醫(yī)院檢驗(yàn)科檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程

1、檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程目 錄第一節(jié) 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié) 自動(dòng)凝血儀操作規(guī)程第四節(jié) 半自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié) 血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第七節(jié) 肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程 第八節(jié) 腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程 第九節(jié) 血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程第十節(jié) 血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程 第十一節(jié) 凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程第十二節(jié)ab0血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程 第一節(jié) 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準(zhǔn)備1.1開機(jī)前的檢查、準(zhǔn)備在開啟分析儀電源之前，操作者須按以下要求進(jìn)行檢查:1.1.1檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足，有無過期; 試劑管路是否彎折，連接是否可

2、靠。1.1.2 電源線是否正確連接。1.1.3 廢液桶是否清空。1.1.4 ups電是否足夠，打印紙安裝是否正確，是否足夠。1.1.5 確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。1.2.開機(jī)1.2.1 打開分析儀后面的電源開關(guān),電源指示燈亮，屏幕上顯示“initializing”.1.2.2 分析儀進(jìn)行初始化，整個(gè)初始化過程持續(xù)約47分鐘。1.2.3 初始化過程結(jié)束后，系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。1.3 動(dòng)物類型選擇1.3.1 按菜單鍵，移動(dòng)光標(biāo)，選擇“動(dòng)物”，按確認(rèn)進(jìn)入“動(dòng)物”界面。1.3.2 操作者根據(jù)測量的動(dòng)物類型，選擇需要分析的動(dòng)物類型。2.1.1 按菜單鍵，選擇“計(jì)數(shù)”，進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按模式

3、鍵，將當(dāng)前模式設(shè)置為“全血”模式。2.1.2 確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“全血”。2.1.3 將準(zhǔn)備好的全血樣本放到采樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.1.4 按計(jì)數(shù)鍵，啟動(dòng)樣本分析過程。此時(shí)，狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行”。2.1.5 采樣針自動(dòng)吸取13ul的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。2.1.6 分析完成后，按f4鍵進(jìn)入“樣本信息編輯”界面。按f9鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按f8鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換，輸入樣本信息 ，輸入完成后，點(diǎn)擊“確認(rèn)”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。2.1.7 按打印鍵打印樣本分析報(bào)告。

4、2.1.8 按照此操作過程進(jìn)行其余樣本的分析。2.2 預(yù)稀釋樣本分析2.2.1 按菜單鍵，選擇“計(jì)數(shù)”，進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按模式鍵，將當(dāng)前模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”模式。按稀釋鍵，屏幕彈出“加稀釋液”對話框，取一個(gè)干凈的樣本杯放在采樣針下，按計(jì)數(shù)鍵，微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動(dòng)排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中，避免產(chǎn)生氣泡或?yàn)R出。2.2.2 加完稀釋液后，按確認(rèn)鍵，“加稀釋液”對話框關(guān)閉，分析儀自動(dòng)清洗采樣針。2.2.3 采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。2.2.4 確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“預(yù)稀釋”。2.2.5將準(zhǔn)備好的預(yù)稀釋樣本放到采樣針下，使

5、采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.2.6 按計(jì)數(shù)鍵，啟動(dòng)樣本分析過程。此時(shí)，狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行”。2.2.7 采樣針自動(dòng)吸取0.7ml的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。2.2.8分析完成后，按f4鍵進(jìn)入“樣本信息編輯”界面。按f9鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按f8鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換，輸入樣本信息 ，輸入完成后，點(diǎn)擊“確認(rèn)”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。2.2.9按打印鍵打印樣本分析報(bào)告。2.2.10按照此操作過程進(jìn)行其余樣本的分析。3、樣品分析結(jié)束后3.1 按菜單鍵，彈出系統(tǒng)菜單，選擇“關(guān)機(jī)”。3.2界面彈出“關(guān)機(jī)”對話框，點(diǎn)擊“確認(rèn)

