臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士考試輔導(dǎo)之2019年檢驗(yàn)技士精選體驗(yàn)課

1、.2019 年檢驗(yàn)技士精選體驗(yàn)課四、血液涂片制備一張良好的血片厚薄適宜頭體尾明顯細(xì)胞分布均勻血膜邊緣整齊并留有一定空隙血涂片的制備手工推片法25 30夾角血滴大小、推片與載玻片間夾角、推片速度、血細(xì)胞比容。厚血膜涂片法瘧原蟲、微絲蚴等。五、血液細(xì)胞染色瑞氏染色法1. 染料組成染料組成酸性染料伊紅（e- ） 鈉鹽陰離子1 / 20.堿性染料亞甲藍(lán)（m ） 氯鹽陽(yáng)離子將適量伊紅、亞甲藍(lán)溶解在甲醇中。甲醇的作用：一是溶解亞甲藍(lán)和伊紅；二是固定細(xì)胞形態(tài)。2. 染色原理物理吸附與化學(xué)親和作用中性顆粒呈等電狀態(tài)與e- 和 m+結(jié)合淡紫紅色紅細(xì)胞原始紅細(xì)胞、早幼紅細(xì)胞胞質(zhì)、核仁，染成較濃厚的藍(lán)色；中幼紅細(xì)胞

2、既含酸性物質(zhì)，又含堿性物質(zhì)，染成紅藍(lán)色或灰紅色；完全成熟紅細(xì)胞，酸性物質(zhì)徹底消失后，染成粉紅色。3.ph 值的影響細(xì)胞各種成分均屬蛋白質(zhì)，由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì)，所帶電荷隨溶液ph 而定，在偏酸性環(huán)境中正電荷增多，易與伊紅結(jié)合，紅細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞染色偏紅，細(xì)胞核呈淡藍(lán)色或不染色；在偏堿性環(huán)境中負(fù)電荷增多，易與美藍(lán)結(jié)合，所有細(xì)胞呈灰藍(lán)色，顆粒呈深暗，嗜酸性顆粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性顆粒偏粗，呈紫黑色。 ph pi pr 帶正電荷多易與e- 結(jié)合染色偏紅 ph pi pr 帶負(fù)電荷多易與m+結(jié)合染色偏藍(lán)磷酸鹽緩沖液（ph6.4 6.8 ）保證細(xì)胞受色時(shí)恒定最佳ph條件4. 注意事項(xiàng)（ 1）血涂

3、片干透后固定，否則細(xì)胞在染色過程中容易脫落。（ 2）沖洗時(shí)應(yīng)以流水沖洗，不能先倒掉染液，以防染料沉著在血涂片上。沖洗時(shí)間不能過久，以防脫色。如血涂片上有染料顆粒沉積，可滴加甲醇，然后立即用流水沖洗。（ 3）染色過淡可以復(fù)染，復(fù)染時(shí)應(yīng)先加緩沖液，然后加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡，也可用甲醇脫色。六、方法學(xué)評(píng)價(jià)1. 血涂片制備用血量少、操作簡(jiǎn)單，是應(yīng)用最廣泛的方法。瘧原蟲、微絲蚴等檢查可采用厚血膜涂片法。2 / 20.2. 血液細(xì)胞染色瑞氏染色法：最經(jīng)典、最常用。對(duì)于細(xì)胞質(zhì)成分、中性顆粒等可獲得很好的染色效果，但對(duì)細(xì)胞核的著色能力略差。吉姆薩染色法：對(duì)細(xì)胞核、寄生蟲（如瘧原蟲等）著色較好，結(jié)

4、構(gòu)更清晰，但對(duì)細(xì)胞質(zhì)成分的著色能力略差。瑞 - 吉姆薩復(fù)合染色：使細(xì)胞胞質(zhì)、顆粒、胞核等均獲得滿意的染色效果。瑞氏染料的質(zhì)量規(guī)格用吸光度比值（ra ）來評(píng)價(jià)。新配制染料ra 接近 2，降到（ 1.3 0.1 ）染料即可使用。新鮮配制的染料偏堿，須在室溫或是37下貯存一定時(shí)間，待亞甲藍(lán)逐漸變?yōu)樘烨郻，貯存時(shí)間愈久，染色效果愈好。在貯存過程中，必須加塞，以防甲醇揮發(fā)和氧化成甲酸。所用甲醇須為ar級(jí)，若其中含過多丙酮，會(huì)使染色偏酸，白細(xì)胞著色不良。七、質(zhì)量控制1. 血涂片制備血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快，血膜愈厚，反之則愈薄。血細(xì)胞比容增高、血液黏度較高時(shí)，采用小血滴、小角度、慢推；血細(xì)胞比容減

