V-A-C-005-0紫外分光光度計驗證方案

1、編號：V-A-C-005-0紫外分光光度計驗證方案 驗證文件 類另技術(shù)標(biāo)準(zhǔn) 部門：驗證委員會 編號：V-A-C-005-0 頁碼：共17頁，第1頁 紫外分光光度計驗證方案 版次： 起草： 新訂 替代： 年 月 日 部門審核： 年 月 日 審閱會簽： （驗證委員會） 批準(zhǔn)： 年 月 日 實施日期： 年 月 日 復(fù)印數(shù)：批準(zhǔn)： 目錄 1. 儀器基本情況 3 1.1 概述3 1.2基本情況3 2. 驗證目的4 3. 職責(zé)4 3.1 驗證委員會4 3.2工程部4 3.3 質(zhì)量部4 4. 驗證內(nèi)容5 4.1安裝確認(rèn)5 4.1.1安裝確認(rèn)所需文件資料 5 4.1.2關(guān)鍵性儀表及消耗性備品 5 4.1.3評

2、價設(shè)備性能、質(zhì)量、適用性是否符合采購質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求 5 4.1.4評價儀器的安裝是否符合GM及供應(yīng)商提議的要求5 4.1.5 起草標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 6 4.1.6 校正6 4.2運行確認(rèn)（也即功能試驗） 7 4.3 性能確認(rèn)（適用性預(yù)試驗 ）:9 4.4擬訂再驗證項目及周期 9 4.5驗證結(jié)果評定與結(jié)論 10 5. 附件10 1. 儀器基本情況 1.1概述 本紫外分光光度計是雙光束紫外分光光度計，波長范圍是190870nm,光譜 帶寬2nm,波長精度土 0.4nm,具有數(shù)字顯示，可以記錄吸收光譜。 當(dāng)單色光通過溶液時，溶液的吸收度與溶液的濃度和溶液的厚度（光路長度） 成正比，即A=E C L ,據(jù)此

3、通過測定吸收度計算溶液的濃度得到被測物質(zhì)含 量。 本儀器主要用于測定原料和成品的含量。 1.2基本情況 設(shè)備編號： 設(shè)備名稱： 型 號： 系列號： 生產(chǎn)廠家： 供貨廠家： 使用部門： 工作間： 工作間編號： 2. 驗證目的 為確認(rèn)紫外分光光度計測試數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，性能穩(wěn)定，特制訂本驗證方案， 對紫外分光光度計進(jìn)行驗證。驗證過程應(yīng)嚴(yán)格按照本方案規(guī)定的內(nèi)容進(jìn)行，若因 特殊原因確需變更時，應(yīng)填寫驗證方案變更申請及批準(zhǔn)書（附件1），報驗證委 員會批準(zhǔn)。 3. 職責(zé) 3.1驗證委員會 1. 負(fù)責(zé)驗證方案的審批。 2. 負(fù)責(zé)驗證的協(xié)調(diào)工作，以保證本驗證方案規(guī)定項目的順利實施。 3. 負(fù)責(zé)驗證數(shù)據(jù)及結(jié)果的審核

4、。 4. 負(fù)責(zé)驗證報告的審批。 5. 負(fù)責(zé)發(fā)放驗證證書。 6. 負(fù)責(zé)再驗證周期的確定。 3.2工程部 1. 負(fù)責(zé)設(shè)備的安裝、調(diào)試，并做好相應(yīng)的記錄。 2. 負(fù)責(zé)建立設(shè)備檔案。 3. 負(fù)責(zé)數(shù)字顯示器、記錄儀的校正。 4. 負(fù)責(zé)擬訂再驗證項目及周期。 5. 負(fù)責(zé)收集各項驗證、試驗記錄，報驗證委員會。 6. 負(fù)責(zé)起草儀器使用、維護(hù)保養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。 3.3質(zhì)量部 1. 負(fù)責(zé)驗證用對照品、樣品及其它消耗性備品的準(zhǔn)備 2. 負(fù)責(zé)備品的保存。 3. 負(fù)責(zé)設(shè)備儀器的操作 4. 負(fù)責(zé)記錄各種測試結(jié)果。 4. 驗證內(nèi)容 4.1安裝確認(rèn) 4.1.1安裝確認(rèn)所需文件資料 工程部在設(shè)備開箱驗收后建立設(shè)備檔案，整理使

