第5章動物檢疫技術(shù).ppt

1、第五章第五章 動物檢疫技術(shù)動物檢疫技術(shù) 第一節(jié)第一節(jié) 流行病學調(diào)查流行病學調(diào)查 一、調(diào)查方式和方法一、調(diào)查方式和方法 1 1、現(xiàn)場調(diào)查、現(xiàn)場調(diào)查 詢問調(diào)查詢問調(diào)查 現(xiàn)場觀察現(xiàn)場觀察 查驗資料查驗資料 動物剖檢動物剖檢 現(xiàn)場采樣現(xiàn)場采樣 數(shù)理統(tǒng)計數(shù)理統(tǒng)計 2 2、通信調(diào)查、通信調(diào)查 n電話、傳真、電話、傳真、e-maile-mail等進行交流調(diào)查。等進行交流調(diào)查。 二二. .調(diào)查的種類和內(nèi)容調(diào)查的種類和內(nèi)容 1 1、現(xiàn)況調(diào)查、現(xiàn)況調(diào)查 普查普查 n如每年春季或秋季進行如每年春季或秋季進行牛結(jié)核病和布氏桿菌牛結(jié)核病和布氏桿菌 病病的普查；在多雨年份的秋季對全部奶牛進的普查；在多雨年份的秋季對全部奶

2、牛進 行肝片吸蟲病的檢查。行肝片吸蟲病的檢查。 抽樣調(diào)查抽樣調(diào)查 n抽樣調(diào)查簡稱抽查是調(diào)查有關(guān)動物群體中的抽樣調(diào)查簡稱抽查是調(diào)查有關(guān)動物群體中的 部分動物部分動物, ,即樣本。即樣本。 n通過對部分動物的調(diào)查了解通過對部分動物的調(diào)查了解, ,估計某病在全估計某病在全 群中群中發(fā)生發(fā)展趨向發(fā)生發(fā)展趨向, ,以少窺多。以少窺多。 2 2、流行調(diào)查、流行調(diào)查 n流行調(diào)查流行調(diào)查指對某養(yǎng)殖場指對某養(yǎng)殖場( (戶戶) )在短時間內(nèi)在短時間內(nèi) 突然集中發(fā)生或連續(xù)發(fā)生大量同一種傳突然集中發(fā)生或連續(xù)發(fā)生大量同一種傳 染病病畜禽時所進行的調(diào)查。染病病畜禽時所進行的調(diào)查。 n目的是目的是控制或消滅流行，并從中發(fā)現(xiàn)

3、防控制或消滅流行，并從中發(fā)現(xiàn)防 疫工作的薄弱環(huán)節(jié)，總結(jié)經(jīng)驗教訓，避疫工作的薄弱環(huán)節(jié)，總結(jié)經(jīng)驗教訓，避 免類似事件再次發(fā)生。免類似事件再次發(fā)生。 (1)(1)最初調(diào)查最初調(diào)查 n養(yǎng)殖場養(yǎng)殖場( (戶戶) )基本情況、基本情況、 病史病史 、本次發(fā)病、本次發(fā)病 情況、環(huán)境因素。情況、環(huán)境因素。 (2)(2)深入調(diào)查深入調(diào)查 n發(fā)病情況發(fā)病情況調(diào)查調(diào)查 、傳染來源傳染來源調(diào)查、調(diào)查、傳播途徑傳播途徑 調(diào)查。調(diào)查。 (3)(3)追蹤調(diào)查追蹤調(diào)查 n追蹤疫點追蹤疫點傳染源和傳播媒介傳染源和傳播媒介的的擴散趨勢擴散趨勢。 n追蹤調(diào)查的關(guān)鍵是追蹤調(diào)查的關(guān)鍵是查明接觸者查明接觸者。 三三. .流行病學調(diào)查常用

4、的數(shù)和率流行病學調(diào)查常用的數(shù)和率 1.1.發(fā)病率：發(fā)病率：在一定時間內(nèi)在一定時間內(nèi), ,某動物群體中某病某動物群體中某病 的發(fā)病動物數(shù)占該群體動物總數(shù)的百分率。的發(fā)病動物數(shù)占該群體動物總數(shù)的百分率。 2.2.患病率：患病率：在一定時間內(nèi)在一定時間內(nèi), ,某動物群體中某病某動物群體中某病 的患病動物數(shù)占該群體動物總數(shù)的百分率。的患病動物數(shù)占該群體動物總數(shù)的百分率。 100% 動物群體中的發(fā)病數(shù) 發(fā)病率(%)= 該群動物總數(shù) (%)100% 動物群體中患病動物數(shù) 患病率 該群動物總數(shù) 3.3.死亡率：死亡率：在一定時間內(nèi)在一定時間內(nèi), ,某動物群體中因某動物群體中因 某病死亡的動物數(shù)占該群體動物總

5、數(shù)的某病死亡的動物數(shù)占該群體動物總數(shù)的 百分率百分率。 4.4.病死率病死率( (致死率致死率) )：在一定時間內(nèi)在一定時間內(nèi), ,某動某動 物群體中因某病死亡的動物數(shù)占該病患物群體中因某病死亡的動物數(shù)占該病患 病動物總數(shù)的百分率。病動物總數(shù)的百分率。 (%)100% 因某病死亡的動物數(shù) 死亡率 該群動物總數(shù) 100% 因某病死亡的動物總數(shù) 致死率(%)= 該病患病動物總數(shù) 第二節(jié)第二節(jié) 臨診檢疫技術(shù)臨診檢疫技術(shù) 一、群體檢疫一、群體檢疫 n群體檢疫是指對待檢動物群體進行的現(xiàn)群體檢疫是指對待檢動物群體進行的現(xiàn) 場檢疫。場檢疫。 ( (一一) )群體檢疫的組織群體檢疫的組織 1.1.群體劃分群體

6、劃分 n同場、同圈同場、同圈( (舍舍) )；同一產(chǎn)地來源的；同一產(chǎn)地來源的；同同 車、同船、同機運輸?shù)能?、同船、同機運輸?shù)膭潪橐蝗簞潪橐蝗?。在畜。在?群過大時群過大時, ,要適當分群要適當分群, ,以利于檢查。以利于檢查。 2.2.檢疫順序檢疫順序 n大群大群小群；幼年小群；幼年成年；種用畜群成年；種用畜群 其它用途的；健康其它用途的；健康染病畜群染病畜群 3.3.檢疫時間檢疫時間 n放牧的放牧的：跟群檢疫檢疫跟群檢疫檢疫 n舍飼的舍飼的：飼喂時檢疫飼喂時檢疫。 n反芻動物反芻動物：飼后安靜時檢疫飼后安靜時檢疫 n乳牛乳牛：擠乳時檢疫擠乳時檢疫 n產(chǎn)地和口岸隔離檢疫產(chǎn)地和口岸隔離檢疫：按規(guī)

