薤白提取物的抗氧化作用研究

1、薤白提取物的抗氧化作用研究,/1i薤白提取物的抗氧化作用研究j)碎國(guó)中醫(yī)研究院廣安門醫(yī)院(北京100053)李向虹顧麗貞v張百舜王愛(ài)紅段紹瑾h摘要本文研究了薤白乙醚提取物,乙酸乙酯提取物,水提取物,揮發(fā)油及原汁對(duì)白酒造成的氧應(yīng)激態(tài)大鼠血清超氧化物歧化醇(sod)活性,過(guò)氧化氫酶(cat)活性,過(guò)乳化脂質(zhì)(lpo)和t淋巴細(xì)胞百分率的影響結(jié)果表明,薤白原汁對(duì)該大鼠的血清sod,cat和t淋巴細(xì)胞具有明顯保護(hù)作用且顯著抑制血清過(guò)氧化脂質(zhì)形成.但是,低,中劑量(2.4gkg,4.8,動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的某些病理過(guò)程和環(huán)節(jié)與脂質(zhì)過(guò)氧化損傷有關(guān),防止ldl的氧化修飾,在防治動(dòng)脈粥樣硬化中具有重要作用.

2、薤白同屬植物大蒜(asativum)和野蒜(aurs$num)的抗氧化作用已被證實(shí)【”.本文探討了薤白不同提取物的抗氧化作用,并初步觀察其對(duì)t淋巴細(xì)胞的影響.1材料和方法1.1薤白;鮮品,產(chǎn)地內(nèi)江.經(jīng)鑒定為百合科植物小根蒜(atliummacrostenonbge.)的地下鱗莖.1.2薤白不同提取物的制備;取薤白300g,洗凈打碎,先后用eto,etoac,ho提取,分別制成eto提取物(提,),etoac提取物(提),h.o提取物(提.).取薤白30g,洗凈,打碎,提取揮發(fā)油,制得薤白揮發(fā)油(提.).取薤白300g,洗凈,打碎,經(jīng)兩次壓榨致謝i姥白植物來(lái)源由中國(guó)中醫(yī)研究院中藥研究所胡世林研究

3、員鑒定.豐宣萬(wàn)索君剮研究員在部舟實(shí)駐中給予幫助.車課題為國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目?34?每ml相當(dāng)于原生藥0.48g5動(dòng)物:wistar大鼠,早,體重13218g,購(gòu)于北京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部.隨機(jī)將56只大鼠分為八組,空白組和白酒組以蒸餾水,ve+vc組按(0.21retool+0.68retoo1)m1,各提取物組按4.8gkg”d灌胃,連續(xù)25日后,除空白組,其余各組按1c.mlkg給56度二鍋頭酒(北京釀酒總廠出品),連續(xù)三日,時(shí)給藥,取外周血壩it淋巴細(xì)胞百分率,處死,測(cè)定血清超氧化物歧化酶(sod)活性.在以上實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,再將5o只大鼠隨機(jī)分為六組,空白組,白酒組處理同上,vc組按1

4、.1mmolkgd,其它三個(gè)組以薤白原汁分別按低劑量(2.4gkgd)中劑量(4.8gkgd),高劑量(8.cgkgd)灌胃.其余處理同上,測(cè)外周血t淋巴細(xì)胞百分率,血清sod活性,過(guò)氧化氫酶(cat)活性,丙二醛(mda)含量.1.4測(cè)試方法血清sod活性測(cè)定;采用海軍總醫(yī)院試劑盒(亞硝酸鹽法).血清cat活性測(cè)定:根據(jù)aebi法.血請(qǐng)mda測(cè)定:采用南京鐵道醫(yī)學(xué)院試劑盒ctba顯色法).外周血t淋巴細(xì)胞百分率測(cè)定.根據(jù)改良的口一醋酸萘酯酶法羥自由基?oh測(cè)定:minotti法【”.利用fenton反應(yīng)產(chǎn)生?oh.以圩露醇為清除?oh的陽(yáng)性對(duì)照,于fruker一3c0型電子自旋共振波譜儀(德

