注射劑滅菌工藝(內(nèi)容豐富)

1、注射劑滅菌工藝驗證漫談,主講人：李新成 杭州天杭空氣質(zhì)量檢測有限公司,1,1,參考內(nèi)容,滅菌工藝驗證的必要性,滅菌安全相關(guān)的藥害事件 美國：1971年3月，7個州8家醫(yī)院發(fā)生了405起敗血癥 中國：2006年8月，“欣弗”事件，涉及十幾個省，160多起嚴(yán)重不良反應(yīng)，8人死亡 注：引發(fā)藥害事件的產(chǎn)品均通過了無菌檢查,2,參考內(nèi)容,滅菌工藝驗證的必要性,無菌檢驗的局限性一： 無菌的定義 理論上：無菌沒有任何活的微生物 實際上：無法證明產(chǎn)品中沒有活微生物存在 無法對整批產(chǎn)品進(jìn)行100%檢驗 檢驗的結(jié)果只是一個基于“可能性”的判斷 無菌檢驗用培養(yǎng)基有其局限性 只進(jìn)行細(xì)菌和真菌的檢驗 對結(jié)果的判定是基于

2、“是否在培養(yǎng)基中生長” 培養(yǎng)條件（如溫度和時間）是有限的 我們的工作環(huán)境及操作是在相對無菌的狀態(tài),3,參考內(nèi)容,滅菌工藝驗證的必要性,無菌檢驗的局限性二： 產(chǎn)品污染率、無菌檢查抽樣量和無菌檢查 “通過”率，可以用如下數(shù)學(xué)公式表示： P=(1-q)n q：產(chǎn)品污染率 P：無菌檢查通過率 n：無菌檢查抽樣量 按照藥典規(guī)定的瓶抽樣量，假設(shè)該批產(chǎn)品的污染率為，則該批產(chǎn)品“通過”無菌檢查的概率為,4,參考內(nèi)容,滅菌工藝驗證的必要性,我們看一下，當(dāng)固定污染率為0.1%，抽樣20瓶時，通過無菌檢查的通過率： (1-0.001)20=98.0% 檢出染菌的概率為2.0% 抽樣1000瓶時，通過無菌檢查的通過率

3、： (1-0.001)1000=36.7% 檢出染菌的概率為63.3% 抽樣3000瓶時，通過無菌檢查的通過率： (1-0.001) 3000=4.97% 檢出染菌的概率為95.03%,5,參考內(nèi)容,滅菌工藝驗證的必要性,共識無菌檢查合格不能得出產(chǎn)品無菌的結(jié)論 滅菌產(chǎn)品的無菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無菌檢驗，而是取決于生產(chǎn)過程中采用合格的滅菌工藝、嚴(yán)格的GMP管理和良好的無菌保證體系 滅菌工藝的驗證是無菌保證的必要條件 滅菌工藝經(jīng)過驗證后，方可正式用于生產(chǎn),6,參考內(nèi)容,附：無菌產(chǎn)品檢測取樣的時機(jī)和位置,無菌灌裝產(chǎn)品 批開始、結(jié)束及重大故障和調(diào)整后 最多24小時為一批 USP 每天灌裝的產(chǎn)品應(yīng)

4、分別做無菌檢驗 最終滅菌產(chǎn)品 從滅菌柜中最冷點取樣 對經(jīng)不同滅菌柜滅菌的產(chǎn)品應(yīng)分別進(jìn)行無菌檢驗,7,參考內(nèi)容,滅菌工藝驗證中的幾個常用術(shù)語,3,1. 無菌保證值SAL： 中國藥典、美國藥典、歐洲藥典都將最終滅菌產(chǎn)品的無菌保證水平規(guī)定為微生物污染概率不超過百萬分之一；采用無菌生產(chǎn)工藝的產(chǎn)品，其無菌保證水平為微生物污染概率不超過千分之一,8,參考內(nèi)容,4,2、D值： 在一溫度下，殺滅90%微生物（或殘存率為10%）所需的滅菌時間。 3、Z值： 降低一個lgD值所需升高的溫度，即滅菌時間減少到原來的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅99%的微生物所需提高的溫度。 4、 F值： 在一定滅菌

5、溫度（T）下給定的Z值所產(chǎn)生的滅菌效果與在參比溫度（T0）下給定的Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時所相當(dāng)?shù)臅r間。F值以min為單位。 注：參比溫度121時為F0,170 時為FH。,滅菌工藝驗證中的幾個常用術(shù)語,9,參考內(nèi)容,滅菌工藝驗證中的幾個常用術(shù)語,5、過度殺滅法 F012 微生物殘存概率10-6 6、殘存概率法 8 F0 12 微生物殘存概率10-6 7、 無菌生產(chǎn)工藝 無菌保證一般只能達(dá)到10-3水平,10,參考內(nèi)容,滅菌工藝驗證中的幾個常用術(shù)語,8 滅菌率 指在某一溫度T()下滅菌lmin 所獲得的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間L LF0/FTD121/DT10(T121)/Z 9 標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間 系滅菌過