7、定在規(guī)定時：按規(guī)定在規(guī)定時 間完成間完成必檢項目必檢項目。 ( (二二) )群體檢疫的方法和內(nèi)容群體檢疫的方法和內(nèi)容 1.1.靜態(tài)觀察靜態(tài)觀察 n靜態(tài)觀察是在動物靜態(tài)觀察是在動物安靜安靜休息休息, ,完全保持自完全保持自 然狀態(tài)下然狀態(tài)下, ,觀察其觀察其站立站立、睡臥姿勢睡臥姿勢；精神精神 狀態(tài)；營養(yǎng)程度和呼吸、反芻狀態(tài)；營養(yǎng)程度和呼吸、反芻等基本生等基本生 理活動現(xiàn)象。注意有無異常站立、睡臥理活動現(xiàn)象。注意有無異常站立、睡臥 姿勢姿勢, ,有無咳嗽、喘息、呻吟、流涎、嗜有無咳嗽、喘息、呻吟、流涎、嗜 睡、孤立一隅等反常現(xiàn)象。睡、孤立一隅等反常現(xiàn)象。 2.2.動態(tài)觀察動態(tài)觀察 n經(jīng)靜態(tài)觀察之

8、后經(jīng)靜態(tài)觀察之后, ,將被檢動物將被檢動物驅(qū)趕驅(qū)趕起來起來, , 觀察其自然活動和驅(qū)趕活動。重點看觀察其自然活動和驅(qū)趕活動。重點看起起 立、運動的姿勢與步態(tài)；精神狀態(tài)。立、運動的姿勢與步態(tài)；精神狀態(tài)。注注 意有無不愿起立意有無不愿起立, ,不能起立或起立困難以不能起立或起立困難以 及跛行、步態(tài)蹣跚、轉(zhuǎn)圈、共濟失調(diào)、及跛行、步態(tài)蹣跚、轉(zhuǎn)圈、共濟失調(diào)、 曲背弓腰、離群掉隊及運動后咳嗽、喘曲背弓腰、離群掉隊及運動后咳嗽、喘 氣等病態(tài)。氣等病態(tài)。 3.3.飲食觀察飲食觀察 n目的在于檢查動物的食欲和口腔疾病。目的在于檢查動物的食欲和口腔疾病。 可以觀察動物可以觀察動物自然采食飲水動作自然采食飲水動作,

9、 ,亦可有亦可有 意少給食物看其搶食行為。從中發(fā)現(xiàn)不意少給食物看其搶食行為。從中發(fā)現(xiàn)不 食不飲、少食少飲、吞咽困難和退槽、食不飲、少食少飲、吞咽困難和退槽、 嘔吐、流涎等可疑患病動物。嘔吐、流涎等可疑患病動物。 n通過群體檢疫通過群體檢疫, ,從大群動物中挑揀出有病從大群動物中挑揀出有病 態(tài)的動物態(tài)的動物, ,隔離后進一步進行個體檢疫。隔離后進一步進行個體檢疫。 二二. .個體檢疫個體檢疫 n個體檢疫是對個體檢疫是對群體檢疫時檢出的可群體檢疫時檢出的可 疑病態(tài)動物疑病態(tài)動物進行進行詳細和系統(tǒng)詳細和系統(tǒng)的臨診的臨診 檢查。檢查。 n若群體檢疫沒有發(fā)現(xiàn)病態(tài)動物若群體檢疫沒有發(fā)現(xiàn)病態(tài)動物, ,亦應亦

10、應 抽查抽查5 52020的動物作個體檢疫。的動物作個體檢疫。 若抽查發(fā)現(xiàn)檢疫對象若抽查發(fā)現(xiàn)檢疫對象, ,再抽檢再抽檢1010, , 必要時對全群動物逐一進行復查。必要時對全群動物逐一進行復查。 （一）個體檢疫的方法和內(nèi)容（一）個體檢疫的方法和內(nèi)容 1.1.視診視診 (1)(1)看精神狀態(tài)看精神狀態(tài) n健康動物靜止時安靜健康動物靜止時安靜, ,行動時靈活行動時靈活, ,對各對各 種外界刺激敏感。種外界刺激敏感。 (2)(2)看營養(yǎng)程度看營養(yǎng)程度 營養(yǎng)狀況營養(yǎng)狀況：肌肉的豐滿度、皮下脂肪的蓄：肌肉的豐滿度、皮下脂肪的蓄 積量、被毛狀況三方面觀察。積量、被毛狀況三方面觀察。 n營養(yǎng)良好營養(yǎng)良好：肌

11、肉豐滿：肌肉豐滿, ,皮下脂肪肥厚皮下脂肪肥厚, ,被被 毛平順光亮毛平順光亮, ,軀體輪廓豐圓。軀體輪廓豐圓。 n營養(yǎng)不良營養(yǎng)不良：消瘦：消瘦, ,被毛蓬亂無光被毛蓬亂無光, ,骨骼表骨骼表 露明顯。露明顯。 (3)(3)看姿勢與運動看姿勢與運動 n觀察動物站立、睡臥的姿勢是否自然觀察動物站立、睡臥的姿勢是否自然, ,運動運動 時動作是否靈活而協(xié)調(diào)。時動作是否靈活而協(xié)調(diào)。 (4)(4)看皮膚被毛看皮膚被毛 n觀察動物是否有皮膚病變觀察動物是否有皮膚病變, ,被毛是否整潔、被毛是否整潔、 平順有光澤。平順有光澤。 (5)(5)看可視黏膜看可視黏膜 n在檢查可視黏膜的同時在檢查可視黏膜的同時,

12、,檢查眼、鼻、口檢查眼、鼻、口 等天然孔分泌物的性狀。等天然孔分泌物的性狀。 (6)(6)看排泄物看排泄物 (7)(7)看呼吸與反芻看呼吸與反芻 2.2.觸診觸診 （1 1）耳根、角根、鼻端、四肢末端耳根、角根、鼻端、四肢末端 （2 2）體表皮膚體表皮膚 （3 3）體表淋巴結(jié)體表淋巴結(jié) （4 4）嗉囊嗉囊 3.3.聽診聽診 （1 1）叫聲：判別動物異常聲音）叫聲：判別動物異常聲音 （2 2）咳嗽：判別動物呼吸器官病變。）咳嗽：判別動物呼吸器官病變。 n干咳：見于上呼吸道炎癥（咽喉炎、慢干咳：見于上呼吸道炎癥（咽喉炎、慢 性支氣管炎）；性支氣管炎）； n濕咳：見于支氣管和肺部炎癥濕咳：見于支氣管

13、和肺部炎癥 4.4.測體溫測體溫 n健康動物：早晨溫度較低健康動物：早晨溫度較低, ,午后略高午后略高, ,波波 動范圍在動范圍在0.50.511之間。之間。 n動物檢疫中常根據(jù)體溫升高程度動物檢疫中常根據(jù)體溫升高程度, ,判斷動判斷動 物發(fā)熱程度物發(fā)熱程度, ,進而進而推測疫病的嚴重性和可推測疫病的嚴重性和可 疑疫病范圍。疑疫病范圍。 n體溫升高程度分為：體溫升高程度分為：微熱微熱( (體溫升高體溫升高1)1)； 中等熱中等熱( (體溫升高體溫升高2)2)；高熱高熱( (體溫升高體溫升高 3)3)；最高熱最高熱( (體溫升高體溫升高33以上以上) )。 群體檢疫群體檢疫 臨床檢疫臨床檢疫 個

