完整版紫外 可見分光光度法習題答案與解析

1、9紫外-可見分光光度法習題精選一、選擇題（其中 廣14題為單選，15遼4題為多選）1.以下四種化合物，能同時產(chǎn)生B吸收帶、K吸收帶和R吸收帶的是（）CH2=CHCH =0A.0 CH 3CH =C -H= 02.在下列化合物中,A. 1,3 丁二烯C. 1,3環(huán)已二烯C. 吸收池的個數(shù)D. 檢測器的個數(shù)*躍遷所需能量最大的化合物是（）B. 1,4戊二烯D. 2,3 二甲基 1,3 丁二烯3. 符合朗伯特-比耳定律的有色溶液稀釋時，其最大吸收峰的波長位置（）A. 向短波方向移動B. 向長波方向移動C. 不移動，且吸光度值降低D. 不移動，且吸光度值升高4. 雙波長分光光度計與單波長分光光度計的主

2、要區(qū)別在于（）A. 光源的種類及個數(shù)B.單色器的個數(shù)5. 在符合朗伯特-比爾定律的范圍內(nèi)，溶液的濃度、最大吸收波長、吸光度三者的關(guān)系是（）A. 增加、增加、增加B.減小、不變、減小C.減小、增加、減小D.增加、不變、減小6. 雙波長分光光度計的輸出信號是（）A. 樣品吸收與參比吸收之差B. 樣品吸收與參比吸收之比C. 樣品在測定波長的吸收與參比波長的吸收之差D. 樣品在測定波長的吸收與參比波長的吸收之比7. 在紫外可見分光光度法測定中，使用參比溶液的作用是（）A調(diào)節(jié)儀器透光率的零點B. 吸收入射光中測定所需要的光波C. 調(diào)節(jié)入射光的光強度D. 消除試劑等非測定物質(zhì)對入射光吸收的影響8. 掃描K

3、 2CI2 0 7硫酸溶液的紫外-可見吸收光譜時，一般選作參比溶液的是（）A. 蒸鐳水B.H 2S04溶液CK 2C龍0 7的水溶液DK 2C 120 7的硫酸溶液9. 在比色法中，顯色反應的顯色劑選擇原則錯誤的是（）A. 顯色反應產(chǎn)物的值愈大愈好B. 顯色劑的值愈大愈好C顯色劑的值愈小愈好D.顯色反應產(chǎn)物和顯色劑，在同一光波下的值相差愈大愈好10. 某分析工作者，在光度法測定前用參比溶液調(diào)節(jié)儀器時，只調(diào)至透光率為95.0% ,測得某有色溶液的透光率為35.2% ,此時溶液的真正透光率為（）A. 40.2% B. 37.1% C. 35.1% D. 30.2%用分光光度法測定中的微量 時，可在

4、酸性條件下，加入過量的KMnO 411KC1I將I-氧化為12,然后加入淀粉，生成E-淀粉藍色物質(zhì)。測定時參比溶液應選擇（）A. 蒸錨水B.試劑空白C .含KM n0 4的試樣溶液D .不含KM n0 4的試樣溶液12. 常用作光度計中獲得單色光的組件是（）A. 光柵或棱鏡）+反射鏡B.光柵或棱鏡）+狹縫C .光柵 或棱鏡）+穩(wěn)壓器D光柵 或棱鏡）+準直鏡13. 某物質(zhì)的吸光系數(shù)與下列哪個因素有關(guān)（）A 溶液濃度 B測定波長C 儀器型號D .吸收池厚度14. 假定 T=0.50% A = 0.699則測定結(jié)果的相對誤差為（）A. 土 1.55%B. 土 1.36% C. 土 1.44% D.

5、土 1.63%15. 今有A和B兩種藥物的復方制劑溶液，其吸收曲線相互不重疊，下列有關(guān)敘 述正確的是（）A. 可不經(jīng)分離，在A吸收最大的波長和B吸收最大的波長處分別測定A和BB. 可用同一波長的光分別測定A和BCA吸收最大的波長處測得的吸光度值包括了 B的吸收A二0或T二100% ,其目的是DB吸收最大的波長處測得的吸光度值不包括A的吸收16. 用標準曲線法測定某藥物含量時，用參比溶液調(diào)節(jié)A. 使測量中cT成線性關(guān)系B. 使標準曲線通過坐標原點C. 使測量符合比耳定律，不發(fā)生偏離D. 使所測吸光度A值真正反應的是待測物的A值17. 某藥物的摩爾吸光系數(shù)（）很大，則表明（）A該藥物溶液的濃度很大

6、B. 光通過該藥物溶液的光程很長C. 該藥物對某波長的光吸收很強D. 測定該藥物的靈敏度高18. 為提高分光光度法測定的靈敏度可采用（）；為提高分光光度法的準確度可采用（）；為提高分光光度法測定的精密度可采用（）；為提高分光光度法測定的選擇性可采用（）A. 顯色反應產(chǎn)物大的顯色劑B. max作測定波長C. 選擇適當?shù)膮⒈纫篋. 控制比色皿厚度及有色溶液濃度19分光光度法中，選用max進行比色測定原因是（）A.與被測溶液的pH有關(guān)B. 可隨意選用參比溶液C. 濃度的微小變化能引起吸光度的較大變化，提高了測定的靈敏度D. 儀器讀數(shù)的微小變化不會引起吸光度的較大變化，提高了測定的精密度 20等吸收雙