6、程賦予一個產(chǎn)品121下的 等效滅菌時間 F0 F0=FT10(T121)/Z=t10(T121)/10,11,參考內(nèi)容,5,歐盟滅菌方法選擇的對策,歐盟1999年8月正式開始執(zhí)行滅菌方法選擇的決策樹 決策樹的作用是在考慮各種復(fù)雜因素的情況下輔助選擇最佳的滅菌方法,12,參考內(nèi)容,6,溶液劑型產(chǎn)品滅菌方法選擇的決策樹,產(chǎn)品是否可以在121濕熱滅菌15分鐘,產(chǎn)品是否可以濕熱滅菌F08 分鐘，達(dá)到SAL 10-6,采用高壓滅菌鍋 12115分鐘,是,否,處方是否可以通過微生物滯留過濾器過濾,無菌配藥和灌封,采用濕熱滅菌 F08 分鐘,除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合,是,否,是,否,13,參考內(nèi)容,7,非溶

7、液劑型、半固體或干粉產(chǎn)品滅菌方法選擇的決策樹,產(chǎn)品是否可以在160干熱滅菌120分鐘,產(chǎn)品是否可以在另外一種時間和溫度條件下標(biāo)準(zhǔn)周期干熱滅菌達(dá)到SAL 10-6,采用160干熱滅菌120分鐘,是,否,產(chǎn)品是否可以用其他非干熱方法滅菌，如電離輻射，吸收最小劑量 25KGY,采用另一種替代時間和溫度條件下標(biāo)準(zhǔn)周期干熱滅菌達(dá)到SAL 10-6,是,否,產(chǎn)品是否可以使用經(jīng)過驗證的稍低輻射劑量滅菌（參見ISO11137）,采用最小輻射吸收最小劑量 25KGY進(jìn)行輻射滅菌,是,否,處方是否可以通過微生物滯留過濾器過濾,采用經(jīng)過驗證的輻射劑量滅菌,是,否,無菌配藥和灌封,除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合,是,否,1

8、4,參考內(nèi)容,8,決策樹越往下，風(fēng)險越大 需要提供的必要證據(jù)越多,15,參考內(nèi)容,10,滅菌工藝驗證要求,驗證內(nèi)容： 空載熱分布 滿載熱分布 熱穿透試驗 微生物挑戰(zhàn)試驗（殘存概率法） 滅菌前微生物污染水平-數(shù)量和耐熱性 -過程控制,16,參考內(nèi)容,找出冷點 多個溫度探頭均勻/重點分布在腔室內(nèi)， 重復(fù)運行代表性滅菌程序，記錄個點溫度 變化曲線，計算各點溫差 通過比較各點溫度與平均溫度的差異確定冷點,11,空載熱分布試驗,17,參考內(nèi)容,找出裝載方式下的冷點 以空載試驗結(jié)果為基礎(chǔ) 更接近實際情況,12,滿載熱分布試驗,18,參考內(nèi)容,熱穿透試驗,測定產(chǎn)品實際溫度和F0值 以熱分布（空載、滿載）試驗

9、結(jié)果為基 礎(chǔ)，進(jìn)一步確定實際樣品（或模擬樣品） 的冷點. 重要標(biāo)準(zhǔn) 冷點F0 平均F02min,13,19,參考內(nèi)容,14,熱穿透試驗,注意： 同品種不同濃度考察不同濃度對熱穿透的影響 不同包裝規(guī)格進(jìn)行最大和最小包裝規(guī)格的試驗 不同裝載量進(jìn)行最小和最大裝載量的試驗 不同滅菌溫度進(jìn)行最高溫度條件下的試驗,20,參考內(nèi)容,15,證明通過該工藝能殺滅一定污染量和D值的微生物 -生物指示劑 -根據(jù)D值計算接種量 -植入芽孢的產(chǎn)品放在冷點部位 -運行滅菌程序后含芽孢的產(chǎn)品應(yīng)通過無菌檢查,微生物挑戰(zhàn)試驗,21,參考內(nèi)容,以上試驗一般應(yīng)連續(xù)進(jìn)行三次,空載、滿載熱分布試驗考察滅菌 設(shè)備的特性和狀況 熱穿透和微

10、生物挑戰(zhàn)試驗考察滅 菌設(shè)備在執(zhí)行特定滅菌工藝時賦予產(chǎn)品的 F0值，以及對微生物孢子的實際殺滅效果。,22,參考內(nèi)容,滅菌前產(chǎn)品的微生物控制,監(jiān)控的原因 產(chǎn)品滅菌前微生物監(jiān)控是國際規(guī)范的要求：世界衛(wèi)生組織GMPl992 版第17.50 款規(guī)定，應(yīng)制定產(chǎn)品滅菌前微生物污染的控制標(biāo)準(zhǔn)，這一標(biāo)準(zhǔn)與所采用(滅菌)方法的有效性及熱原污染的風(fēng)險相關(guān)。 注射劑滅菌后的無菌保證值與滅菌前產(chǎn)品的微生物污染程度及污染菌的耐熱性有關(guān)，對滅菌前微生物污染的狀況進(jìn)行檢控是對產(chǎn)品作無菌評價的先決條件。 控制滅菌前微生物污染的程度是控制產(chǎn)品熱原污染的重要手段。,23,參考內(nèi)容,滅菌前產(chǎn)品的微生物控制,監(jiān)控的標(biāo)準(zhǔn) 目前歐洲一些

