噻蟲 嗪水分散粒劑的速效性不明顯 用藥3d 后 各藥劑處理對金銀花蚜蟲的防治效果均 明顯增加 用藥5d 后 各處理藥劑的防治效果與用藥3d 后的結(jié)果區(qū)別不明顯 因 此 這也作為2 0 1 4 年重復試驗修改蟲口調(diào)查統(tǒng)計間隔天數(shù)的依據(jù) 用藥7 1 0d 后 只有2 5 噻蟲嗪水分散粒劑5 0 0 0 倍液的防治效果持續(xù)增加 高達9 5 以上 具有一 定的持效性 總體而言 2 5 噻蟲嗪水分散粒劑5 0 0 0 倍液的防治效果均明顯高于1 0 吡蟲啉可濕性粉劑2 0 0 0 倍液 而2 5 噻蟲嗪水分散粒劑1 0 0 0 0 倍液的防治效果與1 0 吡蟲啉可濕性粉劑2 0 0 0 倍液差別不大 方差比較分析均無顯著性差異 表3 不同處理藥劑對金銀花蚜蟲的防治效果 2 0 1 3 年 n 3 T a b l e3T h ec o n t r o le f f e c to f d i f f e r e n tp e s t i c i d et r e a t m e n tt oh o n e y s u c k l ea p h i di n2 0 1 3 n 3 注 與對照藥劑組 1 0 1 1 比蟲啉 比較 P 0 0 5 p 0 0 1 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 1 2 0 1 0 0 8 0 簧 哥 羹6 0 螺 4 0 2 0 0 13571 0 藥后天數(shù) d 2 5 1 鏖蟲嗪W G 5 0 0 0 倍液 2 5 J 噻蟲嗪W G I O O O O f 嗇液 一2 5 噻蟲嗪W G l 5 0 0 0 倍液 一l 0 吡蟲啉W P 2 0 0 0 倍液 圖9 不同藥劑處理對金銀花蚜蟲的防治效果比較 2 0 1 3 年 F i g 9T h ec o n t r o le f f e c tc o m p a r i s o no fd i f f e r e n tp e s t i c i d et r e a t m e n tt oh o n e y s u c k l ea p h i di n2 013 田間試驗是一種開放式的環(huán)境 因此會受到多方面的因素影響 包括可控的因素 如施藥量 數(shù)據(jù)統(tǒng)計天數(shù) 小區(qū)設(shè)計等 和不可控的因素 如氣候和天氣狀況等 因此僅僅一年的實驗數(shù)據(jù)不能夠說明農(nóng)藥的防治效果 因此本課題組設(shè)計了第二年的 重復實驗 同時 考慮到金銀花的種類差異 因此增加了北京市植保站順義金銀花基 地大毛花種類的田間藥效試驗 通過2 0 1 3 年的試驗結(jié)果 考慮到用藥后第5 d 蚜蟲的 藥劑反應不具有特點 試驗結(jié)果與第3 d 接近 因此取消用藥后第5 d 的蟲口統(tǒng)計 增 加第1 4 d 的蟲口統(tǒng)計 借以說明對農(nóng)藥的長效性 2 3 2 0 1 4 年2 5 噻蟲嗪水分散粒劑對金銀花蚜蟲的防治效果 2 3 12 0 1 4 年藥用植物研究所田間試驗結(jié)果 根據(jù)2 0 1 4 年對中國醫(yī)學科學院藥用植物研究所金銀花試驗基地的調(diào)查結(jié)果 見 表4 圖1 0 用藥1d 后 蚜蟲的蟲口減退率較低 對金銀花蚜蟲的防治效果也相對 較低 與第一年的試驗結(jié)果較為接近 說明2 5 噻蟲嗪水分散粒劑的速效性不明顯 用藥3d 后各藥劑處理對金銀花蚜蟲的蟲口減退率以及防治效果均有所增加 且用藥 7d 后 金銀花蚜蟲的蟲口減退率明顯增加 防治效果均明顯呈上升趨勢 說明2 5 2 8 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 