7、波長消去法定量分析的理論依據(jù)是（）A. 溶液對兩波長的吸光度之和為定值B. 溶液對兩波長的吸光度之差與待測物濃度成正比C. 吸光度具有加和性D. 干擾物質(zhì)和被測物質(zhì)有等吸收點21下列基團或分子中，能發(fā)生n *躍遷的基團是（）A OC B. C=0C. C N D. CHsOH22. 酸度對顯色反應影響很大，這是因為酸度的改變可能影響（）A. 反應產(chǎn)物的穩(wěn)定性B. 被顯色物的存在狀態(tài)C. 反應產(chǎn)物的組成D. 顯色劑的濃度和顏色23. 在比色法中，顯色反應應選擇的條件有 （）A.顯色時間B.入射光波長C. 顯色的溫度D.顯色劑的用量24. 紅外光譜與紫外吸收光譜的區(qū)別是（）A. 前者使用廣泛，后者

8、適用范圍小B. 后者是由分子外層價電子躍遷引起C. 前者譜圖信息豐富，后者則簡單D. 前者是分子振動轉(zhuǎn)動能級躍遷引起二、填空題1在以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標的濃度不同KMn0 4溶液吸收曲線上可以看出未變，只是改變了。2.不同濃度的同一物質(zhì)，其吸光度隨濃度增大而,但最大吸收波長3.符合光吸收定律的有色溶液，當溶液濃度增大時,它的最大吸收峰位置02、0.8范圍內(nèi)，可采取措施有,摩爾吸光系數(shù)o4. 為了使分光光度法測定準確，吸光度應控制在和5. 摩爾吸光系數(shù)是吸光物質(zhì) 的度量，其值愈,表明該顯色反應愈O6. 分子中的助色團與生色團直接相連，使*吸收帶向方向移動，這是因為產(chǎn)生共轆效應。7. 一有

9、色溶液，在比色皿厚度為2cm時，測得吸光度為0.340o如果濃度增大1倍時，其吸光度A=, T=o8分光光度法測定鈦，可用(1)H 20 2法(二7.2 102 Lmof1 cm _1),也可用 二胺替 比咻甲烷法(=1.8 lOmof1 cm_1)o當測定試樣中鈦含量較低時，用 法較好。9. 各種物質(zhì)都有特征的吸收曲線和最大吸收波長，這種特性可作為物質(zhì) 的依據(jù)；同種物質(zhì)的不同濃度溶液，任一波長處的吸光度隨物質(zhì)的濃度的增加而增大，這 是物質(zhì)的依據(jù)。10. 朗伯特比耳定律表達式中的吸光系數(shù)在一定條件下是一個常數(shù)，它與、及無關(guān)。11. 符合朗伯特 比耳定律的Fe?+鄰菲羅卩林顯色體系，當Fe?+濃

10、度c變?yōu)?c時，A將; T將;將o12. 某溶液吸光度為A1，稀釋后在相同條件下，測得吸光度為A2,進一步稀釋測得吸光度為A3。已知Ai A2=0.50, A2 A3=0.25,則缶 為。13. 光度分析中，偏離朗伯特比耳定律的重要原因是入射光的 差和吸光物質(zhì)的引起的。14. 在分光光度法中，入射光波一般以選擇 波長為宜，這是因為15. 如果顯色劑或其他試劑對測量波長也有一些吸收，應選為參比溶液；如試樣中其他組分有吸收，但不與顯色劑反應，則當顯色劑無吸收時，可用 作參比溶液。16. R帶是由躍遷引起，其特征是波長； K帶是由躍遷引起，其特征是波長o17. 在紫外-可見分光光度法中，工作曲線是

11、和之間的關(guān)系曲線。當溶液符合比耳定律時，此關(guān)系曲線應為 o18. 在光度分析中，常因波長范圍不同而選用不同材料制作的吸收池?？梢姺止夤舛确ㄖ羞x用吸收池；紫外分光光度法中選用吸收池；紅外分光光度法中選用吸收池。三、判斷對錯1. 某物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)越大，則表明該物質(zhì)的濃度越大。2. 在紫外光譜中，同一物質(zhì)，濃度不同，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù)相同； 同一濃度，不同物質(zhì)，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù)一般不同。3. 有色溶液的透光率隨著溶液濃度的增大而減小，所以透光率與溶液的濃度成反 比關(guān)系；有色溶液的吸光度隨著溶液濃度的增大而增大，所以吸光度與溶液的濃度成正 比關(guān)系。4. 朗伯特 比耳定律中

12、，濃度C與吸光度A之間的關(guān)系是通過原點的一條直線。5. 朗伯特比耳定律適用于所有均勻非散射的有色溶液。6. 有色溶液的最大吸收波長隨溶液濃度的增大而增大。7. 在光度分析法中，溶液濃度越大，吸光度越大，測量結(jié)果越準確。8物質(zhì)摩爾吸光系數(shù) 的大小，只與該有色物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特性有關(guān)，與入射光波長和 強度無關(guān)。9. 若待測物、顯色劑、緩沖溶液等有吸收，可選用不加待測液而其他試劑都加的 空白溶液為參比溶液。10. 摩爾吸光系數(shù) 是吸光物質(zhì)在特定波長和溶劑中的特征常數(shù)，值越大，表明測定結(jié)果的靈敏度越高。11. 吸光度的讀數(shù)范圍不同，讀數(shù)誤差不同，引起最大讀數(shù)誤差的吸光度數(shù)值約為 0.434。12. 在進行紫

13、外分光光度測定時，可以用手捏吸收池的任何面。13. 今有1.0molCuS04溶液，若向該溶液中通 NH 3時，其摩爾吸光系數(shù)不發(fā)生 改變。14. 分光光度計檢測器直接測定的是吸收光的強度。15. 丙酮在已烷中的紫外吸收max為279 nm , max 9 14.8 L m ol_1 cm _1 o引起該吸收帶躍遷是* o16. 分光光度法測定的相對誤差約為2% 5% o使用這類方法可進行微量組分分析， 因為它能滿足測定微量組分對準確度的要求。17雙波長分光光度法和雙光束分光光度法都是以試劑空白作參比。四、有關(guān)概念及名詞解釋五、計算題1安絡血的相對摩爾質(zhì)量為236,將其配成100 niL含安絡

