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1、酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)產(chǎn)品簡介:酸性磷酸酶(acid phosphatase , ACP)分布極廣泛,遍布各種組織,主要存在于細胞的 溶酶體內(nèi),所以常作為溶酶體標志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和胞質(zhì)內(nèi)。各種動物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶的適宜pH為4.55.5。MB酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)以萘酚AS-BI為底物,在酸性 pH下被酸性磷酸酶 水解釋放出磷酸和萘酚, 萘酚與重氮鹽偶聯(lián)生成有色產(chǎn)物, 定位于細胞質(zhì)中。對某些酸性磷 酸酶來講,Cu2+、酒石酸根離子和四氯化碳以及醛類也都是抑制劑,Mn2+為該酶的激活劑。多用于新鮮血涂片、細胞涂片、冰凍切片等,亦可用于石蠟切
2、片。產(chǎn)品組成:名稱編號DE00154 X2mlDE00154 X10mlDE00154 X20mlStorage試劑(A): ACP固定液10ml50ml100ml4 C避光試劑(B):B1: AS-BI Buffer0.2ml1ml2ml-20 C避光ACP孵育液B2: GBC染色液0.02ml0.1ml0.2ml4 C避光B3: ACP Buffer1.8ml9ml18mlRT避光臨用前,按B1:B2:B3=10:1:90 混合,即為ACP孵育液,即配即用。試劑(C): Lea蘇木素染色液2ml10ml20ml4 C避光試劑(D):甲基綠染色液2ml10ml20mlRT避光自備材料:1、蒸餾水、恒溫箱2、載玻片、推玻片3、光學顯微鏡染色結(jié)果:陽性顆粒紫紅色細胞核藍色(蘇木素)或綠色(甲基綠)注意事項:ACP孵育液易失效,本法宜用皮膚穿刺血涂片,晾干后應(yīng)及時染色對冰凍切片染色時,應(yīng)減少切片在室溫暴露的時間。樣本需新鮮,取材后應(yīng)立即處理,否則會影響酶的活性。組織固定需在4 C冰箱進行,時間不宜超過 24h,否則酶活性會減弱或消失。浸蠟時組織在石蠟包埋時, 溫度不宜高于56 C。應(yīng)使用熔點為5254 C的石蠟進行浸蠟,間要短,否則酶活性會減弱或消失。不純的二甲苯會分解黑色沉淀,宜選用A
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