6、”進(jìn)入關(guān)機(jī)界面。3.3 將e-z清洗液放到采樣針下，按計(jì)數(shù)鍵，采樣針將自動(dòng)吸取e-z清洗液，執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。3.4 按照界面提示信息，將e-z清洗液放到采樣針下，按計(jì)數(shù)鍵，采樣針將再次自動(dòng)吸取e-z清洗液，執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。3.5 執(zhí)行完成后，界面提示“請關(guān)閉電源”是，關(guān)閉分析儀的電源開關(guān)。3.6 關(guān)閉電源后檢查分析儀是否有滲漏，并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程本測試儀是一項(xiàng)精密儀器，為了更好的維護(hù)和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟1. 尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連，接通電源，先打開電腦，再打開分析儀；儀器啟動(dòng)，風(fēng)扇轉(zhuǎn)動(dòng)，推

7、進(jìn)器移動(dòng)，屏幕顯示 “系統(tǒng)正在測試”，此時(shí)系統(tǒng)正在自檢，顯示屏顯示主菜單，工作臺檢條區(qū)有紅色光交替閃爍，用戶可以開始測試2. 點(diǎn)擊電腦桌面尿液分析軟件；3. 將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出，將試紙條的側(cè)邊沿尿樣容器的管壁刮去多余尿液；4. 將蘸有尿液的試紙平放在工作臺的檢條區(qū)，確保試紙同工作臺前壁接觸；5. 儀器檢測到試紙存在后，推進(jìn)器將試紙推到測試區(qū)進(jìn)行測試；6. 當(dāng)推進(jìn)器退回原位，放下一條試紙，這樣實(shí)現(xiàn)連續(xù)測試；7. 當(dāng)工作臺上所有的試紙條測試完畢，打印結(jié)果輸出結(jié)束后，按菜單鍵進(jìn)入儀器設(shè)置，將電源開關(guān)撥到 “ 斷（）”位置，關(guān)閉儀器電源。二、儀器維護(hù)1.

8、 不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器；2. 不要用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機(jī)溶劑擦拭儀器；3. 不要用水清洗液晶屏，不要用任何會擦傷工作臺和白基準(zhǔn)的物質(zhì)擦拭工作臺；4. 不要用任何溶劑清潔白基準(zhǔn)，如果白基準(zhǔn)有明顯劃痕或損壞，請與供應(yīng)商聯(lián)系；5. 用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器，保持儀器清潔；6. 用柔軟、無磨損的布擦拭液晶屏；7. 為使儀器正常運(yùn)行并提供準(zhǔn)確的測試結(jié)果，必須定期從儀器中取下推進(jìn)器、工作臺、步進(jìn)板、用清水沖洗，用軟布依次擦干保持工作臺的清潔。三、注意事項(xiàng)1. 測試時(shí)不要將儀器放置在陽光直射的地方,以免影響測試精度；2. 請?jiān)跍y試前核對尿液分析試紙型號，避免

9、因使用的尿液分析試紙型號不正確而導(dǎo)致測試結(jié)果錯(cuò)誤；3. 請勿使用過有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙；4. 尿樣本中血的濃度高時(shí)，可影響測試的準(zhǔn)確性，儀器能夠識別出高濃度血尿并打印出 “結(jié)果無效”的提示；5. 必須在推進(jìn)器動(dòng)作前，將待測試紙條放好；6. 在放置試紙條時(shí)應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺前壁；7. 如果儀器測試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運(yùn)行受阻。關(guān)掉儀器，拉出工作臺，取出受阻試紙條后，重新安裝工作臺。開機(jī)自檢后，對未得出結(jié)果的樣本重測。第三節(jié) 自動(dòng)凝血儀操作規(guī)程1、儀器的常規(guī)操作1.1打開電源開關(guān)前的檢查。 檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過低，請用蒸餾水或去離子水將罐充滿。清空廢液瓶。 管