5、屠)上測(cè)定該?oh信號(hào).其強(qiáng)度以信號(hào)第二峰峰高值表達(dá).見(jiàn)圖1.鼻撩=塑饕煮.%清除率一蠶百萌啄一做濃度一自由基清除率曲線.同時(shí)測(cè)定體系ph值.珈一田1以dmpo為撼捉劑.用epr鍘街的典型?oh信號(hào)洲試條件lx波段,微波頻率9.77ghz,微波功率20row,掃描寬度348050g,調(diào)制幅度1g.時(shí)間常數(shù)81.92m2結(jié)果2.1蘸白不同提取物對(duì)白酒連成的氧應(yīng)激態(tài)太鼠血清sod活性和外周血t淋巴細(xì)胞百分率的影響與正常大鼠相憂,過(guò)量白酒造成的氧應(yīng)激態(tài)大鼠的sod活性和t淋巴細(xì)胞百分率均明顯降低(p<o.o5).在蔗白不同提取物中,原汁能顯著提高氧應(yīng)激態(tài)大鼠的sod,活性(p<0.05)

6、并增加t淋巴細(xì)胞百分率(p<0.01).而其它各提取物的作用不咀顯.見(jiàn)表1.2.2不同劑量薤白原汁對(duì)白酒遣成的氧應(yīng)激志大鼠血清sod活性,cat活性,mda臺(tái)量和外周血t淋巴細(xì)胞百分率的影響低,中劑最藏白原汁均能顯著抑制白酒造成的氧應(yīng)激態(tài)大鼠的lpo形成(低劑量p<o.05,中劑量p<0.01)并顯著提高其t淋巴細(xì)胞百分率(p<o.01).中劑量薤白原汁顯著提高氧應(yīng)激態(tài)大鼠的sod活性(p<0.01).低劑量薤白原汁能顯著提高氧應(yīng)激態(tài)大鼠的cat活性(p<0.05).低劑量與,0;在sod的催化下歧化成過(guò)氧化氫(ho:)和氧(),過(guò)量的ho:不能及時(shí)清除則損

7、傷sod.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在薤白五種提取物中,原汁對(duì)白酒造成的氧應(yīng)澈態(tài)大鼠的保護(hù)作用最佳.從薤白五種提取物的制備過(guò)程來(lái)看只有原汁未經(jīng)加熱,結(jié)合術(shù)文實(shí)驗(yàn)結(jié)果,提示薤白所含抗氧化活性物質(zhì)具有熱不穩(wěn)定性.另.訃,原計(jì)成分較全,有利于發(fā)揮成分間的協(xié)同也可能是其作用最強(qiáng)的原因.實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示低,中劑量蓬白原汁作用強(qiáng)于高劑量者,提示選擇合適劑量對(duì)于較好地發(fā)揮薤自原汁的抗氧,35t襲1燕白不同拄颯物對(duì)白酒造成的氧應(yīng)激卷太鼠血清sod活性和外周血t淋巴細(xì)胞百分隼曲影響空白組白酒組0灑一ve十vc組白酒+.組白酒+提組白酒一提胡l白酒十提.組sod活性【nu/trd)79.211.5(7)63.05.7(6)63

8、.52.8(7)59.93.g(6)53.98.0(6)62.ii2.3(7)54.410.2(7)t淋毫細(xì)胞百分率(%)74.1i0.9(7)50.07.0(6)62.73.5(7j65.09.8(6)69.210.6(6)68.o9.3(6)64.99.4(7)白酒十提5組75.2i0.3(7)75.o士9.3(7)sod活性(nu/mi)cat活性(lu/wa)lpo(nmo1mda/m1)t淋巴細(xì)胞百分率(,a與空白組ip<o-05與白j酉組比p<o.08.p<o.01化作用是重要的.基的esr研究.中國(guó)藥學(xué)雜志,1992,27現(xiàn)有研究表明,機(jī)體內(nèi)活性氧代謝和免疫(1

9、6):030功能密切相關(guān).本實(shí)驗(yàn)所得氧應(yīng)激態(tài)大鼠的4bietzreta1.cardioprotectiveactionst淋巴細(xì)胞明顯降低的結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道黃瞟呤ofwgarlic(ai.ursinum)insc和黃瞟呤氧化酶同pbmnc共同溫育使玫瑰蝴cp_fu?mmndcd花形成細(xì)胞明顯下降的結(jié)果接近.薤自在抗.:.氧化的同時(shí)還具有保護(hù)t淋巴細(xì)胞的作用說(shuō)明ym01ogy|1.84.l05:121127薤白的抗氧億活性與免疫調(diào)節(jié)作用可能有相關(guān)6萬(wàn)素君,蕁.t淋巴細(xì)胞非特異性醣酶染色性.法.上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,10q2,7(1):53參考文越7minottg.etai.therequirmentf