14、體檢疫個體檢疫個體檢疫個體檢疫個體檢疫個體檢疫 群體檢疫群體檢疫 群檢正常群檢正常 抽檢抽檢 5%-20% 群檢異常群檢異常個體檢查個體檢查 靜態(tài)觀察靜態(tài)觀察 食態(tài)觀察食態(tài)觀察 動態(tài)觀察動態(tài)觀察 三三. .各種動物臨診檢疫特點各種動物臨診檢疫特點 （一）豬的臨診檢疫特點（一）豬的臨診檢疫特點 1.1.健康豬健康豬 n站立平穩(wěn)站立平穩(wěn), ,不斷走動拱食不斷走動拱食, ,并發(fā)出并發(fā)出“吭吭吭吭”聲。聲。 對外界刺激敏感對外界刺激敏感, ,遇人接近表現(xiàn)警惕性凝視。遇人接近表現(xiàn)警惕性凝視。 睡臥常取側(cè)臥睡臥常取側(cè)臥, ,四肢伸展四肢伸展, ,頭側(cè)地，呼吸均勻；頭側(cè)地，呼吸均勻； 爬臥時后腿屈于腹下爬臥

15、時后腿屈于腹下。排泄物正常。體溫正。排泄物正常。體溫正 常。被毛整齊光亮。常。被毛整齊光亮。 n起立敏捷起立敏捷, ,行動靈活行動靈活, ,走跑時搖頭擺尾或上卷走跑時搖頭擺尾或上卷 尾。遇驅(qū)趕尾。遇驅(qū)趕, ,隨群前進隨群前進, ,不斷發(fā)出叫聲。不斷發(fā)出叫聲。 n餓時叫喚餓時叫喚, ,飲喂時搶食飲喂時搶食, ,大口吞咽有響聲且響大口吞咽有響聲且響 聲清脆聲清脆, ,全身鬃毛隨吞食而顫動。全身鬃毛隨吞食而顫動。 2.2.病豬病豬 n精神萎靡精神萎靡, ,離群獨立離群獨立, ,全身顫抖或頭頸歪全身顫抖或頭頸歪 斜。蜷臥斜。蜷臥, ,不愿起立。不愿起立。被毛粗亂無光被毛粗亂無光, ,鼻鼻 盤干燥盤干燥

16、, ,眼有分泌物眼有分泌物, ,肷窩凹陷肷窩凹陷。行動遲。行動遲 緩緩, ,步態(tài)踉蹌步態(tài)踉蹌, ,跛行或出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。跛行或出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。 n食欲下降食欲下降, ,懶于上槽懶于上槽, ,或只吃幾口就退槽或只吃幾口就退槽, , 有些只聞而不食有些只聞而不食, ,亦有的食欲廢絕。排泄亦有的食欲廢絕。排泄 物異常。多有體溫異常。物異常。多有體溫異常。 ( (二二) )牛的臨診檢疫特點牛的臨診檢疫特點 1.1.健康牛健康牛 n站立平穩(wěn)站立平穩(wěn), ,神態(tài)安靜。睡臥時常呈膝臥姿勢神態(tài)安靜。睡臥時常呈膝臥姿勢, , 四肢彎曲四肢彎曲。全身被毛平整有光澤。全身被毛平整有光澤, ,鼻鏡濕潤鼻鏡濕潤, , 眼、嘴

17、及肛門周圍干凈。眼、嘴及肛門周圍干凈。反芻有力，正常噯反芻有力，正常噯 氣，呼吸平穩(wěn)氣，呼吸平穩(wěn)。肉用牛垂肉高度發(fā)育；乳用。肉用牛垂肉高度發(fā)育；乳用 牛乳房清潔牛乳房清潔, ,泌乳正常。排泄物、體溫正常泌乳正常。排泄物、體溫正常 n健康牛走起路來精力充沛健康牛走起路來精力充沛, ,腰背靈活腰背靈活, ,四肢有四肢有 力力, ,搖耳甩尾搖耳甩尾, ,自由自在。自由自在。 n飲食中爭搶飼料飲食中爭搶飼料, ,咀嚼有力咀嚼有力, ,采食時間長采食時間長, ,采采 食量大。放牧中喜采食高草食量大。放牧中喜采食高草, ,常甩頭用力扯常甩頭用力扯 斷。運動后飲水不咳嗽。斷。運動后飲水不咳嗽。 2.2.病牛

18、病牛 n精神沉郁精神沉郁, ,頭頸低伸頭頸低伸, ,拱背彎腰或有異常拱背彎腰或有異常 體態(tài)。睡臥時四肢伸開體態(tài)。睡臥時四肢伸開, ,橫臥或曲頸側(cè)臥橫臥或曲頸側(cè)臥, , 嗜睡嗜睡, ,久臥不起或起立困難久臥不起或起立困難。被毛粗亂。被毛粗亂。 反芻遲緩或停止。排泄物異常。體溫、反芻遲緩或停止。排泄物異常。體溫、 呼吸多異常。呼吸多異常。 n運動時常運動時常跛行掉隊或不愿行走跛行掉隊或不愿行走。飲食時。飲食時 表現(xiàn)厭食或不食表現(xiàn)厭食或不食, ,或采食緩慢或采食緩慢, ,咀嚼無力。咀嚼無力。 出現(xiàn)運動后飲水咳嗽。出現(xiàn)運動后飲水咳嗽。 ( (三三) )羊的臨診檢疫特點羊的臨診檢疫特點 1.1.健康羊健

19、康羊 站立平穩(wěn)站立平穩(wěn), ,乖順。被毛整潔。呼吸平穩(wěn)。常乖順。被毛整潔。呼吸平穩(wěn)。常 于飽腹后合群臥地休息，反芻。遇炎熱相于飽腹后合群臥地休息，反芻。遇炎熱相 互把頭藏于對方腹下避暑。互把頭藏于對方腹下避暑。 n走起路來精神活潑走起路來精神活潑, ,合群不掉隊；放牧中雖合群不掉隊；放牧中雖 很分散很分散, ,但不離群。山羊活潑機敏但不離群。山羊活潑機敏, ,喜攀登喜攀登, , 善跳躍善跳躍, ,好爭斗好爭斗, ,尤其是羔羊和幼齡羊。尤其是羔羊和幼齡羊。 n飼喂時互相爭食，放牧時常邊走邊吃草飼喂時互相爭食，放牧時常邊走邊吃草, ,邊邊 走邊排糞，排泄物正常。食后肷窩臌起。走邊排糞，排泄物正常。食

20、后肷窩臌起。 2.2.病羊病羊 n精神萎靡不振精神萎靡不振, ,常獨臥一隅常獨臥一隅, ,遇人接近不遇人接近不 起不走。起不走。不反芻不反芻。排泄物異常。呼吸異。排泄物異常。呼吸異 常。常。被毛粗亂被毛粗亂, ,脫毛脫毛, ,皮膚干裂皮膚干裂。行走搖行走搖 擺擺, ,或出現(xiàn)異常運動或出現(xiàn)異常運動, ,異常姿勢異常姿勢。 n食欲不振或停食食欲不振或停食, ,食后肷窩仍下陷。山羊食后肷窩仍下陷。山羊 喜臥懶動喜臥懶動，多有體溫異常。，多有體溫異常。 ( (四四) )家禽的臨診檢疫特點家禽的臨診檢疫特點 1.1.健康家禽健康家禽 n神態(tài)活潑神態(tài)活潑, ,反應敏銳。反應敏銳。站立時伸頸昂首翹站立時伸頸

