兒童腸道菌群生理功能及相關(guān)疾病的研究進(jìn)展.doc

腸道菌群生理功能及相關(guān)兒童疾病的研究進(jìn)展腸道是體內(nèi)細(xì)菌定植的主要場(chǎng)所，胃腸道棲息的細(xì)菌大約重1000g，大約30個(gè)屬，400500多種，總體數(shù)量在1014以上，比人體細(xì)胞的10倍還多；腸道定植的細(xì)菌具有數(shù)量巨大、多樣化、復(fù)雜性和動(dòng)態(tài)性的特點(diǎn)，腸道菌群（intestinal microflora）是目前人體微生態(tài)學(xué)研究關(guān)注的核心。隨著認(rèn)識(shí)的深入和分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用，證實(shí)腸道菌群對(duì)兒童重要的生理功能諸如免疫、代謝、營(yíng)養(yǎng)等的發(fā)育成熟過(guò)程起著決定性的作用，與感染性疾病、腸道慢性炎癥性疾病、過(guò)敏性疾病、自身免疫性疾病及代謝性疾病等密切相關(guān)。本文對(duì)近年來(lái)兒童腸道菌群生理功能及相關(guān)兒童疾病的研究新進(jìn)展進(jìn)行綜述。1腸道菌群的生理功能 腸道微生態(tài)承載著人類(lèi)后天獲得基因，參與人類(lèi)正常生理和疾病病理過(guò)程，與人體健康密不可分。研究表明腸道菌群能防御感染與增強(qiáng)腸道屏障功能，對(duì)外來(lái)致病菌及條件致病菌的入侵具有較強(qiáng)的生物拮抗作用；腸道菌群可合成維生素并促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)素吸收，刺激宿主免疫器官及其功能的發(fā)育；腸道菌群所生成的氨、硫化氫、胺、毒素等代謝產(chǎn)物是有害的，也促使機(jī)體完善免疫機(jī)制以清除之。近年來(lái)在腸道菌群對(duì)機(jī)體代謝和免疫作用方面特別引起關(guān)注。1.1 腸道菌群與營(yíng)養(yǎng)代謝功能腸道菌群在食物的消化吸收方面發(fā)揮著重要作用。來(lái)自歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)腸道菌群有三種不同的優(yōu)勢(shì)族群類(lèi)型，其中Bacteroides（擬桿菌屬）擅長(zhǎng)分解碳水化合物，而Prevotella（普雷沃菌屬）則傾向于分解腸道黏液，和Ruminococcus（瘤胃球菌屬）會(huì)幫助細(xì)胞吸收糖類(lèi)1，都是有助于食物的消化吸收。大量證據(jù)表明腸道菌群能競(jìng)爭(zhēng)性消耗致病菌的營(yíng)養(yǎng)素，促進(jìn)鈣、鎂和鐵等無(wú)機(jī)鹽的吸收，參與了機(jī)體多種等維生素的合成；更重要是參與蛋白質(zhì)、肽和氨基酸的代謝并具有改善脂質(zhì)代謝的作用：腸道菌群可利用特有的酶類(lèi) (如半乳糖苷酶等)分解未被上消化道水解吸收的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，生成乙酸、丙酸和酪酸等短鏈脂肪酸(SCFA)，后者既能作為能量底物被機(jī)體利用（如酪酸提供結(jié)腸上皮能量，乙酸和丙酸可隨門(mén)靜脈到達(dá)肝臟和外周器官，成為糖原和脂肪合成的底物），也能調(diào)控人體抗組氨酸脫乙酰酶基因表達(dá)發(fā)揮抗癌作用，對(duì)G蛋白耦合受體基因表達(dá)發(fā)揮作用進(jìn)而調(diào)控外周代謝器官脂肪合成2。在研究肥胖及其相關(guān)代謝性疾病的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)肥胖、糖尿病或者非酒精性脂肪肝的動(dòng)物或成人身上都伴隨著腸道菌群數(shù)量或組成的變化。動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)表明腸道擬桿菌屬增加會(huì)增加積聚和肥胖，嬰兒期腸道較高的脆弱擬桿菌和葡萄球菌的減少與學(xué)齡期較高體重指數(shù)有關(guān)3。Kalliomaki等4為了明確早期的腸道菌群是否與兒童肥胖相關(guān)，通過(guò)對(duì)25名超重的7歲兒童進(jìn)行前瞻性研究，發(fā)現(xiàn)與體質(zhì)量正常的同齡兒童相比，腸道雙歧桿菌減少，腸球菌增多。Furet等5分析了肥胖者行減肥手術(shù)前后糞便菌群變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)普拉梭菌術(shù)前含量較低，且與炎癥物質(zhì)呈負(fù)相關(guān)，術(shù)后該細(xì)菌保持增長(zhǎng)趨勢(shì)，與宿主攝入食物無(wú)關(guān)。