培養(yǎng)基適用性檢查報(bào)告

1、培養(yǎng)基適用性檢查報(bào)告1. 試驗(yàn)?zāi)康模簩?duì)培養(yǎng)基性能的質(zhì)量控制，以保證微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量。2. 適用范圍：適用于細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基和控制菌檢查用的培養(yǎng)基的適用性檢查。需檢查的培養(yǎng)基包括成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基和按處方配制的培養(yǎng)基。3. 試驗(yàn)內(nèi)容：3.1 .計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查3.1.1.菌種：大腸埃希菌CMCC B )44102金黃色葡萄球菌CMCC B) 26003枯草芽抱菌CMCC B )63501白色念珠菌CMCC F) 98001黑曲霉CMCC F )980033.1.2. 菌液制備：接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽抱菌的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基或瓊脂斜面培養(yǎng)基中，33

2、C培養(yǎng)24小時(shí)，接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基或改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，26C培養(yǎng) 48小時(shí)。上述培養(yǎng)物用 0.9%無菌氯化鈉溶液制成每 1ml含 菌數(shù)50100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，26C培養(yǎng)7天，加入4ml含0.05% (ml/ml )聚山梨酯80的0.9%的無菌氯化鈉溶液，將抱子洗脫。然后，用 管口帶有薄的無菌棉花吸出抱子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05% ( ml/ml )聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每 1ml含菌數(shù)50100cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用；若保存在 28C，可在24小時(shí)內(nèi)使

3、用。黑曲霉孢子懸液可保存在28C，在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使用。3.1.3.適應(yīng)性檢查 3.1.3.1.細(xì)菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適應(yīng)性檢查取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌各1ml （50lOOcfu ）,分別注入無菌平皿中，立即傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置33C培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)。用被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（若無對(duì)照培養(yǎng)基可用其他廠家生產(chǎn)的培養(yǎng)基）按上述方法進(jìn)行試驗(yàn)，并記錄。試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告見表1。檢測(cè)日期報(bào)告日期被檢培養(yǎng)基批生產(chǎn)廠家名稱對(duì)照培養(yǎng)基號(hào)批生產(chǎn)廠家名稱號(hào)菌落數(shù)：?jiǎn)未蠼鹂菸唬╟fu ）腸埃布困黃色葡萄球菌草芽抱桿菌平平1匸21 “匸212均均均被檢培養(yǎng)基對(duì)照培

4、養(yǎng)基平均菌落數(shù)比值菌落形態(tài)大小結(jié)果判定備注表1細(xì)菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查檢驗(yàn)人：復(fù)核人：3.131.霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適應(yīng)性檢查取白色念珠菌、黑曲霉各 1ml (50100cfu ),分別注入無菌平皿中，立即傾 注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置 26C培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)。用被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基(若無對(duì)照培養(yǎng)基可用其他廠家生產(chǎn)的培養(yǎng)基)按上述方法進(jìn)行試驗(yàn)，并記錄。3.1.4.結(jié)果判定若被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%,（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基上菌落平均數(shù)相互比值不小于 70% ,且菌落形態(tài)大 小與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培

5、養(yǎng)基）上的菌落一致，判該培養(yǎng)基的適用性 檢查符合規(guī)定。試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告見表|2。表2霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查檢測(cè)日期報(bào)告日期生產(chǎn) 被檢培養(yǎng)基名稱廠家對(duì)照培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)批廠家號(hào)菌落數(shù)：?jiǎn)挝唬╟fu）色念珠菌白曲霉黑八、被檢培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基平均菌落數(shù)比值菌落形態(tài)大小結(jié)果判定備注檢驗(yàn)人：復(fù)核人:32控制菌（大腸埃希菌）培養(yǎng)基的適用性檢查321.菌種：大腸埃希菌CMCC（ B）44102金黃色葡萄球菌CMCC（ B）260033.2.2.菌液制備接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，33C培養(yǎng)24小時(shí)，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每 1ml含菌數(shù)為101

6、00cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用；若保存在 28C，可在24小時(shí)內(nèi)使用。3.2.3. 適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促生長(zhǎng)能力、抑制能力及指示能力 的檢查。大腸埃希菌培養(yǎng)基的檢測(cè)項(xiàng)目及所用菌株見表3。表3大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)能力、抑制能力及指示能力檢查培:K甘 養(yǎng)基丿特試驗(yàn)菌株性膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL)促生長(zhǎng)能力大腸埃布困抑制能力金黃色葡萄球菌4-促生長(zhǎng)能力+扌曰示甲基傘形酮葡萄甘酸培養(yǎng)基(大腸埃布困MUG能力曙紅亞甲基監(jiān)瓊脂培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力+指示(E2MB或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基能力大腸埃布困(MacC與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管