10、道連接 檢查各種管線的連接。確保沒有管子脫落或扭結(jié)，電源線被安全的插入交流插座。確保打印機(jī)中有足夠的紙張以供打印當(dāng)天所需處理的所有樣本結(jié)果。 補(bǔ)充反應(yīng)杯 丟棄用過的反應(yīng)杯，加入適量的干凈的反應(yīng)杯。 1.2打開電源 開機(jī)順序：打印機(jī) 壓力單元電源單元和主單元（右側(cè)）。 打開電源后，儀器自動(dòng)進(jìn)入自檢。 將病人樣本，質(zhì)控與試劑分別按要求準(zhǔn)備就緒，進(jìn)入分析過程： 試劑準(zhǔn)備 set reagent 輸入確認(rèn)試劑體積 補(bǔ)充反應(yīng)杯 安放樣本架 1.3樣本分析: work list id no.entry 輸入樣本號 enter 選擇所需檢測的項(xiàng)目(變?yōu)?,確認(rèn)所有的設(shè)置結(jié)束后 enter 按屏幕右上方“st

11、art”鍵,執(zhí)行分析。 分析完畢,儀器進(jìn)入準(zhǔn)備狀態(tài)。 1.4關(guān)機(jī)前的工作 每日清潔所有樣本針和試劑針： 在主菜單屏上按下【rinse probe】鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【excute】鍵。 1.5關(guān)機(jī) 關(guān)閉電源。 2. 儀器保養(yǎng)2.1每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做完試驗(yàn)都必須清洗樣品針，主要是預(yù)防堵針，執(zhí)行rinse probeexcute清空垃圾箱2.2清空廢液查看儀器后面防逆流瓶trap chamber有無水，防止因?yàn)橛兴鴮?dǎo)致真空泵不能抽真空在洗液瓶中注蒸餾水，最高不要超過上面的凹槽，防止因水過滿，工作時(shí)水回流到壓力泵和壓力傳感器上導(dǎo)致人為破壞。2.3每周保養(yǎng)做一次管路清潔，執(zhí)行specia

12、l operate rinse&prepare清潔儀器2.4每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶內(nèi)部，清洗洗液瓶出水管上的過濾網(wǎng)一次。2.5每三或六個(gè)月保養(yǎng)清潔傳動(dòng)滑軌(x軸、y軸)并上潤滑油。防止因積塵而使樣品針運(yùn)行不到位，向下扎錯(cuò)位置造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié) 半自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】1.開機(jī)之前檢查電源線是否連接無誤，電源要求接地良好;連接打印機(jī)電源線，接通打印機(jī)電源開關(guān);將廢液管插入廢液容器內(nèi);接通顯示器開關(guān)及主機(jī)背部電源開關(guān)。2.開機(jī)自檢后鍵入enter，確定已設(shè)定測試參數(shù)鍵入enter，進(jìn)入編制工作表在設(shè)置欄，開啟聯(lián)機(jī)打印儀器預(yù)熱20分鐘后，調(diào)用已設(shè)定測試項(xiàng)目進(jìn)行樣品測定打印結(jié)果清洗儀

13、器關(guān)機(jī)。3.吸液口由不銹鋼保護(hù)管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成，應(yīng)注意保護(hù)，不要碰彎。4.切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口?！緝x器的保養(yǎng)與維護(hù)】1.日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動(dòng)比色皿，每天工作結(jié)束后，要用蒸餾水清洗。具體方法如下：將吸液管插入蒸餾水中，向上扳動(dòng)吸液開關(guān)，反復(fù)沖洗流動(dòng)比色皿，直到蒸餾水的吸光度值正常為止。2.每周要用專門的清洗劑清洗一次流動(dòng)比色皿，清洗時(shí)，讓清洗劑停留在比色皿中約半小時(shí)，然后排掉，再用蒸餾水沖洗干凈，最后注入蒸餾水。3.不使用儀器時(shí)，流動(dòng)比色皿內(nèi)一定要保證充滿蒸餾水。4.更換打印機(jī)色帶時(shí)，嚴(yán)格遵照打印機(jī)操作手冊，避免不規(guī)范操作。5.光源燈更換時(shí)一定要先切斷儀器的電源，手

14、不可觸摸光源燈的玻璃部分，萬一光源燈的玻璃部分弄臟了，可用無水乙醇將污物除去。6.更換的蠕動(dòng)泵管尺寸材料應(yīng)與原泵管一致，如不一致則要重新調(diào)整吸液量。第五節(jié) 血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程 【 標(biāo) 本 】 抗凝靜脈血（有些儀器也可用末梢血）。 【 方 法 】 血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀測定法。 【 試 劑 】 血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀配套試劑。 【 操 作 】 詳見血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀使用手冊。 【 附 注 】 1. 血常規(guī)包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞比積、血小板計(jì)數(shù)等項(xiàng)目。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見有關(guān)資料。 2. 半自動(dòng)及全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀從設(shè)計(jì)上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點(diǎn)為： （1）