Larsen等6通過(guò)熒光定量PCR檢測(cè)2型糖尿病患者腸道菌群發(fā)現(xiàn)厚壁菌屬、梭菌屬明顯減少，有更豐富的變形菌，且該菌屬與血糖水平成正相關(guān)，表明腸道菌群可能參與糖尿病的形成。腸道菌群可能通過(guò)影響能量吸收、脂肪代謝以及細(xì)菌內(nèi)毒素等途徑引發(fā)肥胖和代謝紊亂。隨著生活條件的改變，人類(lèi)生活習(xí)慣和飲食結(jié)構(gòu)也隨之改變，長(zhǎng)期高脂飲食導(dǎo)致能量過(guò)剩引起肥胖；高脂飲食可能與腸道菌群相互作用導(dǎo)致炎癥：高脂飲食改變了腸道菌群的結(jié)構(gòu)，腸內(nèi)雙歧桿菌減少，腸道通透性增加，腸上皮細(xì)胞合成乳糜顆粒增多，促進(jìn)脂多糖吸收和運(yùn)轉(zhuǎn)到靶組，引起游離脂肪酸水平升高及炎癥因子表達(dá)，導(dǎo)致糖尿病等代謝紊亂性疾病增多。Cani等7發(fā)現(xiàn)腸道雙歧桿菌數(shù)量明顯增多的大鼠，其內(nèi)臟、附睪和皮下脂肪含量都有明顯減少，與肥胖和糖尿病發(fā)病呈正相關(guān)的血漿促胰島素多肽的水平也顯著降低；雙歧桿菌還能夠促使腸道前體細(xì)胞向分泌細(xì)胞分化，使得血漿中的胰高血糖素樣肽1和胰高血糖素樣肽2水平明顯升高。肥胖患者腸道菌群結(jié)構(gòu)和發(fā)酵產(chǎn)物改變，引起一系列代謝過(guò)程變化，導(dǎo)致胰島素抵抗；結(jié)腸細(xì)菌發(fā)酵膳食纖維釋放SCFA，進(jìn)一步提高機(jī)體能量攝取，調(diào)控外周代謝器官的脂肪合成；腸道菌群結(jié)構(gòu)改變通過(guò)固有免疫機(jī)制導(dǎo)致腸粘膜屏障損傷和非酒精性脂肪肝等21。1.2腸道菌群與免疫功能 腸道菌群與腸粘膜構(gòu)成了人體最重要的外周免疫器官。維持腸道細(xì)菌與腸上皮穩(wěn)態(tài)的免疫機(jī)制：粘膜層、腸上皮抗菌多肽、漿細(xì)胞分泌的分泌性免疫球蛋白（sIgA）。SIgA是免疫系統(tǒng)發(fā)育的一個(gè)重要因素，SIgA表達(dá)對(duì)腸道菌群與宿主體內(nèi)平衡的建立以及對(duì)胃腸道菌群的免疫耐受有重要作用8。腸道正常菌群和食物傳播的病原微生物都是通過(guò)改變新生兒期Th2細(xì)胞的活性來(lái)增強(qiáng)SIgA介導(dǎo)腸表面屏障和促進(jìn)口服耐受，從而在日后形成細(xì)胞因子新的平衡9。樹(shù)突狀細(xì)胞是一種極其重要的免疫細(xì)胞，Latvala等10研究發(fā)現(xiàn)鼠李糖乳桿菌、雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌等均可刺激樹(shù)突狀細(xì)胞表達(dá)CD86和HEHLA-DR，促進(jìn)其成熟，但不同細(xì)菌促進(jìn)其分泌細(xì)胞因子不同。腸道菌群也調(diào)控著NK細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞、Treg細(xì)胞等T細(xì)胞亞群分化成熟11-13：腸道的革蘭氏(+)菌群是誘導(dǎo)IL-17分化成熟的刺激劑，絲狀片段菌(SFB)是誘導(dǎo)IL-17分化成熟的主要菌種，能增強(qiáng)小腸對(duì)病原菌鼠類(lèi)檸檬酸桿菌的拮抗；梭菌屬是誘導(dǎo)結(jié)腸粘膜表達(dá)Foxp3+ Treg細(xì)胞分化的功能菌群，改善結(jié)腸粘膜炎癥和IgE介導(dǎo)的過(guò)敏應(yīng)答；嬰兒雙歧桿菌能通過(guò)刺激樹(shù)突細(xì)胞促進(jìn)Treg細(xì)胞分化增殖。腸道細(xì)菌的代謝產(chǎn)物同樣參與免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)：Vinolo等14證實(shí)短鏈脂肪酸（SCFA）可影響白細(xì)胞向炎癥遷移和破壞病原微生物的能力，這種作用通過(guò)細(xì)胞因子 (TNF-, IL-2, IL-6, IL-10)、花生酸類(lèi)和細(xì)胞趨化因子的生成來(lái)實(shí)現(xiàn)。 已有證據(jù)表明腸道菌群促進(jìn)出生后腸道黏膜免疫系統(tǒng)和全身免疫系統(tǒng)的發(fā)育成熟，與日后發(fā)生過(guò)敏、肥胖和糖尿病等免疫相關(guān)性疾病有關(guān)。Olszak等15 研究者發(fā)現(xiàn)新生無(wú)菌鼠腸粘膜下層和肺組織蓄積大量NK細(xì)胞，提高了組織炎性應(yīng)答，提高了IBD和過(guò)敏癥的易感性，而植入腸道菌群，通過(guò)誘導(dǎo)CXCL16表達(dá)，抑制NK細(xì)胞在腸粘膜和肺組織蓄積，結(jié)論是初生早期的微生物暴露可限制NK細(xì)胞在腸粘膜和肺組織蓄積，調(diào)控宿主對(duì)IBD和過(guò)敏癥的易感性。