14、血0.4300 m g的溶液， 盛于1 cm吸收池中，在Xmax = 55 nm處測得A值為0.483,試求安絡血的Ei1cm%和值。2. 稱取維生素C 0.0500 g溶于100 m L的5 m oil硫酸溶液中，準確量取此溶液2.00 m L稀釋至100 m L,取此溶液于1 cm吸收池中，在入max=245 nm處測得A值為0.498。 求樣品中維生素C的百分質(zhì)量分數(shù)。（Ei1cm% 560 m L/fe cm ）3. 精密稱取試樣0.0500 g,用0.02 m oK HC1稀釋，配制成250 mLo準確吸取2.00 mL ,稀釋至100 m L ,以0.02 m o HC1為空白，在

15、253 nm處用1 cm吸收池測得T = 41.7%,其= 12000 L/nolcm）,被測組分的分子質(zhì)量=100.0，試計算Ei1cm% （ 263 nm ）和試樣中被測組分的百分質(zhì)量分數(shù)。4測定血清中的磷酸鹽含量時，取血清試樣5.00m L于100m L量瓶中，加顯色劑顯色 后，稀釋至刻度。吸取該試液25.00m L,測得吸光度為0.582；另取該試液25.00m L,加 1.00m L0.0500mg磷酸鹽，測得吸光度為0.693。計算每毫升血清中含磷酸鹽的質(zhì)量。5. 稱取某藥物一定量，用0.1 moll的HC1溶解后，轉(zhuǎn)移至100 m 1容量瓶中用同樣 HC1稀釋至刻度。吸取該溶液5

16、.00 mL,再稀釋至100mLo取稀釋液用2 cm吸收池， 在310 nm處進行吸光度測定，欲使吸光度為0.350o問需稱樣多少克？（已知：該藥物 在310 nm處摩爾吸收系數(shù)=6130 L/（n olcm ,摩爾質(zhì)量M =327.8）6精密稱取V B12對照品20.0 mg,加水準確稀釋至1000 mL,將此溶液置厚度為1cm的吸收池中，在X =361 nm處測得A= 0.414。另取兩個試樣，一為V B12的原料藥， 精密稱取20.0 mg,加水準確稀釋至1000 mL ,同樣條件下測得A= 0.390,另一為V bi2 注射液，精密吸取l.OOmL,稀釋至10.00 mL,同樣條件下測

17、得A =0.510。試分別計算 V B12原料藥的百分質(zhì)量分數(shù)和注射液的濃度。7測定廢水中的酚，利用加入過量的有色的顯色劑形成有色絡合物，并在 575nm 處測量吸光度。若溶液中有色絡合物的濃度為10 XlOmolZL，游離試劑的濃度為1.0 XlOmol/1測得吸光度為0.657：在同一波長下，僅含1.0 XlOmolZl游離試劑的溶 液，其吸光度只有0.018,所有測量都在2.0cm吸收池和以水作空白下進行，計算在575nm 時，（1）游離試劑的摩爾吸光系數(shù)；（2）有色絡合物的摩爾吸光系數(shù)。8. 今有A、B兩種藥物組成的復方制劑溶液。在 1 cm吸收池中，分別以295 nm 和370 nm

18、的波長進行吸光度測定，測得吸光度分別為0.320和0.430。濃度為0.01 mol 的A對照品溶液，在1 cm的吸收池中，波長為295 nm和370 nm處，測得吸收度分別為0.08和0.90；同樣條件，濃度為0.01 moML的B對照品溶液測得吸收度分別為0.67和0.12。計算復方制劑中A和B的濃度（假設復方制劑其他試劑不干擾測定）。9. A與B兩種物質(zhì)的對照品溶液及樣品溶液，用等厚度的吸收池測得吸光度如下表。（1）求被測混合物中A和B含量。（2）求被測混合物在300nm處的吸光度。波長238nm282 nm300 nmA對照3.0卩g/n L0.1120.2160.810B對照5.0

19、ug/fa L1.0750.3600.080A+B樣品0.4420.27810. 在光度分析中由于單色光不純，在入射光2中混入雜散光1。1和2組成強度比為I 人 ，吸光化合物在以=5.0 103，在SA=1.0 1040: 0 =1:5I 處的 1L/fn olcm處的 2L/fnolcm 0用2 cm吸收池進行吸光度測定。（1）若吸光物質(zhì)濃度為 5 10-6 m oil ,計算 其理論吸光度A； （2）若濃度為1 10弋，又為多少？該吸光物浴液是否服從朗伯m o/L A特士匕耳定律？11. 某有色溶液在2.0 cm厚的吸收池中測得透光度為1.0%,儀器的透光度讀數(shù)T有0.5%的絕對誤差。試問

20、：（1）測定結(jié)果的相對誤差是多少？ （ 2）欲使測量的相對誤 差為最小，溶液的濃度應稀釋多少倍？ （3）若濃度不變，問應用多厚的吸收池較合適？（4）濃度或吸收池厚度改變后，測量結(jié)果誤差是多少？12. 有一個兩色酸堿指示劑，其酸式（HA ）吸收420 nm的光，摩爾吸光系數(shù)為325 L/fa olcm 0其堿式（A ）吸收600 nm的光，摩爾吸光系數(shù)為120 L/fn olcm。H A在600 nm處無吸收，A在420 nm處無吸收。現(xiàn)有該指示劑的水溶液，用1 cm比色皿，在420 nm處測得吸光度為0.108,在600 nm處吸光度為0.280。若指示劑的pKa為3.90,計算 該水溶液的p