7、大腸埃希菌應(yīng)生長(zhǎng)良好。膽鹽乳糖培養(yǎng)基（培養(yǎng)基抑制能力檢查）接種3ml （不少于100cfu ）的金黃色葡萄球菌于100ml膽鹽乳糖被檢培養(yǎng)基和對(duì) 照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33C培養(yǎng)24小時(shí)，金黃色葡萄球菌不得 生長(zhǎng)。4甲基傘形酮葡萄苷酸培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力、指示能力檢查）分別接種0.2ml （不大于100cfu ）的大腸埃希菌至5mlMU嗽檢培養(yǎng)基和對(duì)照培 養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）的試管內(nèi)，33C培養(yǎng)，于5小時(shí)、24小時(shí)在366nm紫外光下觀察，被檢培養(yǎng)基應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）大腸埃 希菌生長(zhǎng)情況一致，并呈現(xiàn)熒光。觀察后，分別沿被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培

8、養(yǎng)基（或與 其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）的管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液，液面均應(yīng)呈玫瑰紅色。曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力、指示能力檢查）取大腸埃希菌各0.1ml （含菌數(shù)50100cfu ）分別涂布于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂被檢培 養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上大腸埃希菌生長(zhǎng)的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上，大腸埃希菌的菌落特征：紫黑色、淺紫色、藍(lán)紫 色或粉紅色，菌落中心呈深紫色或無明顯暗色中心，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表 面光滑，濕潤(rùn)，常有金屬光澤。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)

9、基促生長(zhǎng)能力、指示能力檢查）取大腸埃希菌各|0.1ml （含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于麥康凱瓊脂被檢培養(yǎng)基 和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上大腸埃希菌生長(zhǎng)的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或 與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，大腸埃希菌的菌落特征：鮮桃紅色或微紅色，菌落中 心呈深桃紅色，圓形，扁平，邊緣整齊，表面光滑，濕潤(rùn)。表4大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查培養(yǎng)基名稱膽鹽乳糖培養(yǎng)基特性促生長(zhǎng)能力試驗(yàn)菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間批號(hào)生長(zhǎng)情況對(duì)照培養(yǎng)基廠家批號(hào)生長(zhǎng)情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱膽鹽乳糖培養(yǎng)基特性抑制能力試

10、驗(yàn)菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間批號(hào)生長(zhǎng)情況對(duì)照培養(yǎng)基廠家批號(hào)生長(zhǎng)情況結(jié)果判定備注特性促生長(zhǎng)能力、指示能力培養(yǎng)溫度批號(hào)批號(hào)5小時(shí)觀24小時(shí)觀察察培養(yǎng)時(shí)間靛基質(zhì)指示特性促生長(zhǎng)能力、指示能力培養(yǎng)溫度批號(hào)培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)基名稱MUG試驗(yàn)菌株被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家生長(zhǎng)情況被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱 曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基試驗(yàn)菌株被檢培養(yǎng)基廠家生長(zhǎng)情況菌落大小菌落形態(tài)被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注培養(yǎng)溫度批號(hào)批號(hào)菌落大小菌落形態(tài)培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)基名稱麥康凱瓊脂培養(yǎng)基特性促生長(zhǎng)能力、指示能力試驗(yàn)困株被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家生長(zhǎng)情況被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注檢驗(yàn)人：復(fù)核

11、人：33控制菌(乙型副傷寒沙門菌)培養(yǎng)基的適用性檢查3.3.1.菌種：乙型副傷寒沙門菌CMCC( B) 50094金黃色葡萄球菌CMCC( B)260033.3.2.菌液制備接種乙型副傷寒沙門菌、金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，33C培養(yǎng)24小時(shí)，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為1 0100cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在 2小時(shí)內(nèi)使用；若保存在28C，可在24小時(shí) 內(nèi)使用。3.3.3. 適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促生長(zhǎng)能力、抑制能力及指示能力的檢查。沙門菌培養(yǎng)基的檢測(cè)項(xiàng)目及所用菌株見表50表5沙門菌檢查用培養(yǎng)基的

