選修三高考題匯編(基因工程).doc

專題一 基因工程測(cè)試題1、（2011年江蘇卷）33（8分）請(qǐng)回答基因工程方面的有關(guān)問題：(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理 與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似（如右圖所示）。 圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有 引物A的DNA片段所占的比例為 。在第 輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條 脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段。(2)設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物（只標(biāo)注了部分堿基序列）都不合理（如下圖），請(qǐng)分別說明理由。 第1組： ； 第2組： 。(3) PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的 功能，這是因?yàn)?。(4)用限制酶EcoRV、Mbol單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長(zhǎng)度如下圖(1 kb 即1000個(gè)堿基對(duì))，請(qǐng)?jiān)诖痤}卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點(diǎn)。2、（11年北京卷）31.（16分）T-DNA可能隨機(jī)插入植物基因組內(nèi)，導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導(dǎo)擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下：種植野生型擬南芥，待植物形成花蕾時(shí)，將地上部分浸入農(nóng)桿菌（其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因）懸浮液中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子（稱為T1代）。（1）為促進(jìn)植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾，需要去除 ，因?yàn)楹笳弋a(chǎn)生的 會(huì)抑制側(cè)芽的生長(zhǎng)。（2） 為篩選出已轉(zhuǎn)化的個(gè)體，需將T代播種在含 的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，成熟后自交，收獲種子（稱為T代）。（3） 為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T代播種在含 的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。（4）經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與 植株進(jìn)行雜交，再自交 代后統(tǒng)計(jì)性狀分離比。（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測(cè)野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性 。（6）根據(jù)T-DNA的已知序列，利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增出被插入的基因片段。其過程是：提取 植株的DNA，用限制酶處理后，再用 將獲得的DNA片段連接成環(huán)（如右圖）以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取 作為引物進(jìn)行擴(kuò)增，得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。3、（2011年安徽卷）31.（21分）.（9分）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用_酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_和_之間。(3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_和_。(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。4、（11天津理綜卷）某致病基因h位于X染色體上，該基因和正常基因H中的某一特定序列BclI酶切后，可產(chǎn)生大小不同的片段（如圖1，bp表示堿基對(duì)），據(jù)此可進(jìn)行基因診斷。圖2為某家庭病的遺傳系譜。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）A h基因特定序列中Bcl 1酶切位點(diǎn)的消失是堿基序列改變的結(jié)果B II-1的基因診斷中只出現(xiàn)142bp片段，其致病基因來自母親C II-2的基因診斷中出現(xiàn)142bp，99bp和43bp三個(gè)片段，其基因型為XHXhD II-3的丈夫表現(xiàn)型正常，其兒子的基因診斷中出現(xiàn)142bp片段的概率為1/2.5、（11年四川卷）北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是（ ）A過程獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測(cè)序B多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，C過程構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)6、（11年浙江卷）ada（酸脫氨酶基因）通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）A. 每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒 B. 每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn) C. 每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)ada D. 每個(gè)人的ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子7、（11年重慶卷）31. （16分）擬南芥是遺傳學(xué)研究的模式植物，某突變體可用于驗(yàn)證相關(guān)的基因的功能。