高三生物課件動(dòng)物細(xì)胞工程.ppt

1、23.01.2021,a,1,二、動(dòng)物細(xì)胞工程,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞融合 單克隆抗體；胚胎移植；核移植,一）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),23.01.2021,a,2,動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,細(xì)胞懸浮液,胰蛋白酶,10代細(xì)胞,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),無(wú)限傳代,單個(gè)細(xì)胞,加培養(yǎng)液,23.01.2021,a,3,2）為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料,1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處,主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。 獨(dú)特之處：1、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動(dòng)物血清等,因?yàn)檫@些組織或器官

2、上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng),動(dòng)物體細(xì)胞大都生活在液體的環(huán)境,23.01.2021,a,4,血清是一種很好的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，含 有動(dòng)物體細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)， 并給動(dòng)物創(chuàng)造了生活環(huán)境,任何血清使用前必須經(jīng)過(guò)鑒定，只有 無(wú)菌、無(wú)內(nèi)毒素、無(wú)溶血或低溶血、蛋白 質(zhì)以及營(yíng)養(yǎng)素達(dá)一定標(biāo)準(zhǔn)以上才能使用,血清與血漿的主要區(qū)別是血清里不含 纖維蛋白原,23.01.2021,a,5,3）為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng),4）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體,不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體,23.01.202

3、1,a,6,胰蛋白酶,動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的 彈性纖維等蛋白質(zhì)，它們與細(xì)胞一起， 形成具有一定彈性和韌性的組織和器官,彈性纖維易被胰蛋白酶分解,胃蛋白酶,No,23.01.2021,a,7,貼壁生長(zhǎng),大多數(shù)組織細(xì)胞不適應(yīng)懸浮生長(zhǎng)， 必須在固定的表面生長(zhǎng)和分裂,脫離下來(lái),當(dāng)表面相互接觸時(shí)就停止分裂增殖 接觸抑制,23.01.2021,a,8,動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,胰蛋白酶,單個(gè)細(xì)胞,加培養(yǎng)液,制成,細(xì)胞懸浮液,細(xì)胞株,細(xì)胞系,細(xì)胞增殖,無(wú)限傳代,去掉組織間蛋白,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能 最終培養(yǎng)成生物體,23.01.2021,a,9,細(xì)胞系,細(xì)胞株,遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變,遺傳物質(zhì)發(fā)生改變

4、無(wú)限增殖,23.01.2021,a,10,注意界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細(xì)胞株和細(xì)胞系,遺傳物質(zhì)改變,23.01.2021,a,11,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用,1）生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。 （2）獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮。 （3）用于檢測(cè)有毒物質(zhì) （4）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù),23.01.2021,a,12,植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較,23.01.2021,a,13,二）動(dòng)物細(xì)胞融合,23.01.2021,a,14,細(xì)胞A,細(xì)胞B,雜種細(xì)胞,滅活的病毒,物理法 化學(xué)法,仙臺(tái)病毒 皰疹病毒 新城雞瘟病毒,23.01.2

5、021,a,15,用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程,23.01.2021,a,16,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法,物理法：離心、振動(dòng)、電刺激 化學(xué)法：聚乙二醇（PEG） 生物法：滅活的動(dòng)物病毒,喪失感染活性,23.01.2021,a,17,植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,23.01.2021,a,18,動(dòng)物細(xì)胞融合最重要的用途,制備單克隆抗體,23.01.2021,a,19,23.01.2021,a,20,讀下面一段文字資料，思考以下問(wèn)題,長(zhǎng)期以來(lái)，為了獲得抗體，采用的是把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應(yīng)不

6、夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆,1）請(qǐng)從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念,用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行克隆，得到的細(xì)胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體,23.01.2021,a,21,提示1：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎,2）怎樣才能獲得單克隆抗體,提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的,提示3：有什么方法能使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖能力同時(shí)具備呢,23.01.2021,a,22,

7、1）提出問(wèn)題：從動(dòng)物血清中分離抗體的方法產(chǎn)量低、特異性差、純度低、反應(yīng)不夠靈敏,三）單克隆抗體,2）設(shè)計(jì)方案：由于每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌 一種特異性抗體，利用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性 繁殖，就可以產(chǎn)生單克隆抗體,由于B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖，因此利用 小鼠骨髓瘤細(xì)胞與之融合，就可達(dá)到目的,23.01.2021,a,23,單克隆抗體制備過(guò)程,細(xì)胞融合、篩選,足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群,單克隆抗體,選擇性培養(yǎng)基,選擇性培養(yǎng)基： 使親本細(xì)胞不能 存活而雜種細(xì)胞可存活,23.01.2021,a,24,1、本過(guò)程利用了哪些原理,免疫原理， 細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理,2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞

8、與B細(xì)胞融合,這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體,23.01.2021,a,25,細(xì)胞的同源性越近，融合形成的雜種細(xì)胞越易成活,有無(wú)限增殖能力（失去凋亡機(jī)制，失去接觸抑制等）的細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞，而具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細(xì)胞，稱(chēng)為癌細(xì)胞,23.01.2021,a,26,單克隆抗體的應(yīng)用,在基礎(chǔ)理論研究中具有重要意義 在疾病診斷、治療和預(yù)防方面，具有特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。 生物導(dǎo)彈,作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”治療腫瘤,23.01.2021,a,27,資料：目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單

9、克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個(gè)必然趨勢(shì)。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定位體內(nèi)“病灶”也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷,23.01.2021,a,28,小結(jié),兩個(gè)過(guò)程,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程,單克隆抗體制備過(guò)程,三個(gè)“一,一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活病毒,一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性 強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì),多莉羊的培育過(guò)程,細(xì)胞核移植,23.01.2021,a,30,另一頭綿羊的子宮,23.01.2021,a,31,采用此方法可以將兩個(gè)不同種、屬的動(dòng)物優(yōu)點(diǎn)集中在一起，產(chǎn)生具有雙親優(yōu)點(diǎn)的可繁殖的雜種動(dòng)物,細(xì)胞核移植對(duì)動(dòng)物優(yōu)良雜交種的無(wú)性 繁殖具有重大意義。這一技術(shù)的成功與完 善對(duì)于優(yōu)良家禽的無(wú)性繁殖和瀕臨絕跡的 珍貴動(dòng)物的傳種意義重大,23.01.2021,a,32,克隆動(dòng)物的研究意義,1.用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 2.改良動(dòng)物品種 3.治療人類(lèi)疾病 4.保護(hù)瀕危動(dòng)物,23.01.2021,a,33,動(dòng)物的胚胎移植,解決某些妊娠時(shí)間長(zhǎng)、每胎產(chǎn)子數(shù)量少的優(yōu)良種畜的繁殖速度問(wèn)題,23.01.2021,a,34,1）激素促多排卵 （2）體外受精 （3）培育胚胎 （4）胚胎激