噻蟲嗪水分散粒劑的各處理在用藥7 d 后能較明顯的發(fā)揮作用 當用藥1 0d 1 4d 后 農(nóng)藥的作用發(fā)揮到了極大的作用 2 5 噻蟲嗪水分散粒劑5 0 0 0 倍液的防治效果高達 9 7 明顯高于l O l L t 蟲啉可濕性粉劑2 0 0 0 倍液 方差分析結(jié)果顯示 2 5 噻蟲嗪水 分散粒劑各濃度藥劑處理與1 0 吡蟲啉可濕性粉劑2 0 0 0 倍液在金銀花蚜蟲的防治效 果上存在顯著或極顯著差異 同時 由圖表可以看出 2 5 噻蟲嗪水分散粒劑5 0 0 0 1 0 0 0 0 倍液 對金銀花蚜 蟲的減退率和防治效果均符合化學防治的藥效要求 滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中對植株的保護 值 因此通過在藥用植物研究所金銀花試驗基地兩年的試驗可以得出 2 5 噻蟲嗪水 分散粒劑適用于金銀花四季花品種的蚜蟲防治 且在本藥劑5 0 0 0 1 0 0 0 0 倍液時的防 治效果較好 譽 母 較 延 拯 371 01 4 藥后天數(shù) d 5 噻蟲嗪W G 5 0 0 0 倍液 5 噻蟲嗪W G l0 0 0 0 倍液 5 噻蟲嗪W G l 5 0 0 0 倍液 o n l t 蟲啉W P 2 0 0 0 倍液 圖1 0 小I 司藥劑處理對金銀花蚜蟲的防治效果比較 2 0 1 4 藥植所 F i g 10T h ec o n t r o le f f e c tc o m p a r i s o no fd i f f e r e n tp e s t i c i d et r e a t m e n tt oh o n e y s u c k l ea p h i di n2 0 1 4a t I M P L A D 2 3 22 0 1 4 年北京市植物保護站田間試驗結(jié)果 根據(jù)2 0 1 4 年對北京市植物保護站金銀花試驗基地的調(diào)查結(jié)果 見表5 圖1 1 用藥1d 后各處理的蟲口減退率和防治效果也是相對較低 部分藥劑見到蟲口增加的 現(xiàn)象 當用藥3d 后 2 5 噻蟲嗪水分散粒劑5 0 0 0 倍液 1 0 0 0 0 倍液蟲口減退率達到 8 0 以上 且3 種處理對金銀花蚜蟲的平均防治效果均達8 0 以上 用藥7d 1 0d O O O O O O 0 2 0 8 6 4 2 萬方數(shù)據(jù) o n olo ov釓 呂 ov 鐸丑 菩甚薔摹o v冪抵氍靛岬 爆 一N 刊 c 寸一 刊 a H C 卜 n H刊 價 o 一刊 厶n o n N卜 寸一刊 卜 nn n 心 寸一 o o o N 嗲善 日菩裝o H Q 一刊寸u 0西 口n o刊 口 寸 一刊寸 卜心 小 卜n 寸n 岔 口價 刊 o 卜一 寸坩 諺 o n 一刊nq卜口 n n n n 卜N N Q 寸N 9書 價 9卜 Nn 卜刊 西 卜 岔 0刊N寸 西 心 岔寸c 1 寸卜岔N N 岔 nN n刊卜卜 岔峪 鼉 卜 寸州西o n卜 o 0 州 N n卜 寸卜 寸no N 心o o 0 H n n 刊寸o 卜寸 n寸 I刊卜o on n節(jié)N 刊寸n N n n nn 8 n o 0 0 2o o o o o o o 價 o 鑒 q 瞥裝價N 鋈瓣喇 裝 褂贈 鋈爵掣 裝 斛嚶 裝 較簽H輜 裝 ?？