高三生物課件動物細胞工程.ppt

1、23.01.2021,a,1,二、動物細胞工程,動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞工程技術的基礎,動物細胞培養(yǎng)；動物細胞融合 單克隆抗體；胚胎移植；核移植,一）動物細胞培養(yǎng),23.01.2021,a,2,動物胚胎或幼齡動物的組織、器官,細胞懸浮液,胰蛋白酶,10代細胞,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),無限傳代,單個細胞,加培養(yǎng)液,23.01.2021,a,3,2）為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料,1）動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處,主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。 獨特之處：1、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動物血清等,因為這些組織或器官

2、上的細胞生命力旺盛，分裂能力強,動物體細胞大都生活在液體的環(huán)境,23.01.2021,a,4,血清是一種很好的營養(yǎng)物質，含 有動物體細胞生長所需要的營養(yǎng)物質， 并給動物創(chuàng)造了生活環(huán)境,任何血清使用前必須經過鑒定，只有 無菌、無內毒素、無溶血或低溶血、蛋白 質以及營養(yǎng)素達一定標準以上才能使用,血清與血漿的主要區(qū)別是血清里不含 纖維蛋白原,23.01.2021,a,5,3）為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞,成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細胞懸浮液利于培養(yǎng),4）動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體,不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體,23.01.202

3、1,a,6,胰蛋白酶,動物組織細胞間隙中含有一定量的 彈性纖維等蛋白質，它們與細胞一起， 形成具有一定彈性和韌性的組織和器官,彈性纖維易被胰蛋白酶分解,胃蛋白酶,No,23.01.2021,a,7,貼壁生長,大多數(shù)組織細胞不適應懸浮生長， 必須在固定的表面生長和分裂,脫離下來,當表面相互接觸時就停止分裂增殖 接觸抑制,23.01.2021,a,8,動物胚胎或幼齡動物的組織、器官,胰蛋白酶,單個細胞,加培養(yǎng)液,制成,細胞懸浮液,細胞株,細胞系,細胞增殖,無限傳代,去掉組織間蛋白,動物細胞培養(yǎng)不能 最終培養(yǎng)成生物體,23.01.2021,a,9,細胞系,細胞株,遺傳物質未發(fā)生改變,遺傳物質發(fā)生改變

4、無限增殖,23.01.2021,a,10,注意界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細胞株和細胞系,遺傳物質改變,23.01.2021,a,11,動物細胞培養(yǎng)技術的應用,1）生產蛋白質生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。 （2）獲得大量自身的皮膚細胞，用于植皮。 （3）用于檢測有毒物質 （4）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預防疾病提供理論依據(jù),23.01.2021,a,12,植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較,23.01.2021,a,13,二）動物細胞融合,23.01.2021,a,14,細胞A,細胞B,雜種細胞,滅活的病毒,物理法 化學法,仙臺病毒 皰疹病毒 新城雞瘟病毒,23.01.2

5、021,a,15,用滅活的病毒誘導動物細胞融合過程,23.01.2021,a,16,誘導動物細胞融合的方法,物理法：離心、振動、電刺激 化學法：聚乙二醇（PEG） 生物法：滅活的動物病毒,喪失感染活性,23.01.2021,a,17,植物、動物細胞融合的比較,23.01.2021,a,18,動物細胞融合最重要的用途,制備單克隆抗體,23.01.2021,a,19,23.01.2021,a,20,讀下面一段文字資料，思考以下問題,長期以來，為了獲得抗體，采用的是把某種抗原反復注射到動物體內，然后從動物血清中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體，不僅產量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應不

6、夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn)，在動物發(fā)生免疫反應的過程中，體內的B細胞可以產生多達百萬種以上的特異性抗體，但是每個B細胞只分泌一種化學性質單一、特異性強的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個B細胞進行無性繁殖，即克隆,1）請從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念,用單個B細胞進行克隆，得到的細胞群能夠分泌一種化學性質單一、特異性強的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體,23.01.2021,a,21,提示1：僅用細胞培養(yǎng)技術可行嗎,2）怎樣才能獲得單克隆抗體,提示2：我們所學的哪種細胞是可以無限增殖的,提示3：有什么方法能使B細胞產生抗體的能力和腫瘤細胞無限增殖能力同時具備呢,23.01.2021,a,22,

7、1）提出問題：從動物血清中分離抗體的方法產量低、特異性差、純度低、反應不夠靈敏,三）單克隆抗體,2）設計方案：由于每一個B淋巴細胞只分泌 一種特異性抗體，利用單個B淋巴細胞進行無性 繁殖，就可以產生單克隆抗體,由于B淋巴細胞不能無限增殖，因此利用 小鼠骨髓瘤細胞與之融合，就可達到目的,23.01.2021,a,23,單克隆抗體制備過程,細胞融合、篩選,足夠數(shù)量的、能產生特定抗體的細胞群,單克隆抗體,選擇性培養(yǎng)基,選擇性培養(yǎng)基： 使親本細胞不能 存活而雜種細胞可存活,23.01.2021,a,24,1、本過程利用了哪些原理,免疫原理， 細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理,2、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞

8、與B細胞融合,這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳物質，不僅具有B細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領，因而可以獲得大量單克隆抗體,23.01.2021,a,25,細胞的同源性越近，融合形成的雜種細胞越易成活,有無限增殖能力（失去凋亡機制，失去接觸抑制等）的細胞是腫瘤細胞，而具有轉移能力的腫瘤細胞，稱為癌細胞,23.01.2021,a,26,單克隆抗體的應用,在基礎理論研究中具有重要意義 在疾病診斷、治療和預防方面，具有特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。 生物導彈,作為載體，運載抗癌藥物，形成“生物導彈”治療腫瘤,23.01.2021,a,27,資料：目前世界各國已經研制出數(shù)以百計的單

9、克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個必然趨勢。另外，用單克隆抗體做體內診斷，借以鑒別和定位體內“病灶”也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷,23.01.2021,a,28,小結,兩個過程,動物細胞培養(yǎng)過程,單克隆抗體制備過程,三個“一,一個誘導細胞融合的新方法 滅活病毒,一個新細胞雜交瘤細胞,一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性 強、靈敏度高的優(yōu)勢,多莉羊的培育過程,細胞核移植,23.01.2021,a,30,另一頭綿羊的子宮,23.01.2021,a,31,采用此方法可以將兩個不同種、屬的動物優(yōu)點集中在一起，產生具有雙親優(yōu)點的可繁殖的雜種動物,細胞核移植對動物優(yōu)良雜交種的無性 繁殖具有重大意義。這一技術的成功與完 善對于優(yōu)良家禽的無性繁殖和瀕臨絕跡的 珍貴動物的傳種意義重大,23.01.2021,a,32,克隆動物的研究意義,1.用于生物學和醫(yī)學研究的實驗動物 2.改良動物品種 3.治療人類疾病 4.保護瀕危動物,23.01.2021,a,33,動物的胚胎移植,解決某些妊娠時間長、每胎產子數(shù)量少的優(yōu)良種畜的繁殖速度問題,23.01.2021,a,34,1）激素促多排卵 （2）體外受精 （3）培育胚胎 （4）胚胎激