5、低、血液較稀時(shí)，應(yīng)采用大血滴、大角度、快推。2. 血液細(xì)胞染色染色深淺與血涂片中細(xì)胞數(shù)量、血膜厚度、染色時(shí)間、染液濃度、ph 值密切相關(guān)。血清與血漿的區(qū)別是a. 血清缺少某些凝血因子b. 血漿缺少某些凝血因子c. 血清缺少凝血酶d. 血漿缺少凝血酶e. 血清缺少纖維蛋白正確答案a答案解析血清與血漿的差別是：血清缺少某些凝血因子，如凝血因子（纖維蛋白原）、（凝血酶原）、等。嬰幼兒做血常規(guī)檢查時(shí)，多使用的采血部位是a. 頸外靜脈b. 耳垂毛細(xì)血管c. 足跟毛細(xì)血管d. 肘部靜脈e. 以上都是正確答案c答案解析手指采血操作方便，檢查結(jié)果比較恒定，世界衛(wèi)生組織（ who）推薦采集左手無名指指端內(nèi)側(cè)血液

6、，嬰幼兒可采集大踇趾或足跟內(nèi)外側(cè)緣血液，嚴(yán)重?zé)齻颊?，可選擇皮膚完整處采血。下列說法錯(cuò)誤的是a. 采血前要仔細(xì)檢查針頭是否安裝牢固b. 采血前要仔細(xì)檢查針筒內(nèi)是否有空氣和水分c. 使針頭與皮膚成 30角斜行快速刺入皮膚d. 抽血時(shí)針?biāo)梢酝獬楹蛢?nèi)推e. 取下注射器針頭，將血液沿試管壁緩緩注入抗凝管中正確答案 d3 / 20.答案解析抽血時(shí)只能外抽，不能內(nèi)推。導(dǎo)致溶血的因素不包括a. 抽血速度太快b. 血液注入容器時(shí)未取下針頭c. 注入抗凝管后劇烈振蕩混勻d. 注射器干燥e. 取血后直接放入 4冰箱正確答案 d答案解析注射器中有水會(huì)導(dǎo)致溶血，干燥不會(huì)。血液標(biāo)本4保存，可使血液分析儀a. 紅細(xì)胞計(jì)

7、數(shù)結(jié)果減低b. 紅細(xì)胞分布寬度增加c. 血小板計(jì)數(shù)結(jié)果增加d. 血小板計(jì)數(shù)結(jié)果減低e. 白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果減低正確答案d答案解析血漿在 4保存 24h 后，某些凝血因子活性減少 95%，低溫（ 4）保存血液可使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果減低。影響血涂片時(shí)血膜厚度的因素有a. 血滴大小b. 血黏度高低c. 推片角度d. 推片速度e. 以上都是正確答案 e答案解析制備涂片時(shí)，血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快，血膜愈厚，反之則愈薄。血細(xì)胞比容增高、血液黏度較高時(shí)，應(yīng)采用小血滴、小角度、慢推，可得滿意結(jié)果；血細(xì)胞比容減低、血液較稀時(shí)，應(yīng)采用大血滴、大角度、快推。瑞氏染色中起溶解作用的有機(jī)溶劑是a. 無水乙醇b. 甲醇

8、c. 氯仿d. 二甲苯e. 乙二醇正確答案 b答案解析瑞氏染色中甲醇的作用：一是溶解亞甲藍(lán)和伊紅；二是固定細(xì)胞形態(tài)。下列有關(guān)瑞氏染色法的敘述中，哪項(xiàng)是正確的a. 是酸性染料亞甲藍(lán)和堿性染料伊紅組合的復(fù)合染料b. 細(xì)胞核被染成紅色c. 新鮮配制的染料可以馬上使用d. 對(duì)細(xì)胞的染色原理僅有正負(fù)電荷的作用4 / 20.e. 是血涂片染色最常用的方法正確答案 e答案解析瑞氏染色法：是最經(jīng)典、最常用的血涂片染色方法。對(duì)于細(xì)胞質(zhì)成分、中性顆粒等可獲得很好的染色效果，但對(duì)細(xì)胞核的著色能力略差。第一節(jié)抗原抗體反應(yīng)的原理抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原決定簇（表位）和抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性，這種

