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文檔簡介
1、突觸蛋白m(SYN3)ELISA試劑盒說明書木試劑僅供研究使用 標(biāo)木:體液突觸蛋白m(SYN3)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA) 己知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品 加入微孔酹標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人誠性成纖維細(xì)胞生長因子 ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和索標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的鹽結(jié)合物, 然后加入底物A、B.和爾結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān) 系。突觸蛋白m(SYN3)ELISA試劑盒門備材料1. 蒸懈水。2. 加樣器:5uk 10uk 50
2、uk 100uk 200、500ul、1000ul.3. 振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注總事項(xiàng)1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屈部分的加樣器。5. 使用干凈的塑料容器配呂洗滌液。使用前充分混
3、勻試劑盒里的各種成份及樣品。6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入畫標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露丁光避免用手接觸, 有離。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。&加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的雖及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血淸-一操作過程中避免任何細(xì)胞刺激使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000xg離 心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-一EDTA、檸椽酸鹽、肝素血漿可用丁檢測。1000xg離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上淸液-1000xg
4、離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存-一如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 C保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不耍使 用溶血或高血脂血。如果血淸中大雖顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37C或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫卜解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列桶釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品扳蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50x的稀釋:蒸詡水50倍稀釋。操作步驟1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大雖的泡沫,以免加樣時(shí)加入大雖的氣泡,產(chǎn)生 加樣上的誤差。2. 根據(jù)待測樣品數(shù)雖加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)雖決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè) 樣品
5、根據(jù)自己的數(shù)雖來定,能使用復(fù)孔的盡雖做復(fù)孔。3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul T反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul 丁反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物索 標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕撮蕩混勻,37C溫育1小時(shí)。4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。 如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5. 每孔加入80UI的親和鏈幽素-HRP,輕輕振蕩混勻,37C溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50UI,輕輕振蕩混勻,37C溫育10分鐘
6、。避免光照。&取出酚標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。試劑盒性能1. 靈敏度:最小的檢測濃度小丁T號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990c2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。突觸蛋白m(SYN3) ELISA試劑盒結(jié)果判斷,J分析1、儀器值:丁波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(丫),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF
7、含雖可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范I札0-800pg/ml4、敏感度:1.0 pg/mlSEPCR人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 規(guī)格: 48T/96TVEGFR-2/SFLK-1人町溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2規(guī)格: 48T/96TSAC人町溶性腺昔酸環(huán)化酶規(guī)格:48T/96TSCKR 人口 J溶性細(xì)胞因子受體規(guī)格:48T/96TSICAM-1人可溶性細(xì)胞間粘附分子1 規(guī)格:48T/96TSTREM-1人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1規(guī)格:48T/96TSLR人可溶性瘦素受體規(guī)格:48T/96TSPL-A2人可溶性磷脂酶A2規(guī)格:48T/96TSRANKL人可溶性核因子K
8、B受體活化因子配基規(guī)格:SFASL人可溶性凋亡相關(guān)因子配體規(guī)格:48T/96TsFAS/Apo-1人可溶性凋亡相關(guān)因子規(guī)格:48T/96Tsp185/HER-2人可溶性蛋白185規(guī)格:48T/96TB7-2/SCD86人可溶性白細(xì)胞分化抗原86規(guī)格:48T/96TSCD40L人可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體規(guī)格:48T/96TSCD30L人可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體規(guī)格:48T/96TSCD28人町溶性白細(xì)胞分化抗原28規(guī)格:48T/96TsP-selecti n人可溶性P選擇素規(guī)格:48T/96TsE-selecti n人可溶性E選擇素規(guī)格:48T/96TENG/SCD105人可溶性Endoglin規(guī)格:48T/96TSCD44-V9人可溶性CD44變體9規(guī)格:48T/96TSCD146人可
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