21、H值。13. 某一元弱酸的酸式體在475 nm處有吸收，e = 3.4X 104 L/n olcm ,而它的共軌 堿在此波長下無吸收，在pH =3.90的緩沖溶液中，濃度為2.72X10-5 moll的該弱酸溶液 在475 nm處的吸光度為0.261 （用1 cm比色杯）。計算此弱酸的K。值。14. 某弱酸H A總濃度為2.0 10 1 m oVL。于520 nm處，用1 cm比色皿測定，在不同pH值的緩沖溶液中，測得吸光度值如下：pH 0.881.172.993.413.954.895.5013求：（1）在520 nm處，HA和A -的ha , A_;（ 2） HA的電離常數(shù)K&。絡合物 2

22、在395nm下有最大吸收（此條件時，”1及8無吸收），當絡合劑15NB 22+2+2+濃度比Ni過量5倍時，Ni完全形成絡合物。根據(jù)下列數(shù)據(jù)，求Ni +2B-NB 22的 穩(wěn)定常數(shù)K。溶液組成及濃度吸光度血 oil)(入=395nm )2十Ni(2.50X 10),B(2.20X101 )0.7652+-4Ni(2.50X10 ) , B (1.00X 103 )0.360習題答案與解析一、選擇題（其中 廣12題為單選，1321題為多選）1. Co苯環(huán)可產(chǎn)生B吸收帶和E吸收帶，撥基可產(chǎn)生 R吸收帶。撥基和苯環(huán)共軌B帶、E帶和R帶都發(fā)生紅移，同時吸收增強。共軌后的E帶也可稱之為K帶。所以四 種化

23、合物中只有苯乙酮能同時產(chǎn)生 B吸收帶、K吸收和R吸收帶。2. Bo在紫外光譜中，雙鍵發(fā)生共轆后， 軌道進行重新整合， 軌道的最高成鍵軌道（）能量升高，軌道的最低反鍵軌道（*）能量降低，使 *躍遷所需能量減小。 雙鍵共轆越大，*躍遷所需能量越小，吸收波長發(fā)生紅移。四種化合物中， 1,3 丁二烯，1,3環(huán)已二烯，2,3二甲基 1,3 丁二烯都含有共軌體系，*躍遷所需能量減小。因此，*躍遷所需能量最大的化合物是1,4戊二烯。3. C o Lambert-Beer定律描述的是在一定條件下，當一束平行的單色光通過均勻的非散射樣品時，樣品對光的吸光度與樣品濃度及液層厚度成正比。符合LambertBeer定

24、律的有色溶液稀釋時，吸光物質(zhì)的吸光度降低，但最大吸收峰波長位置即max不變。4. Bo單波長分光光度計方框圖:光源單色器吸收池檢測器顯不器雙波長分光光度計方框圖:6. Co由雙波長分光光度計方框圖可知：光源發(fā)出的復光交替通過單色器 1和單色 器2,得到測定波長2和參比波長1,測定波長2和參比波長1交替通過吸收池并通過 檢測器檢測，使得干擾組分A在測定波長2和參比波長1下有：A A2 Ai A2A Aia 0使得測定組分B在2和i有：A A2 Ai A2B Aib （E2B Eib ）cb 1因此，雙波長分光光度計的輸出信號是樣品在測定波長的吸收與參比波長的吸收之 差（設A和B的吸收光譜有等吸收

25、點）。7. Do在配制被測組分分光光度法測加溶液時，常加入的反應試劑、緩沖溶液、溶 劑等都可能對入射光產(chǎn)生吸收，因為物質(zhì)對光的吸收具有加和性。因此，在紫外 -可見 分光光度法測定中，必須選擇一種合適的溶液作為參比溶液，以消除試劑等非測定物質(zhì)對入射光吸收的影響。8Bo K 2C12O7硫酸溶液的配制的一般操作過程：稱取固體 K 2CI20 7 一定量，于小 燒杯中，用一定濃度的硫酸溶液溶解，待 K 2CI20 7完全溶解后，轉(zhuǎn)移至一定體積的容量 瓶中，用硫酸溶液稀釋至刻度，配制成適宜濃度的 K 2CK0 7硫酸溶液。由此可見：溶液 的配制過程只加入了硫酸溶液，因此，掃描 K 2 2 7硫酸溶液的

26、紫外 可見吸收光譜時，C rO-參比溶液選用H2S04溶液即可。9. B o在比色法中，顯色反應的顯色劑選擇原則是：（1）被測物與生成的有色物有 確定的定量關(guān)系；（2）生成的有色物應有足夠的穩(wěn)定性；（3）顯色反應產(chǎn)物和顯色劑吸 收峰的位置應有顯著的差別或在同一光波下的值相差足夠大；（4）顯色反應產(chǎn)物的足夠 大；（5）顯色反應的選擇性要高。因此，顯色反應的顯色劑選擇原則不正確的是顯色劑的 值愈大愈好。10. Bo在光度法測定前，為了保證入射光強度完全被待測物質(zhì)所吸收，需用參比 溶液調(diào)節(jié)儀器吸光度A = 0或透光率T = 100% ,如果透光率只調(diào)至了 95.0% ,滿量程為 T = 0%、950