腸道菌群與宿主免疫系統(tǒng)的相互作用既可以導(dǎo)致B細(xì)胞的損害而增加1型糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)，也可以通過(guò)細(xì)菌的脂多糖等引起代謝性炎癥16。2.菌群紊亂相關(guān)的兒童疾病腸道菌群與健康密切相關(guān)，菌群與人體之間保持動(dòng)態(tài)平衡能有效防止腸道內(nèi)細(xì)菌及內(nèi)毒素易位；當(dāng)正常的微生物群落受機(jī)體及外環(huán)境影響，微生態(tài)平衡遭到破壞可使人體致病。腹瀉病和慢性便秘是兒童常見(jiàn)消化道疾病，其與腸道菌群紊亂的關(guān)系及益生菌治療的有效性已廣為所知。壞死性小腸結(jié)腸炎以早產(chǎn)兒多見(jiàn)，早年的研究認(rèn)為腸道到正常菌群定植延遲是發(fā)病因素之一；最近的研究發(fā)現(xiàn)新生早產(chǎn)豬經(jīng)過(guò)抗生素處理NEC發(fā)生率顯著增加，提示抗生素使用與NEC有關(guān)17，而薈萃分析顯示給予胎齡小于34周體重低于1500 g的早產(chǎn)兒生后10天內(nèi)腸內(nèi)益生菌7天以上可減少30%的NEC發(fā)病率并減少死亡18。幽門(mén)螺桿菌(HP)感染可引起食管返流、胃炎、消化道潰瘍等疾病，也可導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)不良和生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，在年齡稍大兒童中較為常見(jiàn)，而發(fā)展中國(guó)家感染率更高；經(jīng)典的三聯(lián)根治療法雖可控制HP感染，也打破了腸道菌群的動(dòng)態(tài)平衡；研究證實(shí)益生菌盡管在增加兒童HP的根除率方面有爭(zhēng)議，但可糾正菌群失衡并減輕藥物治療的副作用19。 炎癥性腸?。↖BD）是一組原因不明的慢性非特異性胃腸道炎癥性疾病，包括克羅恩并和潰瘍性結(jié)腸炎，其發(fā)病原因尚不明確。Hviid等20進(jìn)行的前瞻性隊(duì)列研究結(jié)果表明抗生素應(yīng)用是導(dǎo)致兒童IBD發(fā)生的非常重要的環(huán)境因素。Sokol等21證實(shí)IBD患者腸道菌群中厚壁菌和擬桿菌的比例減少而變形菌比例增高。另有研究表明克羅恩的兒童腸道菌群存在雙歧桿菌和乳酸桿菌的降低22。 腸易激綜合征（IBS）指的是一組包括腹痛、腹脹、排便習(xí)慣改變和大便性狀異常、粘液便等表現(xiàn)的臨床綜合癥，持續(xù)存在或反復(fù)發(fā)作，是最常見(jiàn)的一種功能性腸道疾病；盡管IBS發(fā)病機(jī)制尚不清楚，腸道微生態(tài)失衡在腹瀉型和便秘型都是有關(guān)的：與健康人比較患者腸道菌群主要以乳酸菌屬、鏈球菌屬、瘤胃球菌屬和韋榮氏球菌屬占優(yōu)勢(shì)23；Saulnier等人24采用基因芯片檢測(cè)22例學(xué)齡期和青春期前的IBS兒童，與正常兒童相比IBS兒童擁有大量的變形菌，其中有經(jīng)常腹痛的還擁有一種特殊的菌種:Alistipes。嬰兒腸絞痛（Infantile Colic）也可以看做功能性腸道疾病，表現(xiàn)為嬰兒陣發(fā)性煩躁不安，極度痛苦喊叫，腹膨脹，排氣多，一般于生后24周發(fā)病，大多到34個(gè)月痊愈。還沒(méi)有學(xué)者對(duì)引起嬰兒腸絞痛的原因作出肯定的回答，可以確定與嬰兒消化道發(fā)育不完整有關(guān)。Savino等25研究了50例純母乳喂養(yǎng)的腸絞痛嬰兒，而給予羅伊氏乳桿菌干預(yù)后哭鬧時(shí)間明顯縮短，同時(shí)糞便中乳酸桿菌顯著增加而大腸桿菌及氨類(lèi)均有減少。乳糜瀉（coeliac disease），又稱麥膠性腸病，在北美、北歐、澳大利亞發(fā)病率較高，國(guó)內(nèi)很少見(jiàn)。發(fā)病高峰年齡主要是兒童與青年，在嬰幼兒主要表現(xiàn)為生長(zhǎng)遲緩、體重下降、嘔吐、腹瀉、腹痛、腹脹及易激惹?，F(xiàn)認(rèn)為發(fā)病是遺傳、免疫和麥膠飲食相互作用的結(jié)果，患者對(duì)含麥膠（俗稱面筋）的麥粉食物異常敏感，是一種Th1介導(dǎo)的免疫紊亂疾病。Palma等26研究有遺傳風(fēng)險(xiǎn)的嬰兒發(fā)現(xiàn)腸道有大量的脆弱擬桿菌和葡萄球菌，而雙歧桿菌spp及長(zhǎng)雙歧桿菌等數(shù)量較少。 肥胖和糖尿病等相關(guān)代謝性疾病的發(fā)病率在全球范圍呈直線上升趨勢(shì)，遺傳、環(huán)境、行為和心理社會(huì)因素已被證明與此類(lèi)疾病的形成有重要作用。最新研究證明存在于腸道的微生物是構(gòu)成肥胖的重要環(huán)境因素。