21、昂首翹 尾尾, ,且常高收一肢且常高收一肢, ,目光伶俐目光伶俐, ,時常側(cè)視時常側(cè)視。 臥時頭疊放在翅內(nèi)臥時頭疊放在翅內(nèi)。冠、髯紅潤。冠、髯紅潤, ,羽絨豐羽絨豐 滿光亮滿光亮, ,排列勻稱?？诒菨崈襞帕袆蚍Q。口鼻潔凈, ,呼吸正常呼吸正常, , 排泄物正常。體溫正常。排泄物正常。體溫正常。 n平養(yǎng)雞平養(yǎng)雞行動敏捷行動敏捷, ,步態(tài)穩(wěn)健步態(tài)穩(wěn)?。圾?、鵝陸地；鴨、鵝陸地 行走穩(wěn)健行走穩(wěn)健, ,水中游牧自如水中游牧自如, ,放牧時不掉隊。放牧時不掉隊。 n健康家禽健康家禽啄食連續(xù)啄食連續(xù), ,食欲旺盛食欲旺盛, ,食量大食量大, ,嗉嗉 囊飽滿。囊飽滿。 2.2.病禽病禽 n精神萎靡精神萎靡,

22、,縮頸垂翅縮頸垂翅, ,閉目似睡閉目似睡。冠、髯冠、髯 蒼白或紫黑蒼白或紫黑, ,喙、蹼色澤變暗喙、蹼色澤變暗。有的頭頸。有的頭頸 部腫脹部腫脹, ,眼、鼻等天然孔有異常分泌物。眼、鼻等天然孔有異常分泌物。 羽絨蓬亂無光羽絨蓬亂無光。行動遲緩。行動遲緩, ,跛行或有肢翅跛行或有肢翅 麻痹及其它神經(jīng)癥狀。食欲減退或廢絕麻痹及其它神經(jīng)癥狀。食欲減退或廢絕, , 嗉囊空虛。排泄物異常。多有體溫異常。嗉囊空虛。排泄物異常。多有體溫異常。 第三節(jié)第三節(jié) 病理學檢查技術(shù)病理學檢查技術(shù) 一、病理剖檢檢查技術(shù)一、病理剖檢檢查技術(shù) （一）對動物尸體剖檢的要求（一）對動物尸體剖檢的要求 1 1、剖檢前檢查、剖檢前

23、檢查 剖檢前仔細檢查尸體體表特征及天然孔有無剖檢前仔細檢查尸體體表特征及天然孔有無 異常，以排除炭疽等惡性傳染病。異常，以排除炭疽等惡性傳染病。 患炭疽病的動物及其尸體，禁止剖檢。患炭疽病的動物及其尸體，禁止剖檢。 若懷疑動物死于炭疽，先采取耳尖血液涂片若懷疑動物死于炭疽，先采取耳尖血液涂片 鏡檢，排除炭疽后方可剖檢。鏡檢，排除炭疽后方可剖檢。 2 2、剖檢時間、剖檢時間 n剖檢進行的剖檢進行的越早越好越早越好，最好在白天進行剖檢。，最好在白天進行剖檢。 3 3、剖檢地點、剖檢地點 n病理解剖室或；在野外或其它檢疫現(xiàn)場剖檢時，病理解剖室或；在野外或其它檢疫現(xiàn)場剖檢時， 應選地勢高燥并遠離居民區(qū)

24、、畜舍及交通要道應選地勢高燥并遠離居民區(qū)、畜舍及交通要道 的地方進行。的地方進行。 4 4、剖檢數(shù)量、剖檢數(shù)量 n家禽：家禽：5 5只以上；大中動物至少剖檢只以上；大中動物至少剖檢3 3頭。頭。 5 5、剖檢術(shù)式、剖檢術(shù)式 6 6、安全防護、安全防護 n工作人員的安全防護工作；防止環(huán)境污染。工作人員的安全防護工作；防止環(huán)境污染。 n常用的消毒液有：常用的消毒液有：1%1%2%2%硼酸、硼酸、0.1%0.1%新潔爾滅、新潔爾滅、 5%5%碘酊、碘酊、70%70%酒精等酒精等 （二）外部檢查（二）外部檢查 1 1檢查檢查尸體變化尸體變化 n尸僵、尸斑、尸腐、血液凝固尸僵、尸斑、尸腐、血液凝固 2

25、2檢查檢查皮膚、被毛及營養(yǎng)狀況皮膚、被毛及營養(yǎng)狀況 3 3檢查檢查天然孔天然孔 （三）內(nèi)部檢查（三）內(nèi)部檢查 1 1、皮下皮下檢查檢查 2 2、內(nèi)臟器官內(nèi)臟器官的檢查的檢查 n對有病變和病變嚴重的器官要重點檢查，分辯對有病變和病變嚴重的器官要重點檢查，分辯 病理變化特點，判定病變性質(zhì)。病理變化特點，判定病變性質(zhì)。 3 3、口腔、鼻腔和頸部器官口腔、鼻腔和頸部器官的檢查的檢查 （四）剖檢記錄（四）剖檢記錄 1 1、記錄內(nèi)容、記錄內(nèi)容 n記錄內(nèi)容要求記錄內(nèi)容要求完整、客觀、真實完整、客觀、真實。記錄。記錄 應在檢查過程中完成，而不是事后補記。應在檢查過程中完成，而不是事后補記。 2 2、病變描述、

26、病變描述 n必須必須客觀準確客觀準確，反映組織器官本來的變，反映組織器官本來的變 化。化。 二病理組織學檢查二病理組織學檢查 n彌補了肉眼檢查的不足，進一步明確病變彌補了肉眼檢查的不足，進一步明確病變 性質(zhì)，常使疫病得到確診。尤其性質(zhì)，常使疫病得到確診。尤其對腫瘤的對腫瘤的 定性，腦組織病變檢查有極高的價值。定性，腦組織病變檢查有極高的價值。 n常用的有常用的有石蠟切片、蘇木素石蠟切片、蘇木素伊紅（伊紅（h.eh.e） 染色法；快速冰凍切片染色法；快速冰凍切片 n如豬瘟、牛海綿狀腦病的檢測。如豬瘟、牛海綿狀腦病的檢測。 第四節(jié)第四節(jié) 檢疫材料的采集檢疫材料的采集 一采集原則一采集原則 1 1適

27、時采集適時采集 2 2典型采樣典型采樣 典型采樣要求樣品具有代表性典型采樣要求樣品具有代表性。 動物活體采樣動物活體采樣 選擇典型動物選擇典型動物 n即未經(jīng)藥物治療、病狀典型的動物，這對細菌即未經(jīng)藥物治療、病狀典型的動物，這對細菌 性傳染病的檢查尤其重要。性傳染病的檢查尤其重要。 選擇典型材料選擇典型材料 na a、采集病原體可能在其中含量最高的材料。、采集病原體可能在其中含量最高的材料。 nb b、在采取病料前，對動物可能患某種疫病作出、在采取病料前，對動物可能患某種疫病作出 初步診斷，側(cè)重采集該病原體常侵害的部位。初步診斷，側(cè)重采集該病原體常侵害的部位。 從動物尸體采樣從動物尸體采樣 n采