15、靜脈血能正確地反映病人實(shí)際情況，重復(fù)性好； （2）利于延長儀器的使用壽命； （3）解決了采血盤的交叉感染問題等。 3. 血細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)用edtak2：為抗凝劑（edtak22 h2o 1.52.2mg可抗凝1ml血）。 4. 貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管。抗凝血采集后在室溫中貯存應(yīng)不超過6h；如需制作血涂片應(yīng)在2h內(nèi)完成。 5. 測定前必須將edtak2抗凝血充分混勻。 6. 血細(xì)胞分析儀測定最適溫度為1822，低于15或高于30，均可使細(xì)胞體積發(fā)生改變，影響各參數(shù)的結(jié)果。7. 血細(xì)胞分析儀用于白細(xì)胞分類只能當(dāng)作一種過篩手段，當(dāng)白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白和血小板的任何一項(xiàng)有明顯升高或降低；白細(xì)胞分類出

16、現(xiàn)異常結(jié)果（中間細(xì)胞群百分率8.0%）；紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的任何一個(gè)直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況，須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程 【 標(biāo) 本 】 新鮮尿液。 【 方 法 】 化學(xué)試帶法。 【 試 劑 】 各型號尿液化學(xué)分析儀配套試帶。 【 操 作 】 詳見尿液化學(xué)分析儀使用手冊。 【 附 注 】 1. 尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀，目前能進(jìn)行810項(xiàng)檢測（ph、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細(xì)胞）。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見有關(guān)資料。 2. 必須了解所用試帶各膜塊注意事項(xiàng)、藥物干擾。 3. 要注意尿液化學(xué)分析儀測定結(jié)果與手工法的差異，必

17、要時(shí)用手工法復(fù)查。 4. 尿液化學(xué)分析儀檢測僅是一個(gè)過篩手段，當(dāng)?shù)鞍?、隱血、白細(xì)胞等出現(xiàn)異常結(jié)果（如尿蛋白“”或以上）時(shí)，應(yīng)進(jìn)行鏡檢。5. 尿液顏色、透明度等一般性狀異常時(shí)也應(yīng)報(bào)告。第七節(jié) 肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程血清總膽紅素（tbil）和結(jié)合膽紅素（dbil）測定 改良jg法 【 試 劑 】 參照書刊文獻(xiàn)（如全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第二版）自配，配制標(biāo)準(zhǔn)液的膽紅素應(yīng)符合如下標(biāo)準(zhǔn)，純膽紅素的氯仿溶液在25當(dāng)光徑1.0000.001cm,波長453nm條件下其摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在607001600范圍內(nèi)，偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380866范圍內(nèi)，配制標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋劑須含白蛋白，可用牛血清白蛋白或人血清

18、代替人血清白蛋白。標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)貯於棕色瓶中避光保存，在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高。 【 操 作 】 按試劑盒說明書或相應(yīng)書刊文獻(xiàn)規(guī)程手工操作，比色測定，波長600nm.制作準(zhǔn)曲線。血樣測定，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求tbil及dbil的含量以umo1/l報(bào)告。 也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說明書的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入，用自動(dòng)生化分析儀測定。 【 標(biāo) 本 】 血清，空腹血為宜，脂血、脂溶性色素及嚴(yán)重溶血干擾此測定，暫不能測定的標(biāo)本應(yīng)避光保存，室溫可穩(wěn)定8h，28可保存48h。 含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測定膽紅素。 膽紅素氧化酶（bod）法 【 試 劑 】 市售成套試劑。bod

