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第一次微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作及微生物接種技術(shù)細(xì)菌革蘭氏染色法第二次細(xì)菌芽孢及莢膜染色觀察第三次細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性觀察及細(xì)菌鞭毛染色法第四次常見(jiàn)放線菌及霉菌觀察 一 微生物接種技術(shù)一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)微生物接種工具的使用 掌握無(wú)菌操作方法 建立有菌概念 二 實(shí)驗(yàn)原理在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)或科研生產(chǎn)中 要經(jīng)常地把一定種類(lèi)的微生物菌種接種或移植到新鮮培養(yǎng)基中 由于我們接種的微生物都是純種的 所以接種工作都必須在無(wú)菌環(huán)境下 在無(wú)菌室或超凈工作臺(tái) 進(jìn)行 并嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù) 利用接種工具 如接種環(huán) 接種鏟等 進(jìn)行菌種的移植 因此無(wú)菌操作是接種培養(yǎng)微生物的關(guān)鍵 三 實(shí)驗(yàn)用品接種環(huán)等接種工具 斜面培養(yǎng)基 酒精燈 酒精棉球四 實(shí)驗(yàn)步驟 1 接種工具的介紹接種環(huán) 接種鉤 接種針 接種圈 接種鋤 玻璃涂棒 其他接種工具 2 無(wú)菌操作要點(diǎn)1 要求建立 有菌概念 2 接種時(shí)要有一個(gè)潔凈的環(huán)境 整個(gè)操作過(guò)程必須在火焰旁進(jìn)行 3 接種環(huán) 棉塞一定要拿在手上 不能隨便亂丟 3 微生物接種技術(shù)1 斜面接種技術(shù)從斜面菌種將菌移接至另一斜面培養(yǎng)基的方法 叫做斜面接種 接種方法 A 接種前用酒精棉球擦凈桌面 B 將試管貼上標(biāo)簽 注明菌名 接種日期 接種人姓名等 然后用酒精棉球擦手消毒 C 點(diǎn)燃酒精燈以后 在火焰旁將每一支試管內(nèi)的棉塞稍微轉(zhuǎn)一下 使其松動(dòng) 以便在接種時(shí)易拔出 并將試管放在試管架上 放在接種臺(tái)的右前方 D 將菌種和斜面培養(yǎng)基的兩支試管 用大拇指和其他四指握在左手中 使中指位于兩試管之間的部分 斜向上 并使他們呈水平位置 也可將試管橫放在左手掌中央 用四個(gè)手指托住試管 大拇指壓在試管上 斜面向上 E 右手拿接種環(huán) 在火焰上將環(huán)的部分燒紅滅菌 環(huán)以上凡在接種可能進(jìn)入試管內(nèi)的部分 均應(yīng)通過(guò)火焰灼燒 見(jiàn)圖4 圖4接種環(huán)滅菌 以下操作 需要使管口靠近火旁F 用右手小指 無(wú)名指和手掌拔掉棉塞 G 以火焰灼燒管口 灼燒時(shí)應(yīng)不斷轉(zhuǎn)動(dòng)試管口 使試管口沾染的少量菌得以燒死 H 將燒過(guò)的接種環(huán)伸入菌種試管內(nèi) 先將環(huán)接觸沒(méi)有長(zhǎng)菌的培養(yǎng)基部分 使其冷卻 以免燒死被接種的菌體 然后輕輕接觸菌體 取出少許 慢慢將接種環(huán)抽出試管 圖5 注意盡量不要使環(huán)的部分碰釘子到管壁 取出后不可使環(huán)通過(guò)火焰 圖5從一個(gè)試管移種到另一試管 I 迅速將接種環(huán)在火焰旁伸進(jìn)另一試管 在斜面培養(yǎng)基上從底部劃線到頂部 但不要把培養(yǎng)基劃破 也不要使菌種沾染管壁 J 取出接種環(huán) 灼燒試管口 并在火焰旁將棉塞塞上 不要用試管去迎棉塞 以免試管在運(yùn)到時(shí)灌入不潔的空氣 K 將接種環(huán)在火焰上再灼燒滅菌 放回原出后 再騰出手來(lái)將棉塞塞緊 將新接種的斜面試管放在試管架上 L 接種后的斜面培養(yǎng)基 放在恒溫箱內(nèi)培養(yǎng) 2 液體接種方法3 穿刺接種方法
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