鳫巡 裝 狡蕊目延 摹 較邃肖巡 鋈較邃目輜 鱔 甚 口弭 鱔口珥 口弭 蕁H 哩蕊 p 0 崾黼 乏怛黼 p C 妲梳 p l 嶇黼 裝 瓣贈 鱔 日 纂逛瀵樓 冪哥張 一nic Q l d z 一奄 寸一o c 勺一I n百 一 u罩 xoco乙I o pc I 鬈一時 基o 一u一 oQ cokg一嘭oo 臻 一o lpLloo o 二白 大白 金花 銀花 但 幼蕾的質(zhì)量不穩(wěn)定 性狀欠佳而且產(chǎn)量小 生產(chǎn)上亦選取二白期花蕾 因此 本實驗 取二白期花蕾為實驗材料 且在第一茬花 第一茶花占年產(chǎn)量的6 0 同時也是蚜蟲 為害盛期 3 1 1 4 5 1 4 6 1 材料與方法 1 1 儀器與藥劑 1 1 1 實驗儀器 W a t e r s 2 6 9 5 型高效液相色譜儀 2 9 9 6 紫外檢測器 色譜柱 A g i l e n tT C C 1 8 4 6 m m 2 5 0I i l l i l 5l a m 高速離心機 T G l 6 M W K Q 2 5 0 D E 超聲波清洗器 昆山市 超聲儀器有限公司 電子分析天平 F A 2 0 0 4 超純水機 M i l l i Q 抽濾瓶 容量 瓶 具塞三角瓶 棕色量瓶 中藥粉碎機 D F T 1 0 0 恒溫烘箱 背負式手動噴霧器 市下S X L K l 6 1 1 2 實驗藥劑 綠原酸 木犀草苷標準品 純度9 9 O 中國藥品生物制品檢定所 2 5 噻蟲嗪 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 水分散粒劑 先正達 中國 投資股份有限公司 甲醇 乙腈 色譜純 甲醇 磷酸 乙醇 冰醋酸 分析純 實驗用水均為超純水 1 2 田間試驗設(shè)計 分別于2 0 1 3 年 2 0 1 4 年在中國醫(yī)學科學院藥用植物研究所試驗基地進行田間試 驗 設(shè)每個小區(qū)1 5 株金銀花 每組處理3 次重復 不同處理間設(shè)有保護行 小區(qū)間 隨機排列 田間施藥期間時刻關(guān)注田間植株及天氣變化情況 并做記錄 共設(shè)推薦劑量組 9 0g h m 2 高劑量組 1 3 5g l n 之 和空白對照組 每個劑 量設(shè)施藥1 次 每株金銀花均勻噴灑相應處理藥劑3 0 0m L 分別于施藥后的2h 1 3 5 7 1 0 1 4 2 1d 進行隨機多點取樣 分別位于金銀花植株的前 后 左 右 上 中 下等不同方位點 樣品經(jīng)逐步升溫法烘干后于 2 0 貯存?zhèn)溆?1 3 綠原酸含量測定方法學考察 1 3 1 對照品溶液制備 精密稱取綠原酸對照品5 1m g 置5 0m L 棕色量瓶中 加5 0 甲醇溶液溶解并 稀釋至刻度 搖勻 制成每l m L 含1 0 2 I t g 的溶液 即得 4 保存?zhèn)溆?1 3 2 金銀花綠原酸樣品溶液制備 金銀花樣品過四號篩 精密稱定金銀花樣品的粉末O 5 0 0 0 9 置具塞三角瓶中 精密加入5 0 甲醇溶液5 0m L 稱定質(zhì)量 超聲處理 功率2 5 0W 頻率3 5k H z 3 0 m i n 放冷 再稱定質(zhì)量 用5 0 甲醇補足減失的重量 搖勻 濾過 精密量取續(xù)濾 液5m L 置2 5m L 棕色量瓶中 加5 0 甲醇至刻度 搖勻 即得 4 保存?zhèn)溆?1 3 3 色譜條件 色譜柱 A g i l e n tT C C 1 8 4 6m i n x2 5 0I l l l l 5 m 檢測波長 3 2 7n n l 進樣 量 1 0 此 流動相 乙腈 0 4 磷酸溶液 1 3 8 7 流速 1 0m L m i n 進樣測定 按外標峰面積法計算綠原酸的含量 色譜圖見圖1 7 A 一一 一一一k 一一 一 一一L 3 他 們 9 54 8 n 偽毗6 砂 j P h J 4 3r Z丁 萬方數(shù)據(jù) 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士學位論文 B 2 0 04 0 06 0 08 0 01 0 0