11、大容量注射劑生產(chǎn)公司采用的標(biāo)準(zhǔn)如下： 每100ml 藥液中污染菌不得超過100 個。 在設(shè)定的滅菌程序下，污染菌的耐熱性(即D 值)不導(dǎo)致滅菌后產(chǎn)品微生物污染的概率大于106。,24,參考內(nèi)容,滅菌前產(chǎn)品的微生物控制,監(jiān)控方法 (1)取樣 在正常生產(chǎn)過程中，從每批產(chǎn)品灌裝開始、中間及結(jié)尾各取一瓶灌封好的產(chǎn)品作滅菌前微生物監(jiān)控檢查。應(yīng)當(dāng)使用事先滅菌并做好標(biāo)記的瓶子取樣。 (2)試驗方法 污染水平檢查：先用滅菌的5吐溫充分濕潤0.45m 濾膜，然后定量過濾藥液，將此濾膜移至營養(yǎng)瓊脂平板上，在3035培養(yǎng)37 天，計數(shù)。 耐熱性檢查：另用一張0.45m 濾膜，經(jīng)滅菌的5吐溫充分濕潤后，過濾生物負(fù)荷檢

12、查所剩余的藥液樣品。將此濾膜轉(zhuǎn)移入裝有無菌的待監(jiān)測產(chǎn)品的試管中，在沸水浴上煮沸30min，然后在3035下在硫乙醇酸鹽肉湯中培養(yǎng)，觀察是否有耐熱菌生長。,25,參考內(nèi)容,滅菌前產(chǎn)品的微生物控制,當(dāng)污染水平超標(biāo)準(zhǔn)時，應(yīng)對污染菌進(jìn)行鑒別，調(diào)查污染菌的來源并取相應(yīng)糾正措施。當(dāng)耐熱性檢查發(fā)現(xiàn)藥液存在耐熱菌污染時，應(yīng)測定污染菌的D 值或采用定時沸騰法將它和已知生物指示劑的D 值作比較，然后根據(jù)滅菌的F0 值及污染菌的耐熱性對產(chǎn)品無菌作出評價。 如果曝?zé)岷髽悠返臋z測結(jié)果為不長菌，則說明產(chǎn)品中無耐熱孢子,26,參考內(nèi)容,滅菌器溫度均勻度的標(biāo)準(zhǔn),USP 24 在1211中規(guī)定，干熱滅菌器在不低于250空載運行

13、時，腔室各點允許的溫差范圍在15。 USP 24提到： 在121下滅菌時，各測溫點之間的溫差允許在1之內(nèi)。 JB200012003中規(guī)定：大、小容量注射劑滅菌器的熱分布試驗中，冷點溫度與腔室平均溫度之差1 ；熱穿透試驗中，冷點F0與腔室平均F0之差2min.,27,參考內(nèi)容,干熱滅菌、除熱原的標(biāo)準(zhǔn),BP1993年版規(guī)定： 僅以滅菌為最終目的的干熱滅菌系統(tǒng)，必須保證其最小的FH值大于17060min。干熱除熱原必須保證其暴露實際溫度和時間相當(dāng)于25030min。 說明： 25030min除熱原效應(yīng)FH900 中國藥典2005規(guī)定： 160170 120min; 170180 60min； 250

14、 45min（可除熱原） 說明： 250 45min除熱原效應(yīng)FH1365。,28,參考內(nèi)容,隧道式滅菌干燥機(jī)除熱原的標(biāo)準(zhǔn),口服液瓶灌裝聯(lián)動線隧道式滅菌干燥機(jī) JB20007.32004中規(guī)定： 口服液瓶、抗生素瓶在隧道高溫區(qū)300以上至少5min。除熱原效應(yīng)FH1276； 安瓿隧道式滅菌干燥機(jī)JB20002.32004中規(guī)定：安瓿在隧道高溫區(qū)300以上至少4min。除熱原效應(yīng)FH1021； 表冷式隧道干燥機(jī)標(biāo)準(zhǔn)：FH1365（與藥典接規(guī)）,29,參考內(nèi)容,說明,過去，很多人將流通蒸氣滅菌法誤認(rèn)為是終端滅菌法。其實流通蒸氣滅菌法應(yīng)以無菌生產(chǎn)工藝（除菌過濾，嚴(yán)格控制與藥液接觸的設(shè)備、器具和環(huán)境的

15、微生物污染水平等）為基礎(chǔ)，流通蒸氣加熱只是無菌生產(chǎn)工藝的補(bǔ)充手段，不計算F0，微生物殘存概率10-3 流通蒸氣100加熱30分鐘，相當(dāng)于F0值0.24,30,參考內(nèi)容,滅菌器驗證過程中曾遇到的幾個問題,1、 濕熱滅菌柜腔室內(nèi)溫度上下分層 排氣不徹底； 疏水閥堵塞。 以前，我們在杭州一家藥廠的一臺老式滅菌柜的驗證過程中曾遇到過這個問題。 2、隧道式烘箱溫度控制顯示與驗證儀溫度差異很大 測溫探頭質(zhì)量問題； 測溫探頭位置（高度）。 我們在富陽一家藥廠驗證時曾遇到過這個問題。,31,參考內(nèi)容,滅菌器驗證過程中曾遇到的幾個問題,3、隧道式烘箱腔室溫度分布差異很大 部分加熱管損壞； 進(jìn)風(fēng)、回風(fēng)的調(diào)節(jié)問題。