19、試劑復(fù)溶后28可保存一周。 【 操 作 】 按廠家提供的試劑及儀器說明書要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動(dòng)生化分析儀測定。波長450或460nm。 【 標(biāo) 本 】 血清要求與改良j一g法相似。 二甲亞楓（dmso）法 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。 【 操 作 】 按試劑盒說明書手工操作比色測定或用自動(dòng)生化儀測定。波長560nm。 【 標(biāo) 本 】 血清、輕度脂血，溶血標(biāo)本對結(jié)果無明顯影響、重度脂血、溶血標(biāo)本須作標(biāo)本空白進(jìn)行較正。血氨測定 【 方 法 】 酶兩點(diǎn)法。 【 試 劑 】 市售成套試劑。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求，設(shè)入相應(yīng)的程序及各項(xiàng)參數(shù)、用自動(dòng)生化分析儀測定。波長340nm

20、。 【 標(biāo) 本 】 edta.na2抗凝血漿。靜脈采血后與edta.na2混勻，立即置冰水中盡快分離出血漿，加塞置24保存，在23h內(nèi)分析，-20可穩(wěn)定24h。溶血標(biāo)本忌用。第八節(jié) 腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程尿素氮1.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中尿素的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測提供重要的參考價(jià)值。2.標(biāo)本要求：2.1病人準(zhǔn)備：空腹12小時(shí)。2.2標(biāo)本類型：血清、肝素化的血漿或24小時(shí)尿。3.設(shè)備和試劑：3.1儀器設(shè)備：邁瑞半自動(dòng)生化分析儀3.2試劑材料：試劑3.3試劑的貯存：3.3.1 28密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。3.3.2開蓋上

21、機(jī)28避光穩(wěn)定30天。3.3.3變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值0.050時(shí)，不能繼續(xù)使用。4.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時(shí)請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準(zhǔn)備：即開即用的，無需特殊準(zhǔn)備。5.操作步驟：見半自動(dòng)生化分析儀操作流程。6.質(zhì)量控制：6.1質(zhì)控物：randox多項(xiàng)人基質(zhì)血清6.2質(zhì)控措施：6.2.1室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進(jìn)行。6.2.2室間質(zhì)控：參加臨床化學(xué)室間質(zhì)評。7.干擾因素：直接膽紅素257mol/l，血紅蛋

22、白0.5g/l，抗壞血酸3mmol/l,甘油三酯15.0mmol/l,肝素50ku/l，枸櫞酸鈉10g/l對本法無干擾。8.參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間：8.1參考范圍：血清/血漿53.0123.0mol/l (男性)44.0106.0mol/l (女性)首次晨尿 153015320mol/l24小時(shí)尿 6.615.0mmol/24h8.2可報(bào)范圍：0.08840.0mol/l。樣品crea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。9.異常結(jié)果處理：結(jié)果異常、與臨床診斷不符，應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。9.危急值及處理方法：177mol/l。及時(shí)與臨床聯(lián)絡(luò)。10.實(shí)驗(yàn)室解釋：增高：嚴(yán)重腎功能不全、

23、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降低：營養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié) 血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程標(biāo)本采集與處理 1受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習(xí)慣，近期體重穩(wěn)定無外傷，手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥，-受體阻滯劑，免疫抑制劑，激素藥物等，則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測。 2空腹抽血，tg，脂蛋白，載脂蛋白測定應(yīng)至少禁食12小時(shí)（僅作膽固醇測定不必強(qiáng)求空腹）24小時(shí)內(nèi)不作劇烈運(yùn)動(dòng)。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5分鐘。抽血時(shí)止血帶使用不可超過1分鐘。 3標(biāo)本用血清，也可用肝素或edta.na2抗凝之血漿。edta.na2濃度不宜太高。 4血標(biāo)本室溫放置不得超過3h，放置

24、3045分鐘后應(yīng)即時(shí)分離出血清（漿）蓋封於4冰箱中可穩(wěn)定至少4天，如需長期保存，應(yīng)於-70中冰凍存放，不可反復(fù)凍融。血清總膽固醇（tc）測定 酶法（chodpap法） 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序，輸入?yún)?shù)用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測定（速率法）終點(diǎn)法可手工操作，用普通分光光度計(jì)比色測定。波長500nm或520nm。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）參看本節(jié)的標(biāo)本采集與處理。 【 附 注 】 本法為中華醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)學(xué)會推薦的tc測定常規(guī)方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1995、18：185）。 膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液以定值參考血清為宜，而不宜用chol的水溶液作標(biāo)準(zhǔn)。

