【畢業(yè)學(xué)位論文】（Word原稿）利用SSR標(biāo)記分析寄主植物對(duì)B型煙粉虱種群遺傳變異的影響農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治碩士論文

密級(jí)： 論文編號(hào)： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 學(xué)位論文 利用 型煙粉虱種群遺傳變異的影響 I 摘 要 煙粉虱是一種由多種生物型組成的世界性的重要農(nóng)業(yè)害蟲。除了直接危害寄主植物外，還能傳播多種植物的病毒病，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大損失。在煙粉虱 多種 生物型 中， B 生物型是一種入侵性較強(qiáng)的致害類型，該生物型自 90 年代中后期入侵我國以來，在廣大地方爆發(fā)成災(zāi)，已成為我國蔬菜、花卉和棉花等經(jīng)濟(jì)作物上的主要害蟲。種群遺傳變異引起的“遺傳后適應(yīng)”可以導(dǎo)致外來物種對(duì)新入侵環(huán)境的快速適應(yīng)并擴(kuò)展暴發(fā)，種群遺傳變異因子研究對(duì)于闡明外來入侵生物入侵與種群擴(kuò)張暴發(fā)機(jī)制，預(yù)防與控制外來生物入侵具有重要理論與實(shí)踐意義。 本論文采用 記分析了寄主植物對(duì) B 型煙粉虱遺傳分化的影響。分別于 2005 年和 2006年對(duì)來自于同一母體種群并在 5種寄主植物上隔離飼養(yǎng)的煙粉虱樣本進(jìn)行種群間與 種群內(nèi)的遺傳變異分析，結(jié)果表明寄主植物是影響煙粉虱種群遺傳結(jié)構(gòu)的一個(gè)重要因素， 5 個(gè)寄主上的煙粉虱種群都表現(xiàn)出不同程度的遺傳分化。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： （ 1）篩選出多態(tài)性較好的 6 對(duì)引物，每對(duì)引物檢測(cè)出的等位基因數(shù)為 2 9 條，其中 條； 測(cè)到的等位基因最少為 2 條。共檢測(cè)到 28 條等位基因變異，平均每個(gè)位點(diǎn) 。 （ 2） 2005 年，利用 4 對(duì) 物對(duì) 5 個(gè)寄主種群共 162 個(gè)煙粉虱樣本進(jìn)行遺傳變異分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有位點(diǎn)上均有遺傳分化的發(fā)生 （ ,0, 其中番茄種群內(nèi)部的遺傳分化 （ 程度最高，大于番茄種群與其它四個(gè)寄主種群間的遺傳分化程度。甘藍(lán)種群內(nèi)部的遺傳分化也相當(dāng)顯著 （ 黃瓜種群的內(nèi)部變異程度最低（ 關(guān)鍵詞 ： B 型 煙粉虱，寄 主植物，轉(zhuǎn)換寄主，遺傳 變異 ， in it an in of is as a a of is a of by by of of of of my is on of in In to or 005 006, to st at of at as as (1)A 8 of ( (2) st in 馬鈴薯 茄子 棉花 蘿卜，白菜上面的煙粉虱的遺傳多樣性 較其它寄主種群的高，但是未對(duì)煙粉虱種群的寄主專化機(jī)制進(jìn)行探討； 張麗萍 (2004)采用 析了山西省晉南地區(qū)的 13 個(gè)寄主植物上的 B 型煙粉虱種群，聚類結(jié)果表明，不同寄主上的煙粉虱可分成兩個(gè)類群，玉米上的煙粉虱種群為一群，其余為一群，兩個(gè)類群間平均遺傳距離為 明了玉米上的煙粉虱種群有趨于?