微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

1、到目前為止，到目前為止， 幾十項(xiàng)幾十項(xiàng)Nobel生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，化學(xué)獎(jiǎng)生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，化學(xué)獎(jiǎng) 都與微生物學(xué)有關(guān)都與微生物學(xué)有關(guān) 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 微生物的類(lèi)群微生物的類(lèi)群 原生生物：原生生物： 原核生物原核生物: 真菌真菌: 病毒病毒: 如酵母菌如酵母菌 單細(xì)胞的動(dòng)植物單細(xì)胞的動(dòng)植物 如草履蟲(chóng)、單細(xì)胞藻類(lèi)等如草履蟲(chóng)、單細(xì)胞藻類(lèi)等 無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu) 真核細(xì)胞真核細(xì)胞 細(xì)菌、藍(lán)藻細(xì)菌、藍(lán)藻原核細(xì)胞原核細(xì)胞 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 1.提供營(yíng)養(yǎng)和條件 2.防止污染 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 一一. .培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：微生物生存的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)微生物生存的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)

2、物質(zhì) 1.1.基本成分：基本成分： 思考：微生物“吃”什么？ 碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽 碳源碳源 無(wú)機(jī)碳源：無(wú)機(jī)碳源： 有機(jī)碳源：有機(jī)碳源： COCO2 2、COCO3 32 2- -、HCOHCO3 3- - 牛肉膏、蛋白胨等牛肉膏、蛋白胨等 自養(yǎng)微生物自養(yǎng)微生物 異養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物 氮源氮源 無(wú)機(jī)氮源：無(wú)機(jī)氮源： 有機(jī)氮源：有機(jī)氮源： N N2 2、NHNH4 4 、 、NONO3 3- -（為硝化細(xì)菌提供 （為硝化細(xì)菌提供N N源和能源）源和能源） 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：含注：含CHONCHON的有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源

3、、氮源、能源的有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、能源 2.2.特殊成分：特殊成分： 生長(zhǎng)因子：核苷酸、堿基、維生素等生長(zhǎng)因子：核苷酸、堿基、維生素等 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 一一. .培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：微生物生存的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)微生物生存的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 1.1.基本成分：基本成分：碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽 2.2.特殊營(yíng)養(yǎng)：特殊營(yíng)養(yǎng)：維生素、堿基等（生長(zhǎng)因子）維生素、堿基等（生長(zhǎng)因子） （牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有） 3.pH3.pH、氧氣的需求：、氧氣的需求： 4.4.種類(lèi)：種類(lèi)： 固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基 有無(wú)有無(wú) 凝

4、固劑瓊脂凝固劑瓊脂 分離分離 鑒定鑒定 工業(yè)工業(yè) 生產(chǎn)生產(chǎn) 化學(xué)成分：化學(xué)成分： 物理性質(zhì)：物理性質(zhì)： 天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基 合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基。 1000ml1000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方 H2O 定容至定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨蛋白胨 10g 牛肉膏牛肉膏 5g 瓊脂瓊脂20.0g 分析營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成？分析營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成？ 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 5. 5. 配制原則配制原則 目的明確：目的明確： 營(yíng)養(yǎng)全面、濃度

5、適宜、比例恰當(dāng)營(yíng)養(yǎng)全面、濃度適宜、比例恰當(dāng) 適宜的適宜的pHpH值：值： 有機(jī)碳源有機(jī)碳源異養(yǎng)型：異養(yǎng)型： 根據(jù)微生物的種類(lèi)、培養(yǎng)目的選擇原料根據(jù)微生物的種類(lèi)、培養(yǎng)目的選擇原料 自養(yǎng)型：自養(yǎng)型： 不加碳源不加碳源 加入緩沖劑加入緩沖劑 細(xì)菌偏堿（細(xì)菌偏堿（7-87-8），真菌偏酸（），真菌偏酸（5-65-6） （COCO2 2碳源）碳源） 生產(chǎn)生產(chǎn)科研科研 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 耐高溫需保持干燥的耐高溫需保持干燥的 物品，物品，160170 12小時(shí)小時(shí) 接種環(huán)、接種針等接種環(huán)、接種針等 金屬用具金屬用具 7075、30min 80、15min 100、56min 消毒消毒滅菌滅菌 定義定義