16、 在寧波一家藥廠驗證時曾遇到過這個問題。,32,參考內(nèi)容,國內(nèi)企業(yè)滅菌工藝驗證常見缺陷,無包裝規(guī)格 無裝載方式 未對每一種產(chǎn)品每一種包裝規(guī)格的每一種裝載方式進(jìn)行驗證 采用留點溫度計監(jiān)測溫度 無溫度探頭校準(zhǔn)記錄 驗證的滅菌工藝與實際工藝不一致 未驗證最差滅菌條件 僅針對生產(chǎn)線進(jìn)行驗證，未結(jié)合產(chǎn)品進(jìn)行驗證 設(shè)定的驗證合格標(biāo)準(zhǔn)達(dá)不到無菌保證水平（SAL）10-6,33,參考內(nèi)容,國內(nèi)企業(yè)滅菌工藝驗證常見缺陷,生物指示劑使用不規(guī)范 國內(nèi)缺乏某些無菌藥品生產(chǎn)必備的檢測儀器 D值測定儀 企業(yè)的微生物實驗室能力薄弱 缺乏專業(yè)人員 缺乏菌種分離鑒別的條件和能力 無菌生產(chǎn)工藝未進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝和微生物截流量試驗,

17、34,參考內(nèi)容,注射劑生產(chǎn)常見問題問答,1、問：洗烘灌聯(lián)動線在正常運行時，玻璃瓶通過隧道烘箱滅菌后即進(jìn)行灌裝，但當(dāng)灌裝機(jī)出現(xiàn)故障或不間斷檢修的情況下，受聯(lián)動線的限制，必然會導(dǎo)致隧道烘箱內(nèi)的一部分玻璃瓶將處于高溫區(qū)，長時間滯留時會不會對瓶本身產(chǎn)生影響？ 答：要看什么材質(zhì)的，可以做驗證，烘洗后做耐酸耐堿試驗。 2、問：熱風(fēng)循環(huán)烘箱溫度時有失控現(xiàn)象，如何解決？ 答：可以檢查一下溫度傳感器是否失靈，電磁閥是否工作正常：一、更換溫度傳感器，二、更換溫度控制儀。,35,參考內(nèi)容,注射劑生產(chǎn)常見問題問答,3、問：玻璃瓶在隧道烘箱里冷爆的原因和風(fēng)速有關(guān)系嗎？ 答： 玻璃瓶爆裂，其原因就在于溫差或是外力擊打，此

18、問題中的原因是溫差，可能是風(fēng)速的原因，就是說冷卻得不均衡，或是移動過程中接觸到低溫的物體，尤其是熱傳導(dǎo)較快的金屬物體。再有就是所用玻璃瓶的質(zhì)量不很好，建議選用正規(guī)廠家生產(chǎn)的。,36,參考內(nèi)容,注射劑生產(chǎn)常見問題問答,4、在對濕熱滅菌器進(jìn)行熱分布、熱穿透的驗證時，如果柜內(nèi)找到的冷點在3次驗證中不同，該如何處理？答：一般來說，空載熱分布的冷點應(yīng)該是在確定的位置周圍，否則就可能是設(shè)備、壓力、空氣置換不完全、蒸汽質(zhì)量等原因引起。對于裝載熱穿透，大容量注射劑（LVP，100ml）冷點位于產(chǎn)品的幾何中心和沿縱軸位于產(chǎn)品的底部，但需要驗證確認(rèn)。冷點的定位在小容量注射劑中并不典型，因為溶液加熱的速率幾乎與滅菌

19、器相同。還有，容器的方向也會影響冷點的位置，當(dāng)容器旋轉(zhuǎn)或翻轉(zhuǎn)時，可能不存在可辨別的冷點。如果裝載不變，容量相同，蒸汽穿透不存在阻隔等，冷點仍然無法重現(xiàn)，則應(yīng)檢查設(shè)備、工藝、壓力、蒸汽質(zhì)量等方面可能存在的不確定性。,37,參考內(nèi)容,注射劑生產(chǎn)常見問題問答,5、熱穿透試驗中的模擬樣品是什么概念，是指實驗室小批量樣品嗎？ 答：熱穿透試驗中的模擬樣品是指熱穿透性能與真實樣品一致的樣品，不是實驗室小批量樣品。,38,參考內(nèi)容,注射劑生產(chǎn)常見問題問答,6、請問滅菌前微生物污染水平和耐熱性（D值）的測試方法？ 答：微生物污染水平通常采用濾膜過濾法截留微生物，再將濾膜轉(zhuǎn)移到固體培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)并作微生物計數(shù)。