5、用手冊等技術(shù)資料，歸檔保 存（見表1）。 表1.安裝確認(rèn)所需資料及存放處 資料名稱 編 號 存放處 調(diào)研報告（預(yù)確認(rèn)） 設(shè)備采購定單 技術(shù)規(guī)格變動確認(rèn)往來函件 使用手冊 設(shè)備卡片 備件清單 4.1.2關(guān)鍵性儀表及消耗性備品 列出關(guān)鍵性儀表及消耗性備品的目錄（附件 2），匯總統(tǒng)計，作為儀器的關(guān) 鍵資料，用來與儀器以后的變動做比較。 4.1.3評價設(shè)備性能、質(zhì)量、適用性是否符合采購質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求 應(yīng)根據(jù)采購質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、定單等進(jìn)行評價，評價內(nèi)容應(yīng)包括儀器性能、質(zhì)量、 檢測樣品的適用性。儀器性能、質(zhì)量、適用性評價表見附件3。 4.1.4評價儀器的安裝是否符合 GMF及供應(yīng)商提議的要求 查閱設(shè)備采購定單、操

6、作手冊等，列出設(shè)備安裝、使用所需條件，包括溫度、 濕度、通風(fēng)條件、電路等。 檢查儀器安裝與使用所處的環(huán)境條件，是否符合上述要求。檢查結(jié)果記錄于 附件4 4.1.5起草標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 -紫外分光光度計標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 -紫外分光光度計維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程 -紫外分光光度計校正規(guī)程 4.1.6 校正 4.1.6.1 波長準(zhǔn)確度校正： 儀器本身光源D2燈檢查656.1 nm,486.02nm波長的準(zhǔn)確度。 操作步驟： 1）將電源開關(guān)置于“ON，光源D2燈開關(guān)“ON，光源選擇開關(guān)置于“UV 2）讀數(shù)選擇：T% 3）波長設(shè)定：655.6nm 或 485.5nm。 點亮氘燈，將波長置于 656 20nm處，調(diào)小狹縫或調(diào)

7、負(fù)高壓，使透光率在 10%左右，慢慢地往返轉(zhuǎn)動波長旋鈕，記錄透光率最大或指針擺浮最大時的波長， 復(fù)測三次，取三次平均值與656.1比較，即為波長準(zhǔn)確度有誤差，如果準(zhǔn)確的波 長不在 656.1 nm,則應(yīng)為 656.1 0.4nm。 用486.02nm按上述步驟操作亦可校正，如果準(zhǔn)確的波長不在486.02nm,則 應(yīng)為 486.02 0.4nm. 如果波長超出656.1 0.4nm或486.02 0.4nm時，則應(yīng)按維修說明書進(jìn)行 調(diào)整。 測定結(jié)果和偏差記錄于附件5 4.1.6.2 吸收度準(zhǔn)確度校正 取基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60mg在 120C干燥至恒重，精密稱定，用硫酸0.005mol/l 溶解并稀釋

8、至1000ml，置1cm石英池中，用0.005mol/l硫酸溶液作參比。按下 表規(guī)定的波長處分別測定吸收度并計算吸收計算基相對偏差。 波長 235 （最?。?257（最大） 313（最?。?350（最大） 吸收系數(shù) 125.5 144.0 48.62 106.6 測定結(jié)果和偏差記錄于附件5 4.2運行確認(rèn)（也即功能試驗） 進(jìn)行運行確認(rèn)的目的是在不使用任何試樣的條件下，確認(rèn)該儀器能夠達(dá)到設(shè) 計要求。 4.2.1百分透光率-吸收度轉(zhuǎn)換 波長約為400nm, T%鈕為100%時，轉(zhuǎn)換為 ABS 0-2鈕，讀數(shù)應(yīng)為0.000。 4.2.2波長校正 氘燈的兩條譜線656.1和486.0nm是最常用的檢定

9、波長。方法：點亮氘燈， 將波長置于656 20nm處，調(diào)小狹縫或調(diào)負(fù)高壓，使透光率在10%左右，慢慢 地往返轉(zhuǎn)動波長旋鈕，記錄透光率最大或指針擺浮最大時的波長。復(fù)測三次，取 三次平均值與656.1 nm比較，即為波長準(zhǔn)確度的誤差，限度為土 0.4nm。 4.2.3基線平直度的檢定 將儀器波長范圍置于800200nm,狹縫1nm,樣品與參比光路均為空氣， 調(diào)透光率為95%,以適當(dāng)?shù)膾呙杷俣葤呙鑳x器的基線，檢查透光率變化情況并與 檢查規(guī)定值比較。限度為= 2.0 %。 允許繪制的基線在更換光源或濾光片時微有跳動，必要時可在檢定前進(jìn)行一 次基線校正。 %線和100%線噪聲的測定： 儀器置時間掃描方式