；目赡苄?。 目前對(duì) B 型煙粉虱的入侵機(jī)制、遺傳分化等的研究還沒有明確的結(jié)果。遺傳差異決定入侵成功與否及入侵效應(yīng) ,是遺傳特性與入侵生物學(xué)特征相互作用的結(jié)果。有關(guān)這方面的研究充滿前景，但目前的研究并不令人滿意。在定 殖與建立種群的過程中，遺傳過程與生態(tài)過程哪一個(gè)更具相對(duì)的重要性，或者是兩者間的相互作用？成功入侵如果受遺傳變異的影響，遺傳差異在多大程度上決定其入侵效應(yīng)？地理區(qū)域、寄主植物、種群特性哪一個(gè)因素對(duì)遺傳分化的影響更大？目前這些問題還不能得到確切的回答。對(duì)于遺傳分化的研究是研究煙粉虱成功定殖、建立種群的關(guān)鍵問題，這方面有待深入研究。 究內(nèi)容與方法 煙粉虱生物型的鑒定 溫室人工飼養(yǎng) B 型煙粉虱種群，原始寄主為甘藍(lán) (京豐一號(hào) )，轉(zhuǎn)換寄主分別為一品紅(番茄 (中農(nóng) 12 號(hào) )、棉花 (保鈴棉 黃瓜 (中雜 9 號(hào) )，每個(gè)寄主種群用防蟲網(wǎng)隔離飼養(yǎng)； 利用 記分析五個(gè)寄主植物上的種群的遺傳多樣性，確定不同寄主種群間和寄主種群內(nèi)的遺傳分化，初步揭示 B 型煙粉虱種群與不同寄主間的關(guān)系，為煙粉虱對(duì)不同寄主的適應(yīng)性進(jìn)化提供理論基礎(chǔ)。 研究擬解決的問題 影響煙粉虱種群遺傳結(jié)構(gòu)的因素較多，如化學(xué)農(nóng)藥、寄主植物、棲息環(huán)境等，本文 擬 從寄主植物的角度來分析五種寄主對(duì) B 型煙粉虱的遺傳結(jié)構(gòu)的影響，以揭示寄主植物在煙粉虱遺傳進(jìn)化中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 15 中的作用。 研究的創(chuàng) 新之處 首次采用微衛(wèi)星標(biāo)記分析溫室內(nèi)寄主植物對(duì)煙粉虱種群遺傳結(jié)構(gòu)的影響， 以期為入侵成災(zāi)機(jī)理的研究提供有利的幫助。 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 16 術(shù)路線 （第一寄主） 向比較 縱向比較 (同一年份 ) (不同年份 ) 子鑒定 溫室人工種群飼養(yǎng) 按不同年份取樣 采用 提取單頭煙粉虱的 外分光光度檢測(cè) 質(zhì)量和濃度 用具有多態(tài)性的 物進(jìn)行分析 收集數(shù)據(jù)（記錄多態(tài)性等位基因變異位點(diǎn)），計(jì)算種間和種內(nèi)的遺傳距離 不同寄主種群間的遺傳分析 同種寄主種群間的遺傳比較 甘藍(lán) 寄主轉(zhuǎn)換 一品紅 黃 瓜 棉 花 番 茄 寄主種群內(nèi)部的遺傳分析 寄主種群內(nèi)部的遺傳分析 采集樣本 形態(tài)學(xué)鑒定 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 利用 析寄主植物對(duì) B 型煙粉虱種群遺傳分化的影響 17 第二章 采用 記分析寄主 植物對(duì) B 型煙粉虱 種群 遺傳分化 的影響 煙粉虱 產(chǎn)于熱帶和亞熱帶地區(qū)，現(xiàn)已廣泛分布于世界許多國家和地區(qū)。煙粉虱屬多食性害蟲，寄主范圍很廣。據(jù) 995)報(bào)道，其寄主植物達(dá) 74 科 500 余種。 (1985)研究發(fā)現(xiàn) ， B 型煙粉虱在生菜、黃瓜、茄子、南瓜、花椰菜、胡蘿卜、瓜爾豆和苜蓿等寄主植物上的體形、發(fā)育歷期、存活率和生殖率等均存在明顯差異；其它有關(guān)學(xué)者通過對(duì)不同寄主植物上 煙粉虱種群的生物學(xué)差異研究，也都得出了類似結(jié)果。