9、特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的。除兩者分子構(gòu)型高度互補(bǔ)外，抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸，才有足夠的結(jié)合力。一、抗原抗體結(jié)合力抗原抗體是一種非共價(jià)結(jié)合，不形成共價(jià)鍵。1. 靜電引力（庫(kù)倫引力） ：是因抗原、抗體帶有相反電荷的氨基與羧基基團(tuán)間相互吸引的能力，這種吸引力的大小和兩個(gè)電荷間的距離平方成反比。兩個(gè)電荷距離越近，靜電引力越大。2. 范德華力 ：這是原子與原子、分子與分子相互接近時(shí)分子極化作用發(fā)生的一種吸引力，是抗原、抗體兩個(gè)大分子外層軌道上電子相互作用時(shí)，兩者電子云中的偶極擺動(dòng)而產(chǎn)生的引力。這種引力的能量小于靜電引力。3. 氫鍵結(jié)合力 ：是供氫體上的氫原子與受氫體上氫原子間的引

10、力。其結(jié)合力較強(qiáng)于范德華引力。4. 疏水作用：最強(qiáng)。 水溶液中兩個(gè)疏水基團(tuán)相互接觸，由于對(duì)水分子的排斥而趨向聚集的力。二、抗原抗體的親和性和親合力親和性指抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對(duì)應(yīng)的抗原表位之間相適應(yīng)而存在的引力，它是抗原抗體間固有的結(jié)合力。親和性用平衡常數(shù)k 來表示， k 值越大，親和性越強(qiáng)，與抗原結(jié)合也越牢固?？贵w的親合力指抗體結(jié)合部位與抗原表位間結(jié)合的強(qiáng)度，與抗體結(jié)合價(jià)、抗體的親和性、抗原有效表位數(shù)目等相關(guān)。三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體抗體和大多數(shù)的抗原同屬蛋白質(zhì)，在通常的血清學(xué)反應(yīng)條件下帶有 負(fù)電荷 ，形成水化層，成為新水膠體，因此，蛋白質(zhì)分子不會(huì)相互凝集或沉淀。當(dāng)抗原與抗體結(jié)合，使

11、其表面電荷減少，水化層變薄，失去親水性能，抗原抗體復(fù)合物成為疏水膠體。在電解質(zhì)作用下，膠體粒子表面的電荷被中和，使疏水膠體進(jìn)一步靠攏，形成可見的抗原抗體復(fù)合物。第二節(jié)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)一、特異性抗原表位與抗體超變區(qū)結(jié)合的特異性，是兩者在化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補(bǔ)關(guān)系所決定的。這一特性，是應(yīng)用于臨床診斷的基礎(chǔ)。但某些天然抗原具有多種抗原表位，與另一物質(zhì)可能有共同抗原表位，對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生交叉反應(yīng)。二、可逆性抗原抗體是非共價(jià)結(jié)合，故不牢固，是一種動(dòng)態(tài)平衡過程。抗原抗體的親合力及反應(yīng)條件（如離子強(qiáng)度、 ph 等）可影響解離。親和層析法就是利用這個(gè)原理來純化抗原或抗體。三、比例性5 / 20.抗原抗體比

12、例合適時(shí)，沉淀物形成快而多，稱為抗原抗體反應(yīng)的等價(jià)帶；若抗原或抗體極度過剩則無沉淀形成，稱為帶現(xiàn)象，抗體過量時(shí)，稱為前帶，抗原過量時(shí)，稱為后帶。四、階段性抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段。第一階段：抗原與抗體特異性結(jié)合階段，此階段僅需幾秒至幾分鐘，但不出現(xiàn)可見反應(yīng)。第二階段：可見反應(yīng)階段，此階段需要數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)。反應(yīng)過程受到反應(yīng)條件（如溫度、ph、電解質(zhì)、抗原抗體比例等）的影響。第三節(jié)影響抗原抗體反應(yīng)的因素一、反應(yīng)物自身因素1. 抗體：濃度、特異性、親和性和等價(jià)帶的寬窄都影響抗原抗體反應(yīng)。應(yīng)選擇高特異性、高親合力的抗體作為診斷試劑。但單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng)。2. 抗原：理化性狀、分子量、抗原表