母乳中含有豐富的雙歧桿菌，母乳喂養(yǎng)的嬰兒日后發(fā)生超重和肥胖的機(jī)率減少，母乳喂養(yǎng)的時(shí)間與超重的發(fā)生率成負(fù)相關(guān)；而母親孕期BMI、胎兒生長(zhǎng)方式以及嬰兒期使用抗生素等均與隨后童年時(shí)期的肥胖癥風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)26。肥胖和糖尿病患兒腸道菌群均有異常：最近一項(xiàng)研究證實(shí)哈薩克女性肥胖兒童腸道菌群 Bacteroidetes 減少，而擬桿菌門(mén)/厚壁門(mén)菌比例下降26；糖尿病患者腸道菌群中厚壁菌屬、梭菌屬明顯減少，變形菌更加豐富6。對(duì)138 例3周到一歲嬰兒的前瞻性研究顯示早期腸道富集脆弱擬桿菌而葡萄球菌較低與學(xué)齡前期的肥胖癥風(fēng)險(xiǎn)有相關(guān)3。Luoto等29發(fā)現(xiàn)孕期婦女添加乳酸桿菌和雙歧桿菌可以減少妊娠糖尿病和降低高體重嬰兒的出生風(fēng)險(xiǎn)。過(guò)敏性疾病是當(dāng)今世界重大衛(wèi)生學(xué)問(wèn)題，兒童常見(jiàn)疾病有濕疹、特異性皮炎、哮喘等，“衛(wèi)生學(xué)說(shuō)”是解釋過(guò)敏性疾病上升的重要機(jī)制，大多數(shù)學(xué)者認(rèn)同與“生活方式西方化”致腸道菌群減少有關(guān)，0-1歲應(yīng)用抗生素與兒童期哮喘、過(guò)敏性鼻炎、結(jié)膜炎及濕疹等過(guò)敏癥發(fā)生率增加顯著高度相關(guān)30。流行病學(xué)資料顯示過(guò)敏患兒較之非過(guò)敏兒童有較高水平的梭狀芽孢桿菌，而雙歧桿菌等相應(yīng)減少31；Bisgaard 32的課題組研究證實(shí)嬰兒期的腸道細(xì)菌多樣性降低與生后6年內(nèi)變應(yīng)性致敏、過(guò)敏性鼻炎和外周嗜酸細(xì)胞增高有關(guān)；Pelucchi等33人對(duì)懷孕期婦女或嬰兒生后早期給與益生菌，結(jié)果嬰兒期的特異性皮炎的發(fā)生率明顯降低。自閉癥（Autism）也稱孤獨(dú)癥，是一種廣泛性發(fā)展障礙，社會(huì)交流障礙是自閉癥患兒面臨的最大問(wèn)題。Finegold等34采用焦磷酸測(cè)序法對(duì)33例自閉癥患兒的腸道菌群進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重自閉癥患兒擬桿菌門(mén)、放線菌門(mén)明顯增高，而糞便中呈現(xiàn)較高水平的脫磷孤菌屬（Desulfovibrio）和普通擬桿菌（Bacteroides vulgatus），后者的特殊變化是否發(fā)病的原因抑或是疾病的結(jié)果尚不能判定，但腸菌異常所致代謝紊亂可能是發(fā)病機(jī)制之一。囊性纖維化 (Cystic fibrosis)是遺傳疾病，以肺部和消化系統(tǒng)所受的影響最為嚴(yán)重，白種人多見(jiàn)，非洲人和亞裔人則較少患病。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)囊性纖維化患兒生命早期的腸道菌群也有異常，而給予益生菌干預(yù)可以減少腸道的炎癥和延遲呼吸道損傷修復(fù)，認(rèn)為腸道菌群紊亂與本病有關(guān)聯(lián)，具體機(jī)制仍需研究35。綜上所述，腸道作為機(jī)體最大的免疫器官和微生態(tài)體系，直接影響機(jī)體的正常生長(zhǎng)發(fā)育、患病率及遠(yuǎn)期健康，保持其功能的正常發(fā)揮至關(guān)重要。兒童腸道菌群具有動(dòng)態(tài)、脆弱的特點(diǎn)，早期菌群與機(jī)體免疫系統(tǒng)和代謝發(fā)育有密切相關(guān)；腸道菌群失調(diào)可誘發(fā)多種疾病，多種疾病又可導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)，互為因果；以腸道細(xì)菌為靶點(diǎn)研究?jī)和嚓P(guān)疾病將有良好的前景。參考文獻(xiàn)：1. Arumugam M, Raes J, Pelletier E, et al. Enterotypes of the human gut microbiome.Nature，2011，473(7346):174-80.2. Tremaroli V, Bckhed F. Functional interactions between the gut microbiota and host metabolism. Nature, 2012, 489(7415):242-9.3. Vael C, Verhulst SL, Nelen V, et al. Intestinal microflora and body mass index during the first three years of life: an observational study. Gut Pathog,2011,3(1):8.4. Kalliomki M, Collado MC, Salminen S, et al. Early