28、集有采集有病變的組織、器官或病變最明顯、最典型病變的組織、器官或病變最明顯、最典型 的部位的部位。 n供病理組織切片的樣品，應連帶部分健康組織。供病理組織切片的樣品，應連帶部分健康組織。 n淋巴結(jié)、心、肝、脾、肺、腎，不論有無病變，淋巴結(jié)、心、肝、脾、肺、腎，不論有無病變， 一般均應采取一般均應采取。 3 3合理采樣合理采樣 n動物群體發(fā)病，動物群體發(fā)病，至少采取至少采取5 5頭（只）動物的病料頭（只）動物的病料。 每一種樣品應有足夠的數(shù)量，除確保本次實驗用每一種樣品應有足夠的數(shù)量，除確保本次實驗用 量外，以備必要的復檢用。量外，以備必要的復檢用。 4 4無菌采樣無菌采樣 n樣品采集全過程應樣

29、品采集全過程應無菌操作無菌操作，尤其是供微，尤其是供微 生物學檢查和血清學實驗的樣品。生物學檢查和血清學實驗的樣品。 n采樣部位、采樣用具、盛放樣品的容器均采樣部位、采樣用具、盛放樣品的容器均 需需滅菌處理滅菌處理。 5 5安全采樣安全采樣 n在采樣過程中，采樣人員要注意安全，防在采樣過程中，采樣人員要注意安全，防 止感染；同時防止病原擴散而造成環(huán)境污止感染；同時防止病原擴散而造成環(huán)境污 染。染。 二供病原學檢查材料的采集、處理二供病原學檢查材料的采集、處理 1 1、供微生物學檢查材料的采集、處理、供微生物學檢查材料的采集、處理 （1 1）血液）血液 n采血部位：采血部位：頸靜脈或尾靜脈或耳靜

30、脈頸靜脈或尾靜脈或耳靜脈；家禽從；家禽從翅翅 靜脈或心臟靜脈或心臟。死亡動物從右心房采血。死亡動物從右心房采血。 n采血量：采血量： 10ml10ml（大、中動物）；（大、中動物）； 3 35ml5ml（小動（小動 物和家禽）。物和家禽）。 n全血抗凝：全血抗凝：edtaedtana2na2、枸櫞酸鈉、肝素。枸櫞、枸櫞酸鈉、肝素。枸櫞 酸鈉不宜用于病毒血樣酸鈉不宜用于病毒血樣。 n10ml10ml血液血液+4%+4%枸櫞酸鈉溶液枸櫞酸鈉溶液1ml1ml或或0.1%0.1%肝素肝素1ml1ml或或 edtaedtana215na2152020。 n病毒樣品：病毒樣品：1ml1ml血樣血樣= =青

31、霉素青霉素+ +鏈霉素各鏈霉素各500500 1000iu1000iu，以抑制血源性或在采血過程中污染的細，以抑制血源性或在采血過程中污染的細 菌。菌。 （2 2）分泌物和滲出液）分泌物和滲出液 n 口腔、鼻腔、喉氣管、泄殖腔及陰道分泌物：口腔、鼻腔、喉氣管、泄殖腔及陰道分泌物： 用用滅菌的棉球蘸取滅菌的棉球蘸取。 n咽食道分泌物：采前禁食咽食道分泌物：采前禁食12h12h，食道探子刮取。，食道探子刮取。 n乳汁：清洗乳房并消毒乳汁：清洗乳房并消毒棄去最初擠出的幾棄去最初擠出的幾 把乳汁把乳汁擠出的擠出的101020ml20ml乳汁乳汁。 n尿液：排尿時采集或用導尿管采取，常取尿液：排尿時采集

32、或用導尿管采取，常取 303050ml50ml。 n水泡液、水腫液、關(guān)節(jié)囊液，胸腹腔滲出液：水泡液、水腫液、關(guān)節(jié)囊液，胸腹腔滲出液： 用用注射器抽取，至少采取注射器抽取，至少采取1ml1ml。 n膿汁：已破口的膿皰，用棉球蘸??；未破口膿汁：已破口的膿皰，用棉球蘸??；未破口 的用注射器吸取。過于濃稠不好抽取時，可的用注射器吸取。過于濃稠不好抽取時，可 切開膿皰，用棉球蘸取。切開膿皰，用棉球蘸取。 （3 3）淋巴結(jié)、內(nèi)臟器官、肌肉）淋巴結(jié)、內(nèi)臟器官、肌肉 n淋巴結(jié)：淋巴結(jié)連帶周圍脂肪整體采集。淋巴結(jié)：淋巴結(jié)連帶周圍脂肪整體采集。 n內(nèi)臟器官和肌肉：取病變最明顯的部位。內(nèi)臟器官和肌肉：取病變最明顯的

33、部位。 n采集的淋巴結(jié)、內(nèi)臟器官、肌肉分別置于滅采集的淋巴結(jié)、內(nèi)臟器官、肌肉分別置于滅 菌容器。菌容器。 （4 4）水泡皮）水泡皮 n病變部清水清洗，剪取新鮮水泡皮病變部清水清洗，剪取新鮮水泡皮3 35g5g放入放入 滅菌小瓶。滅菌小瓶。 （5 5）腸管）腸管 n選取要采集的腸管至少選取要采集的腸管至少6cm6cm，兩端結(jié)扎，剪斷，兩端結(jié)扎，剪斷， 置滅菌玻璃容器或塑料袋中。置滅菌玻璃容器或塑料袋中。 （6 6）長骨及肋骨）長骨及肋骨 n整根采集，不要損傷其兩端，用整根采集，不要損傷其兩端，用5%5%石炭酸石炭酸 水容液浸透的紗布或麻袋片包裹；水容液浸透的紗布或麻袋片包裹； （7 7）流產(chǎn)胎兒

34、、家禽及其它小動物尸體）流產(chǎn)胎兒、家禽及其它小動物尸體 n用不透水塑料袋包緊，裝入木箱送檢。用不透水塑料袋包緊，裝入木箱送檢。 （8 8）患病小動物）患病小動物 n在距離實驗室較近，又有較好的隔離運輸在距離實驗室較近，又有較好的隔離運輸 條件下，可將發(fā)病小動物直接送實驗室檢條件下，可將發(fā)病小動物直接送實驗室檢 查。查。 保存與送檢保存與送檢 n分泌物和滲出液采集分泌物和滲出液采集放入滅菌容器放入滅菌容器密密 封封外貼標簽外貼標簽冷藏冷藏送檢送檢。 n病毒性病料的保存病毒性病料的保存：含抗生素的含抗生素的ph7.2ph7.2 7.47.4磷酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液、5050甘油磷酸鹽緩沖液、甘油

35、磷酸鹽緩沖液、 5050甘油生理鹽水甘油生理鹽水。 n細菌性病料的保存細菌性病料的保存：3030甘油磷酸鹽緩沖甘油磷酸鹽緩沖 液、液、3030甘油生理鹽水、滅菌液體石蠟甘油生理鹽水、滅菌液體石蠟。 n液體材料（血液、膽汁、分泌物）涂片液體材料（血液、膽汁、分泌物）涂片： 滅菌接種環(huán)取一滴滅菌接種環(huán)取一滴載玻片中央均勻涂布載玻片中央均勻涂布 成適當大小的薄層成適當大小的薄層自然干燥自然干燥包扎固定包扎固定 送檢送檢 n組織器官涂片組織器官涂片：無菌方法剪取新鮮切面，：無菌方法剪取新鮮切面， 在玻片上壓?。ㄓ|片）或涂抹成一薄層在玻片上壓印（觸片）或涂抹成一薄層 自然干燥自然干燥包扎固定包扎固定送檢