20、應(yīng)注意過濾的體積、截留微生物的數(shù)量，保證足夠的檢出率（足量的過濾量）和可計數(shù)性（截留的微生物太多就沒法計數(shù)了）。 每批產(chǎn)品都進(jìn)行的耐熱性測試并非D值測試，而是所謂沸騰試驗一種定性試驗。將截留了微生物的濾膜放入裝有同種產(chǎn)品藥液的試管中，進(jìn)行水浴煮沸15分鐘或更長時間，對該藥液進(jìn)行無菌檢查，如陰性則通過，呈陽性，說明污染菌是耐熱菌，則需要進(jìn)一步測D值。99%以上的檢品是非耐熱菌。 D值測定相當(dāng)復(fù)雜，請參考藥品生產(chǎn)驗證指南（藍(lán)皮書，國家藥監(jiān)局編）第三篇第三章第一節(jié)，有詳細(xì)介紹。,39,參考內(nèi)容,附：D值測定法,生物指示劑耐熱性測定儀 在滅菌過程中形成矩形脈沖曲線，即升溫及降溫極快，能保持恒定的溫度，

21、曝?zé)徇^程容易計時。 假設(shè)條件 微生物存活數(shù)從N0到滅菌終點始終與曝?zé)釙r間呈線性關(guān)系（對數(shù)規(guī)則）。,40,參考內(nèi)容,方法一：不生長分?jǐn)?shù)法（陰性分?jǐn)?shù)法）,最可能數(shù)測定法 將一組樣品（至少10個樣本）置于設(shè)定滅菌溫度下，加熱到設(shè)定時間后，分別作無菌檢查。 當(dāng)滅菌溫度T為121時，可用下式計算D值 DTF0/lgN0-lg2.303lg(n/q) 式中：n樣品總數(shù) q曝?zé)崽幚砗鬅o菌樣品數(shù),41,參考內(nèi)容,方法一：不生長分?jǐn)?shù)法（陰性分?jǐn)?shù)法）,估算法 系列組（每組至少10個樣品），置于預(yù)定溫度下，按等差遞增的方式設(shè)置不同的曝?zé)釙r間，分別進(jìn)行熱處理，處理后的樣品放入無菌液體中適宜溫度下培養(yǎng)，記錄每組樣品中沒

22、有微生物生長的樣品數(shù)，按下表方式進(jìn)行排列,42,參考內(nèi)容,選擇從全部生長的最長曝?zé)釙r間組（B）到顯示完全不生長最短曝?zé)釙r間組（G）之間的數(shù)據(jù)計算D值。 首先計算出孢子完全殺滅時間t t=tk-d/2-(d/10f) 式中：tk陰性分?jǐn)?shù)范圍下限（全部樣品不長菌所需的最短曝?zé)釙r間） d 等差值,43,參考內(nèi)容,方法一：不生長分?jǐn)?shù)法（陰性分?jǐn)?shù)法）,然后根據(jù)下式計算D值 Dt/(lgN0+0.2507) 假設(shè)N0105，其它實驗數(shù)據(jù)如上表所示，則D值的計算為 t152/2-（2/1026）=8.8(min) D=8.8/(5+0.2507)=1.7(min),44,參考內(nèi)容,方法二：存活曲線法,測試兩

23、個樣品（至少），在設(shè)定溫度下（如121）分別取兩個不同的曝?zé)釙r間，然后將熱處理后的樣品及對照樣品（未經(jīng)熱處理的樣品）采用平皿計數(shù)法或經(jīng)薄膜過濾并置于適當(dāng)培養(yǎng)基表面培養(yǎng)的方法對每個樣品中存活微生物進(jìn)行計數(shù)（NS），將實驗數(shù)據(jù)的平均值取常用對數(shù)（lg），對相應(yīng)的曝?zé)釙r間F0作圖，可得如圖所示的存活曲線,45,參考內(nèi)容,在存活曲線上，從微生物差值為一個對數(shù)單位的二個點分別作X軸和Y軸的平行線，在X軸上即可求得D值，也可用下面的公式計算 D121F0/（lgN0lgNS） 舉例：D值測定中曝?zé)釙r間為5min,而N0105，NS102，則 D1215/(lg105- lg102)=5/3=1.7(min

24、),46,參考內(nèi)容,方法二：存活曲線法,從上圖中也可以看出，D值為存活曲線斜率的負(fù)倒數(shù)（1/K），因此D值可在存活曲線的直線段，用未加權(quán)最小二次線性回歸分析法按下式求得 式中u曝?zé)釙r間 y曝?zé)釛l件下存活菌落數(shù)的平均值 n所得初驗數(shù)據(jù)的組數(shù),47,參考內(nèi)容,注射劑生產(chǎn)常見問題問答,7、對于選擇殘存概率法最終滅菌的產(chǎn)品，如果滅菌前每批檢測微生物限度，而微生物限度檢測時間為72小時，而實際連續(xù)生產(chǎn)的生產(chǎn)周期遠(yuǎn)遠(yuǎn)短于72小時，其檢測結(jié)果僅是對滅菌后產(chǎn)品無菌保證水平的參考嗎？答：顯然滅菌前微生物含量檢查的結(jié)果遠(yuǎn)遠(yuǎn)滯后于生產(chǎn)過程，其目的不是用于對當(dāng)批產(chǎn)品的中間控制。該檢查的意義主要有兩項： 第一，用于評價