10、，波長置230nm,狹縫1nm,樣品和參比光路均為空氣， 調(diào)整透光率為100%，用適當(dāng)?shù)膾呙杷俣茸鰰r間掃描 2分鐘，觀察100%線的變 化，然后再將擋光塊插入樣品光路，觀察 0%線的變化2分鐘，讀出各自峰的最 大（谷）值的差，與規(guī)定值比較。 儀器置時間掃描方式，波長置 500nm,按上述方法測定500nm處的100%和 0%的線噪聲處，用目視觀察2分鐘，讀出各自最大峰（谷）位之差 如儀器無時間掃描方式，也可將波長調(diào)至規(guī)定處，用目視觀察2分鐘，讀出 各自最大峰（谷）位之差。 424吸收度的準(zhǔn)確度 將儀器波長設(shè)置于400-200nm，狹縫1nm ,先用配對吸收池均裝入 0.005mol/l硫酸空白

11、液，用合適的掃描速度記錄基線或自動校正基線，然后再將 樣品光路改放重鉻酸鉀溶液，掃描并打印峰谷值，重復(fù)三次，計算吸收系數(shù)，與 規(guī)定值相比較。 波長 235（最?。?257 （最大） 313 （最?。?350 （最大） 吸收系數(shù) 125.5 144.0 48.62 106.6 可接受標(biāo)準(zhǔn)：在規(guī)定的測試波長處，E 1cm1%值差V 1.00% 4.2.5雜散光的檢定 取10%碘化鈉溶液，以水為空白，在220nm的波長處（用氘燈）測定其透 光率，記錄其測定值并與規(guī)定值比較。 取5%亞硝酸鈉溶液，以水為空白，在 380nm的波長處（用鎢燈）測定其透 光率，記錄其測定值并與規(guī)定值比較。 測定前應(yīng)將擋光塊

12、插入樣品池，校正儀器零點。其透光率應(yīng)為0.0% 可接受標(biāo)準(zhǔn)： 試劑 測定用波長 透光率（%） 1.00%碘化鈉 220nm V 0.8 1.00%亞硝酸鈉 340nm V 0.8 注：用兩種試劑檢測透光率均V0.6 426吸收池配對誤差的檢定： 取洗凈的石英吸收池盛水，在220nm處，以其中一只調(diào)透光率為100%，再 分別更換其它吸收池，測其的透光率，凡誤差在規(guī)定范圍以內(nèi)的再裝入0.006% 重鉻酸鉀0.005mol/l硫酸溶液，在350nm處以其中一個為100%透光率，分別測 定其它吸收池，凡透光率均在規(guī)定范圍以內(nèi)的即為配對吸收池。 取洗凈的玻璃吸收池盛水，在660nm處，以其中一只調(diào)光率為

13、100%，分別 測定其它吸收池，凡透光率均在規(guī)定范圍內(nèi)的吸收池。再分別裝入0.006%重鉻 酸鉀0.005mol/l硫酸液，在400nm處以其中一個為100%透光率，分別分別測定 其它吸收池，凡透光率均在規(guī)定范圍以內(nèi)的即為配對吸收池。 運行確認(rèn)試驗結(jié)果記錄于附件6 4.3性能確認(rèn)（適用性預(yù)試驗）： 目的：使用標(biāo)準(zhǔn)品或供試品，確認(rèn)儀器性能符合使用要求。 實驗步驟： 酒石酸美托洛爾含量測定：精密稱定片粉適量（相當(dāng)于酒石酸美托洛爾 0.12g）,置100ml量瓶，加2%氯化鈉溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻濾過，棄去 初濾液，精密量取續(xù)濾液 5ml置50ml量瓶中，加2%氯化鈉溶液稀釋至刻度搖 勻，即為樣

14、品溶液。另取酒石酸美托洛爾對照品 0.12g,用2%氯化鈉溶液稀釋成 每ml含0.12mg的溶液為對照品溶液，取酒石酸美托洛爾對照品溶液和樣品溶液 分別置1cm石英池中，用2%氯化鈉溶液為空白，以分光光度法在 274 1nm波 長處測定吸收度，按下式進(jìn)行計算： A1X W2 X asX w X 100% A2X W1 X 0.100 式中：A1、A2分別為樣品液，對照液吸收度; W1、W2分別為樣品、對照品稱重（g） 4.4擬訂再驗證項目及周期 工程部負(fù)責(zé)根據(jù)設(shè)備儀器情況，確定再驗證周期項目及周期（附件8），報 驗證委員會審核。 4.5驗證結(jié)果評定與結(jié)論 工程部負(fù)責(zé)收集各項驗證、試驗結(jié)果記錄，

