氨茶堿對(duì)小鼠心肺復(fù)蘇的作用.doc

成績(jī)：山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題 目：氨茶堿對(duì)小鼠心肺復(fù)蘇的作用設(shè)計(jì)者：郭小琴 李秀琪 王超 李成林 專 業(yè)：醫(yī)學(xué)影像學(xué)班 級(jí)： 醫(yī)學(xué)院 06級(jí)4班聯(lián)系電話：15966060676835122009年05月14日立題依據(jù)（主要說(shuō)明本研究的目的、意義、國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀及主要參考文獻(xiàn)）近來(lái)的研究已表明心跳驟停后,除交感神經(jīng)系統(tǒng)和副交感神經(jīng)系統(tǒng)出現(xiàn)改變外,內(nèi)源性的腺苷系統(tǒng)起著非常重要的作用。臨床和實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)心肌缺血和缺氧時(shí)存在大量的腺苷釋放 ,后者可拮抗兒茶酚胺的興奮作用,降低起搏細(xì)胞的功能,減慢心率,抑制房室傳導(dǎo),擴(kuò)張血管,還顯著增加電除顫的閾值,因此對(duì)于心跳驟停的患者給予腺苷受體拮抗劑氨茶堿,有可能促進(jìn)心跳驟?；颊咝碾娕c血流動(dòng)力學(xué)不穩(wěn)定性的恢復(fù)。早在1993 年Viskin 等學(xué)者在15 例對(duì)腎上腺素?zé)o反應(yīng)的心跳驟停患者中應(yīng)用了氨茶堿(250 mg) ,有11 例恢復(fù)了心電活動(dòng),但其中有8 例死于心源性休克,2 例死于缺氧性腦病,1 例出院,但文中未交代自主循環(huán)恢復(fù)情況。近年來(lái)國(guó)內(nèi)的研究表明早期腎上腺素聯(lián)合氨茶堿用于心臟停搏的治療可能優(yōu)于單純應(yīng)用腎上腺素,它有助于心電活動(dòng)的恢復(fù)和近期存活時(shí)間的延長(zhǎng)。但是否氨茶堿能取代腎上腺素的作用還有待于探討。另外,人們對(duì)心臟驟停和心肺復(fù)蘇的研究大多局限在大動(dòng)物,近年來(lái)應(yīng)用家兔和大鼠進(jìn)行CPR 研究的逐漸增多 ,但應(yīng)用小鼠進(jìn)行CPR 研究的報(bào)道還很少。國(guó)外現(xiàn)在多采用電擊法或靜脈注射藥物來(lái)復(fù)制小鼠心臟驟停模型,兩者都存在一定缺陷。靜脈注射藥物雖然簡(jiǎn)單,但用藥劑量不易控制,且藥物在體內(nèi)堆積給后續(xù)研究尤其是在觀察復(fù)蘇藥物療效時(shí)帶來(lái)困難。電擊誘發(fā)室顫的模型發(fā)生心臟驟停的時(shí)間短,更接近臨床,但其操作復(fù)雜。研究者必須將電極經(jīng)右心導(dǎo)管送至右心室,再把一定能量的交流電引至心內(nèi)膜誘發(fā)室顫。陳蒙華等在研究中發(fā)現(xiàn): 經(jīng)食管心室快速起搏能導(dǎo)致小鼠血壓迅速下降至10mmHg 以下,但個(gè)體差異較大。究其原因主要是呼吸的影響。由于研究中未使用肌松藥,在起搏刺激的同時(shí)小鼠仍有呼吸運(yùn)動(dòng),而心臟在呼吸時(shí)發(fā)生移位,使部分起搏脈沖不能捕獲心室,導(dǎo)致心室仍能間歇搏動(dòng)、維持一定的排血量。隨著起搏刺激時(shí)間的延長(zhǎng),小鼠呼吸運(yùn)動(dòng)逐漸減弱到消失,所有起搏脈沖均能捕獲心室,造成“室顫樣效應(yīng)”,血壓迅速下降至0 mmHg。綜上所述,經(jīng)食管心室快速起搏誘發(fā)小鼠心臟驟停具有操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、可控性強(qiáng)等特點(diǎn),該模型穩(wěn)定,復(fù)蘇成功率高,能夠滿足心肺復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)研究的需要,尤其適用于復(fù)蘇藥物的療效鑒定和篩選,有推廣應(yīng)用的價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)設(shè)立不同的實(shí)驗(yàn)組和小鼠心肺復(fù)蘇模型的制備來(lái)研究氨茶堿對(duì)小鼠心肺復(fù)蘇的影響。