27、% ,而不是T=0% 100% 0在光度法測定前，如果透光率只調(diào)至 95.0% ,測得 某有色溶液的透光率為 35.2% ,此時溶液的真正透光率為：100% 0%x100% x 35.2%37.1%95% 0%35.2%95%11. Bo該法是通過氧化還原反應用分光光度法間接測定KC1中的微量匸 在測定中一切可吸光的物質(zhì)或影響氧化還原反應的物質(zhì)均應在測定中扣除，扣除的辦法就是選36擇合適的參比溶液，該法選擇的參比溶液應包括除廠以外所有與樣品相同的酸、KMnO 4及淀粉，稱為試劑空白。12. Bo 一般分光光度計有5部分組成：光源、單色器、吸收池、檢測器和顯示器。 其中卩色器是將連續(xù)光按波長順序

28、色散，并從中分離出一定寬度的波帶的裝置。單色光 的組件主要包括光柵或棱鏡、狹縫。13. Bo物質(zhì)的吸光系數(shù)不僅與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)有關(guān)，而且與測定波長有關(guān)。因為物質(zhì) 對光的吸收具有選擇性，同一物質(zhì)在不同波長光下測定吸收能力不同，吸光系數(shù)不同。14. A o 根據(jù)：一C求得：-0.434 TTlgT0.434（ 0.50% ）0.217 1.55%lOo.6992.699）0.14015. 由吸收曲線可見：A正確，可不經(jīng)分離，在 A組分吸收最大的波長處和B吸 收最大的波長處分別測定A和B； D正確，B組分吸收最大的波長處測得的吸光度值不 包括A的吸收。16. BCD o A錯，在LambertBeer定

29、律中，cT之間沒有線性關(guān)系；B正確，參比溶液（即試劑空白）的干擾屬于系統(tǒng)誤差。若不使用參比溶液調(diào)節(jié)A二0,就等于沒有消除方法的系統(tǒng)誤差，這時標準曲線不通過原點；C正確，若假設參比溶液中僅有一種吸光物質(zhì)，有關(guān)系式：A （E樣c樣E參c參）1A與c樣不成正比，即吸光度與c樣的關(guān)系偏離Lam bertB eer定律。D正確，用參比溶液調(diào)節(jié)A=0就是扣除了被測組分以外其它物質(zhì)對入射光的吸收的 干擾，使所測吸光度A值真正反應的是待測物的A值。17. CDo摩爾吸光系數(shù)（）是指在一定波長下，溶液中吸光物質(zhì)濃度為lmol/L,液層厚度為1 cm的吸光度。與吸光物質(zhì)濃度和液層厚度無關(guān)。是吸光物質(zhì)對光吸收強弱的

30、表征，反映了吸光物質(zhì)測定時的靈敏度。因此，某藥物的摩爾吸光系數(shù)越大，表 明該藥物對某波長的光吸收越強，測定該藥物的靈敏度越高。18. （1） AB o化合物的吸收光譜反映化合物的特性。在以波長為橫坐標，吸光度 為縱坐標的吸收光譜上，任意一點都對應化合物的同一濃度。同樣濃度下測定，吸光度A越大，靈敏度越高，因此，使用顯色反應產(chǎn)物大的顯色劑和以max作測定波長均可提高測定的靈敏度。（2）CDo選擇正確的參比液可以扣除干擾物質(zhì)對待測組分的影響， 消除系統(tǒng)誤差。 控制比色皿厚度及溶液濃度可以是測定吸光度值在 0.20.7之間，因此CD均為提高分 光光度法的準確度的方法。（3）Bo同一濃度下，測定的吸光

31、度值越大，由儀器讀數(shù)的微小變化引起吸光度的 相對誤差變化很小，即方法的精密度越好。（4）Co選擇適當?shù)膮⒈热芤?，避開參比溶液中干擾成分對測定的影響，即提高了 分析方法的選擇性。19. CDoB和干擾組分A的吸收光20. BCo等吸收雙波長消去法定量分析是根據(jù)被測組分譜，選擇測定波長2和參比波長1 （如下圖所示）。根據(jù)吸光度的加和性，使得A組分 在測定波長2和參比波長 1下有：A A2a Aia 0 ,使得B組分在2和i有：A A2 Ai A2b AiB G? Eib ）cb1o因此等吸收雙波長消去法定量分析的理論依據(jù) 是溶液對兩波長的吸光度之差與待測物濃度成正比和吸光度具有加和性。21. BC

32、o含有雜原子的不飽和化合物，由雜原子空軌道（n）躍遷到口反鍵軌道5 *）稱為n *躍遷。此類躍遷需要的能量低，n-n*吸收波長落在近紫外區(qū)或可見區(qū)， 但 吸收較弱（ =10100） o能發(fā)生n *躍遷的基團是C =0和CN。22. ABCD o顯色反應是指不吸收紫外光或可見光化合物，通過與顯色劑反應轉(zhuǎn)化成能吸收紫外光或可見光化合物，從而進行比色法測定。為了達到測定的精密度和準確 度，對于顯色反應有嚴格的條件要求，特別是溶液的酸度對顯色反應影響很大，酸度的 改變可能影響（1）顯色劑的濃度和顏色。因為顯色劑一般都是有機酸或堿指示劑，酸 度的改變不但影響酸型體或堿型體存在的狀態(tài)，還影響其濃度和顏色；

33、（2）被顯色物的存在狀態(tài)；（3）反應產(chǎn)物的穩(wěn)定性和組成。23. ACD o在光電比色法中，為了達到測定的精密度和準確度，對于顯色反應要進行嚴格的條件選擇，顯色反應應選擇的條件有（1）溶劑；（2）顯色劑的用量；（3）溶液的酸度；（4）顯色時間；（5）顯色的溫度等。B不屬于顯色反應應選擇的條件，為測 定條件。24. ABCD o二、填空題1. 最大吸收峰的位置或max）；吸光度2 增大；不變3. 不變；不變4. 改變?nèi)芤簼舛?；改變比色皿厚?. 吸光能力；大（?。?；靈敏（不靈敏）6. 長波長；n7 0.680； 20.9%8. 二胺替比卩林甲烷9. 定性分析；定量分析10溶液濃度；光程長度；入射光