13、位的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果。顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng)，可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng)，單價(jià)抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。二、環(huán)境因素1. 電解質(zhì)：抗原抗體反應(yīng)時(shí)常用0.85%nacl 或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。2. 酸堿度：抗原抗體反應(yīng)一般在ph6 9 之間進(jìn)行。3. 溫度： 一般為 15 40，常用反應(yīng)溫度為 37，如高于 56，可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體解離，甚至變性或破壞。4. 振蕩：適當(dāng)振蕩也可加速反應(yīng)。第四節(jié)免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的類型免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)。早期包括：凝集現(xiàn)象、沉淀現(xiàn)象、溶血現(xiàn)象等。免疫組織化學(xué)技術(shù)、免疫測(cè)定、放射免疫技術(shù)、熒光免疫技術(shù)、酶免疫技術(shù)、化學(xué)發(fā)光

14、免疫技術(shù)和金免疫技術(shù)等?？乖贵w反應(yīng)不包括a. 特異性b. 比例性c. 可逆性d. 多價(jià)性e. 電離性正確答案 e答案解析抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)：特異性、可逆性、比例性和階段性?？梢杂靡阎乖蚩贵w檢測(cè)相應(yīng)的抗體或抗原，是由于抗原抗體反應(yīng)的a. 特異性b. 比例性c. 可逆性d. 多價(jià)性e. 電離性正確答案 a6 / 20.答案解析抗原抗體的特異性指的是抗原表位與抗體超變區(qū)結(jié)合的特異性，是兩者在化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補(bǔ)關(guān)系所決定的?？乖贵w反應(yīng)需要合適的溫度才有利于二者結(jié)合，其范圍一般為a.4 10b.11 15c.16 20d.15 40e.41 50正確答案d答案解析抗原抗體反應(yīng)的溫度一般為

15、 15 40，常用反應(yīng)溫度為 37，如高于 56，可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體解離，甚至變性或破壞。不是影響抗原抗體反應(yīng)的因素是a. 溫度b. 電解質(zhì)c.phd. 適當(dāng)振蕩e. 隔絕空氣正確答案 e答案解析影響抗原抗體反應(yīng)的因素：反應(yīng)物自身因素：抗體、抗原。環(huán)境因素：電解質(zhì)、酸堿度、溫度、振蕩。不屬于抗原抗體反應(yīng)的是a.pcr技術(shù)b. 免疫電泳技術(shù)c. 酶聯(lián)免疫技術(shù)d. 免疫比濁技術(shù)e. 放射免疫技術(shù)正確答案a答案解析聚合酶鏈反應(yīng)（ polymerase chain reaction ，簡(jiǎn)稱 pcr）又稱無細(xì)胞分子克隆或特異性dna序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。細(xì)菌的化學(xué)組成相同：水 +無機(jī)鹽 +蛋

16、白質(zhì) +糖類 +脂類 +核酸（ dna/rna）等。細(xì)菌含有核糖核酸（rna）和脫氧核糖核酸（dna）兩種核酸。 rna主要存在于胞質(zhì)中，占細(xì)菌干重的10%； dna則存在于染色體和質(zhì)粒中，占細(xì)菌干重的3%。特有： 肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、脂多糖（lps）等。細(xì)菌的物理性狀帶負(fù)電荷：可結(jié)合正電荷。染色反應(yīng)、凝集反應(yīng)、抑菌和殺菌作用。菌體小，表面積大：有利于物質(zhì)交換，生長(zhǎng)繁殖迅速。半透明：染色法、比濁法、分光光度計(jì)法。半透膜：高滲低滲培養(yǎng)基。營(yíng)養(yǎng)類型：根據(jù)細(xì)菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需要的不同，將細(xì)菌分為兩大營(yíng)養(yǎng)類型。（ 1）自營(yíng)菌：能以簡(jiǎn)單的無機(jī)碳化物、氮化物作為碳源、氮源，合成菌體所需的大分子，其能量來自