野生型擬南芥的種皮為深褐色（TT），某突變體的種皮為黃色（tt）,下圖是利用該突變體驗(yàn)證油菜種皮顏色基因(Tn)功能的流程示意圖。（1）與擬南芥t基因的mRNA相比，若油菜Tn基因的mRNA中UGA變?yōu)椋淠┒诵蛄谐蔀椤啊?，則Tn比多編碼個(gè)氨 基酸（起始密碼子位置相同，、為終止密碼子）。（）圖中應(yīng)為。若不能在含抗生素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，則原因是 .若的種皮顏色為 ，則說明油菜基因與擬南芥T基因的功能相同。（3）假設(shè)該油菜基因連接到擬南芥染色體并替換其中一個(gè)t基因，則中進(jìn)行減數(shù)分裂的細(xì)胞在聯(lián)會(huì)時(shí)的基因?yàn)?；同時(shí)，的葉片卷曲（葉片正常對(duì)葉片卷曲為顯性，且與種皮性狀獨(dú)立遺傳），用它與種皮深褐色、葉片正常的雙雜合體擬南芥雜交，其后代中所占比列最小的個(gè)體表現(xiàn)為 ；取的莖尖培養(yǎng)成16顆植珠，其性狀通常 （填 不變或改變）。（4）所得的轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型擬南芥 （填是或者不是）同一個(gè)物種。8、（11年廣東卷）27.（16分） 登革熱病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人時(shí)將病毒傳染給人，可引起病人發(fā)熱、出血甚至休克?？茖W(xué)家用以下方法控制病毒的傳播。（1）將S基因轉(zhuǎn)入蚊子體內(nèi)，使蚊子的唾液腺細(xì)胞大量表達(dá)S蛋白，該蛋白可以抑制登革熱病毒的復(fù)制。為了獲得轉(zhuǎn)基因蚊子，需要將攜帶S基因的載體導(dǎo)入蚊子的 細(xì)胞。如果轉(zhuǎn)基因成功，在轉(zhuǎn)基因蚊子體內(nèi)可檢測(cè)出 、 和 。（2）科學(xué)家獲得一種顯性突變蚊子（AABB）。A、B基因位于非同源染色體上，只有A或B基因的胚胎致死。若純合的雄蚊（AABB）與野生型雌蚊（aabb）交配，F(xiàn)1群體中A基因頻率是 ，F(xiàn)2群體中A基因頻率是 。（3）將S基因分別插入到A、B基因的緊鄰位置（如圖11），將該純合的轉(zhuǎn)基因雄蚊釋放到野生群體中，群體中蚊子體內(nèi)病毒的平均數(shù)目會(huì)逐代 ，原因是 。9、（11年山東卷）35.（8分） 人類疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示。（1）卵母細(xì)胞除從活體輸卵管中采集外，還可以從處死的雌鼠_中獲取。（2）圖中的高血壓相關(guān)基因作為_，質(zhì)粒作為_,二者需用_切割后連接成重組載體，該過程與質(zhì)粒上含有_有關(guān)。 （3）子代大鼠如果_和_，即可分別在水平上說明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型。（4）在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是_、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。10、（10浙江卷）在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過程中，下列操作錯(cuò)誤的是（ ）A. 用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草茶葉病毒的核酸B. 用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C. 將重組DNA分子導(dǎo)入原生質(zhì)體D. 用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞11、（10全國2）下列敘述符合基因工程概念的是（ ）AB淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞中含有B淋巴細(xì)胞中的抗體基因B將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株C用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株D自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上12、（10廣東卷）新技術(shù)的建立和應(yīng)用對(duì)生物學(xué)發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用匹配正確的是（ ）A. PCR技術(shù)擴(kuò)增蛋白質(zhì) B.雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體 C.光學(xué)顯微鏡觀察葉綠體的基粒 D.花粉離體培養(yǎng)培育單倍體植物13、（10浙江卷）4.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A. 培養(yǎng)保留接觸抵制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B. 克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程上多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變C. 二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D. 惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行付代培養(yǎng)14、（10福建卷）32生物現(xiàn)代生物科技專題(10分)紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病由于天然EP0來源極為有限，目前臨床使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO）期間要生產(chǎn)流程如右圖（1）圖中所指的是 技術(shù)。（2）圖中所指的物質(zhì)是 ，所指的物質(zhì)是 。（3）培養(yǎng)重組CHO 細(xì)胞時(shí)，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞嚴(yán)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換 。（4）檢測(cè) rhEPO外活性需用抗rhEPO單克隆抗體。分泌單克隆抗體的 細(xì)胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成。15、（10天津卷）7.（26分） .