6、 方法方法 較為溫和理化方法，較為溫和理化方法， 殺死部分有害菌體殺死部分有害菌體 （不包括芽孢、孢子）（不包括芽孢、孢子） 強(qiáng)烈的理化方法，強(qiáng)烈的理化方法， 殺死所有微生物殺死所有微生物 （包括芽孢、孢子）（包括芽孢、孢子） 煮沸消毒法煮沸消毒法 巴氏消毒法巴氏消毒法 化學(xué)藥劑化學(xué)藥劑 紫外線紫外線 灼燒滅菌灼燒滅菌 干熱滅菌干熱滅菌 酒精、氯氣、石炭酸等酒精、氯氣、石炭酸等 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌 培養(yǎng)基，培養(yǎng)基， 100KPa、 121、1530min 二二. .無(wú)菌技術(shù)：無(wú)菌技術(shù)：防止外來(lái)雜菌的污染防止外來(lái)雜菌的污染 1.1.消毒與滅菌：消毒與滅菌： 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 高壓蒸汽

7、滅菌鍋的使用步驟：高壓蒸汽滅菌鍋的使用步驟： 1、加水：使用前加人適量的水、加水：使用前加人適量的水 2、裝鍋：待滅菌的物品放在滅菌鍋內(nèi)，蓋好鍋蓋，旋緊固、裝鍋：待滅菌的物品放在滅菌鍋內(nèi)，蓋好鍋蓋，旋緊固 定螺栓，打開(kāi)排氣閥。定螺栓，打開(kāi)排氣閥。 3、加熱排氣：目的排盡其中的冷空氣，關(guān)閉排氣閥。、加熱排氣：目的排盡其中的冷空氣，關(guān)閉排氣閥。 4、保溫保壓：、保溫保壓：100KPa、121、20-30min.20-30min. 5 5、出鍋：壓力表為、出鍋：壓力表為0 0時(shí)，溫度時(shí)，溫度6060打開(kāi)排氣閥，開(kāi)蓋取出物品。打開(kāi)排氣閥，開(kāi)蓋取出物品。 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 請(qǐng)你判斷以下材料或用具是

8、否需要消毒或請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或 滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。 （1 1） 培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 （2 2） 玻棒、試管、燒瓶和吸管玻棒、試管、燒瓶和吸管 （3 3） 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手實(shí)驗(yàn)操作者的雙手 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 2.2.無(wú)菌范圍：無(wú)菌范圍：實(shí)驗(yàn)操作空間消毒實(shí)驗(yàn)操作空間消毒 操作者的手、衣著消毒操作者的手、衣著消毒 實(shí)驗(yàn)用具滅菌實(shí)驗(yàn)用具滅菌 實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程 二二. .無(wú)菌技術(shù)：無(wú)菌技術(shù)：防止外來(lái)雜菌的污染防止外來(lái)雜菌的污染 1.1.消毒與滅菌：消毒與滅菌： 酒精燈旁操作酒精燈旁操作 超

9、凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái) 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面 形成一個(gè)橢圓形的休眠體，叫做芽孢。形成一個(gè)橢圓形的休眠體，叫做芽孢。 芽孢的壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫芽孢的壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫 等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如，等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如， 有的細(xì)菌的芽孢，煮沸有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3 3小時(shí)以后才死小時(shí)以后才死 亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。 當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的 時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì) 菌菌 細(xì)菌、原