25、該批產(chǎn)品的無菌保證水平； 第二，長期積累了多批滅菌前微生物含量的數(shù)據(jù)后，可以對生產(chǎn)系統(tǒng)在滅菌前的各工藝步驟的微生物污染狀況作整體的評估，從而指示該生產(chǎn)體系是否有效地將微生物污染控制在很好的水平，是否需要進(jìn)行改進(jìn)等。,48,參考內(nèi)容,注射劑生產(chǎn)常見問題問答,8、請問微生物種類、數(shù)量研究的方法？所需的設(shè)備？如果采用殘存概率法，是否在生產(chǎn)過程中必須對微生物水平進(jìn)行測定？ 答：微生物污染的程度即數(shù)量的檢查可以按照藥典收載的微生物限度檢查方法進(jìn)行； 微生物的種類可以從以下幾方面依次展開： 1）通過肉眼觀察菌落形態(tài)； 2）鏡檢形態(tài)和運動性； 3）一般生化試驗：革蘭氏染色或3KOH試驗； 4）生化鑒定（即A

26、PI試驗）鑒別到種。 采用殘存概率法時，應(yīng)該檢測產(chǎn)品滅菌前微生物污染水平，包括污染菌的煮沸試驗（如100，15分鐘）和微生物計數(shù)。,49,參考內(nèi)容,注射劑生產(chǎn)常見問題問答,9、過度殺滅法是否確定不需進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)試驗？ 答：過度殺滅法的內(nèi)涵是產(chǎn)品中的微生物下降12個對數(shù)，微生物挑戰(zhàn)試驗是證明微生物的殘存概率不大于10-6，故過度殺滅法可不進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)試驗。,50,參考內(nèi)容,注射劑生產(chǎn)常見問題問答,10、如何進(jìn)行藥液儲存周期驗證，儲存周期起點、終點如何確定，使配制完成后滅菌前，還是過濾后滅菌前，取樣點如何設(shè)置，檢驗方法及合格判定標(biāo)準(zhǔn)如何確定？ 答：進(jìn)行藥液儲存時間驗證的目的是為了確保藥液的微生

27、物水平控制在下道工藝要求范圍內(nèi)并確保對產(chǎn)品的無菌性和內(nèi)毒素等質(zhì)量指標(biāo)無不良影響。一般來講，配液完成后到無菌過濾前，或過濾完成后到滅菌前（終端滅菌產(chǎn)品）是考察的重點，方法和標(biāo)準(zhǔn)需要根據(jù)自己產(chǎn)品的工藝特點確定。,51,參考內(nèi)容,討論1:隧道式滅菌干燥機(jī)的傳輸速度,提請注意審核一下你們注射劑工藝規(guī)程中，是否規(guī)定的干熱滅菌干燥機(jī)傳輸帶的運行速度？沒有制定傳輸帶的運行速度，滅菌除熱原的效果（時間）靠什么保證？ 再請大家審核一下你們以前做的驗證方案或驗證報告（包括委托專業(yè)公司進(jìn)行的驗證），里面有沒有體現(xiàn)出“傳輸速度”這個關(guān)鍵的驗證點呢？倘若這個點沒有出現(xiàn)在方案或報告中，你驗證的是什么呢？,52,參考內(nèi)容,

28、討論2：裝載熱分布和熱穿透合做試驗的分析,濕熱滅菌柜驗證時，裝載熱分布和熱穿透試驗?zāi)闶欠珠_做還合在一起做的呢？當(dāng)你合在一起做時候，哪些探頭是用于熱分布的，哪些是用于熱穿透的，你標(biāo)注清楚了嗎？你合在一起做的目的描述了嗎？對兩組數(shù)據(jù)分析了嗎？ 濕熱滅菌柜的測溫探頭的裝置方式，不同企業(yè)有時是不同的，有的是暴露在滅菌環(huán)境中，測空氣的溫度，有的則裝在模擬產(chǎn)品中，測滅菌產(chǎn)品內(nèi)部的溫度。也就是說，有的和熱分布是一致的，有的和熱穿透試驗是一致的，不同的安裝方式對于你制定滅菌程序時的影響你考慮了嗎？,53,參考內(nèi)容,討論3：接二連三的注射劑產(chǎn)品出事提醒些什么,齊二藥事件 不法商人王桂平偽造藥品生產(chǎn)許可證等證件，

29、于年月將工業(yè)原料二甘醇假冒藥用輔料丙二醇出售給齊二藥?；炇抑魅侮惞鸱业热宋磳z測圖譜與“藥用標(biāo)準(zhǔn)丙二醇圖譜”進(jìn)行對比鑒別，并在發(fā)現(xiàn)檢驗樣品“相對密度值”與標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)重不符的情況下，將其改為正常值，簽發(fā)合格證，致使假藥“亮菌甲素注射液”出籠并造成名患者使用該產(chǎn)品后出現(xiàn)急性腎功能衰竭并死亡。,54,參考內(nèi)容,討論3：接二連三的注射劑產(chǎn)品出事提醒些什么,“欣弗”事件 安徽華源生物藥業(yè)有限公司2006年6月至7月生產(chǎn)的克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液未按批準(zhǔn)的工藝參數(shù)滅菌，降低滅菌溫度，縮短滅菌時間，增加滅菌柜裝載量，影響了滅菌效果。經(jīng)中國藥品生物制品檢定所對相關(guān)樣品進(jìn)行檢驗，結(jié)果表明，無菌檢查和熱原檢查不符