參考文獻(xiàn)：氨茶堿和腎上腺素合用在心臟停搏患者中的療效馬勇中國(guó)急救醫(yī)學(xué)2003/04氨茶堿在腎上腺素?zé)o效心臟驟停患者中應(yīng)用的初步研究孟慶義中國(guó)急救醫(yī)學(xué)2001/04中華老年心腦血管病雜志2004年2月第6卷第1期氨茶堿與腎上腺素合用在大鼠心臟停搏中的療效 馬勇,孟慶義,王志忠,錢(qián)遠(yuǎn)宇中國(guó)急救醫(yī)學(xué)2005年12月第25卷第12期小鼠心臟驟停動(dòng)物模型的建立 陳蒙華1實(shí)驗(yàn)材料（包括動(dòng)物的品種、規(guī)格、數(shù)量和來(lái)源；藥品的名稱、規(guī)格和來(lái)源；儀器設(shè)備等）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠 20只 3050 g （山東大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心 ）藥品：烏拉坦 肝素鈉 腎上腺素 氨茶堿 儀器設(shè)備：18 g 套管； 4 倍放大鏡 ； 24 G靜脈留置管 ；皮下針頭 ； 4 極5 F 起搏電極 ； 定容型小動(dòng)物呼吸機(jī)(DH - 150 , 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器公司)；壓力換能器與BL - 420E 生物機(jī)實(shí)驗(yàn)方法（詳細(xì)寫(xiě)明實(shí)驗(yàn)步驟，尤其動(dòng)物分組、給藥途徑和劑量、觀察指標(biāo)及數(shù)據(jù)處理等）動(dòng)物的準(zhǔn)備選用健康小鼠20 只,體質(zhì)量3050 g ,雌雄不限。隨即均分為四組。小鼠經(jīng)腹腔注射烏拉坦(1 g/ kg) 麻醉、氣管切開(kāi)并插入18 g 套管以備接呼吸機(jī)用。分離并切開(kāi)左頸總動(dòng)脈,借助4 倍放大鏡插入預(yù)充肝素鈉的24 G靜脈留置管,通過(guò)壓力換能器與BL - 420E 生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)連接以監(jiān)測(cè)動(dòng)脈壓。同時(shí)經(jīng)四肢皮下針頭記錄標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)聯(lián)心電圖。經(jīng)食管心臟起搏誘發(fā)室顫4 極5 F 起搏電極經(jīng)口插入食管約4 cm ,電極近端與BL - 420E 生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的電生理刺激輸出端相連。先測(cè)定心室起搏閾值(通常起搏電壓為1518 V ,脈寬58 ms) ,誘發(fā)室顫電壓應(yīng)高于起搏閾值35 V。采用連續(xù)快速起博誘發(fā)室顫,所需參數(shù)為:電壓20 V、脈寬10 ms、頻率20 Hz。當(dāng)起搏90 s 后暫停起搏并觀察12 s ,如心電圖顯示,起搏誘發(fā)出來(lái)的室顫自動(dòng)轉(zhuǎn)律時(shí),應(yīng)立即再起搏30 s ,直至誘發(fā)出的室顫持續(xù)存在、或出現(xiàn)無(wú)脈性電活動(dòng)或一條直線(無(wú)心電活動(dòng)) 為止,通常需要起搏90180 s 不等。起博刺激后4 min 開(kāi)始心肺復(fù)蘇CRP。采用定容型小動(dòng)物呼吸機(jī)(DH - 150) 行機(jī)械通氣(室內(nèi)空氣) ,通氣頻率70 次/ min ,潮氣量為4 mL/ kg 。一組：人工手法行胸外心臟按壓,頻率200 次/ min。按壓深度為小鼠胸廓前后徑1/ 3 。二組：胸外按壓的同時(shí)經(jīng)動(dòng)脈注射腎上腺素100g/ kg 。實(shí)驗(yàn)全程連續(xù)監(jiān)護(hù)心電和血壓。三組：在二組的基礎(chǔ)上經(jīng)動(dòng)脈注射氨茶堿68g/ kg。實(shí)驗(yàn)全程連續(xù)監(jiān)護(hù)心電和血壓。四組：二三聯(lián)合判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷誘發(fā)心臟驟停的標(biāo)準(zhǔn)為有創(chuàng)血壓監(jiān)測(cè)顯示平均動(dòng)脈壓 20 mmHg ,持續(xù)1 min 以上。 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法本組資料采用.x s 表示,并采用stata 4. 0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料的比較采用Pearson 2 檢驗(yàn)或Fisher 精確檢驗(yàn),非正態(tài)分布或方差不齊用kwallis 秩和檢驗(yàn),計(jì)量資料的比較采用Student t 檢驗(yàn)或方差分析。P 0. 05) 。起效時(shí)間氨茶堿+ 腎上腺素組、氨茶堿組，顯著快于腎上腺素組 ( P 0. 05)。對(duì)照組小鼠成活率較低。自主循環(huán)恢復(fù)的比較氨茶堿+ 腎上腺素組恢復(fù)自主循環(huán),腎上腺素組恢復(fù)自主循環(huán),氨茶堿組恢復(fù)自主循環(huán);3 組差異無(wú)顯著性意義( P 0. 05) 。循環(huán)開(kāi)始恢復(fù)時(shí)間氨茶堿+ 腎上腺素組,腎上腺素組,氨茶堿組。循環(huán)開(kāi)始恢復(fù)時(shí)間和作用持續(xù)時(shí)間3 組差異無(wú)顯著性意義( P 0. 05) 。氨茶堿+ 腎上腺素組平均血壓,顯著高于腎上腺素組和氨茶堿組。結(jié)果分析：氨茶堿可舒張支氣管平滑肌， 增加內(nèi)源性