17、7 / 20.無機(jī)化合物的氧化（化學(xué)能），也可通過光合作用而獲得（光能），如固氮菌。（ 2）異營(yíng)菌：不能以無機(jī)碳化合物作為唯一的碳源，必須利用有機(jī)物如糖類、蛋白質(zhì)、蛋白胨和氨基酸作為碳源和氮源，僅有少數(shù)異養(yǎng)菌能利用無機(jī)氮化物，合成菌體所需的大分子，其所需的能量大多從有機(jī)物質(zhì)氧化而獲得。細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖條件1. 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：碳、氮源、無機(jī)鹽、微量元素、生長(zhǎng)因子、水。2. 大多最適 ph7.2 7.6 （霍亂弧菌嗜堿，結(jié)核分枝桿菌嗜酸）。3. 大多嗜溫菌，最適溫度為 37。4. 氣體：（ 1）需氧菌：必須有氧（空氣）。（ 2）微需氧菌： 5%左右的低氧環(huán)境。（ 3）厭氧菌：必須在無氧的環(huán)境。（ 4）兼

18、性厭氧菌：在有氧和無氧環(huán)境中均能生長(zhǎng)。細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖規(guī)律繁殖方式個(gè)體：二分裂。群體：液體培養(yǎng)基或瓊脂平板培養(yǎng)。繁殖速度通常每 20 30min 分裂一次，結(jié)核分枝桿菌1820h 分裂一次。細(xì)菌群體繁殖：生長(zhǎng)曲線8 / 20.生 曲 分 4 個(gè) 期：1） 期：是 菌 入新 境后的適 段， 菌數(shù)不增加，甚至 稍有減少。2） 數(shù)期：此期 菌以幾何 數(shù)增 （20 21 22 23 24），在生 曲 上，活菌數(shù)的 數(shù)呈直 上升，增 極快。此期 菌的形 、染色性、生理活性都 典型， 外界 境因素的作用 敏感。3） 定期：由于培養(yǎng)基中 養(yǎng)物 消耗，毒性 物 聚，ph 下降使 菌繁殖速度 下降， 菌死亡數(shù) 逐

19、 上升， 菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)大致平衡。4）衰亡期： 菌繁殖逐 減慢，死亡逐 增多，死菌數(shù)超 活菌數(shù)。 菌的能量來源： 菌生物氧化；需氧呼吸； 酵。 菌的死亡菌數(shù) 大于活菌數(shù)的 段是a. 期b. 數(shù)生 期c. 衰亡期d. 定期e. 都不是正確答案 c9 / 20.答案解析衰亡期：細(xì)菌死亡速率逐步增加，活菌數(shù)逐步減少，死亡數(shù)大于增加數(shù)。細(xì)菌形態(tài)和生理活性比較典型的階段是a. 遲緩期b. 對(duì)數(shù)增殖期c. 穩(wěn)定期d. 衰亡期e. 增殖期正確答案 b答案解析對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)菌代謝活躍而穩(wěn)定，其大小、形態(tài)、染色性和生化反應(yīng)典型，對(duì)外界因素反應(yīng)敏感，是檢測(cè)細(xì)菌生物學(xué)性狀和進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)的適宜階段。結(jié)核分枝桿菌

20、在適宜條件下分裂一次所需時(shí)間為a.20 分鐘b.2 小時(shí)c.5 小時(shí)d.10 小時(shí)e.18 小時(shí)正確答案e答案解析 大多數(shù)細(xì)菌繁殖的速度為每 20 30min 分裂一次， 稱為一代， 而結(jié)核分枝桿菌則需要 18 20h 才能分裂一次，故結(jié)核患者的標(biāo)本培養(yǎng)需時(shí)較長(zhǎng)。第五章溶血性貧血及其實(shí)驗(yàn)診斷貧血由多種原因引起外周血單位容積內(nèi)血紅蛋白（hb）濃度、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（rbc）及血細(xì)胞比容（hct ）10 / 20.低于本地區(qū)、相同年齡和性別的人群的參考值下限的一種癥狀。一、概述1. 溶血性貧血的定義和分類（熟練掌握）2. 溶血性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷步驟（熟練掌握）3. 溶血性貧血檢驗(yàn)的基本方法（各實(shí)驗(yàn)的臨床意

