益母湯的制備技術

1、益母湯的制備技術十珍益母湯是由當歸、 川芎、熟地黃、 益母草、桃仁、赤芍、 蒲黃、炮姜、王不留行、甘草等十味中藥組成的口服制劑，功能 主治為補血養(yǎng)血，活血化瘀，溫經止痛，通經下乳。適用于產后 血虛，頭暈無力，惡露不盡，小腹疼痛，乳汁不足及因瘀血不凈 而致出血淋漓不止。方中當歸補血養(yǎng)血、川芎活血化瘀，二者同 為君藥。 十珍益母湯是我院著名中醫(yī)的經驗良方， 用于臨床取得 很好的療效， 為有效控制該制劑質量， 采用薄層色譜法對方中當 歸、川芎進行定性鑒別； 采用高效液相色譜法對當歸中阿魏酸進 行含量測定。完善了該制劑的質量控制標準。一、材料島津LC1ADV藹效液相色譜儀，手動點樣器（瑞士），紫外 分

2、析儀ZFC（上?？岛坦怆妰x器 XX公司）；當歸對照藥材（北 京中醫(yī)藥大學，批號 1015120901），芍藥苷對照品（中國生物 制品檢定所，批號 121304200812）。本實驗所用藥材均由河南 大學藥學院許文淵教授鑒定； 十珍益母湯制劑成品 3 批（本院制 劑室配制，批號 090413， 090507， 090618）；所用化學試劑均 為分析純或色譜純。二、薄層鑒別1、 當歸分別取3批十珍益母湯樣品各20mL各加乙醇60mL搖勻，濾過，濾液揮至無醇味，加乙酸乙酯振搖提取兩次，每次15 mL，合并乙酸乙酯提取層，在水浴上濃縮至約2mL作供試品溶液1 3號。另取當 歸對照藥材2g,加水60 m

3、L微沸煎煮0.5h，放冷 濾過，濾液加水稀釋至 20mL按上述方法制成2 mL當歸對照品 溶液。按處方比例及工藝，制備缺少當歸的陰性樣品，再按供試 品溶液的制備方法制成 2 mL 陰性對照溶液。照薄層色譜法 1（中國藥典2005年版一部VIB）試驗，吸取上述溶液各5uL,分 別點于同一以0.6%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 G薄層板上， 以正己烷乙酸乙酯（9： 1）為展開劑，展開后，取出晾干，置紫 外光燈（365nn）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相 應位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性無干擾（圖 1）。 13： 供試品； 4：陰性對照； 5：對照藥材圖 1 當歸薄層色譜圖2、 川芎分

4、別取3批十珍益母湯樣品各20mL各加乙醇60mL振搖 5min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇 2mL使溶解，作供試品溶液 13號。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1mL含2mg的溶液， 作為對照品溶液。 按處方比例及工藝， 制備缺少川芎的陰性樣品， 再按供試品溶液的制備方法制成2 mL陰性對照溶液。照薄層色譜法（中國藥典2005年版一部VIB）試驗，吸取上述溶液各4 uL, 分別點于同一硅膠 G薄層板上。以三氯甲烷乙酸乙酯甲醇甲酸（40 : 5 : 10 : 0.2 ）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5橋草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上， 顯相同的藍紫色斑

5、點， 陰性無干擾（圖 2） 13:供試品；4 :對照品；5 :陰性對照圖2川芎薄層色譜 圖三、含量測定1 、色譜條件與系統適用性試驗色譜柱：Kromasil C18 （4.6mmK 250mm 5 um）;流動相： 甲醇水冰醋酸（30： 68： 2） ; SPD10AV紫外檢測器；檢測波長: 320 nm；進樣量：20 卩 L;流速：1.0 m L min-1 柱溫：30C； 理論塔板數按阿魏酸峰計算大于 4000,分離度R大于1.5。2 、溶液的制備對照品溶液 取阿魏酸對照品適量，精密稱取 6.2 mg，置于 25 mL棕色量瓶中，加甲醇溶液并定溶至刻度，搖勻，制得初始 液；精密量取初始液1

6、 mL置50 mL棕色量瓶中加甲醇至刻度， 搖勻，作為對照品溶液。供試品溶液精密量取本品約3mL,置具塞錐形瓶中，加入 甲醇50mL超聲處理（功率 250W 頻率20kHz） 5min,放冷， 再稱定，用甲醇補足減失的的質量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即 得。陰性對照溶液 按處方比例及工藝，制備缺少當歸的陰性樣 品，再按供試品溶液的制備方法制備不含阿魏酸的陰性對照溶 液。轉 3、 線性關系考察分別精密量取初始液 0.2、0.4、1、2、5mL置50mL棕色 量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。分別精密量取20卩L,注入色譜儀，記錄色譜圖，以吸收峰面積為縱坐標，阿魏酸進樣量為橫坐 標，繪制標準曲線，得線性回

7、歸方程： Y=117080.4X+6652.612， r=0.9996。結果表明阿魏酸在 0.01980.496卩g范圍內線性關 系良好。4、 精密度試驗取“321 ”項下對照品溶液20卩L,在上述色譜條件下連 續(xù)進樣5次，記錄色譜圖，RSD為1.26%,結果表明精密度良好。5 、穩(wěn)定性試驗精密量取對照品溶液在 0, 1, 2, 3, 4, 5h，連續(xù)進樣6次， 進樣量為20卩L,測得峰面積值，RSD為1.20% (n=6),結果表 明阿魏酸在5h內穩(wěn)定。6 、重復性試驗精密吸取同一批( 090413)樣品 3mL, 5 份,分別照供試品 制備方法, 制備供試品溶液, 在上述色譜條件下, 測定

8、含量, RSD 為 1.65%,結果表明重復性良好。7、 干擾試驗 分別精密量取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各20卩L,按上述色譜條件分別進行測定峰，阿魏酸與其他組分能 達到基線分層，陰性對照無干擾，見圖3。A:供試品溶液；B:對照品溶液；C:陰性樣品溶液圖3高效液相色譜圖8、 加樣回收率試驗精密吸取已知阿魏酸含量的同一批（ 090413）樣品 5 份，分 別加入阿魏酸對照品初始液 2mL按供試品制備方法，制得供試 品溶液，照上述條件進行檢測，結果見表 1。9 、樣品含量測定精密吸取樣品溶液20卩L,按上述色譜條件測定3批制劑中 阿魏酸含量， 結果 3 批含量分別為 0.19%， 0.21%， 0.21%。表 1 加 樣回收率試驗結果四、討論本實驗在阿魏酸的含量測定中， 先采用藥典當歸項下的流動 相實驗， 結果被測峰與雜質峰分離不開， 后改為本研究所用流動 相，結果顯示分離完全。同時對檢測波長也進行了考察，結合紫 外吸收光譜圖，選擇 320 nm 作為檢測波長。選擇薄層色譜對中藥口服制劑中的當歸、川芎進行定性鑒 別，方法及試驗條件的選定根據當歸、 川芎所含主要成分的性質 而定2 。當歸的主要成分為阿魏酸，先用乙醇溶解，再用乙酸 乙酯提取藥材中的專屬性成分， 解決了其它成分的干擾問題。