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文檔簡介
1、選修一生物技術(shù)實踐原理及過程的概要(一)果酒制作的原理酶酶1菌種是酵母菌,屬于真核生物,新陳代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧型,有氧時,進行有氧呼吸,大量繁殖,反應(yīng)式為:C6H12O6+6H2O+6O2 6CO2+12H2O+能量;無氧時,能進行酒精發(fā)酵,反應(yīng)式為:C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+能量。(二)果醋制作的原理酶2當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸,當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿幔磻?yīng)簡式為C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O。1、流程圖挑選葡萄 沖洗 榨汁 酒精發(fā)酵 醋酸發(fā)酵 果酒 果醋(三)腐乳制作的原理1腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同
2、作用,其中起主要作用的是毛霉,它是一種真核生物,新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。2毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸實驗流程讓豆腐長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制(四)泡菜制作的原理1. 泡菜的制作離不開乳酸菌,乳酸菌包括乳酸桿菌和乳酸鏈球菌,代謝類型為異養(yǎng)厭氧型的細菌。2.泡菜中亞硝酸鹽的形成及含量變化:硝酸鹽亞硝酸鹽還原氧化細菌等微生物維生素C、E和酚類物質(zhì)亞硝胺(具有致癌作用)特定條件 3.亞硝酸鹽含量的測定方法比色法原理 鹽酸酸化亞硝酸鹽+ 對氨基苯磺酸 重氮化反應(yīng)+ N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽-玫瑰紅色溶液4.實驗流程:
3、小結(jié):比較果酒果醋腐乳泡菜微生物類型原理反應(yīng)條件檢測方法酵母菌,真菌,兼性厭氧醋酸菌,細菌,好氧菌毛霉,真菌,好氧乳酸菌,細菌,厭氧菌酵母菌的無氧呼吸產(chǎn)生酒精20,無氧重鉻酸鉀與其反應(yīng)呈灰綠色醋酸菌的有氧呼吸產(chǎn)生醋酸3035,通入氧氣品嘗、pH試紙檢測毛霉產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶1518接種,酒精含量控制在12左右乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸常溫,無氧條件pH檢測,亞硝酸鹽的檢測方法(五)微生物實驗室培養(yǎng)的基本操作程序(1.器具的滅菌 (2.培養(yǎng)基:制備、 滅菌、倒平板(3.微生物接種(純化)原理是:在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞,使其長成單個的菌落,這個菌落就是一個純化的細菌菌落方法有:平板劃線法
4、和稀釋涂布平板法(4.恒溫箱中培養(yǎng) (5.菌種的保存:臨時保藏和甘油管藏法 倒平板操作;平板劃線法;稀釋涂布平板法操作過程圖見課文(六)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)方法:利用以尿素作為唯一氮源選擇培養(yǎng)基進行篩選。實驗操作流程 1.土壤取樣與稀釋 2.涂布平板到選擇培養(yǎng)基(目的:篩選出目的菌種) 3.微生物的培養(yǎng)與觀察 4.統(tǒng)計菌落數(shù)目(方法:活菌計數(shù)法、顯微計數(shù)法、濾膜法) 5.結(jié)果分析 6.鑒定目的菌種(方法:選用鑒別培養(yǎng)基)過程圖:鑒定方法鑒別培養(yǎng)基(加入酚紅指示劑)0.1ML選擇培養(yǎng)基(只有能分解尿素的細菌才能在上面生長)培養(yǎng)培養(yǎng)培養(yǎng)計算:每克土壤樣品中的菌落數(shù)(CV)M菌落 (七)
5、分解纖維素的微生物的分離方法:剛果紅染色法原理:以纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中,加入剛果紅時,剛果紅與培養(yǎng)基的纖維素形成紅色復(fù)合物;當(dāng)纖維素被分解后,該紅色復(fù)合物不能形成,培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落環(huán)境?目的和方法?纖維素分解菌的再次鑒定方法?(八)探究溫度對果膠酶活性的影響蘋果泥分裝入9支試管(提供果膠)適量果膠酶水溶液分裝入另外9支試管各取一支分九組分別放入30、 35 、40 、45、 50 55、60、65 、70的恒溫箱中恒溫加熱將果膠酶加入相同溫度的蘋果泥內(nèi)恒溫保持10分鐘過濾果汁,用量
6、筒測量果汁的量,填入表格繪圖過程圖:結(jié)果:果汁量果汁量 果膠酶用量 溫度(PH)(九)DNA的粗提取與鑒定1.提取原理:(1.)DNA在不同濃度的氯化鈉溶液中溶解度不同,使DNA溶解或DNA析出。(2.)DNA不溶于酒精,但細胞的其他物質(zhì)則溶于酒精,據(jù)此可提取到含雜質(zhì)較少的DNA2.鑒定原理: 沸水浴 DNA+二苯胺藍色溶液左圖曲線解讀:1、在NaCl溶液濃度低于0.14 mol/L時,DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的增加而逐漸降低;2、在0.14 mol/L時,DNA溶解度最?。?、當(dāng)NaCl溶液濃度繼續(xù)增加時,DNA的溶解度又逐漸增大。 NaCl濃度0.14mol/LDNA溶解度(十)多