這些研究結(jié)果表明 ， B 型煙粉虱存在著寄主種群間的遺傳分化。 （ 1992）采用聚丙烯酰胺凝膠電泳比較了四種酶的圖譜，結(jié)果表明只有 譜可區(qū)分與寄主相關(guān)的煙粉虱種群，認(rèn)為 譜的差異反應(yīng)了寄主范圍的局限性 ； （ 1993）使用等電荷聚焦法分析了異構(gòu)酶在構(gòu)成 14 種酶的 18 個(gè)位點(diǎn)中的變異性，并報(bào)道 有 6 個(gè)位點(diǎn)是多態(tài)的； （ 1989）則報(bào)道 ， 位基因表現(xiàn)出的明顯的異質(zhì)性與寄主植物和地理分布均無關(guān)系，而與來自殺蟲劑及噴藥處理的種 群有關(guān)。在分子水平上，目前國內(nèi)外對(duì)于不同地區(qū)、不同寄主上的煙粉虱種群的遺傳分化及生物型，已有許多研究報(bào)道。張麗萍等（ 2005）應(yīng)用 子標(biāo)記方法對(duì)采自山西省同一地區(qū)的不同寄主上的 B 型煙粉虱種群進(jìn)行遺傳分化的研究，將不同寄主上的煙粉虱分為兩個(gè)類群，玉米上的煙粉虱聚為一類，其余為一類，這就初步表明了 B 型煙粉虱有存在寄主?；目赡苄?。 本文應(yīng)用微衛(wèi)星標(biāo)記 子標(biāo)記方法，首次對(duì)溫室內(nèi)人工飼養(yǎng)的煙粉虱種 群間和種群內(nèi)的遺傳變異進(jìn)行了研究，旨在深入探討 地理區(qū)域、寄主植物和種群特性三因素中哪一個(gè)因素對(duì)煙粉虱種群遺 傳分化起決定性作用， 為其爆發(fā)成災(zāi)、入侵機(jī)理研究提供理論依據(jù)。 材料和方法 試驗(yàn)材料 來源：供試蟲源采自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所南口溫室大棚的甘藍(lán)上，采集時(shí)間為2004 年 11 月份，取部分供試種群的煙粉虱個(gè)體進(jìn)行 定，均為 B 型煙粉虱。 試驗(yàn)中所用的寄主品種：甘藍(lán)（京豐一號(hào)）；黃瓜（中農(nóng) 12 號(hào)）；番茄（中雜 9 號(hào)）；棉花（保鈴棉 一品紅。 寄主轉(zhuǎn)換：供試蟲源在甘藍(lán)上飼養(yǎng)一定階段以后，從甘藍(lán)葉片上采蟲分別接種于其它四個(gè)寄主，黃瓜，番茄，棉花和一品紅。 溫室環(huán)境條件 保持恒定 （ L： D 12： 12； 25左右），采樣時(shí)間分別是 2005 年和 2006年的 10 月 12 月間，采集的 B 型煙粉虱成蟲經(jīng)目視鏡檢測(cè)后選取雌性個(gè)體，每個(gè)寄主種群取樣數(shù)為 30 48 頭， 70%酒精保存，置于 箱中。 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 利用 析寄主植物對(duì) B 型煙粉虱種群遺傳分化的影響 18 取 分子標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中所用的模板均為單頭煙粉虱 提取方法參考 盧圣棟（ 2002） 和 安瑞生等（ 2002） 的實(shí)驗(yàn)步驟并作進(jìn)一步的改進(jìn)，提取流程如下： （ 1） 心管加入單頭煙粉虱和 20解液（ 1%10255白酶 K【 ，用封口槍頭搗碎，再加入 80解液沖洗槍頭； （ 2） 65熱浴 30 45 分鐘； （ 3）待冷卻后每管加入 1 酶溶液 (置于 37水浴下半小時(shí)左右； （ 