12、促生長(zhǎng)能力、抑制能力及指示能力檢查培養(yǎng)基特性試驗(yàn)困株?duì)I養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基抑制能力乙型副傷寒沙門 促生長(zhǎng)能力菌乙型副傷寒沙門 促生長(zhǎng)能力菌金黃色葡萄球菌膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基或沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)促生長(zhǎng)能力+指乙型副傷寒沙門示能力菌曙紅亞甲基藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力+指乙型副傷寒沙門示能力菌乙型副傷寒沙門 三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基指示能力菌營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力檢查）分別接種1ml （不大于100cfu ）的乙型副傷寒沙門菌于.200ml營(yíng)養(yǎng)肉湯被檢培養(yǎng) 基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33C培養(yǎng)18小時(shí)，與對(duì)照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）比較

13、，被檢培養(yǎng)基管沙門菌應(yīng)生長(zhǎng)良好。四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力檢查）分別接種1ml （不大于100cfu ）的乙型副傷寒沙門菌于10ml四硫磺酸鈉亮綠被 檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33C培養(yǎng)18小時(shí)，與對(duì)照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管乙型副傷寒沙門菌應(yīng)生 長(zhǎng)良好。四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（培養(yǎng)基抑制能力檢查）接種3ml （不少于100cfu ）的金黃色葡萄球菌于100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基被檢培養(yǎng) 基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中， 33E培養(yǎng)24小時(shí)，金黃色葡萄球 菌不得生長(zhǎng)。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力、指示能力檢查

14、）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml （含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于膽鹽硫乳瓊脂被 檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長(zhǎng)的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與 對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門菌的菌落特征：無色至淺橙色，半 透明，菌落中心帶黑色或全部黑色或無黑色。沙門、志賀瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml （含菌數(shù)50100cfu ）分別涂布于沙門、志賀瓊脂 被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)1

15、8小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長(zhǎng)的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng) 與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在沙門、志賀瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門菌的菌落特征：無色至淡紅色， 半透明或不透明，菌落中心有時(shí)帶黑褐色。曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml （含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂 被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長(zhǎng)的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng) 與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上，乙型

16、副傷寒沙門的菌落特征：無色至淺橙色，透 明或半透明，光滑濕潤(rùn)的圓形菌落。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml （含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于麥康凱瓊脂被檢 培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33 E培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長(zhǎng)的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì) 照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門的菌落特征：無色至淺橙色，透明或 半透明，菌落中心有時(shí)為暗色。三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml （不大于100cfu ）分

17、別涂布于三糖鐵被檢培養(yǎng)基 和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）高層斜面上進(jìn)行斜面和高層穿刺接種， 33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長(zhǎng)的菌落大小、形態(tài)特征、指 示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基斜面見紅色、底層見黃色；或斜面黃色、底層黑色。表6乙型副傷寒沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查培養(yǎng)基名稱宮養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基特性促生長(zhǎng)能力試驗(yàn)菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間被檢培養(yǎng)基廠家批號(hào)生長(zhǎng)情況對(duì)照培養(yǎng)基廠家批號(hào)生長(zhǎng)情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱四硫磺酸鈉兄綠培養(yǎng)基特性促生長(zhǎng)能力試驗(yàn)菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間被檢培養(yǎng)基廠家批號(hào)生長(zhǎng)情況對(duì)照培養(yǎng)基廠家批號(hào)生長(zhǎng)情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱四硫磺酸鈉兄綠培養(yǎng)基特性抑制能力試驗(yàn)困株被檢培養(yǎng)基廠 家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基試驗(yàn)菌株被檢培養(yǎng)基廠 家對(duì)照培養(yǎng)基廠家生長(zhǎng)情況培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間批號(hào)生長(zhǎng)情況批號(hào)生長(zhǎng)情況特性促生長(zhǎng)能力、指示能力培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間批號(hào)批號(hào)菌落大小菌落形態(tài)被檢培養(yǎng)基廠 家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定特性促生長(zhǎng)能力、指示能力培養(yǎng)溫度批號(hào)批號(hào)菌落大小菌落形態(tài)培養(yǎng)時(shí)間特性 促生長(zhǎng)能力、指示能力培養(yǎng)溫度批號(hào)培養(yǎng)時(shí)間備注培養(yǎng)基名稱沙門、志賀菌屬瓊脂