21、義熟練掌握，其他了解）以下各部分包括的實(shí)驗(yàn)幾乎要求掌握二、紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)三、紅細(xì)胞酶缺陷檢驗(yàn)四、珠蛋白合成異常的檢驗(yàn)五、免疫性溶血性貧血的檢驗(yàn)一、概述1. 定義和分類（ 1）是由于某種原因使 紅細(xì)胞存活期縮短，破壞增加，超過了骨髓代償能力所引起的一類貧血。（ 2）分類1）病因?qū)W分類，見下表。2）按溶血發(fā)生的部位分類：血管內(nèi)及血管外溶血。主要溶血性貧血的病因分類類型疾病名稱紅細(xì)胞 內(nèi)在缺陷 所致的溶貧（ 遺傳性 / 先天性 ）遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥膜缺陷遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥遺傳性口形紅細(xì)胞增多癥葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶缺陷癥酶缺陷丙酮酸激酶缺陷癥葡萄糖磷酸異構(gòu)酶缺陷癥嘧啶 5核苷酸酶缺

22、陷癥珠蛋白生成障礙性貧血血紅蛋白病鐮狀細(xì)胞貧血不穩(wěn)定血紅蛋白病類型疾病名稱紅細(xì)胞 外來因素 所致的溶貧（ 獲得性 ）11 / 20.自身免疫性溶血性貧血冷凝集素綜合征免疫 因素陣發(fā)性冷性血紅蛋白尿癥藥物誘發(fā)的免疫性溶血性貧血新生兒同種免疫性溶血性貧血溶血性輸血反應(yīng)膜缺陷陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥微血管病性溶血性貧血物理因素心源性溶血性貧血行軍性血紅蛋白尿癥化學(xué)因素砷化物、硝基苯、苯肼、蛇毒等中毒感染因素溶血性鏈球菌、瘧原蟲、產(chǎn)氣莢膜桿菌等感染其它脾功能亢進(jìn)2. 溶血性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷步驟（ 1）確定有無溶血項(xiàng)目參考值溶血情況網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)0.5% 1.5%絕對(duì)值（24 84） 109/l異形紅細(xì)胞

23、0 0.6%嗜多色性紅細(xì)胞0.2% 1%骨髓紅系增生活躍， （間期分裂細(xì)胞增多，可見核染色質(zhì)小體及卡波環(huán)）粒紅比例2 4:1縮小或倒置項(xiàng)目參考值溶血情況膽紅素12 / 20.總膽紅素5.1 17.1 mol/l間接膽紅素為主間接膽紅素1.7 10.2 mol/l血清游離 hb40mg/l血管內(nèi)溶血血清結(jié)合珠蛋白0.5 1.5g/l高鐵血紅素白蛋白+血紅蛋白尿+rous 試驗(yàn)+血清乳酸脫氫酶109 245u/l紅細(xì)胞壽命（51crt1/2 ）25 35 天縮短血漿游離血紅蛋白增多1. 血紅蛋白血癥2. 血漿結(jié)合珠蛋白降低3. 血紅蛋白尿 - 快速的血管內(nèi)溶血4. 含鐵血黃素尿 - 慢性溶血13

24、/ 20.（尿含鐵血黃素試驗(yàn)-rous 試驗(yàn)）左：正常尿液與血紅蛋白尿；右：含有鐵顆粒的腎小管上皮細(xì)胞（普魯士藍(lán)染色）。血紅蛋白代謝產(chǎn)物增多1. 總膽紅素？2. 間接膽紅素？3. 尿膽原排出？14 / 20.4. 糞膽原排出？（ 2）確定血管內(nèi)與血管外溶血血管內(nèi)與血管外溶血的鑒別特征血管內(nèi)溶血血管外溶血病因紅細(xì)胞內(nèi)缺陷，紅細(xì)胞內(nèi)缺陷，外因素獲得性多見外因素遺傳性多見紅細(xì)胞主要破壞場(chǎng)所血管內(nèi)單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)病程急性多見常為慢性，可急性加重貧血、黃疸常見常見肝、脾腫大少見常見紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變少見常見紅細(xì)胞脆性改變變化小多有改變hb 血癥常 100mg/dl輕度增高h(yuǎn)b 尿常見無或輕微尿含鐵血黃素慢

