課題3血紅蛋白的提取和分離(二)

1、血紅蛋白的提取與分離測試題第i卷選擇題一、單選題1. 凝膠色譜法是根據(jù)蛋白質(zhì)（ ）分離蛋白質(zhì)的有效方法。a 對其他分子的親和力 b 相對分子質(zhì)量的大小 c 帶電荷的多少d 溶解度的大小2. 緩沖液的作用是：在一定范圍內(nèi)，抵制外界的影響來維持（ ）基本不變。a 溫度 b ph c 滲透壓 d 氧氣濃度3. 電泳是指帶電粒子在電場的作用下向著與其所帶電荷（ ）的電極移動。a 相同 b 相反c 相對d 相向4. 血液由血漿和各種血細(xì)胞組成，其中（ ）的含量最多。a 白細(xì)胞 b 血小板 c 紅細(xì)胞d 淋巴細(xì)胞5. 血紅蛋白因含有（ ）而呈紅色a. o2 b. co c. co2d.血紅素.6. 血紅蛋

2、白的提取和分離中，將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為 4 層，其中第3 層是（ ）a 無色透明的甲苯層b 脂溶性物質(zhì)的沉淀層c 血紅蛋白的水溶液d 其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物第二卷非選擇題7. 紅細(xì)胞含有大量的血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶氧氣或二氧化碳，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白，請回答下列有關(guān)問題：8. 1）血紅蛋白提取和分離的程度可分為四步： 、 、 和。9. 2）實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的

3、目的是 。以上所述的過程即是樣品處理，它包括 、收集血紅蛋白溶液。10. 3）收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離。透析的目的是 。透析的原理是 。11. 然后通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是 。血紅蛋白有什么特點(diǎn)？ 。這一特點(diǎn)對進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離有什么意義？ 。8 .在蛋白質(zhì)的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，若用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液來分離血紅蛋白，需 對樣品如何處理？9 .你能描述血紅蛋白分離的完整過程嗎？10 .有4瓶失去標(biāo)簽的無色透明液體。已知各裝有：大腸桿菌超標(biāo)的自來水，丙種球蛋白溶液 (一種抗體)，溶解著

4、dna分子的2mol/l的nacl溶液，葡萄糖溶液。請根據(jù)提供的第一步鑒定方法，簡要寫出用相應(yīng)物質(zhì)進(jìn)行鑒定的其余步驟和結(jié)果。第一步：各取4種液體少許分別倒入 4個(gè)試管中，緩慢加入蒸儲水并用玻璃棒攪拌，則第二步：除上述鑒定 dna的方法外，還可以用哪些方法進(jìn)行鑒定？ 凝膠色譜法血紅蛋白的提基礎(chǔ)知識，緩沖溶液取和分離i電泳同品處理 實(shí)驗(yàn)操作y凝膠色譜操作、ds一聚丙烯酰凝膠電 紅細(xì)胞的洗滌實(shí)驗(yàn)操作，色譜主填料的處理凝膠色譜柱的裝填 蛋白質(zhì)的分離 結(jié)果分析與評價(jià)課題延伸專題5 dna和蛋白質(zhì)技術(shù)答案 1b 2b 3b 4c 5d 6c7. (1)樣品處理；粗分離；純化；純度鑒定(2)防止血液凝固紅細(xì)

5、胞的洗滌，血紅蛋白的釋放(3)去除分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)(4)通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去血紅蛋白呈現(xiàn)紅色， 在凝膠色譜分離時(shí)， 可以通過觀察顏色來判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液；這使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實(shí)驗(yàn)操作。8紅細(xì)胞的洗滌；血紅蛋白的釋放；分離血紅蛋白溶液；透析（注意每步的細(xì)節(jié)問題）9血紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步。包括：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。首 先通過洗滌紅細(xì)胞、 血紅蛋白的釋放、 離心等操作收集到血紅蛋白溶液， 即樣品的處理；在經(jīng) 過透析去除分子量較小的雜質(zhì)， 即樣品的粗分離； 然后通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化；最后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。10.第一步：出現(xiàn)絲狀物的溶液，為溶解著dna分子的2mol/l的nacl溶液。第二步：向其 余 3 支試管中加入伊紅美蘭試劑， 呈現(xiàn)深紫色的為大腸桿菌超標(biāo)的自來水。 第三步：將其 余 2 種溶液各取少許倒入 2 支試管中，加入雙縮脲試劑，呈現(xiàn)紫色反應(yīng)的為丙種球蛋白溶液。最后一瓶為葡萄糖溶液用二苯胺沸水浴變?yōu)樗{(lán)色；或加入冷卻的酒精，攪拌出現(xiàn)絲狀物12. 分離血紅蛋白溶液時(shí)，將混合液離心后可看到試管中的液體分為 4 層：