30、合規(guī)定。 工藝參數(shù)不得任意進(jìn)行更改,55,參考內(nèi)容,討論3：接二連三的注射劑產(chǎn)品出事提醒些什么,甲氨蝶呤事件 上海華聯(lián)制藥廠在生產(chǎn)過程中，現(xiàn)場操作人員將硫酸長春新堿尾液混于注射用甲氨蝶呤及鹽酸阿糖胞苷等批號藥品中，導(dǎo)致了多個批次的藥品被硫酸長春新堿污染，造成重大的藥品生產(chǎn)質(zhì)量責(zé)任事故 標(biāo)識、清場、工作態(tài)度、培訓(xùn),56,參考內(nèi)容,討論3：接二連三的注射劑產(chǎn)品出事提醒些什么,完達(dá)山刺五加注射液事件 2008年7月1日，昆明特大暴雨造成庫存的刺五加注射液被雨水浸泡。完達(dá)山藥業(yè)公司云南銷售人員張某從完達(dá)山藥業(yè)公司調(diào)來包裝標(biāo)簽，更換后銷售。 正是這些被雨水浸泡過的產(chǎn)品，致使3名使用該藥品的患者死亡。 二

31、次污染、貯存條件、標(biāo)簽管理,57,參考內(nèi)容,附件1：滅菌器驗證流程,1. 首次驗證 2. 偏差管理、變更控制 3. 再 驗 證 4. 階段性的風(fēng)險評估,58,參考內(nèi)容,首次驗證,用戶要求 URS（ User Requirement Specification ） 功能標(biāo)準(zhǔn)FDS（ Functional Design Specification 設(shè)計確認(rèn)D Q （ Design Qualification ） 工廠測試FAT（ Factory Acceptance Test ） 現(xiàn)場測試 SAT（ Site Acceptance Test ） 安裝確認(rèn)I Q（ Installation Qual

32、ification ） 運行確認(rèn) O Q（ Operational Qualification ） 性能確認(rèn) P Q（ Performance Qualification ）,59,參考內(nèi)容,首次驗證用戶要求 URS,1. 工藝描述 (產(chǎn)品,部件) 生產(chǎn)流程介紹、滅菌的工藝 、產(chǎn)品特性, 物料的特性、產(chǎn)量、滅菌的效果達(dá)到要求, (Temp FO)等 2. 滅菌柜驗證的主要合格標(biāo)準(zhǔn) 3. 一些指南的要求 4. 環(huán)境和安全要求 5. 技術(shù)要求及布局要求 機(jī)械部分的要求 電氣部分的要求 控制系統(tǒng)的要求 6. 介質(zhì)的要求,60,參考內(nèi)容,URS 的關(guān)注點,對于自己列出的要求, 首先要自己判斷是否理解，

33、是否合理 由于設(shè)備大都是按標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計的, 必須確保供應(yīng)商對URS仔細(xì)閱讀,61,參考內(nèi)容,首次驗證功能標(biāo)準(zhǔn) FDS,由供應(yīng)商提供 設(shè)備 控制系統(tǒng) 對驗證的設(shè)計也是FDS的一部分 大多設(shè)備的FDS都是針對型號編寫的, 可以要求供應(yīng)商提供FDS/URS 符合表,62,參考內(nèi)容,首次驗證設(shè)計確認(rèn) DQ,DQ 的參考資料: URS/ FDS/ 圖紙/ 法規(guī) 確保設(shè)計滿足URS和法規(guī)的要求 對于FDS 和URS 的不符合項,需要作出決定是整改還是接受 從DQ開始,所有的文件變更都是GMP檢查的范圍!,63,參考內(nèi)容,首次驗證工廠測試 FAT,在出廠之前對設(shè)備進(jìn)行整體的測試 對制造文件的詳細(xì)檢查 材料(材質(zhì)

34、證明) 焊接檢查 壓力容器證書 對于IQ/OQ 中一些無法檢查的項目,需要安排在FAT中進(jìn)行，如：一些控制功能的模擬, 一些挑戰(zhàn)實驗,64,參考內(nèi)容,首次驗證現(xiàn)場測試 SAT,設(shè)備在現(xiàn)場組裝完成后進(jìn)行的整體測試 確保系統(tǒng)能按設(shè)計要求正常運轉(zhuǎn) 是對員工進(jìn)行培訓(xùn)的機(jī)會 開始準(zhǔn)備SOP 可以作為IQ 的準(zhǔn)備,65,參考內(nèi)容,首次驗證安裝確認(rèn) IQ,文件的檢查 儀表與管道的檢查 介質(zhì)的檢查 設(shè)備主要特性及安全特性的檢查,66,參考內(nèi)容,首次驗證運行確認(rèn)OQ,儀表的校準(zhǔn)（控制用儀表和記錄用儀表） LOOP 測試 安全檢查 報警測試 單項功能測試 整體性能測試 程序運行 電子記錄和電子簽名的測試,67,參