10、生動(dòng)物、真菌和植細(xì)菌、原生動(dòng)物、真菌和植 物等產(chǎn)生的一種有繁殖作用物等產(chǎn)生的一種有繁殖作用 的生殖細(xì)胞。能直接發(fā)育成的生殖細(xì)胞。能直接發(fā)育成 新個(gè)體。新個(gè)體。 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 單個(gè)單個(gè) 或少數(shù)菌體或少數(shù)菌體 2.2.特征：特征：大小、形狀、光澤度、大小、形狀、光澤度、 顏色、透明度等。顏色、透明度等。 3.3.功能：功能： 1.1.定義：定義： 菌落菌落 鑒定菌種的重要依據(jù)鑒定菌種的重要依據(jù) 固體培養(yǎng)基上固體培養(yǎng)基上 大量繁殖大量繁殖 子細(xì)胞群體子細(xì)胞群體 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 1000ml1000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方 H2O 定容至定容至1000ml

11、 Nacl 5g 蛋白胨蛋白胨 10g 牛肉膏牛肉膏 5g 瓊脂瓊脂20.0g 三三. .大腸桿菌的純化培養(yǎng)：大腸桿菌的純化培養(yǎng)： 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 1.1.計(jì)算：計(jì)算：培養(yǎng)基用量培養(yǎng)基用量 依配方計(jì)算各成分的用量依配方計(jì)算各成分的用量 2.2.稱(chēng)量：稱(chēng)量： 3.3.溶化：溶化： 牛肉膏黏稠，用稱(chēng)量紙稱(chēng)取牛肉膏黏稠，用稱(chēng)量紙稱(chēng)取 牛肉膏、蛋白胨易吸潮，要快、加蓋牛肉膏、蛋白胨易吸潮，要快、加蓋 牛肉膏、稱(chēng)量紙牛肉膏、稱(chēng)量紙 、少量水加熱溶解、少量水加熱溶解 取紙取紙 蛋白胨、蛋白胨、NaClNaCl瓊脂瓊脂 補(bǔ)水定容補(bǔ)水定容 4.4.調(diào)調(diào)pHpH、分裝、包扎

12、：、分裝、包扎： 5.5.滅菌：滅菌： 6.6.擱置斜面或倒平板：擱置斜面或倒平板： 培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿 分散成單個(gè)細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞, ,形成單個(gè)菌落形成單個(gè)菌落 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 溫度冷卻至溫度冷卻至50左右將試管枕在左右將試管枕在1cm1cm的木條上，斜面長(zhǎng)度的木條上，斜面長(zhǎng)度 不超過(guò)試管總長(zhǎng)的不超過(guò)試管總長(zhǎng)的1/21/2 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 約約50 防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染 灼燒滅菌，灼燒滅菌， 防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 1. 1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到培養(yǎng)基滅菌

13、后，需要冷卻到50 50 左右左右 時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng) 基的溫度？基的溫度？ 答：答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形 瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手 時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。 2.2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？ 答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微 生物污染培養(yǎng)基。生物污染培養(yǎng)基。 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 3.3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，為什么要將平板倒

14、置？ 4.4.在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺 在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái) 培養(yǎng)微生物嗎？為什么？培養(yǎng)微生物嗎？為什么？ 答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固 后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置， 既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以 防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。 答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之答：空氣中的微生

15、物可能在皿蓋與皿底之 間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板 培養(yǎng)微生物。培養(yǎng)微生物。 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 二二. .斜面接種和斜面接種和培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌：大腸桿菌： 1、斜面接種大腸桿菌的目的：、斜面接種大腸桿菌的目的： 菌種轉(zhuǎn)移、擴(kuò)大培養(yǎng)、保存純凈菌種等菌種轉(zhuǎn)移、擴(kuò)大培養(yǎng)、保存純凈菌種等 2、步驟：、步驟： a、點(diǎn)燃酒精燈、點(diǎn)燃酒精燈 b、滅菌接種環(huán)、滅菌接種環(huán) c、試管管口過(guò)火、試管管口過(guò)火 d、挑取菌種、挑取菌種 e、接種劃線、接種劃線 -S型曲線型曲線 f、試管口和接種環(huán)過(guò)火滅菌、試管口和接種環(huán)過(guò)火滅菌 g、培養(yǎng)大腸桿菌、培養(yǎng)大腸桿菌-恒