25、性可見一般陰性骨髓再障危象少見急性加重時(shí)可見ldh增高輕度增高15 / 20.（ 3）確定溶血的原因不同類型溶血性貧血的實(shí)驗(yàn)選擇主要溶 疑及的溶血性血部位貧血疾病名稱篩選 / 排除試驗(yàn)確診試驗(yàn)遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥；遺傳性橢圓紅細(xì)胞形態(tài)檢查高滲冷溶血試驗(yàn)滲透脆性試驗(yàn)?zāi)さ鞍纂娪痉治瞿ぶ|(zhì)形紅細(xì)胞增多癥酸化甘油溶血試驗(yàn)分析血管外自身溶血試驗(yàn)遺傳性口形紅膜蛋白基因分析紅細(xì)胞腺苷三磷酸活性細(xì)胞增多癥家系調(diào)查coombs試驗(yàn)高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)紅細(xì)胞 g-6-pdg6pd熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)g-6-pd-cnsha活性測(cè)定；硝基四氮唑藍(lán)試驗(yàn)基因分析heinz 小體生成試驗(yàn)血管外丙酮酸激酶紅細(xì)胞形態(tài)檢查pk活性定

26、量測(cè)定缺乏癥pk熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)中間代謝產(chǎn)物測(cè)定嘧啶 -5 - 核苷酶嘧啶核苷酶比率嘧啶 -5 - 核苷酶缺乏癥活性測(cè)定紅細(xì)胞形態(tài)檢查紅細(xì)胞鐮變?cè)囼?yàn)珠蛋白生成障礙性貧血紅細(xì)胞包涵體試驗(yàn)血紅蛋白電泳異丙醇沉淀試驗(yàn)珠蛋白肽鏈分析血紅蛋白病熱變性試驗(yàn)基因分析血管外heinz 小體生成試驗(yàn)吸收光譜測(cè)定溫抗體型自身免疫性溶貧紅細(xì)胞形態(tài)檢查coombs試驗(yàn)冷凝集素綜合征紅細(xì)胞形態(tài)檢查冷凝集素試驗(yàn)coombs試驗(yàn)藥物致免疫性溶血性貧血（半抗原型、紅細(xì)胞形態(tài)檢查加藥后 iagt16 / 20.自身免疫型）coombs試驗(yàn)新生兒同種紅細(xì)胞形態(tài)檢查；coombs試驗(yàn)；ret ；膽紅素代謝檢查；孕婦產(chǎn)前免疫性免疫性溶血

27、癥血型鑒定抗體檢查血管外遲發(fā)性溶血性紅細(xì)胞形態(tài)檢查；ret ； coombs試驗(yàn)輸血反應(yīng)進(jìn)一步的血型鑒定聚凝胺試驗(yàn)陣發(fā)性睡眠性rous 試驗(yàn)ham試驗(yàn)?zāi)螂[血試驗(yàn)蛇毒溶血因子試驗(yàn)血紅蛋白尿癥蔗糖溶血試驗(yàn)補(bǔ)體敏感性試驗(yàn)血管內(nèi)高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)蠶豆病g-6-pd 熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)紅細(xì)胞 g-6-pd 活性測(cè)硝基四氮唑藍(lán)試驗(yàn)定；基因分析heinz 小體生成試驗(yàn)陣發(fā)性冷性rous 試驗(yàn)冷熱溶血試驗(yàn)血紅蛋白尿癥coombs試驗(yàn)藥物致免疫性溶血性貧血coombs試驗(yàn)iagt 及加藥后的 iagt（奎尼丁型）血管內(nèi)急發(fā)性溶血性coombs試驗(yàn)血型鑒定及不同方輸血反應(yīng)法的交叉配血試驗(yàn)微血管病性紅細(xì)胞形態(tài)檢查；re