34、的強度11 增至3倍；降至T彳倍；不變12. 5.6213. 單色性；化學變化14. 被測物質(zhì)的最大吸收；最大吸收波長處摩爾吸光系數(shù)最大，測定時靈敏度最高15. 空白溶液；試樣溶液16. n *；較長；共轆雙鍵的*；較短，但隨共轆鍵增長而增長17. 濃度；吸光度；一條直線18. 玻璃；石英；巖鹽三、判斷對錯1X。吸光系數(shù)是指在一定波長下，溶液中吸光物質(zhì)濃度為1,液層厚度為1cm的吸光度。常用摩爾吸光系數(shù)和百分吸光系數(shù)Eicm1%表示。吸光系數(shù)是吸光物質(zhì)的特性 參數(shù)，是吸光物質(zhì)定性的重要參數(shù)，與吸光物質(zhì)的濃度無關(guān)。2. Vo摩爾吸光系數(shù)與吸光物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特性、吸收光的波長有關(guān)。同一物質(zhì)，入 射光波

35、長不同，摩爾吸光系數(shù)不同。但紫外光譜反映的是分子母體的性質(zhì)，母體相同而 取代基不同摩爾吸光系數(shù)可能相同也可能不同。所以同一物質(zhì)，濃度不同，入射光波長 相同，則摩爾吸光系數(shù)相同；同一濃度，不同物質(zhì)，入射光波長相同，則摩爾吸光系數(shù) 一般不同。3. Xo有色溶液的透光率與溶液濃度之間的關(guān)系為：AfeT倉一Ecl 或 T 10 EclIo由此可見：有色溶液的吸光度隨著溶液濃度的增大而增大，所以吸光度與溶液的濃度成 正比關(guān)系。透光率隨著溶液濃度的增大而減小，有色溶液的透光率與溶液濃度之間成指 數(shù)關(guān)系，但不成反比關(guān)系。4. Vo朗伯特 比耳定律表明在一定條件下，當一束平行的單色光通過均勻的非散 射樣品時，

36、樣品對光的吸光度與樣品濃度及液層厚度成正比。即：IA JgT g-_ EclIo所以，從理論上講符合朗伯特 比耳定律吸光物質(zhì)濃度C與吸光度A之間的關(guān)系是通 過原點的一條直線。5. Vo朗伯特 比耳定律是指在一定條件下，當一束平行的單色光通過均勻的非散射樣品時，樣品對光的吸光度與樣品濃度及液層厚度成正比。朗伯特比耳定律不僅適用于均勻非散射的有色溶液，而且適用于均質(zhì)的固體。6. X。有色溶液的最大吸收波長是吸光物質(zhì)的特性參數(shù)，是吸光物質(zhì)定性的重要 參數(shù)，與吸光物質(zhì)的濃度無關(guān)。所以，有色溶液的最大吸收波長不隨溶液濃度的變化而 變化。7. Xo在光度分析法中測量結(jié)果的準確度可推導如下：, 1由 Lam

37、 bertB eer? Law :c -A- t 亠El T El0 434對上式求導并除以上式，得結(jié)果的相對誤差：Y:1CTlgTc如暗噪音：（y( qpyT1 b tCT g T(T lg T )2C c結(jié)果的相對誤差最小值：（一y （!一） T0c T g T（T T ）2h T 1 T 0.368 A 0.434所以，在光度分析法中，溶液濃度要適中，吸光度讀數(shù) A 0.434,測量結(jié)果準確度 最高。一般要求A 0.20.7之間即可滿足光度分析法測定準確度的要求。8. Xo摩爾吸光系數(shù)不僅與吸光物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特性有關(guān)，還與入射光的波長有關(guān)。 同一物質(zhì)，入射光波長相同，摩爾吸光系數(shù)相同；同一物

38、質(zhì)，入射光波長不同，摩爾吸 光系數(shù)不同。9. Vo在配制被測組分光度法測定溶液時，常加入的顯色劑、緩沖溶液、溶劑等都可能對入射光產(chǎn)生吸收。因此，在紫外-可見分光光度法測定中，必須選擇一種合適的 溶液作為參比溶液，以消除試劑等非測定物質(zhì)對入射光吸收的影響，提高測定結(jié)果的準 確度。所以，待測物、顯色劑、緩沖溶液等都對所選擇的波長有吸收時，可選用不加待 測液而其他試劑都加的空白溶液為參比溶液。10. Vo由朗伯特 比耳定律可知：在一定條件下， A JgT feL cl,在一Io定的液層厚度1時，吸光度與溶液的濃度成正比關(guān)系，值越大，溶液濃度的微小改變，可引起吸光度較大變化，所以， 值越大，測定結(jié)果的

39、靈敏度越高。同時摩爾吸光系數(shù) 是吸光物質(zhì)在特定波長和溶劑中的特征常數(shù)，是物質(zhì)定性的重要指標。11. X。見3.7答案的解釋。12. Xo紫外分光光度配有一對石英吸收池，吸收池的兩相對面是光面透光的，另 兩相對面是毛面不透光的。在進行紫外分光光度測定時，要對吸收池進行清洗并盛放待 測溶液。在進行這些操作時，手不能捏吸收池的光面，只能捏吸收池的毛面，這是因為 吸收池的光面是入射光的透過面，用手捏吸收池的光面，會在光面粘上汗?jié)n或其他污物 而玷污，對入射光的強度產(chǎn)生影響，使測定結(jié)果的準確度降低。13. X。在CuSO 4溶液中通NH 3時將發(fā)生以下反應：2+- 2+Cu + 4NH3Cu（NHs）4摩