4）將離心管取出，待冷卻至室溫后加入等體積的乙酸鈉（ 然后冰浴至少半小時(shí)以上； （ 5）取出后，在常溫下 12000心 10 分鐘； （ 6）吸取上清夜并轉(zhuǎn)移至新的 心管，每管加入等體積的異丙醇，然后置于 小時(shí)以上； （ 7）取出后室溫 下 13000心 10 分鐘； （ 8）到掉上清夜，加入 70%的乙醇，然后 12000心 3 分鐘，重復(fù)兩次，再用無水乙醇洗滌，將 淀置于通風(fēng)廚自然中干燥，加入 15解； （ 9） 55溫浴 10 分鐘以上，以促進(jìn) 溶解，取出后 存?zhèn)溆谩?煙粉虱生物型的鑒定 利用 記對(duì)供試蟲源進(jìn)行生物型的鑒定，以確定為 B 型煙粉虱種群， 子標(biāo)記體系中的引物為 晨， 2002），由上海生工合成，以 B 型煙粉虱 模板的 增產(chǎn)物大小為 620右。 5： 5反應(yīng)擴(kuò)增程序 （ et 1994） 為： 94預(yù)變性 5后進(jìn)行 35 個(gè)如下循環(huán)： 94變性 150退后 172延伸 1環(huán)結(jié)束后 72延伸 5應(yīng)產(chǎn)物 物于 1%瓊脂糖凝膠電泳分離， 色后在紫外透視儀上觀察并記錄結(jié)果。反應(yīng)體系為： 10 .5 25 2.5 ul .5 2.5 150ng/1.0 2819 (50ng/1.0 5U/ 0.2 1 ul 0 國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 利用 析寄主植物對(duì) B 型煙粉虱種群遺傳分化的影響 19 微衛(wèi)星引物的篩選 微衛(wèi)星引物的篩選：從目前已知的 25 對(duì)引物中（ et 2003； 003 ）篩選出 6 對(duì)， 物由上海生工合成。 表 2篩選出的 6 對(duì)煙粉虱微衛(wèi)星引物 6 of 物編號(hào) 序號(hào)位點(diǎn)引物 (5-3: 增 在 進(jìn)行 增，擴(kuò)增體系如表 2 表 2應(yīng)體系 CR SR 應(yīng)組分 反應(yīng)體積 0 10 2(25 2U/ 2 2ul 變性聚丙稀凝膠電泳 (（ 1）電泳程序 以 斷為分子量標(biāo)準(zhǔn)，在 丙烯酰胺凝膠 (電泳檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 利用 析寄主植物對(duì) B 型煙粉虱種群遺傳分化的影響 20 銀染后觀察結(jié)果。電泳過程參考 1998)進(jìn)行，根據(jù)試驗(yàn)條件做出一定的改動(dòng)。 儀器： T 電泳系統(tǒng) （ 膠型： 38304膠： 丙烯酰胺變性凝膠 具體過程如下： 用洗滌靈和自來水將玻璃板沖洗干凈，再分別用蒸餾水和 95%酒精各擦洗兩遍，自然干燥。然后在玻璃板上均勻 涂抹 5%乙醇， 5ul 5 在主板上涂抹一層 2 干，操作過程中防止兩塊玻璃板相互污染。 待玻璃板干燥后組裝電泳槽，水平儀檢測(cè)。 膠的配制 稱取尿素加少量 力加熱（ 0， 棉花（ 一品紅（ 黃瓜（ 0，這也在一定程度上反應(yīng)了不同寄主種群內(nèi)部的遺傳分化的趨勢(shì)。通過比較表 2 8a 和表 2 12 的不同種群間 （表 2 13）表明， 2006 年各個(gè)種群間的遺傳分化程度除了棉花種群與甘藍(lán)種群、一品紅種群、番茄種群之間有所降低外，其它種群間的遺傳分化程度顯著地高于 2005 年；其中黃瓜種群與第一寄主（甘藍(lán)）種群間的遺傳分化程度大于其它選擇寄主與甘藍(lán)種群間的遺傳分化。