36、。送檢。 2 2、供寄生蟲檢查材料的采集、處理、供寄生蟲檢查材料的采集、處理 （1 1）血液）血液 n多從耳靜脈采集，立即制成涂片標本。多從耳靜脈采集，立即制成涂片標本。 （2 2）陰道分泌物）陰道分泌物 n用棉拭子擦拭采取用棉拭子擦拭采取 （3 3）糞便）糞便 n直腸采集或采集新排出的糞便。直腸采集或采集新排出的糞便。 （4 4）被寄生蟲寄生的組織、器官）被寄生蟲寄生的組織、器官 n組織、器官常連帶寄生蟲一并采集，放入組織、器官常連帶寄生蟲一并采集，放入5 5 1010福爾馬林溶液中。福爾馬林溶液中。 （5 5）皮膚刮下物）皮膚刮下物 n螨病病料：在病變皮膚和健康皮膚交界處采螨病病料：在病變

37、皮膚和健康皮膚交界處采 集。集。 （6 6）寄生蟲）寄生蟲 n體表寄生蟲體表寄生蟲：用手或鑷子捏取或把附有蟲體：用手或鑷子捏取或把附有蟲體 的羽毛剪下的羽毛剪下7070酒精、甘油酒精或酒精、甘油酒精或5 5福爾福爾 馬林容液中。馬林容液中。 n體內(nèi)寄生蟲體內(nèi)寄生蟲：小型線蟲：小型線蟲用毛筆將蟲體挑出用毛筆將蟲體挑出 生理鹽水洗凈生理鹽水洗凈7070酒精、甘油酒精或巴酒精、甘油酒精或巴 氏夜固定。氏夜固定。 n大型蠕蟲像蛔蟲、棘頭蟲、絳蟲用大型蠕蟲像蛔蟲、棘頭蟲、絳蟲用5 51010 福爾馬林溶液固定。福爾馬林溶液固定。 三供血清學檢查材料的采集、處理三供血清學檢查材料的采集、處理 1 1、血清

38、、血清 采血采血 n一次采血量大中動物每頭不少于一次采血量大中動物每頭不少于10ml10ml；家禽；家禽 不少于不少于3ml3ml； 制備血清制備血清 n自然析出或離心分離血清。自然析出或離心分離血清。 血清保存血清保存 n制備的血清若能在制備的血清若能在一周內(nèi)檢測，一周內(nèi)檢測，44冷藏。若冷藏。若 需保存較長時間，需保存較長時間，-30-30凍結(jié)凍結(jié)。 2 2、抗原、抗原 n抗原材料的采集、處理方法同微生物學檢查抗原材料的采集、處理方法同微生物學檢查 材料的采集和處理。材料的采集和處理。 四供病理組織學檢查材料的采集、處理四供病理組織學檢查材料的采集、處理 1.1.選材選材 n應選擇應選擇病

39、變部位與健康部位交界處的組織病變部位與健康部位交界處的組織作為檢材。作為檢材。 n較重要的病變要多取幾塊，以展示病變的發(fā)展過程。較重要的病變要多取幾塊，以展示病變的發(fā)展過程。 n若同一器官有不同的病變，分別采取。若同一器官有不同的病變，分別采取。 2.2.采集采集 n供切片時用的組織塊大小為供切片時用的組織塊大小為1.5cm1.5cm1.5cm1.5cm0.5cm0.5cm， 3.3.固定固定 n供石蠟切片用的組織塊切好后，用清水輕輕沖洗血污，供石蠟切片用的組織塊切好后，用清水輕輕沖洗血污， 立即浸入固定液中。但胃腸、膽囊、膀胱等組織不要立即浸入固定液中。但胃腸、膽囊、膀胱等組織不要 用水沖洗

40、。用水沖洗。 n常用的固定液有常用的固定液有10%10%福爾馬林溶液、福爾馬林溶液、95%95%酒精、酒精、 鮑因氏液（鮑因氏液（bounibouni氏液）氏液）等，用量應是病料體等，用量應是病料體 積的積的5 51010倍倍。固定時間通常為。固定時間通常為121224h24h。 n若需長期保存，經(jīng)若需長期保存，經(jīng)121224h24h固定以后更換一次固定以后更換一次 固定液。固定液。 n固定時在容器底部墊以脫脂棉，以防組織粘固定時在容器底部墊以脫脂棉，以防組織粘 底而固定不良。若有幾個病例的組織固定在底而固定不良。若有幾個病例的組織固定在 同一容器時，應把每一病例的組織塊用紗布同一容器時，應把

41、每一病例的組織塊用紗布 包好，附上標簽再投入固定液中。包好，附上標簽再投入固定液中。 n供快速冰凍切片檢查用的組織常不經(jīng)固定，供快速冰凍切片檢查用的組織常不經(jīng)固定， 采樣后盡快送檢。如當天不能送出或檢查，采樣后盡快送檢。如當天不能送出或檢查， 必須凍結(jié)保存，以免組織腐敗和自溶。必須凍結(jié)保存，以免組織腐敗和自溶。 五檢疫材料的包裝和運送五檢疫材料的包裝和運送 1 1、包裝、包裝 包裝容器包裝容器 n直接包裝檢疫材料的容器可選擇玻璃或塑料直接包裝檢疫材料的容器可選擇玻璃或塑料 制品；制品； n運輸時的外包裝常用木箱、保溫瓶、保溫箱。運輸時的外包裝常用木箱、保溫瓶、保溫箱。 n所有容器必須完整無損，

42、密封性能良好，清所有容器必須完整無損，密封性能良好，清 潔無污染。潔無污染。 n供病原學檢查的容器，清洗后經(jīng)干熱滅菌或供病原學檢查的容器，清洗后經(jīng)干熱滅菌或 高壓滅菌并烘干。高壓滅菌并烘干。 n塑料制品耐高壓的高壓滅菌，不耐高壓的紫塑料制品耐高壓的高壓滅菌，不耐高壓的紫 外線消毒或熏蒸消毒。外線消毒或熏蒸消毒。 包裝包裝 n一種材料一個容器。不可將多種病料或多頭一種材料一個容器。不可將多種病料或多頭 家畜的病料混裝在一起家畜的病料混裝在一起。 n一個容器裝量不能過滿。一個容器裝量不能過滿。液體樣品不能超過液體樣品不能超過 總?cè)萘康目側(cè)萘康?070。 n裝入樣品的容器必須加塞、加蓋裝入樣品的容器

43、必須加塞、加蓋。塞子和蓋。塞子和蓋 子用膠布封固。液體病料在膠布外還需用溶子用膠布封固。液體病料在膠布外還需用溶 化石蠟加封。選用塑料袋作容器，需用兩層化石蠟加封。選用塑料袋作容器，需用兩層 包裝，分別用線結(jié)扎袋口，防止液體露出或包裝，分別用線結(jié)扎袋口，防止液體露出或 水進入袋中。水進入袋中。 貼標簽貼標簽 n標簽：樣品名稱、動物種類、采集時間、采標簽：樣品名稱、動物種類、采集時間、采 集地點、樣品編號等內(nèi)容。集地點、樣品編號等內(nèi)容。 2 2、運送、運送 供病毒學檢查的樣品供病毒學檢查的樣品 n病毒學檢材要置于保溫容器（保溫瓶或保溫箱）病毒學檢材要置于保溫容器（保溫瓶或保溫箱） 中運輸。血液樣