28、t ；止血與血栓實(shí)驗(yàn)室血小板計(jì)數(shù)；血漿溶血性貧血檢查及其他相關(guān)檢查游離血紅蛋白測(cè)定等3. 溶血性貧血檢驗(yàn)的基本方法及應(yīng)用（ 1）血漿游離血紅蛋白測(cè)定（ 2）血清結(jié)合珠蛋白（ hp）測(cè)定（ 3）血漿高鐵血紅素白蛋白測(cè)定（ 4）血紅蛋白尿測(cè)定（ 5）尿含鐵血黃素試驗(yàn)各實(shí)驗(yàn)的臨床意義要求熟練掌握（ 1）血漿游離血紅蛋白測(cè)定1）原理：利用血紅蛋白具有類過氧化物酶活性的特點(diǎn)，在過氧化氫（h202）參與下，可催化無色的鄰聯(lián)甲苯胺脫氫而顯藍(lán)色，根據(jù)顯色深淺，與同時(shí)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白液對(duì)照，可測(cè)出血漿游離血紅蛋白的量。參考值： 40mg/l。2）臨床意義： 血管內(nèi)溶血時(shí)顯著升高；珠蛋白生成障礙性貧血、自身免疫

29、性溶貧時(shí)輕度增高；血管外溶血、紅細(xì)胞膜缺陷性溶貧時(shí)不增高。（ 2）血清結(jié)合珠蛋白（hp）測(cè)定1）原理：在待測(cè)血清中加入一定量的血紅蛋白（hb）液，使之與待測(cè)血清中的結(jié)合珠蛋白（hp）形成hp-hb 復(fù)合物。通過電泳法將結(jié)合的hp-hb 復(fù)合物與未結(jié)合的hb 分開，測(cè)定hp-hb 復(fù)合物的量，從而得到血清中結(jié)合珠蛋白的含量。參考值： 0.8 2.7g/l 。2）臨床意義：增高見于妊娠、慢性感染、惡性腫瘤等，但不能排除溶血；減低見于各種溶血、肝病或無結(jié)合珠蛋白血癥、巨幼細(xì)胞貧血等。17 / 20.（ 3）血漿高鐵血紅素白蛋白測(cè)定1）原理：血漿中游離的血紅蛋白可被氧化為高鐵血紅蛋白，再分解為珠蛋白和

30、高鐵血紅素，后者先與血中的血紅蛋白結(jié)合，血紅蛋白消耗完后，高鐵血紅素與白蛋白結(jié)合形成高鐵血紅素白蛋白，后者與硫化銨形成一個(gè)容易識(shí)別的銨血色原，用光譜儀觀察結(jié)果，在綠光區(qū)558nm處有一最佳吸收區(qū)帶。結(jié)果：陰性。2）臨床意義：血管內(nèi)溶血時(shí)陽(yáng)性。本試驗(yàn)陽(yáng)性說明機(jī)體存在嚴(yán)重血管內(nèi)溶血，是嚴(yán)重血管內(nèi)溶血的指標(biāo)。（ 4）血紅蛋白尿測(cè)定1）原理：血管內(nèi)有大量紅細(xì)胞破壞，血漿中的游離血紅蛋白超過1000mg/l 時(shí)，血紅蛋白可隨尿排出，尿中血紅蛋白檢查陽(yáng)性。其特點(diǎn)為外觀呈濃茶色或透明的醬油色，鏡檢無紅細(xì)胞，但隱血試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)。結(jié)果：健康人呈尿隱血試驗(yàn)陰性。2）臨床意義： 血型不合的輸血 、大面積燒傷、惡性瘧疾、某些傳染病、溶血性中毒癥等，明顯增多。遺傳性或繼發(fā)性溶血性貧血 ，如蠶豆病、陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥、行軍性血紅蛋白尿及陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥等。（ 5）尿含鐵血黃素試驗(yàn)1）原理： 又稱 rous 試驗(yàn) 。當(dāng)血紅蛋白通過腎濾過時(shí)，部分鐵離子以含鐵血黃素的形式沉積于上皮細(xì)胞，并隨尿液排出。尿中含鐵血黃素是不穩(wěn)定的鐵蛋白聚合體，其中的高鐵離子與亞鐵氰化鉀作用，在酸性環(huán)境下產(chǎn)生藍(lán)色的亞鐵氰化鐵沉淀。尿沉渣腎小管細(xì)胞內(nèi)外可見直徑1 3