表 2 14 說明寄主種群內(nèi)部也存在明顯的遺傳分化（ F0， 棉花種群（ 一品紅（ 黃瓜（ 而且番茄種群內(nèi)部的 大于番茄種群與其它四個(gè)種群的 ，但是種群內(nèi)部的分化整體上遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于種間的遺傳分化。 表 2 13 不同亞種群間遺傳距離和遺傳相似度的比較 種群 遺傳 遺傳 無偏估計(jì) 距離 相似度 1-1 1 -1 2 -1 2 -1 3 -1 3 -1 4 -1 4 -1 5 -1 5 -2 2 -2 2 -2 3 -2 3 -2 4 -2 4 -2 5 -2 5 -1 2 -1 3 -1 3 -1 4 國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 利用 析寄主植物對(duì) B 型煙粉虱種群遺傳分化的影響 32 2-1 4 -1 5 -1 5 -2 3 -2 3 -2 4 -2 4 -2 5 -2 5 -1 3 -1 4 -1 4 -1 5 -1 5 -2 4 -2 4 -2 5 -2 5 -1 4 -1 5 -1 5 -2 5 -2 5 -1 5 ： 1 1別為甘藍(lán)種群的兩個(gè)亞種群； 2 2別為一品紅種群的兩個(gè)亞種群； 3 3別為番茄種群的兩個(gè)亞種群； 4 4別為黃瓜種群的兩個(gè)亞種群； 5 5別為棉花種群的兩個(gè)亞種群。 表 2 14 不同時(shí)間的寄主種群的 比較 st in 主 _寄主 2005） 2006） 甘藍(lán) _一品紅 藍(lán) _番茄 藍(lán) _黃瓜 藍(lán) _棉花 一品紅 _番茄 品紅 _黃瓜 品紅 _棉花 番茄 _黃瓜 茄 _棉花 黃瓜 _棉花 代表種群間的遺傳分化度有所降低 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 利用 析寄主植物對(duì) B 型煙粉虱種群遺傳分化的影響 33 表 2 15 寄主間和寄主內(nèi)所有樣本的 st 1 2 2 3 3 4 4 5 5 S 注： *代表同種寄主種群內(nèi)部的 ， P代表種群間關(guān)系不顯著。 注：該表的數(shù)值是以兩年共用的四對(duì)引物 （ 得出的。 （ 2） 位點(diǎn)間的連鎖分析 采用軟件 不同時(shí)間的煙粉虱種群進(jìn)行基因型連鎖不平衡檢測(cè)，在 5 個(gè)種群中，六個(gè)位點(diǎn)之間互相組合， 2005年飼養(yǎng)的寄主種群在 點(diǎn)之間存在連鎖不平衡，而在其它位點(diǎn)間存在連鎖平衡（表 2 16a 和表 2 16b）。 005 (s 10 10 10 10 10 10 006 (s 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 利用 析寄主植物對(duì) B 型煙粉虱種群遺傳分化的影響 34 （ 3） 不同年份的雜合度和多態(tài)信息含量的比較 通過比較不同時(shí)間寄主種群的雜合度和多態(tài)信息含量等發(fā)現(xiàn)，寄主種群內(nèi)部的遺傳分化較大，從表 2 17 可以看出，飼養(yǎng)兩年以后的 5 個(gè)煙粉虱種群的雜合度 （ 和多態(tài)信息含量 （ 著 高于第一年的 5 個(gè)寄主種群，相應(yīng)的近交系數(shù) （ 隨時(shí)間的增加而下降 ，表明寄主種群內(nèi)部個(gè)體間的近交繁殖程度有所下降。，另外從表 2 15 中的 也可以看出這種趨勢(shì)。 表 2 17 不同年份的遺傳參數(shù)比較 of in 2005/2006) 005/2006) 005/2006) 甘藍(lán) 品紅 茄 瓜 花 ：數(shù)據(jù)取自表 2表 2有表中的標(biāo)準(zhǔn)差略去。 