25、chol定值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標(biāo)準(zhǔn)液。 主要技術(shù)指標(biāo)：終點(diǎn)法批內(nèi)cv1.5%、批間cv2.5%。靈敏度：顯色劑用酚時(shí)，tc5.2mmo1/l(200mg/dl)時(shí)的吸光度（a 500nm）約0.300.35，故a 500nm=0.005時(shí)tc濃度約為0.08mmo1/l(3mg/dl)。測定范圍：當(dāng)血清與試劑用量之比為1:100時(shí)其測定的上界為13mmo1/l(500ng/dl)。血清甘油三酯（tg）測定 酶法（gpopap法） 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。有兩種。 一步酶法單一試劑，二步酶法雙試劑。 標(biāo)準(zhǔn)液（參考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不適用於二步酶法。 【

26、操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序和參數(shù)，用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測定，終點(diǎn)法可用普通分光光度計(jì)手工操作，比色測定。波長500nm。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）參看本節(jié)標(biāo)本采集與處理。 【 附 注 】 本法在操作程序上分為一步酶法與二步酶法，二步酶法為中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會的推薦方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志1995、18：249）?，F(xiàn)階段允許二法并存，要求逐步過渡到統(tǒng)一采用二步酶法，在方法尚未統(tǒng)一前，實(shí)驗(yàn)室報(bào)告tg測定結(jié)果時(shí)應(yīng)注明“除fg值”或“未除fg值”。 主要枝術(shù)指標(biāo)：酶試劑用緩沖液配制后，2025應(yīng)穩(wěn)定1天，4可穩(wěn)定37天，試劑空白為a500nm0.05；顯色后穩(wěn)定30min：測定上界

27、11.3mmo1/l(100mg/dl)；精密度：批內(nèi)cv3%，批間cv5%：靈敏度：2mmo1/l tg a 500nm0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇(hdl-c)測定 磷鎢酸鎂沉淀法 【 試 劑 】 市售成套試劑，沉淀劑，酶試劑（同tg測定）。 【 操 作 】 按試劑盒說明書操作。 1沉淀含apob的脂蛋白。 2測定上清液（只含hdl）的膽固醇含量（方法同酶法tc測定）。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）。 硫酸葡聚糖一鎂沉淀法 【 試 劑 】 市售成套試劑：總hdl試劑，hdl3試劑，酶試劑（同tc試劑）。 【 操 作 】 按試劑說明書操作： 1沉淀含apob的脂蛋白，（總hdl試劑）； 2沉

28、淀含apob的脂蛋白及hdl2（hdl3試劑）； 3測定總hdlc及hdl3c（同酶法tc測定），并計(jì)算出hdl2c量。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）血樣在室溫中不宜久放，應(yīng)即時(shí)測定，原則應(yīng)低溫保存。 直接hdlc測定法 【 試 劑 】 市售專門的試劑，無沉淀劑。酶試劑同tc測定。（如日本第一化學(xué)藥品株式會社的產(chǎn)品）。 【 操 作 】 按試劑盒及儀器使用說明書要求設(shè)置程序，輸入?yún)?shù)直接用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測定，無須沉淀離心分離出hdl步驟。 【 標(biāo) 本 】 血清（漿）。血清低密度脂蛋白膽固醇（ldl-c）測定 1friedwald工式計(jì)算法： （1）ldl-c=tchdl-ctg/5（以mg

29、/dl為單位計(jì)）； （2）ldl-c=tchdl-ctg/2.2 (以mmo1/l為單位計(jì))； （3）只有當(dāng)血tg4.52mmo/l結(jié)果才較準(zhǔn)確； （4）只有tc、tg、hdl-c三項(xiàng)測定都準(zhǔn)確且符合標(biāo)準(zhǔn)化要求時(shí)，才可計(jì)算出ldl-c的近似值。 2聚乙烯硫酸沉淀法 【 試 劑 】 沉淀劑市售，酶試劑同tc測定。 【 操 作 】 1tc測定。 2選擇性沉淀血清中l(wèi)dl，測定上清液之hdlc與vldlc之和的量，（同tc測定）。 3計(jì)算出ldlc的含量。 【 標(biāo) 本 】血清。血清載脂蛋白a1（apoa1）測定 免疫透射比濁法。波長340nm，本法批間cv5%。 【 試 劑 】 市售試劑盒，試劑28