differences in fecal microbiota composition in children may predict overweight. Am J Clin Nutr，2008，87(3):534-8.5. Furet JP, Kong LC, Tap J, et al. Differential adaptation of human gut microbiota to bariatric surgery-induced weight loss: links with metabolic and low-grade inflammation markers. Diabetes, 2010, 59(12):3049-57.6. Larsen N, Vogensen FK, van den Berg FW, et al. Gut microbiota in human adults with type 2 diabetes differs from non-diabetic adults. PLoS One, 2010, 5(2):e9085.7. Cani PD, Possemiers S, Van de Wiele T, et al. Changes in gut microbiota control inflammation in obese mice through a mechanism involving GLP-2-driven improvement of gut permeability. Gut， 2009，58(8):1091-103.8. Hapfelmeier S, Lawson MA, Slack E, et al. Reversible microbial colonization of germ-free mice reveals the dynamics of IgA immune responses. Science, 2010, 328(5986):1705-9.9. Brandtzaeg P. Food allergy: separating the science from the mythology. Nat Rev Gastroenterol Hepatol,2010,7(7):380-400.10. Latvala S, Pietil TE, Veckman V, et al. Potentially probiotic bacteria induce efficient maturation but differential cytokine production in human monocyte-derived dendritic cells. World J Gastroenterol，2008，14(36): 55705583.11. Ivanov II, Atarashi K, Manel N, et al. Induction of intestinal Th17 cells by segmented filamentous bacteria. Cell，2009，139(3):485-98.12. Atarashi K, Tanoue T, Shima T, et al. Induction of colonic regulatory T cells by indigenous Clostridium species. Science, 2011,331(6015):337-41.13. Corinne Grangette. Bifidobacteria and subsets of dendritic cells: friendly players in immune regulation! GUT, 2011,7(3):e32841-e3285114. Vinolo MA, Rodrigues HG, Nachbar RT, et al. Regulation of inflammation by short chain fatty acids. Nutrients，2011，3(10):858-76.15. Olszak T, An D, Zeissig S, et al. Microbial exposure during early life has persistent effects on natural killer T cell function. Science, 2012,336(6080):489-93.16. Delzenne NM, Cani PD. Gut microbiota and the pathogenesis of insulin resistance. Curr Diab Rep, 2011, 11(3):154-9.17. Jiang P, Jensen ML, Cilieborg MS, et al. Antibiotics increase gut metabolism and antioxidant proteins and decrease acute phase response