35、考內(nèi)容,首次驗證性能確認(rèn) PQ,1 前提條件 滅菌柜 IQ、OQ 完成 程序及裝載的預(yù)測試完成 純蒸汽的PQ 第一第二階段完成 壓縮空氣的PQ完成 驗證儀器的確認(rèn)完成 SOP 完成, 所用的程序和裝載方式確定 人員培訓(xùn)完成 所有的測試材料準(zhǔn)備完畢,68,參考內(nèi)容,首次驗證性能確認(rèn) PQ,2. PQ 中的重要測試項目 空腔體溫度分布 最小裝載的溫度分布 最大裝載的溫度分布 中間裝載的溫度分布 (根據(jù)實際情況) 微生物挑戰(zhàn)實驗 泄漏率測試 Air Detector 測試 對于每一種測試, 重復(fù)三次,69,參考內(nèi)容,滅菌驗證的一些基本要求,驗證用儀器必須提供校準(zhǔn)證書 熱電偶/電阻在使用前和使用后都必

36、須進(jìn)行校準(zhǔn) 對于大容量的瓶子,熱電偶/電阻在瓶子中的位置必須進(jìn)行確認(rèn) 如果采用替代物質(zhì)進(jìn)行PQ, 必須進(jìn)行等同性測試 必須確定產(chǎn)品滅菌的接受標(biāo)準(zhǔn)F0值的范圍 對于濕熱滅菌柜,需要考慮平衡時間 對于收集的數(shù)據(jù),必須及時進(jìn)行分析,總結(jié),70,參考內(nèi)容,偏差管理和變更控制,對于驗證過程中出現(xiàn)的偏差必須遵循偏差管理的流程 如果需要變更, 則還需要遵循變更的流程,71,參考內(nèi)容,再驗證,滅菌的程序和裝載發(fā)生變化后,必須進(jìn)行再驗證 滅菌柜使用一定周期后,必須對程序和裝載進(jìn)行再次確認(rèn). 通常為一年 再驗證的策略是列出程序和裝載的列表, 有選擇地對關(guān)鍵裝載進(jìn)行再驗證,72,參考內(nèi)容,風(fēng)險評估,幾個術(shù)語： 風(fēng)險

37、：是危害發(fā)生的可能性和嚴(yán)重性的組合。 風(fēng)險管理：即系統(tǒng)性的應(yīng)用管理方針、程序?qū)崿F(xiàn)對 目標(biāo)、任務(wù)的風(fēng)險分析、評價和控制。 風(fēng)險分析：運用有用的信息和工具，對危險進(jìn)行識 別、評價。 風(fēng)險控制：即制定減小風(fēng)險的計劃和對風(fēng)險減少計 劃的執(zhí)行，及執(zhí)行后結(jié)果的評價。,73,參考內(nèi)容,風(fēng)險管理,有什么風(fēng)險? 從哪兒來? 對什么有影響? 嚴(yán)重程度怎樣? 我們?nèi)绾螒?yīng)對?,74,參考內(nèi)容,風(fēng)險管理的應(yīng)用程序,75,參考內(nèi)容,風(fēng)險管理過程,風(fēng)險評估,對危害源的鑒定和對接觸這些危害源造成的風(fēng)險的分析和評估,1）什么時候出錯 2）出錯的可能性有多大 3）結(jié)果是什么（嚴(yán)重性）,風(fēng)險控制,制訂降低和/或 接受風(fēng)險的決定,1

38、）風(fēng)險是否在可接受的水平 以上？ 2）怎么才能降低、控制或消 除風(fēng)險 3）在利益、風(fēng)險和資源間合 適的平衡點是什么？ 4）作為鑒定風(fēng)險控制結(jié)果而 被引入的新的風(fēng)險是否處 于受控狀態(tài),風(fēng)險通報,風(fēng)險回顧,決策制訂人及其他人員之間交換或分享風(fēng)險及其管理信息,風(fēng)險管理的過程結(jié)果應(yīng)結(jié)合新的知識與經(jīng)驗進(jìn)行回顧,風(fēng)險評估,風(fēng)險評估,76,參考內(nèi)容,質(zhì)量風(fēng)險的評估,風(fēng)險評估是基于對危害發(fā)生的頻次和危害程度這兩方面考慮而得出的綜合結(jié)論，評估結(jié)果需被量化。,發(fā)生的可能 第1級:稀少(發(fā)生頻次小于每十年一次) 第2級:不太可能發(fā)生(每十年一次) 第3級:可能發(fā)生(每五年一次) 第4級:很可能發(fā)生(每一年一次) 第5級:經(jīng)常發(fā)生(幾乎每次都可能發(fā)生),嚴(yán)重程度 第1級:可忽略 第2級:微小 第3級:中等 第4級:嚴(yán)重 第5級:毀滅性,風(fēng)險指示值=危害嚴(yán)重性指數(shù)值危害發(fā)生頻次指數(shù)值,77,參考內(nèi)容,質(zhì)量風(fēng)險的評估,