15、起草儀器標(biāo)準(zhǔn)操作程序、維護(hù)保 養(yǎng)程序，報驗證委員會。需要收集的內(nèi)容包括： 1. 驗證方案修改申請及批準(zhǔn)書（附件 1） 2. 關(guān)鍵性儀表及消耗性備品目錄（附件 2） 3. 儀器性能、質(zhì)量、適用性評價表（附件 3） 4. 儀器安裝條件檢查記錄（附件4） 5. 紫外分光光度計校正記錄（附件 5） 6. 紫外分光光度計運行確認(rèn)記錄（附件 6） 7. 紫外分光光度計性能確認(rèn)記錄（附件 7） 8. 紫外分光光度計再驗證項目及周期（附件 8） 9. 紫外分光光度計標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程及操作記錄 10. 紫外分光光度計維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程及維護(hù)保養(yǎng)記錄 驗證委員會負(fù)責(zé)對驗證結(jié)果進(jìn)行綜合評審，做出驗證結(jié)論，發(fā)放驗證證書 （附件

16、9），確認(rèn)再驗證項目及其周期。對驗證結(jié)果的評審應(yīng)包括： 1. 驗證試驗是否有遺漏？ 2. 驗證實施過程中對驗證方案有無修改？修改原因、依據(jù)以及是否經(jīng)過批 準(zhǔn)？ 3. 驗證記錄是否完整？ 4. 驗證試驗結(jié)果是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求？偏差及對偏差的說明是否合理？是 否需要進(jìn)一步的補充試驗？ 5. 附件 附件1. 驗證方案修改申請及批準(zhǔn)書 驗證方案 名稱 驗證方案 編號 修改內(nèi)容 修改原因 及依據(jù) 修改后方案 起草人部門經(jīng)理年月日 驗證委員會 審批 驗證委員會：年月日 附件2. 關(guān)鍵性儀表及消耗性備品情況 儀器名稱 儀器編號 型號 關(guān) 鍵 性 儀 表 儀表名稱 生產(chǎn)廠家或型號 校正證書編號 保存處 校正周期

17、 數(shù)字顯示器 記錄儀 消 耗 性 備 品 品名 生產(chǎn)廠家和型號 單位 數(shù)量 保存處 D2燈 碘鎢燈 石英吸收池 確 認(rèn) 使用部門 工程部 年月日 驗證委員會 年 年月日 月日 附件3. 儀器性能、質(zhì)量及適用性評價表 儀器名稱 儀器編號 型號 用途 性能 質(zhì)量 要求 評價結(jié)果 確 認(rèn) 使用部門 工程部 驗證委員會 年月日 年月日 年月日 附件4. 儀器安裝條件檢查記錄 設(shè)備名稱 設(shè)備編號 型號 安裝條件要求 實際安裝條件 溫度 1030C 濕度 小于65% 其它 條件 工作臺不受陽光直射。 室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體或其它影 響測定的氣體干擾。 周圍應(yīng)無影響測定的強電場、磁 場和強烈震動。 確 認(rèn) 使用

18、部門 年月日 工程部 年月日 驗證委員會 年月日 附件5. 紫外分光光度計校正記錄 設(shè)備名稱 設(shè)備編號 型號 波長 準(zhǔn)確度 準(zhǔn)確波長 實測波長 誤差 者 吸收度 準(zhǔn)確度 測定波長 規(guī)定吸收系數(shù)ElcmT 實測吸收系系數(shù) 誤差 檢測者 復(fù)核者年 月日 確 認(rèn) 使用部門 年 月日 工程部 年月日 驗證委員會 年月日 附件6. 紫外分光光度計運行確認(rèn)記錄 設(shè)備名稱 設(shè)備編號 型號 測試項目 認(rèn)可質(zhì)里標(biāo)準(zhǔn) 實測結(jié)果 結(jié)論 百分透光率-吸收 度轉(zhuǎn)換 波長約為400nm時，T%鈕時100%時，轉(zhuǎn)換為 ABS0-2 鈕時，讀數(shù)應(yīng)為 0.000 波長校正 以儀器本身光源氘燈，檢查 656.1 nm,限度土 0.4nm 100%T平直度和 0%T平直度 波長范圍在 210850nm時，限度土 2.0%T 吸收度 準(zhǔn)確度 測定波 長 規(guī)定吸收系數(shù) 實測吸收系數(shù) 誤差 結(jié)論 235nm 124.5 257nm 144.0 313 nm 48.62 350nm 106.6 配對波長 0號為空白，測定1, 2, 3號 可接受標(biāo)準(zhǔn) 實測結(jié)果 吸收池號碼 1 2 3 220nm 吸收池配對誤差w 0.5% 230nm 240nm 250nm 260nm 270nm 280nm 290nm 300nm 310 nm 320nm 330nm 340nm 350nm 雜散 光檢