10、oriron1郭曉,等.薤白降脂作用的實(shí)驗(yàn)和臨床研(i)intheinitiationofiipidperoxidat究.中西醫(yī)結(jié)合雜志,i990年基礎(chǔ)理論特ionbyiron(i)andhydrogenperoxide?桑,5153頁(yè)thv.ournalofbiologicalchemistry,2胨璦,等主編.自由基醫(yī)學(xué).北京人民軍1987,962(3):1098醫(yī)出版社,1991:223,189,1838rogern,etal?implicationoffreerad-5盧景彝等.大蒜及其提取物清除活性氧自由icalmeclmnsmsinethanolinducedcell.-38.,中

11、藥材第17卷第11期1994年11i1larinjury?freeradicalb州市中醫(yī)院腫瘤科根據(jù)古方及中醫(yī)理論和多年臨床實(shí)踐而研制成的一種以馬錢子,紅娘子,北芪等為主藥的抗癌復(fù)方中藥制劑,臨床上對(duì)肝癌,胃癌等多種癌瘤有良好療效.為此,我們對(duì)馬紅丸進(jìn)行有關(guān)動(dòng)物移植性腫瘤的抑瘤試驗(yàn).現(xiàn)報(bào)告如下.1實(shí)驗(yàn)材料馬紅丸:由廣州市中醫(yī)院提供,使用時(shí)用1cmc(羧甲基纖維索鈉)研磨配成33.3及20兩種濃度使用.羧甲基纖維索鈉:配成1濃度使用.呋嘀氟脲嘧啶(ft一207)使用時(shí)用1%cmc研磨配成0.33濃度使用.小鼠s-180移植性腫瘤瘤株j小鼠肝癌移植性腫瘤瘤株j小鼠腹水癌(eac)瘤株以上癌株均由

12、中山醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所提供.健康昆明種小白鼠t體重202g,雌雄兼用,由本所動(dòng)物研究室提供.2方法與結(jié)果根據(jù)衛(wèi)生部關(guān)于新藥藥理研究有關(guān)規(guī)定和1989年在南寧召開(kāi)的第三屆全國(guó)腫瘤藥理及化療學(xué)術(shù)會(huì)議對(duì)有關(guān)抗腫瘤新藥藥理研究的具體規(guī)范要求,我們?cè)O(shè)計(jì)并完成了以下實(shí)驗(yàn).2.1馬虹丸對(duì)小鼠移植性肝癌的抑瘤試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)選取健康昆明種小鼠4o只,體重在202g,雌雄兼有,按腫瘤移植接種規(guī)范在每只小鼠前肢腋下皮下接種癌細(xì)胞混懸液0.2ml,并子次日按體重隨機(jī)分為4組:cmc空白耐l中萄臂幕開(kāi)藿第1一百j_1軍五h中杰荔為,?中葺瑪照組,ft-207陽(yáng)性對(duì)照組,馬紅丸低劑量組馬紅丸高劑量組.各組小鼠均按20ml/kg

13、之容量分別開(kāi)始給藥每天日服灌胃一次,連續(xù)7天.在末次給藥后的第二天,同時(shí)處死實(shí)驗(yàn)小鼠,分別稱重,剖取瘤體,脾臟并稱重紀(jì)錄,作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,結(jié)果見(jiàn)表1.重復(fù)試驗(yàn)表明.馬紅丸g/kg及1cg/kg劑量口服均對(duì)小鼠移植性肝癌有一定抑瘤作用.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理表明,與空白對(duì)照組比較,其差異有顯著性意義.2.2馬虹丸對(duì)小鼠腹啦癌的生命延長(zhǎng)率試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)選取健康昆明種小鼠4o只,體重范圍20g,雌雄兼用.按腹水癌移植接種規(guī)范給每只小鼠腹腔接種癌性腹水稀釋教0.2ml.次日按體重隨機(jī)分為4組,按表2分組并灌服給藥,每日一次,連續(xù)7天.并在停藥后s0天內(nèi)觀察各組小鼠的死亡情況,記錄每鼠存活天數(shù)柞統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,結(jié)果如表2.重復(fù)