7、聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA片段(十一)血紅蛋白的提取和分離1.方法原理凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理(根據(jù)分子量的大?。?相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部通道,路程較長移動速度較慢; 相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部通道,路程較短移動速度較快;SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理 帶電粒子在電場的作用下發(fā)生定向遷移,在加入SDS排除電荷多少的影響后,使電泳遷移率完全取決于分子大小,從而達到分離的目的。2.實驗步驟:選修三現(xiàn)代生物科技專題原理及過程概要(一)基因工程的基本內(nèi)容獲取目的基因用同一種限制性內(nèi)切酶切割質(zhì)粒 (方法)DNA連接酶目的基因與運載體結(jié)合重組質(zhì)粒 (運載體的組成?)將目的基
8、因?qū)胧荏w細胞 (方法?)細胞增殖目的基因的檢測和表達目的基因產(chǎn)物 (方法?)(二)單克隆抗體制備細胞融合BB-B雜交瘤細胞B-瘤瘤滅活病毒骨髓瘤細胞體外培養(yǎng)注射到小鼠的腹腔能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞單克隆抗體抗原注入小鼠體內(nèi)B淋巴細胞篩選瘤-瘤篩選小結(jié):兩次篩選的目的是:第一次篩選出雜交瘤細胞,第二次篩選出所需抗體的雜交瘤細胞雜交瘤細胞的特點:既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強,靈敏度高,并能大量制備。單克隆抗體的應(yīng)用:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”。(三)牛胚胎移植流程圖: (四)植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)生物學(xué)
9、原理細胞全能性細胞分裂培養(yǎng)基性質(zhì)固體液體培養(yǎng)基成分蔗糖、氨基酸、維生素、水、礦物質(zhì)、生長素、細胞分裂素、瓊脂葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、水、動物血清取材植物器官、組織或細胞動物胚胎、幼齡動物器官或組織培養(yǎng)對象植物器官、組織或細胞分散的單個細胞過程脫分化、再分化原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)細胞分裂生長分化特點分裂:形成愈傷組織分化:形成根、芽只分裂不分化貼壁生長接觸抑制培養(yǎng)結(jié)果新的植株或組織細胞株或細胞系應(yīng)用快速繁殖培育無病毒植株提取植物提取物(藥物、香料、色素等)人工種子培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品皮膚細胞培養(yǎng)后移植檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理研究培養(yǎng)條件無菌、適宜的溫度和pH(五)體內(nèi)受精和早
10、期胚胎發(fā)育生殖細胞的發(fā)生精子的發(fā)生場所睪丸的曲細精管時期初情期生殖機能衰退過程見圖解3-1-1形態(tài)結(jié)構(gòu)外形似蝌蚪,分頭、頸和尾三大部分。不同動物的精子大小略有不同,但與動物的體型大小無關(guān)。卵子的發(fā)生場所卵巢時期動物胚胎性別分化后生殖機能衰退過程見圖解3-1-2受精標(biāo)志在卵黃膜和透明帶的間隙觀察到兩個極體時概念精子與卵子結(jié)合成合子(即受精卵)的過程場所輸卵管階段受精前的準(zhǔn)備階段精子獲能發(fā)現(xiàn)略含義在雌性動物生殖道內(nèi)發(fā)生相應(yīng)生理變化后獲得受精能力的現(xiàn)象。發(fā)現(xiàn)意義加速了對精子獲能機理的研究,并找到了使精子在體外獲能的物質(zhì),實現(xiàn)了哺乳動物精子在體外條件下的獲能。卵子的準(zhǔn)備獲能經(jīng)歷類似精子獲能的過程成熟排
11、出的初級卵母細胞(馬、犬)或次級卵母細胞(豬、羊)在輸卵管內(nèi)達到M中期的過程,這樣才具備受精能力。受精階段穿越放射冠發(fā)生頂體反應(yīng),使頂體酶釋放,溶解卵丘細胞間物質(zhì),精子穿越放射冠。穿越透明帶頂體酶將透明帶溶出一個孔道,精子穿越并接觸卵黃膜。同時發(fā)生透明帶反應(yīng)(防止多精入卵的第一道屏障)。進入卵黃膜微絨毛將精子抱合,精子外膜與卵黃膜融合,入卵;發(fā)生卵黃膜封閉作用(防止多精入卵的第二道屏障)。原核形成精子尾部脫離,原有核膜破裂,形成新核膜,最后形成雄原核(比原來精子核大);激活的卵子完成M分裂,排出第二極體,形成雌原核。配子結(jié)合雄、雌原核接觸、融合,形成2N合子。早期胚胎發(fā)育卵裂場所在透明帶內(nèi)完成方式有絲分裂特點細胞數(shù)量增加,胚胎總體積不增加或略有縮小。桑椹胚含義細胞數(shù)目達到32個左右時,胚胎形成致密的細胞團,形似桑椹。特點這一階段前的每一個細胞都是全能細胞。囊胚特點細胞開始出現(xiàn)
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