（14分）下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性金銀，BamHI、HindIII、SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答：（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進(jìn)行。（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是 （填字母代號(hào)）。A.啟動(dòng)子 B. tetR C.復(fù)制原點(diǎn) D. ampR（3）過程可采用的操作方法是 （填字母代號(hào)）。A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B. 大腸桿菌轉(zhuǎn)化 C.顯微注射 D. 細(xì)胞融合（4）過程可采用的生物技術(shù)是 。（5）對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過程可獲得多個(gè)新個(gè)體。這利用了細(xì)胞的 性。（6）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用 （填字母代號(hào)）技術(shù)。A.核酸分子雜交 B. 基因序列分析 C.抗原抗體雜交 D. PCR16、（10江蘇卷）下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因植物的敘述。正確的是 A轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，可能通過花粉傳人環(huán)境中 B轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物不會(huì)導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因擷宰增加 C動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)人植物后不能表達(dá) D如轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，則不存在安全性問題17、（10江蘇卷）27（8分）下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圈l、圈2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問題： （1）一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma 切割前后，分別含有 個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。 （2）若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的Sma酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越 。 （3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna 切割，原因是 。 （4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH 和Hind 兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止 。 （5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入 酶。 （6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。 （7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測(cè)。18、（10海南卷）26（18分）選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題請(qǐng)回答胚胎工程和基因工程方面的問題：（1）應(yīng)用胚胎工程技術(shù)可以培育出“試管?！?。試管牛的培育需經(jīng)過體外受精、以及在母體中發(fā)育和產(chǎn)出等過程。（2）在“試管?！钡呐嘤^程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對(duì)精子進(jìn)行處理，使其。另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，該時(shí)期在顯微鏡下可觀察到次級(jí)卵母細(xì)胞和。（3）通常奶牛每次排出一枚卵母細(xì)胞，采用激素處理可使其一次排出多枚卵母細(xì)胞，常使用的激素是。（4）利用基因工程可以獲得轉(zhuǎn)基因牛，從而改良奶牛的某些性狀?；蚬こ痰乃膫€(gè)基本操作步驟是、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、和。若要獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動(dòng)子、和復(fù)制原點(diǎn)等。將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞所采用的方法是（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法），為獲得能大量產(chǎn)生人干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，該基因表達(dá)載體應(yīng)導(dǎo)入的受體細(xì)胞是（受精卵、乳腺細(xì)胞）。19、（09安徽卷）2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個(gè)融合基因，再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是A追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過程B追蹤目的基因插入到染色體上的位置C追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布D追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu) 20、（09浙江卷）下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是A目的基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)、植物或微生物B限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)21、（09廣東理基）錢永健先生因在研究綠色熒光蛋白方面的杰出成就而獲2008年諾貝爾獎(jiǎng)。