44、品要單獨存放在保溫瓶中，不能中運輸。血液樣品要單獨存放在保溫瓶中，不能 和其它樣品混合。和其它樣品混合。 n對冷藏樣品，若能在對冷藏樣品，若能在4h4h內(nèi)送到實驗室，在保溫瓶內(nèi)送到實驗室，在保溫瓶 中加入冰塊或冰袋，冷藏運輸；否則，先將樣品中加入冰塊或冰袋，冷藏運輸；否則，先將樣品 進行冷凍處理。進行冷凍處理。 n對凍結(jié)的樣品，必須在對凍結(jié)的樣品，必須在24h24h內(nèi)冷藏送到實驗室。內(nèi)冷藏送到實驗室。 若在若在24h24h內(nèi)不能送到實驗室，要冷凍運輸，即在內(nèi)不能送到實驗室，要冷凍運輸，即在 運輸過程中樣品的環(huán)境溫度應保持在運輸過程中樣品的環(huán)境溫度應保持在-20-20以下。以下。 n各種樣品到達

45、實驗室后，若暫時不進行實驗，則各種樣品到達實驗室后，若暫時不進行實驗，則 應在應在-70-70或或-70 -70 以下保存。不要反復凍融。以下保存。不要反復凍融。 供細菌學和寄生蟲學檢查的樣品供細菌學和寄生蟲學檢查的樣品 n經(jīng)冷藏的材料并在經(jīng)冷藏的材料并在24h24h內(nèi)能送到，以冷藏運輸內(nèi)能送到，以冷藏運輸 或常溫運輸，否則必須冷藏運輸?；虺剡\輸，否則必須冷藏運輸。 血清樣品血清樣品 n經(jīng)冷藏處理的血清，在經(jīng)冷藏處理的血清，在24h24h內(nèi)能送到實驗室，內(nèi)能送到實驗室， 冷藏運送；否則，先將血清冷凍。冷藏運送；否則，先將血清冷凍。 n經(jīng)冷凍處理的血清，在保溫箱內(nèi)加大量冰袋經(jīng)冷凍處理的血清，在

46、保溫箱內(nèi)加大量冰袋 運送，在運送，在48h48h內(nèi)到達實驗室。內(nèi)到達實驗室。 玻片標本和病理組織學樣品玻片標本和病理組織學樣品 常溫運送。常溫運送。 3 3、采樣單、采樣單 n每一份樣品或每一批樣品均要有采樣單每一份樣品或每一批樣品均要有采樣單。采。采 樣單一式三份，第一聯(lián)，采樣單位保存；第樣單一式三份，第一聯(lián)，采樣單位保存；第 二聯(lián)跟隨樣品；第三聯(lián)，由被采樣單位保存。二聯(lián)跟隨樣品；第三聯(lián)，由被采樣單位保存。 采樣單采樣單 畜畜 種種: : 年年 齡：齡： 性性 別別: : 樣品名稱：樣品名稱： 采自（活體或尸體）：采自（活體或尸體）： 樣品數(shù)量：樣品數(shù)量： 樣品編號樣品編號: : 采樣日期采

47、樣日期: : 樣品保存條件：樣品保存條件： 被采樣單位：被采樣單位： 聯(lián)系電話：聯(lián)系電話： 采樣單位：采樣單位： 聯(lián)系電話：聯(lián)系電話： 檢測目的：檢測目的： 備注：備注： 第五節(jié)病原學檢查技術(shù)第五節(jié)病原學檢查技術(shù) 一、細菌性傳染病病原檢查一、細菌性傳染病病原檢查 （一）顯微鏡檢查法（一）顯微鏡檢查法 1.1.病料處理病料處理 將病料涂成薄而均勻的涂片將病料涂成薄而均勻的涂片室溫下自然室溫下自然 干燥干燥若為細菌培養(yǎng)物涂片火焰固定若為細菌培養(yǎng)物涂片火焰固定 常用的染色方法有：常用的染色方法有：革蘭氏染色法、美藍革蘭氏染色法、美藍 染色法、瑞氏染色法和姬姆薩染色法染色法、瑞氏染色法和姬姆薩染色法

48、2.2.顯微鏡檢查顯微鏡檢查 染色水洗后的涂片標本染色水洗后的涂片標本吸水紙吸干吸水紙吸干 （切勿磨擦）或在酒精燈火焰的遠（切勿磨擦）或在酒精燈火焰的遠 端烘干端烘干滴加香柏油滴加香柏油用油浸鏡觀用油浸鏡觀 察細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)和染色特性。察細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)和染色特性。 （二）培養(yǎng)檢查法（二）培養(yǎng)檢查法 1 1固體培養(yǎng)基上菌落性狀的檢查固體培養(yǎng)基上菌落性狀的檢查 n其菌落的大小、形狀、色澤、表面性狀、其菌落的大小、形狀、色澤、表面性狀、 透明度、邊緣性狀等因菌種而異。因此，透明度、邊緣性狀等因菌種而異。因此， 菌落特征是鑒別細菌的重要依據(jù)。菌落特征是鑒別細菌的重要依據(jù)。 2.2.液體培養(yǎng)基上液體性狀

49、的觀察液體培養(yǎng)基上液體性狀的觀察 n細菌在液體培養(yǎng)基中生長可使液體出現(xiàn)混細菌在液體培養(yǎng)基中生長可使液體出現(xiàn)混 濁、沉淀、液面形成菌膜以及液體變色、濁、沉淀、液面形成菌膜以及液體變色、 產(chǎn)氣等現(xiàn)象。產(chǎn)氣等現(xiàn)象。 （三）生化試驗（三）生化試驗 n生化實驗是利用生物化學的方法，檢測細生化實驗是利用生物化學的方法，檢測細 菌在人工培養(yǎng)繁殖過程中所產(chǎn)生的某種新菌在人工培養(yǎng)繁殖過程中所產(chǎn)生的某種新 陳代謝產(chǎn)物是否存在，是一種定性檢測。陳代謝產(chǎn)物是否存在，是一種定性檢測。 n常用的生化反應有常用的生化反應有糖發(fā)酵試驗、靛基質(zhì)試糖發(fā)酵試驗、靛基質(zhì)試 驗、驗、v-pv-p試驗、甲基紅試驗、硫化氫試驗試驗、甲基紅

50、試驗、硫化氫試驗 （四）動物試驗（四）動物試驗 n最常用的實驗動物有：小鼠、大鼠、豚鼠最常用的實驗動物有：小鼠、大鼠、豚鼠 和家兔。和家兔。 二病毒性傳染病病原檢查二病毒性傳染病病原檢查 （一）病毒分離培養(yǎng)（一）病毒分離培養(yǎng) 1.1.樣品處理樣品處理 2.2.病毒分離培養(yǎng)病毒分離培養(yǎng) （1 1）雞胚接種）雞胚接種 n痘病毒：絨毛尿囊膜接種，用痘病毒：絨毛尿囊膜接種，用9 91212日齡雞胚；日齡雞胚； n雞新城疫病毒：絨毛尿囊腔接種，用雞新城疫病毒：絨毛尿囊腔接種，用9 91010日日 齡雞胚；齡雞胚； n流行性乙型腦炎病毒：卵黃囊內(nèi)接種，用流行性乙型腦炎病毒：卵黃囊內(nèi)接種，用6 6 8 8日