16、溫箱（恒溫箱（37）培養(yǎng)）培養(yǎng)24h24h 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 三三. .大腸桿菌的純化培養(yǎng)：大腸桿菌的純化培養(yǎng)： 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 純化大腸桿菌：純化大腸桿菌： 平板劃線法：平板劃線法： 菌種菌種 劃劃3 3個(gè)平板個(gè)平板 1 1個(gè)不劃線個(gè)不劃線 1.1.純化大腸桿菌的方法：純化大腸桿菌的方法：平板劃線法平板劃線法和稀釋涂布平板法和稀釋涂布平板法 接種環(huán)接種環(huán) 防止劃破培養(yǎng)基防止劃破培養(yǎng)基 （重復(fù)實(shí)驗(yàn)）（重復(fù)實(shí)驗(yàn)） （空白對(duì)照）（空白對(duì)照） 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 平板劃線法是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表平板劃線法是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表 面連續(xù)劃

17、線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到 培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由 一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體。一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體。 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 1 1、為什么在操作的第一步以及每次劃線之、為什么在操作的第一步以及每次劃線之 前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然 需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上 可能存在的微生物污染培養(yǎng)

18、物可能存在的微生物污染培養(yǎng)物 殺死上次殘留的菌種，保證使下一次劃線時(shí)，殺死上次殘留的菌種，保證使下一次劃線時(shí)， 菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃 線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸 減少，以便得到菌落。減少，以便得到菌落。 及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染 環(huán)境和感染操作者。環(huán)境和感染操作者。 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 2.2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其 冷卻后再進(jìn)行劃線？冷卻后再進(jìn)行劃線？ 答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌

19、種。答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。 3.3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)， 為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線？ 答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線 條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi) 始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而 逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái) 的菌落。的菌落。 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 6 6支試管，分別加入支試管，分別加入9ml9ml無(wú)菌水無(wú)菌水

20、1ml 101 1ml 102 1ml 103 1ml 104 1ml 105 1ml 106 稀釋涂布平板法：稀釋涂布平板法： a.a.梯度稀釋菌液：梯度稀釋菌液： 菌液菌液 微量微量 移移 液器液器 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 浸浸 稀釋涂布平板法：稀釋涂布平板法： a.a.梯度稀釋菌液：梯度稀釋菌液： b.b.涂布平板：涂布平板： 不超過(guò)不超過(guò)0.1ml0.1ml 各梯度分別涂布各梯度分別涂布3個(gè)平板個(gè)平板 1 1個(gè)不涂布作空白對(duì)照個(gè)不涂布作空白對(duì)照 滴滴 灼灼 涂涂 稀稀 釋釋 10103 3 倍倍 稀稀 釋釋 10104 4 倍倍 稀稀 釋釋 10105 5 倍倍 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

21、 稀釋涂布法是將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋?zhuān)♂屚坎挤ㄊ菍⒕哼M(jìn)行一系列梯度稀釋?zhuān)?然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培 養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近 進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌 操作要求，想一想，第操作要求，想一想，第2 2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú) 菌操作？菌操作？ 應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌無(wú)菌”。 例如：酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、例如：酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、 吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管頭不要接觸任何其他物體、 吸管要在酒精燈火焰周?chē)鹊?。吸管要在酒精燈火焰周?chē)鹊取?微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn) 平板劃線平板劃線 分離法分離法 可以觀察菌落特征，可以觀察菌落特征， 對(duì)混合菌進(jìn)行分離對(duì)混合菌進(jìn)行分離 不能計(jì)數(shù)不能計(jì)數(shù) 稀釋涂布稀釋涂布 平板法平板法 可以計(jì)數(shù)，可以觀察可以計(jì)數(shù)，可以觀察 菌落特征菌落特征 吸收量較少、較麻煩，吸收量較少、較麻煩， 平板不干燥效果不好，平板不干燥效果不好， 容易蔓延容易蔓延 3平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 平板劃線法：平板劃線法： 二二.