在某種生物中檢測(cè)不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測(cè)到綠色熒光。由此可知A該生物的基因型是雜合的B該生物與水母有很近的親緣關(guān)系C綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá)D改變綠色熒光蛋白基因的1個(gè)核苷酸對(duì)，就不能檢測(cè)到綠色熒光22、（09重慶卷）下表有關(guān)基因表達(dá)的選項(xiàng)中，不可能的是基因表達(dá)的細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物A細(xì)菌抗蟲蛋白基因抗蟲棉葉肉細(xì)胞細(xì)菌抗蟲蛋白B人酪氨酸酶基因正常人皮膚細(xì)胞人酪氨酸酶C動(dòng)物胰島素基因大腸桿菌工程菌細(xì)胞動(dòng)物胰島素D兔血紅蛋白基因兔成熟紅細(xì)胞兔血紅蛋白23、（09天津卷）8（30分）水稻種子中70的磷以植酸形式存在。植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動(dòng)物的抗?fàn)I養(yǎng)因子，同時(shí)，排出的大量磷進(jìn)入水體易引起水華。（1）磷元素除了形成植酸外，還可以出現(xiàn)在下列_分子或結(jié)構(gòu)中（多選）。A.核糖B.ATP C.核糖體D.核膜（2）種植蘆葦能有效抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與引起水華的藻類關(guān)系是_。（3）植酸酶可降解植酸，在谷物類飼料中添加植酸酶可提高飼料的_ 利用率。（4）酵母菌中植酸的活性較高。下圖是從不同類型酵母菌的發(fā)酵液中提取植酸酶的工藝流程。據(jù)圖回答：植酸酶_（/）屬于分泌蛋白。若植酸酶和的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在_。提純的植酸酶需做活性條件測(cè)定。右圖為測(cè)定結(jié)果。圖中的自變量可為_(答一種)；因變量可以通過測(cè)定_來表示。（5）為從根本上解決水稻中的高植酸問題，可將植酸酶基因?qū)胨荆嘤椭菜徂D(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。據(jù)圖回答：圖中基因組文庫_（小于/等于/大于）cDNA文庫。B過程需要的酶是_；A、C過程中_（可以/不可以）使用同一種探針篩選含目的基因的菌株。目的基因和除從構(gòu)建的文庫中分離外，還可以分別利用圖中_和_為模板直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增，該過程中所用酶的顯著特點(diǎn)是_。（6）已獲得的轉(zhuǎn)植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下圖為選育低植酸抗病水稻品種的過程。圖中兩對(duì)相對(duì)性形狀分別由兩對(duì)基因控制，并獨(dú)立遺傳。 采用上圖育種過程，需從_代開始篩選，經(jīng)篩選淘汰后，在選留的植株中低植酸抗病純合體所占的比例是_。選留植株多代自交，經(jīng)篩選可獲得低植酸抗病性狀穩(wěn)定的品性。24、（09福建卷）32.（10分） 轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四種限制酶切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答： （1）構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶 ，對(duì) 進(jìn)行切割。（2）培養(yǎng)板中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有 ，作為標(biāo)記基因。（3）香蕉組織細(xì)胞具有 ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的 。25、（09重慶卷）31.（16分）小鼠基因敲除技術(shù)獲得2007年諾貝爾獎(jiǎng)，該技術(shù)采用基因工程、細(xì)胞工程、雜交等手段使小鼠體內(nèi)的某一基因失去功能，以研究基因在生物個(gè)體發(fā)育和病理過程中的作用。例如現(xiàn)有基因型為BB的小鼠，要敲除基因B，可先用體外合成的突變基因b取代正常基因B，使BB細(xì)胞改變?yōu)锽b細(xì)胞，最終培育成為基因敲除小鼠。（1）基因敲除過程中外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可利用重組質(zhì)粒上的 檢測(cè)。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，則可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的 被激活，使小鼠細(xì)胞發(fā)生癌變。（2）通過基因敲除，得到一只AABb小鼠。假設(shè)棕毛基因A、白毛基因a、褐齒基因B和黃齒基因b均位于常染色體上，現(xiàn)要得到白毛黃齒新類型小鼠，用來與AABb小鼠雜交的純合親本的基因型是 ，雜交子代的基因型是 。讓F1代中雙雜合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中帶有b基因個(gè)體的概率是 。不帶B基因個(gè)體的概率是 。（3）在上述F1代中只考慮齒色這對(duì)性狀，假設(shè)這對(duì)性狀的遺傳屬X染色體伴性遺傳，則表現(xiàn)黃齒個(gè)體的性別是 ，這一代中具有這種性別的個(gè)體基因是 。26、（09江蘇卷）34（7分）蘇云金桿菌（Bt）能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖（為抗氨芐青霉素基因），據(jù)圖回答下列問題。（1）將圖中的DNA用Hind、BamH完全酶切后，反應(yīng)管中有 種DNA片段。（2）圖中表示 Hind與BamH酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得 種重組質(zhì)粒；如果換用Bst l與BamH酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得 種重組質(zhì)粒。 （3）目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的 。（4）圖中的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的TDNA導(dǎo)人植物細(xì)胞，并防止植物細(xì)胞中 對(duì)TDNA的降解。（5）已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對(duì)人類的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞 。 （6）生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的 基因頻率的增長(zhǎng)速率。27.(08山東)35【生物現(xiàn)代生物技術(shù)專題】為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。（1）獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的 處，DNA連接酶作用于 處。（填“a”或“b”）（2） 將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和 法。（3）由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用 技術(shù)。該技術(shù)的核心是 和 。（4）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的 作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要用 方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。 28.(08海南)26（18分）（選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題）圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn)，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動(dòng)因子，T為終止子，ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。（1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后，其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有 、 、 三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行 。（2）用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)的培養(yǎng)基中，能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 。（3）目的基因表達(dá)時(shí)，RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是 ，其合成的產(chǎn)物是 。（4）在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時(shí)應(yīng)選用的酶時(shí) 。29.(08江蘇生物)32（8分）將動(dòng)物致病菌的抗原基因?qū)腭R鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動(dòng)物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過程相關(guān)的圖和表。請(qǐng)根據(jù)以上圖表回答下列問題。（1）在采用常規(guī)PCR方法擴(kuò)增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶，其最主要的特點(diǎn)是 。（2）PCR過程中退火（復(fù)性）溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來設(shè)定。表1為根據(jù)模板設(shè)計(jì)的兩對(duì)引物序列，圖2為引物對(duì)與模板結(jié)合示意圖。請(qǐng)判斷哪一對(duì)引物可采用較高的退火溫度？_。（3）圖1步驟所用的DNA連接酶對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？ 。（4）為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，圖1步驟轉(zhuǎn)基因所用的細(xì)菌B通常為 。（5）對(duì)符合設(shè)計(jì)要求的重組質(zhì)粒T進(jìn)行酶切，假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開，請(qǐng)根據(jù)圖1中標(biāo)示的酶切位點(diǎn)和表2所列的識(shí)別序列，對(duì)以下酶切結(jié)果作出判斷。采用EcoR和Pst酶切，得到_種DNA片斷。采用EcoR和Sma酶切，得到_種DNA片斷。選修三高考試題匯編專題一 基因工程 參考答案1、（2011年江蘇卷）33（8分） (1)15/16 三 (2)引物I和引物局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效 引物I自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效(3) DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié) 合到雙鏈DNA片段的引物鏈上(4)見右圖2、（11年北京卷）答案：31（16分）（1）頂芽 生長(zhǎng)素 （2）（一定濃度的）除草劑 （3）（一定濃度的）鹽（4）野生型 1 （5）降低 （6）突變體 DNA連接酶 B、C3、（2011年安徽卷）31.（21分）.（9分）答案：（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） （2）啟動(dòng)子 終止子 （3）TaqDNA聚合酶 對(duì)干擾素基因特異性的DNA引物對(duì) （4）增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積4、D 5、B 6、C 7、（11年重慶卷）答案：31.（16分）（1）2 （2）重組質(zhì)粒（重組DNA分子） 重組質(zhì)粒未導(dǎo)入 深褐色（3）TnTntt； 黃色正常、黃色卷曲； 不變 （4）是8、（11年廣東卷）27、答案：（1）受精卵 S基因、由S基因轉(zhuǎn)錄的mRNA S蛋白 （2）50% 60% （3）減少 S基因表達(dá)的S蛋白會(huì)抑制登革熱病毒復(fù)制9、（11年山東卷）答案：（1）卵巢（2）目的基因 載體 同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶） 限制酶切割位點(diǎn)（3）檢測(cè)到體內(nèi)有相關(guān)蛋白 出現(xiàn)高血壓 （4）體外受精10、A 11、B 12、BD 13、D14、（10福建卷）32答案：（1）PCR （2）mRNA rhEPO （3）培養(yǎng)液 （