51、齡雞胚。日齡雞胚。 （2 2）動物組織培養(yǎng)）動物組織培養(yǎng) n在病毒分離培養(yǎng)中廣泛采用的是細胞培在病毒分離培養(yǎng)中廣泛采用的是細胞培 養(yǎng)技術(shù)。養(yǎng)技術(shù)。 n單層細胞培養(yǎng)使細胞在器皿的表面生長單層細胞培養(yǎng)使細胞在器皿的表面生長 出一層或數(shù)層細胞，常用于病毒的分離出一層或數(shù)層細胞，常用于病毒的分離 繁殖。繁殖。 n懸浮細胞培養(yǎng)是把細胞懸浮在營養(yǎng)液中懸浮細胞培養(yǎng)是把細胞懸浮在營養(yǎng)液中 進行培養(yǎng)，這中方法可連續(xù)進行，因而進行培養(yǎng)，這中方法可連續(xù)進行，因而 用于疫苗生產(chǎn)。用于疫苗生產(chǎn)。 （3 3）動物接種）動物接種 同細菌學檢查同細菌學檢查 （二）病毒檢查方法（二）病毒檢查方法 1.1.包涵體檢查包涵體檢查

52、n狂犬病、偽狂犬病、犬瘟熱病毒病毒的包涵體狂犬病、偽狂犬病、犬瘟熱病毒病毒的包涵體 2.2.病毒培養(yǎng)性狀觀察病毒培養(yǎng)性狀觀察 n雞新城疫病毒：雞胚全身皮膚有出血點雞新城疫病毒：雞胚全身皮膚有出血點 n雞痘病毒：產(chǎn)生痘斑病變。雞痘病毒：產(chǎn)生痘斑病變。 n細胞病變有：細胞變形皺縮，胞漿內(nèi)出現(xiàn)顆粒，細胞病變有：細胞變形皺縮，胞漿內(nèi)出現(xiàn)顆粒， 核濃縮，核裂解或細胞裂解，出現(xiàn)空泡。核濃縮，核裂解或細胞裂解，出現(xiàn)空泡。 3.3.病毒形態(tài)學觀察病毒形態(tài)學觀察 n有直接電鏡觀察和免疫電鏡技術(shù)。有直接電鏡觀察和免疫電鏡技術(shù)。 4.4.病毒核酸檢測病毒核酸檢測 n最常用的檢測方法是聚合酶鏈式反應。最常用的檢測方法

53、是聚合酶鏈式反應。 三寄生蟲病病原檢查三寄生蟲病病原檢查 （一）蟲卵檢查法（一）蟲卵檢查法 1 1直接涂片鏡檢直接涂片鏡檢 2 2集卵法檢查集卵法檢查 ：水洗沉淀、飽和鹽水漂?。核闯恋?、飽和鹽水漂浮 （二）蟲體檢查法（二）蟲體檢查法 1.1.蠕蟲蟲體檢查法蠕蟲蟲體檢查法 （1 1）成蟲檢查法：肉眼觀察其形態(tài)特征。）成蟲檢查法：肉眼觀察其形態(tài)特征。 （2 2）幼蟲檢查法：低倍鏡下觀察液體中活）幼蟲檢查法：低倍鏡下觀察液體中活 動的幼蟲。動的幼蟲。 2.2.蜘蛛昆蟲蟲體檢查法蜘蛛昆蟲蟲體檢查法 （1 1）螨蟲的檢查）螨蟲的檢查 n病料置于載玻片上病料置于載玻片上, ,滴加數(shù)滴煤油滴加數(shù)滴煤油,

54、,上覆另上覆另 一載玻片，用手搓動兩玻片使皮屑粉碎，一載玻片，用手搓動兩玻片使皮屑粉碎， 鏡檢。鏡檢。 （2 2）蜱等其它蜘蛛昆蟲的檢查）蜱等其它蜘蛛昆蟲的檢查 采用肉眼檢查法。采用肉眼檢查法。 3.3.原蟲蟲體檢查法原蟲蟲體檢查法 n原蟲大多為單細胞寄生蟲，肉眼不可見，原蟲大多為單細胞寄生蟲，肉眼不可見， 須借助于顯微鏡檢查。須借助于顯微鏡檢查。 四四pcrpcr技術(shù)簡介技術(shù)簡介 （一）（一）pcrpcr技術(shù)的主要用途技術(shù)的主要用途 n聚合酶鏈式反應（聚合酶鏈式反應（pcrpcr）：將生物材料中微量）：將生物材料中微量 的目的的目的dnadna片段在體外擴增上百萬倍，從而獲片段在體外擴增上百

55、萬倍，從而獲 得大量特異性核酸。得大量特異性核酸。 n目前，目前，pcrpcr技術(shù)已技術(shù)已廣泛應用于病原微生物的微廣泛應用于病原微生物的微 量檢測、突變基因篩選、法醫(yī)學鑒定等與生量檢測、突變基因篩選、法醫(yī)學鑒定等與生 命有關(guān)的各個領域命有關(guān)的各個領域。 n在動物檢疫中，它主要用于微量樣品和不完在動物檢疫中，它主要用于微量樣品和不完 整病原的檢測，尤其適用于個體極小、難于整病原的檢測，尤其適用于個體極小、難于 觀察且難于人工培養(yǎng)的病毒的檢測觀察且難于人工培養(yǎng)的病毒的檢測。 n過去用常規(guī)檢測技術(shù)幾天甚至幾周才能完過去用常規(guī)檢測技術(shù)幾天甚至幾周才能完 成的試驗，用該技術(shù)成的試驗，用該技術(shù)幾個小時便可

56、完成幾個小時便可完成， 這使禽流感等疫病的病原檢測技術(shù)獲得突這使禽流感等疫病的病原檢測技術(shù)獲得突 破。并且該技術(shù)操作的每一步都不需要活破。并且該技術(shù)操作的每一步都不需要活 的病毒，不會造成病原對環(huán)境的污染，對的病毒，不會造成病原對環(huán)境的污染，對 防疫有重大意義。防疫有重大意義。 （二）（二）pcrpcr技術(shù)的原理技術(shù)的原理 1 1pcrpcr反應基本成分反應基本成分 2 2反應原理反應原理 （三）（三）pcrpcr技術(shù)的基本步驟技術(shù)的基本步驟 （四）特異性核酸的檢出（四）特異性核酸的檢出 第六節(jié)第六節(jié) 免疫學檢查技術(shù)免疫學檢查技術(shù) 一、血清學檢測技術(shù)一、血清學檢測技術(shù) 血清學檢測技術(shù)種類繁多，可血清學檢測技術(shù)種類繁多，可利用抗原抗體中利用抗原抗體中 已知的任何一方去檢測未知的另一方，以達到已知的任何一方去檢測未知的另一方，以達到 檢疫目的。檢疫目的。 （一）凝集反應（一）凝集反應 1 1直接凝集反應直接凝集反應 布氏桿菌病和豬傳染性萎縮性鼻炎：布氏