主種群內(nèi)的遺傳相似性檢測(cè) 根據(jù)煙粉虱個(gè)體間等位基因型的差異，采用 件和 不同年份 的寄主種群內(nèi)的遺傳相似性進(jìn)行分析， 2005 年各個(gè)寄主種群內(nèi)部的遺傳相似系數(shù)分別為 藍(lán)），品紅）， 茄）， 花）， 瓜）（附表 1附表 5，其中不包括無擴(kuò)增條帶的個(gè)體以及基因型相同的個(gè)體，它們之間的遺傳相似度為 0 和 1），表明 同一寄主煙粉虱種群內(nèi)部的遺傳相似性較低，存在顯著的遺傳分化； 2006 年各個(gè)寄主種群內(nèi)部的遺傳相似系數(shù)分別為 0.99（甘藍(lán)）， 品紅 ）， 茄），花）， 瓜）（附表 5附表 10），表明同一寄主內(nèi)部的遺傳相似性仍然較低，遺傳變異較為明顯。從不同年份對(duì)同一寄主種群內(nèi)部的遺傳相似性進(jìn)行比較， 2006 年的各個(gè)寄主種群內(nèi)部的遺傳相似度總體上略高于相對(duì)應(yīng)的 2005 年的數(shù)值，如 2006 年甘藍(lán)種群內(nèi)部的遺傳相似系數(shù)較 2005 年有一定的增長，表明了種群內(nèi)部的變異度有略微降低，但是這一點(diǎn)并不影響種群內(nèi)部遺傳變異的積累。 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第三章 結(jié)論和討論 35 第三章 結(jié)論和 討論 要 結(jié)論 本實(shí)驗(yàn)成功地利用了微 衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)溫室內(nèi)飼養(yǎng)種群的遺傳分化進(jìn)行了初步研究。結(jié)果表明了寄主植物是影響煙粉虱種群遺傳結(jié)構(gòu)的一個(gè)重要因素，溫室內(nèi)的 5 個(gè)寄主上的煙粉虱種群都表現(xiàn)出不同程度的遺傳分化。 傳位點(diǎn)的變異性 每對(duì)引物檢測(cè)出的等位基因數(shù)為 2，平均每個(gè)位點(diǎn) ，其中 測(cè)到的最多為9 條， 測(cè)到的等位基因最少為 2 條。 從位點(diǎn)上的基因型組合來看， 增得到的基因型組合最多，遺傳多樣度和多態(tài)信息含量都高于其它位點(diǎn)，但是該位點(diǎn)的遺傳變異度較低 （ 。對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)的遺 傳多樣性參數(shù)的分析表明， 2006 年五種寄主種群的雜合度（ 、多態(tài)信息含量 （ 和遺傳多樣度均大于 2005 年的數(shù)值，表明飼養(yǎng)兩年以后的寄主種群的遺傳變異高于第一年飼養(yǎng)的種群。位點(diǎn)連鎖分析表明，除了 2005 年的寄主種群在 點(diǎn)間存在連鎖不平衡外，其余位點(diǎn)間均存在連鎖平衡。 個(gè)寄主種群間的遺傳變異程度 2005 年，利用 4 對(duì) 物對(duì) 5 個(gè)寄主種群共 162 個(gè)煙粉虱樣本進(jìn)行遺傳變異分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有位點(diǎn)上均有遺傳分化的發(fā)生 （ ,甘藍(lán)種群（ 棉花（ 一品紅（ 黃瓜（ 0，呈現(xiàn)出與種群內(nèi)部 一致的趨勢(shì)。但是，種群內(nèi)部的遺傳分化仍然不及種群間的分化程度。再通過分析 2005 年和 2006 年的不同寄主種群內(nèi)的遺傳相似系數(shù)表明，各個(gè)寄主種群內(nèi)部的遺傳相似系數(shù)較低， 2006 年的寄主種群內(nèi)部的遺傳相似系數(shù)略高于 2005 年的數(shù)值，表明了 2006 年種群內(nèi)部的遺傳 變異度有略微降低。 