and necrotizing enterocolitis in preterm neonates. PLoS One, 2012,7(9):e44929.18. Deshpande G, Rao S, Patole S, et al. Updated meta-analysis of probiotics for preventing necrotizing enterocolitis in preterm neonates. Pediatrics, 2010,125(5):921-30.19. Mourad-Baars P, Hussey S, Jones NL. Helicobacter pylori infection and childhood. Helicobacter, 2010,15( Suppl 1):53-9.20. Hviid A, Svanstrm H, Frisch M.Antibiotic use and inflammatory bowel diseases in childhood. Gut,2011,60(1):49-54.21. Sokol H, Seksik P, Furet JP, et al. Low counts of Faecalibacterium prausnitzii in colitis microbiota. Inamm Bowel Dis, 2009,15(8):11831189.22. Schwiertz A, Jacobi M, Frick JS, et al. Microbiota in pediatric inflammatory bowel disease. J Pediatr, 2010,157(2):240-244.23. Kassinen A, Krogius-Kurikka L, Mkivuokko H, et al. The fecal microbiota of irritable bowel syndrome patients differs signicantly from that of healthy subjects. Gastroenterology, 2007,133(1):2433.24. Saulnier DM, Riehle K, Mistretta TA, et al. Gastrointestinal microbiome signatures of pediatric patients with irritable bowel syndrome. Gastroenterology, 2011, 141(5):17821791. 25. Savino F, Cordisco L, Tarasco V, et al. Lactobacillus reuteri DSM 17938 in infantile colic: a randomized, double-blind, placebo-controlled trial. Pediatrics, 2010,126:e52633.26. Palma GD, Capilla A, Nova E, et al. Influence of milk-feeding type and genetic risk of developing coeliac disease on intestinal microbiota of infants: the PROFICEL study. PLoS One, 2012, 7(2):e30791.27. Ajslev TA, Andersen CS, Gamborg M, et al. Childhood overweight after establishment of the gut microbiota: the role of delivery mode, pre-pregnancy weight and early administration of antibiotics. Int J Obes，2011，35(4):522-9.28. Xu P, Li M, Zhang J, et al. Correlation of intestinal microbiota with overweight and obesity in Kazakh school children. BMC Microbiol, 2012,12:283.29. Luoto R, Laitinen K, Nermes M, et al. Impact of maternal probiotic-supplemented dietary counselling on pregnancy outcome and prenatal and postnatal growth: a double-blind, placebo-controlled study. Br J Nutr, 2010, 103(12):1792-9.30. Foliaki S, Pearce N, Bjrkstn B, et al. Antibiotic use in infancy and