30、保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價(jià)不應(yīng)低於16。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求，設(shè)定程序和參數(shù)用自動(dòng)生化分析儀測定，也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測定，或用含340nm的分光光度計(jì)手工操作測定。 【 標(biāo) 本 】 血清。血清載脂蛋白b（apob）測定 免疫透射比濁法。波長340nm，本法批間cv5%。 【 試 劑 】 市售試劑，28保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價(jià)不應(yīng)低於1：128。 【 操 作 】 參看apoa1測定。 【 標(biāo) 本 】 血清。 第十節(jié) 血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程1.檢測目的：檢測血清或血漿中葡萄糖的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變

31、化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測提供重要的參考價(jià)值。3.標(biāo)本要求：3.1病人準(zhǔn)備：空腹12小時(shí)。3.2標(biāo)本類型：血清或naf抗凝的血漿。采血后及時(shí)分離，以避免血清或血漿中葡萄糖被細(xì)胞利用而降低。4.設(shè)備和試劑：4.1儀器設(shè)備：奧林巴斯au600生化分析儀4.2試劑材料：四川邁克公司試劑參與反應(yīng)成份：r1：酚（12.0mmol/l）r2：god（35ku/l）、pod（5ku/l）、4-aap（1.20mmol/l）4.3試劑的貯存：4.3.1 28密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。4.3.2開蓋上機(jī)28避光穩(wěn)定30天。4.3.3變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值0.150時(shí)，不能繼

32、續(xù)使用。4.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時(shí)請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準(zhǔn)備：即開即用的，無需特殊準(zhǔn)備。5 質(zhì)量控制：5.1質(zhì)控物：randox多項(xiàng)人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施：5.2.1室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進(jìn)行。5.2.2室間質(zhì)控：參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評。6.參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間：6.1參考范圍：空腹3.896.11mmol/l餐后1小時(shí)7.788.89mmol/l餐后2小時(shí)3.897.78mmol/l6.2可報(bào)范圍

33、：0.0022.30mmol/l。樣品glu含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。7.危急值及處理方法：10mmol/l。及時(shí)與臨床聯(lián)絡(luò)。第十一節(jié) 凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程全血凝固時(shí)間檢驗(yàn)（ct） 【 標(biāo) 本 】 靜脈取血3ml。 【 方法與操作 】 試管法、硅管法操作參見全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版）。 【 附 注 】 1. 靜脈取血要一針見血，盡量減少組織液和空氣混入。 2. 水浴箱溫度要恒定，過高或過低，可影響結(jié)果?；罨糠帜蠲笗r(shí)間測定（aptt） 【 標(biāo) 本 】 自靜脈取血，用109mmol/l枸椽酸鈉作1:9抗凝。 【 試 劑 】 市售成套試劑。 【 方法與操作】

34、按試劑及有關(guān)儀器說明書要求進(jìn)行。 【 附 注 】 1. 標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢測，最遲不超過2h。 2. 分離血漿應(yīng)在3000r/min，離心10min。 3. 本試驗(yàn)較試管法全血凝血時(shí)間敏感，能檢出因子：c25輕型血友病。血漿凝血酶原時(shí)間測定（pt，一期法） 【 標(biāo) 本 】 靜脈血1.8ml，用109mmol/l枸椽酸鈉0.2ml抗凝。 【 試 劑 】 1. 組織凝血活酶浸出液； 2. 0.025mol/l cacl2液； 【 方法與操作 】 見全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版）。 【 附 注 】 1. 采血后宜在1h內(nèi)完成，置冰箱4保存,不應(yīng)超過4h，-20下可放置2周，-70可放置6個(gè)月。 2. 水溫箱控制在371，過高過低均影響結(jié)果。簡易凝血活酶