類分析比較 從不同年份及總的聚類結(jié)果來看，甘藍(lán)種群和番茄種群始終聚在一起，表明這兩個(gè)種群之間的遺傳相似度較高，而其它三個(gè)寄主種群的聚類關(guān)系不是很明確，在第一年時(shí)黃瓜種群種棉花種群聚為一群，而到第二年，黃瓜種群卻與一品紅種群聚為一群，這表明了各個(gè)種群間的遺傳變異不僅與寄主相關(guān)，時(shí)間的累積也有一定的影響。此外，考慮到第一年只用了四對(duì)引物進(jìn)行聚類分析，對(duì)第二年的寄主植物也用共有的四對(duì)引物進(jìn)行分析，得出的聚類結(jié)果與采用六對(duì)引物分析時(shí)得出的相一致。 論 響寄主 遺傳分化的可能性因子分析 本研究采用對(duì)寄主種群的遺傳結(jié)構(gòu)分析表明，種間和種內(nèi)分化都比較明顯，前者的分化程度整體上高于后者。但是，種間分化在各個(gè)寄主間表現(xiàn)得不一致，有的分化得較快，如一品紅種群、黃瓜種群與甘藍(lán)種群間的遺傳分化隨時(shí)間的推移而增大，而棉花種群與甘藍(lán)種群間的遺傳分化卻表現(xiàn)為降低的趨勢(shì)。五個(gè)寄主種群內(nèi)部的遺傳分化也有差異，其中番茄種群內(nèi)部的遺傳分化大于番茄種群與其它四個(gè)寄主種群間的遺傳分化。造成這些現(xiàn)象的可能是：（ 1）在基因漂流基本沒有的情況下受選擇壓力的影響，包括同型交配和歧化選擇等，如交配前后的生 殖隔離；（ 2）受寄主的影響，其中一部分可以歸納為歧化選擇的作用，如寄主植物的形態(tài)、營養(yǎng)以及交配場(chǎng)所的提供等。此外，還需要從生態(tài)、生物學(xué)等方面進(jìn)一步說明 B 型煙粉虱種群內(nèi)部分化的多樣性。 異性位點(diǎn)對(duì)寄主種群遺傳分化的影響 本研究選用的 6 對(duì)微衛(wèi)星引物的多態(tài)性較好，尤其是 是在第二年才篩選出 對(duì)引物對(duì) 5 個(gè)寄主種群進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增的結(jié)果顯示出這兩個(gè)位點(diǎn)上存在著顯著的遺傳分化，但是 較小，表明在該位點(diǎn)上的遺傳分化程度較 低。 間的連鎖不平衡現(xiàn)象出現(xiàn)在飼養(yǎng)初期，而其它位點(diǎn)間均為連鎖平衡，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第三章 結(jié)論和討論 37 可能原因是飼養(yǎng)初期種群個(gè)體間的近親交配所導(dǎo)致的連鎖不平衡，而且在小規(guī)模種群中更容易出現(xiàn)連鎖不平衡現(xiàn)象（ 999）。 986)和 1998） 認(rèn)為僅有少數(shù)幾個(gè)位點(diǎn)在短時(shí)間內(nèi)參與了物種的同域種化，而不像地理隔離種群的遺傳分化需要一個(gè)很長的過程，而且包含了許多位點(diǎn)的變異。在以往對(duì)昆蟲寄主?；脱芯康膶?shí)例中，研究人員較多采用同工酶電泳分析寄主 種群的遺傳分化，但是發(fā)生變異的位點(diǎn)數(shù)很少，如 et (2003)采用六對(duì)同工酶引物對(duì)歐洲玉米螟（ 主專化研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，寄主種群的遺傳分化只體現(xiàn)在其中的四個(gè)位點(diǎn)上； et (2002) 使用 10 對(duì)同工酶引物對(duì)象甲 (進(jìn)行