免疫診斷簡要概述(ppt 40頁).ppt

1、第二十四章免 疫 診 斷,抗原抗體反應(yīng)的原理和特點,抗原抗體發(fā)生結(jié)合反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)抗原決定基與抗體的抗原結(jié)合部位之間的結(jié)構(gòu)互補性。 抗原抗體反應(yīng)的特點 1.高度特異 2.可逆性 3.可見性：適當濃度和比例、鹽離子,Ag/Ab Reactions,親和力（Affinity,凝集反應(yīng) 沉淀反應(yīng) 補體參加反應(yīng) 免疫標記技術(shù),第一節(jié) 抗原或抗體的檢測,Agglutination 顆粒性抗原（如細菌、細胞）與相應(yīng)抗體, 在適當電解質(zhì)存在的條件下, 經(jīng)過一定時間后出現(xiàn)肉眼可見凝集塊稱為凝集反應(yīng),間接凝集實驗,可溶性抗原或抗體吸附于與免疫無關(guān)的載體上,使之成為致敏載體顆粒,然后與相應(yīng)抗體或抗原作用,在電解質(zhì)

2、參與下出現(xiàn)的凝集反應(yīng),應(yīng)用 檢測可溶性抗原或抗體,Coombs (Antiglobulin)Tests,檢測血清中抗-Rh抗體,凝集抑制實驗,將可溶性抗原與相應(yīng)抗體預(yù)先作用,然后再加入致敏顆粒（吸附相同可溶性抗原的乳膠顆粒）, 由于抗體已被可溶性抗原結(jié)合, 因而致敏顆粒不發(fā)生凝集現(xiàn)象。如免疫妊娠實驗,單向免疫擴散,雙向免疫擴散,補體結(jié)合實驗,已知抗原加入血清（檢測抗體,加入標準量補體,加入包被抗體的紅細胞,檢測紅細胞溶解量,Ag,Ag,免疫酶技術(shù),免疫熒光法（immunofluorescence,免疫印跡法（western blotting,放射免疫測定法(RIA,直接熒光法,間接熒光法,Fl

3、ow Cytometry,Flow Cytometry,Flow Cytometry,ELISA,雙抗體夾心法 雙抗原夾心法 生物素親和素系統(tǒng) 酶聯(lián)免疫斑點試驗（ELISPOT） 免疫組化技術(shù),ELISA,雙抗體夾心法（HBsAg、HBeAg等）示意圖,1.將抗體包被在固相載體上,2.如樣品中含有抗原，則結(jié)合 為抗原抗體復(fù)合物,3.再加入酶標記抗體，則結(jié)合 為抗體-抗原-酶標記抗體復(fù)合 物,4.酶催化底物并顯色,雙抗原夾心法（抗-HBs等）示意圖,1.將抗原包被在固相載體上,2.如樣品中含有抗體，則結(jié)合 為抗原抗體復(fù)合物,3.再加入酶標記抗原，則結(jié)合 為抗原-抗體-酶標記抗原復(fù)合 物,4.酶催化底物并顯色,中間藍色為癌巢，周圍棕褐色為轉(zhuǎn)基因的淋巴細胞,第二節(jié) 免疫細胞的測定,一、淋巴細胞的分離與類型鑒定,T細胞總數(shù)及亞類,外周血T細胞總數(shù): CD3+T細胞 60%-80% CD4+T細胞55%-60% CD8+T細胞20%-30% CD4+/CD8+ 比值大約為2/1,免疫熒光法 磁珠分離法 淘選法 流式細胞術(shù) 抗原肽MHC分子四聚體tetramer,免疫磁性微球的分離原理,直接法對細胞進行分類,間接法對T細胞進行分離,二、白細胞功能測定,T細胞功能測定 B細胞功能測定 吞噬細胞功能測定,T細胞功能測定,T細胞增殖試驗：MTT法 細胞毒試驗 細胞因子檢測 細胞