40、爾吸光系數(shù)是吸光物質(zhì)的特性參數(shù)，不同物質(zhì)具有不同摩爾吸光系數(shù)。由此可見向1.0m olCuS04溶液中通NH 3時，吸光質(zhì)點由Cu2+ （淺藍色）變成了 Cu（NH 3）i2+ （藍色 變深），其摩爾吸光系數(shù)必然發(fā)生改變。14. X o分光光度計方框圖:光源單色器吸收池檢測器顯示器分光光度計光路是：由分光光度計光源發(fā)出連續(xù)光譜，經(jīng)單色器分光后，得到所需 要的單色光，單色光經(jīng)過吸收池被吸光物質(zhì)所吸收，剩余的光透過吸收池，進入檢測器 進行檢測。由此可見，分光光度計檢測器直接測定的是透過光強度，而不是吸收光的強 度。15. Xo n-Ji *是不飽和化合物由基態(tài)（口）躍遷到激發(fā)態(tài)5 *）。此類躍遷需

41、要的能量降較低，孤立的兀一n *吸收波長一般 200nm ；共覘的n 兀不吸收波長200nm。 共轆體系越長，向長波長方向移動的程度越大，吸收強度越強，兀一兀 *的吸收強度= 103104o丙酮結(jié)構(gòu)中有撥基C=0,沒有共轆體系，可以產(chǎn)生孤立的兀一兀*和n-Ji *躍遷，n-兀*躍遷需要的能量低,吸收波長落在近紫外區(qū)或可見區(qū),吸收較弱二10100。故丙酮在已烷中的紫外吸收maxmax-1-1的吸收帶不是*躍遷,= 279nm ,=14.8L m ol cm而是n-兀*躍遷。16. Vo常量分析對方法的準確度要求高（一般相對誤差約為0.1% ）,對方法的靈敏度要求低；微量分析則對方法的準確度要求低

42、，而對方法的靈敏度要求高。分光光度法具有較高的靈敏度，但測定的相對誤差約為2%5%。所以，分光光度法可進行微量組分分析。17. Xo雙波長分光光度計方框圖:由此可見，雙波長分光光度法是以波長（1）作參比，雙光束分光光度法是以試劑 空白作參比。四、有關(guān)概念及名詞解釋答案1. 。一。*：飽和桂類化合物由基態(tài)（0 ）躍遷到激發(fā)態(tài)（o *）o此類躍遷需要的能量 較高，一般吸收波長V 150 nm o2. Ji-n *：不飽和化合物由基態(tài)（n）躍遷到激發(fā)態(tài)5*）。此類躍遷需要的能量降較低，孤立的n-n *吸收波長一般V 200 nm；共轆的n - ji *吸收波長 200 nm。共轆 體系越長，躍遷所需

43、能量越小，向長波長方向移動的程度越大，吸收強度越強（= 103104） O3. n-兀*：含有雜原子的不飽和化合物由雜原子空軌道 紅）躍遷到n反鍵軌道5*）。 此類躍遷需要的能量低，n-兀*吸收波長落在近紫外區(qū)或可見區(qū)，但吸收較弱（二10 100） o4n-o *：含有雜原子的飽和化合物由雜原子空軌道（n）躍遷到。反鍵軌道（o*）o 此類躍遷需要的能量較高，n-o *吸收波長一般落在遠紫外區(qū)。5. 電荷遷移：指用電磁輻射照射給體化合物時，電子從給體軌道向受體相關(guān)軌道躍遷，此類躍遷吸收很強（ 10的，吸收波長較長。6. 配位場躍遷：在配位場理論中，過渡元素的 d軌道或f軌道發(fā)生分裂，當他們 吸收

44、電磁輻射后，電子由低能級的d軌道或f軌道躍遷，此類躍遷吸收較弱（e 102）,吸收波長較長，一般位于可見區(qū)。7吸收光譜（absoiptbn specttun）即吸收曲線，以波長（入）為橫坐標，吸光度（A） 為縱坐標所繪制的曲線。吸收光譜是化合物的特征。8. Lam bertrBeer定律：在一定條件下，當一束平行的單色光通過均勻的非散射樣 品時，樣品對光的吸光度與樣品濃度及液層厚度成正比。即：AfeTEcl 或 T 10 EclIo9. 透光率（transm ittance； T）： 一束平行的單色光強度為I）,通過均勻的非散射樣品后,出射光強度為L出射光強度I與入射光強度Io的比，即T100

45、% oIo10-吸光度（absorbance； A）：透光率的負對數(shù)為吸光度，即AfeTIolcm11-摩爾吸光系數(shù)：在一定波長下,溶液中吸光物質(zhì)濃度為1 m oK ,液層厚度為的吸光度。用 表示，單位：L/bm 12.百分吸光系數(shù)：在一定波長下， cm的吸光度。用 1%表示，單位:lcmm oL溶液中吸光物質(zhì)濃度為m 1/fcm g13.生色團：有機化合物結(jié)構(gòu)中含有兀-*躍遷的基團，即能在紫外或可見區(qū)產(chǎn)生吸收的基團。14. 助色團：有機化合物結(jié)構(gòu)中雜原子的飽和基團，與生色團或飽和坯相連時，使相連生色團或飽和坯紫外吸收向長波長方向移動或產(chǎn)生紫外吸收，并使吸收強度增加的 基團。15. 紅移：由于

46、結(jié)構(gòu)或?qū)嶒灄l件的變化，使吸收峰向長波長方向移動的現(xiàn)象，亦稱 長移。16. 藍移：由于結(jié)構(gòu)或?qū)嶒灄l件的變化，使吸收峰向短波長方向移動的現(xiàn)象，亦稱 紫移或短移。17. R帶：n-兀*躍遷引起的吸收帶，波長長（約300 nm ）,強度弱 仁 104）,極性兀一兀*隨著溶劑極性增加，K帶紅移。19. B帶：Ji 肌不躍遷引起的吸收帶，是芳香族化合物的特征吸收。苯蒸氣在波長 230270 nm （中心頻率254 nm ）出現(xiàn)精細結(jié)構(gòu)的吸收光譜，溶液或取代苯精細結(jié)構(gòu)消 失，254 nm出現(xiàn)吸收。強度中等。20. E帶：兀一兀*躍遷引起的吸收帶，也是芳香族化合物的特征吸收，分為 Ei帶 和E2帶。E1帶（苯

47、環(huán)的不共轆雙鍵）吸收波長為180 nm, e為4.7X104, E2帶（苯環(huán) 的共轆雙鍵）吸收波長為203 nm , 為7000,二者都是強吸收。21. 強帶：紫外可見吸收光譜中，化合物摩爾吸光系數(shù)1（）4的吸收峰。如：K帀、E 1帀。22. 弱帶：紫外可見吸收光譜中，化合物摩爾吸光系數(shù)V 102的吸收峰。如：R 4+4-偉T o23. 雙波長分光光度法：雙波長分光光度法包括等吸收雙波長消去法和系數(shù)倍率法。 利用在選擇的波長下，使得： 等吸收雙波長消去法：A干擾0 , A （E2a Eia）cal 系數(shù)倍率法：A干擾0, A KA 2a Aia （KE 2* Eia ）ca 1利用雙波長分光光

48、度法可以測定混濁溶液和混合組分的單獨測定。（a為被測組分）24. 導數(shù)光譜法：利用吸光度對波長求導后的導數(shù)值與吸光物質(zhì)濃度成正比關(guān)系的d E原理建立起來的光度分析方法。即 4Uclo導數(shù)光譜結(jié)構(gòu)精細，可進行定性分d n d n析；譜線寬度變窄，分辨率增加，可進行多組分的同時測定；可以有效的扣除背景。25. 光電比色法：光電比色法是對能吸收可見光的有色溶液或能轉(zhuǎn)化成吸收可見光 的有色溶液的無色溶液進行測定的方法。26. 透光率測量誤差：是測量中的隨機誤差，來自儀器的噪音。一類為暗噪音一與 光訊號無關(guān)；另一類為散粒噪音一隨光訊號強弱而變化。z cT暗噪音：()( )TcT JgT(T T) 2散粒

49、噪音：y 0.434K 林 clg T*T-五、計算題1.解:由ATIoEif-A-0.483 1000cl0.430011236eElcm112310102.解：由Ag TIoEcl1123 血 L/fe cm )2.6510 1 (L/fn olcm )Eclc8.89El 560 1 維生素c的百分質(zhì)量分數(shù)10 4 (g/LOOm L)8.89 10 100%88.9%20.05003 解：由 A g T hT IoEicm1% W-e 1-0臨004M100.0A JgT 0.417100Ecl Eicm1%101200 血 L/g cm )0.380y組分的百分質(zhì)量分數(shù)二丄c0.38

50、0100%z (120 D 100%79 .17%2.000.05 2504.解：在25.00m L試液中加1.00m L00500m g磷酸鹽，溶液體積為26.00m L,校正到25.00m L的吸光度為：0.69326.00.72125.0加入1.00m LO.0500m g磷酸鹽所產(chǎn)生的吸光度為：0.7210.5820.139Ao 582由：Ijl ，25.00m L磷酸鹽質(zhì)量二 0.0500 =0.2094 (hi g)c 標 c 樣0.139每毫升血清中含磷酸鹽的質(zhì)量=.1QQ L 0 167 (in g)255.006-解:由V B12對照品計算入=361 nm的百分吸收系數(shù)Eic

51、m1% :5 解：由AfeTIo310 clX5.0010000.35061302327.8100100解得：x 0.0187g18.7 (mg)Eicm1% 4 亠444一cl 20.01001000 1000VB12原料藥的百分質(zhì)量分數(shù):207 血 L/g cm )V B12 %Xc原料100%0.390/1_加7_1) 100%94.2%200(1000 10)注射液V B12的濃度:c 丄E1 解：7“5100207 1100()由12.46 10 1 (g/fn L)=0.246 血 g/fn L)Lam bertHB eer定律:e ,當僅含顯色劑cl游離二 1.0 X 10*m

52、o/L時，A 二 0.018游離試劑的摩爾吸光系數(shù)：游離0.01890c游離11 10 4 2(jL/fn olcm )(2 )T A維二A絡合+A游離A 絡合二A 混游離=0.6570.018-0.639有色絡合物的摩爾吸光系數(shù):A0.6394 3.2010 (L血 olcm )C絡合11228.解：A組分：1= 295nm , 8iAA-88.0 (L/(nolcm)ca 1 0.0112A eA0.9090.0= 370nm ,2CA 10.01 1(L血 olcm )1=295nm ,B 1A0.6767.0B組分：CB 10.01 1(L/fn olcm )2=370nm ,B2A0.1212.0(L/n olcm )CA 10.01 1ABAl ica1 CicbI0.3208.Oca67.0cbABA 2 2CA1 S2CB10.43090.Oca12.0cb解方程組得：cA = 3.9 103 m oil , cB =4.3 10_